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1、.,動(dòng)物細(xì)胞工程,.,動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段:,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、 動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、 生產(chǎn)單克隆抗體技術(shù),提問(wèn):,植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些?,植物組織培養(yǎng)技術(shù)、 植物體細(xì)胞雜交技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。,.,動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞融合,單克隆抗體制備,體細(xì)胞克隆,細(xì)胞核移植,動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),.,一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),概念:就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。,植物組織培養(yǎng),在無(wú)菌和人工控制的條件下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人工控制的培
2、養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。,.,1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么? 2、從動(dòng)物機(jī)體中要取出哪些相關(guān)組織?并 解釋原因。 3、組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是什么?其理論依據(jù)是什么? 4、動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足哪些條件?,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官 它們細(xì)胞增殖能力強(qiáng),分裂旺盛,分化程度低,容易培養(yǎng)。,細(xì)胞增殖,閱讀課本P44,簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程,.,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,胰蛋白酶,單個(gè)細(xì)胞,加培養(yǎng)液,制成,細(xì)胞懸浮液,10代 細(xì)胞,部分細(xì)胞“癌變”,遺傳物質(zhì)改變,無(wú)限傳代,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成動(dòng)物體,50代細(xì)胞,原代培養(yǎng),傳
3、代培養(yǎng),細(xì)胞貼壁,剝離、分瓶,細(xì)胞株,細(xì)胞,細(xì)胞系,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,.,動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)特性,細(xì)胞貼壁: 懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上, 稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。 要求:培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無(wú)毒、易于貼附。 細(xì)胞的接觸抑制: 當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。,.,細(xì)胞貼壁過(guò)程,.,有關(guān)概念:,原代培養(yǎng):從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱(chēng)為原代培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng):將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出,配制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱(chēng)為傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生
4、長(zhǎng)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到4050代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別: 細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。,.,如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng);細(xì)胞株和細(xì)胞系?,遺傳物質(zhì)改變,.,思考討論,1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)取材時(shí),一般是取胚胎組織或幼齡動(dòng)物的組織或器官,請(qǐng)解釋原因。,細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系,細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān),幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,老齡動(dòng)物則相反。所以
5、,一般來(lái)說(shuō)幼年動(dòng)物的組織細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣,組織細(xì)胞的分化程度越低,則增殖能力越強(qiáng),所以更容易培養(yǎng)。,腫瘤組織或細(xì)胞 正常組織或細(xì)胞,拓展-動(dòng)物組織或細(xì)胞培養(yǎng)的難易程度,幼體組織或細(xì)胞 老齡組織或細(xì)胞,分化程度低的組織或細(xì)胞 分化程度高的組織或細(xì)胞,.,2、人類(lèi)一般保存的是哪類(lèi)細(xì)胞呢?為什么?,保存10代以內(nèi)的細(xì)胞,因?yàn)槠渖飳W(xué)特性未發(fā)生大的變化,最接近于體內(nèi)組織或細(xì)胞的生長(zhǎng)特性,很適合用于藥物測(cè)試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究。,3、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要用胰蛋白酶對(duì)取出的動(dòng)物組織進(jìn)行處理?,胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分酶解,獲得單
6、個(gè)細(xì)胞;成塊的組織細(xì)胞靠在一起,彼此限制了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖.,.,.植物組織培養(yǎng)過(guò)程將組織分散成單個(gè)細(xì)胞的嗎? .胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成份? .細(xì)胞膜的主要成份是什么?胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎? .既然胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉,那將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要注意什么問(wèn)題呢?能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎?為什么?,進(jìn)一步思考:,否,胰蛋白酶水解蛋白質(zhì),蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)和磷脂,能,注意時(shí)間的控制,不能,因?yàn)閮烧叩淖钸mPH不同,而正常組織細(xì)胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近,.,多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中,根據(jù)你所學(xué)的知識(shí),認(rèn)為體外培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)該模擬內(nèi)環(huán)境的哪
7、些內(nèi)容呢?,.,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件:,1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 (添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液),2、必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) (葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清等。),保證細(xì)胞順利的生長(zhǎng)增殖,3、適宜的溫度 36.5+(-)0.5度,4、充足的氧氣和適宜的酸堿度 O2和CO2(95%空氣和5% CO2 ),.,問(wèn)題:,1、培養(yǎng)基的類(lèi)型,(1)天然培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,成分復(fù)雜 (2)合成培養(yǎng)基:成分明確,便于控制試驗(yàn)條件,2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組織培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處?,主要成分:葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。,獨(dú)特之處有:1、液
8、體培養(yǎng)基(動(dòng)物體細(xì)胞大都生活在液體的環(huán)境) 2、成分中有動(dòng)物血清等,.,獲得細(xì)胞,細(xì)胞的全能性,細(xì)胞株、細(xì)胞系,植物體,培養(yǎng)結(jié)果,或細(xì)胞產(chǎn)物,快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動(dòng)物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細(xì)胞增殖,原理,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項(xiàng)目,植物組織和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,.,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品(病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體) 獲得大量自身的皮膚細(xì)胞,用于植皮 培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷某種物質(zhì)的毒性 為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù),.,小結(jié),動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)(原理、材料選
9、擇及原因、一般過(guò)程、培養(yǎng)條件、主要應(yīng)用),注意: 概念理解:原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、細(xì)胞株 、細(xì)胞系 胰蛋白酶處理的原因、目的和注意事項(xiàng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的區(qū)別,.,思考與探究: 如何用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),為燒傷病人植皮?,取該患者的皮膚進(jìn)行 細(xì)胞培養(yǎng),獲得足量的細(xì) 胞后再移植,.,1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是 ( )A細(xì)胞系 B細(xì)胞株 C原代細(xì)胞 D傳代細(xì)胞 2、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 ( )A.動(dòng)物細(xì)胞融合 B.單克隆抗體C.胚胎移植 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織,其主要原因是這樣的組織細(xì)胞 ( )A.容
10、易產(chǎn)生各種變異 B具有更強(qiáng)的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力強(qiáng) 4、下列屬于動(dòng)物細(xì)胞工程中的工具是( ) A限制性內(nèi)切酶 BDNA連接酶 C胰蛋白酶 D果膠酶,A,D,練習(xí),D,C,.,5、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中,正確的是( ) A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是為了獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白 B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散 C細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過(guò)程中 D培養(yǎng)至50代后繼續(xù)傳代的細(xì)胞是細(xì)胞株 6、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中有部分細(xì)胞可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱(chēng)之為( ) A原代培養(yǎng) B傳代培養(yǎng) C細(xì)胞株 D細(xì)胞系 7、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的正確過(guò)程是( ) A.原代培
11、養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系 B. 原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞系細(xì)胞株 C.傳代培養(yǎng)細(xì)胞系原代培養(yǎng)細(xì)胞株 D. 原代培養(yǎng)細(xì)胞系傳代培養(yǎng)細(xì)胞株 8、下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中,不正確的是( ) A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清 B原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右便會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯 C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代,但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞,B,D,A,C,.,下圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)此圖回答,(1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自_ 。 (2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是_,然后用 酶
12、處理,這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。這樣做的目的是_ _. (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成分有 _ _ 等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后,一般傳到第 代,有許多細(xì)胞衰老死亡,到這時(shí)的培養(yǎng)稱(chēng)為_(kāi). (4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中,用_ _ 處理,然后配置成_,再分裝。 (5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_。,幼齡動(dòng)物的器官或組織、動(dòng)物胚胎,剪碎,胰蛋白,使每個(gè)細(xì)胞能與培養(yǎng)液接觸,葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清,10,原代培養(yǎng),胰蛋白酶,細(xì)胞懸浮液,細(xì)胞沒(méi)有發(fā)生瘤變,.,概念:將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一
13、個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。 用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物,核移植,(難度高),受體細(xì)胞:M期的卵母細(xì)胞,二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物,細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易,.,體細(xì)胞核移植的過(guò)程,卵母細(xì)胞去核,體細(xì)胞取核,電刺激使兩細(xì)胞融合,重組細(xì)胞,重組胚胎,新個(gè)體,.,細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞核,細(xì)胞核移植,多莉羊的培育過(guò)程,.,克隆羊培育過(guò)程,另一頭綿羊的子宮,.,、在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?,為使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞。,、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,為什么?,10代以
14、內(nèi)的細(xì)胞一般保持正常二倍體的核型,未發(fā)生突變,思考題,.,3、體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?,不是,克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自供體細(xì)胞核,但核外還有少部分DNA(如線粒體DNA)來(lái)自受體卵母細(xì)胞,4.動(dòng)物克隆實(shí)例很多,為何多莉就舉世聞名呢?,在1997年2月英國(guó)羅斯林研究所維爾穆特博士科研組公布體細(xì)胞克隆羊“多莉”培育成功之前,胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)有了很大的發(fā)展。實(shí)際上,“多莉”的克隆在核移植技術(shù)上沿襲了胚胎細(xì)胞核移植的全部過(guò)程,但這并不能減低“多莉”的重大意義,因?yàn)樗鞘澜缟系谝焕?jīng)體細(xì)胞核移植出生的動(dòng)物,是克隆技術(shù)領(lǐng)域研究的巨大突破。這一
15、巨大進(jìn)展意味著:在理論上證明了,同植物細(xì)胞一樣,分化了的動(dòng)物細(xì)胞核也具有全能性,.,體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景,1、加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育,2、保護(hù)瀕危物種,增加存活數(shù)量,3、克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白,4、可以作為異種移植的供體,可以用于組織器官的移植,.,體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:,許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷,如體型過(guò)大,異常肥胖,發(fā)育困難,臟器缺陷,免疫失調(diào)等。,在研究方面,克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚,克隆技術(shù)效率低,克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問(wèn)題。這些問(wèn)題尚在研究中。 在應(yīng)用上,生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴,距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。,
16、.,“番茄馬鈴薯”理想圖,通過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn),科學(xué)家們采用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄馬鈴薯”植株。,.,雜種植株,篩選融合AB 的原生質(zhì)體,再生出細(xì)胞壁,脫分化,愈傷組織,再分化,植物細(xì)胞的融合,植物組織培養(yǎng),植物細(xì)胞A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體A,雜種細(xì)胞AB,去 壁,去 壁,人 工 誘 導(dǎo),方法?,促進(jìn)融合的方法?,融合完成的 標(biāo)志,植物細(xì)胞B,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程,原理?,原理?,.,成果和未解決的問(wèn)題,成果:克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙,出 現(xiàn)自然界沒(méi)有的新品種。,未解決的問(wèn)題:未能讓雜種植物按照人們 的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。,.,如果將牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交,得到綠色的小奶牛,那豈不是只要曬
17、曬太陽(yáng)就可以擠出牛奶啦!,動(dòng)物細(xì)胞也能融合嗎?,.,動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,.,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,1、動(dòng)物融合的過(guò)程,請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合內(nèi)容 問(wèn)題:什么是動(dòng)物細(xì)胞融合?它相當(dāng) 于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步?它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同?,.,不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞,滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合,融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,1、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程,滅活喪失感染性,保留融合活性,.,動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、原理與誘導(dǎo)方法,.,思考題?,1、植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁?,酶解法,如纖維素酶或果膠酶,2、動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎?為什么?,無(wú)需,因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)
18、細(xì)胞壁,3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些?,離心、電激等物理方法;PEG等化學(xué)方法,4、動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類(lèi)方法嗎?還有其他方法嗎?,能 還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo),5、植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個(gè)體,動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎?,不能,6、你能歸納出什么叫做動(dòng)物細(xì)胞融合嗎?,.,2、動(dòng)物細(xì)胞融合的概念,動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交,是指在一定條件下將兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程.,.,主要用于制備,單克隆抗體,獲得雜種植株,用途,物理、化學(xué)方法,(同左),滅活的病毒,物理(離心、振動(dòng)、電刺激),化學(xué)(聚乙二醇),誘導(dǎo)
19、方法,使細(xì)胞分散后誘,導(dǎo)細(xì)胞融合,去除細(xì)胞壁后誘,導(dǎo)原生質(zhì)體融合,細(xì)胞融合的方法,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞膜的流動(dòng)性、,植物細(xì)胞全能性,原理,動(dòng)物細(xì)胞融合,植物體細(xì)胞雜交,比較項(xiàng)目,植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,.,7、你推測(cè)一下動(dòng)物細(xì)胞融合有哪些方面的應(yīng)用嗎?,思考題,利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細(xì)胞,8、在生產(chǎn)實(shí)際中雜交瘤細(xì)胞有怎樣的應(yīng)用?,生產(chǎn)單克隆抗體,.,1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的? 、一個(gè)淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎? 、一種抗原侵入機(jī)體之后,引起機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎? . 簡(jiǎn)述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑? 、這種方法獲得的抗體有什么缺陷?,二、單克隆抗體,.,問(wèn)題:抗體由
20、什么細(xì)胞產(chǎn)生?其化學(xué)本質(zhì)是什么?與抗原作用的特點(diǎn)?主要分布在哪里?,1抗體,.,一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗原分子刺激淋巴細(xì)胞,說(shuō)的也就是抗原決定簇刺激B淋巴細(xì)胞,使其分裂分化出特異性的效應(yīng)B細(xì)胞,分泌特異性抗體。,.,抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法,從血清中分離抗體,該法制備抗體的特點(diǎn): 產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差、靈敏度低。,多種效應(yīng)B細(xì)胞,動(dòng)物體內(nèi),多種抗體,抗原,.,抗體不純,特異性差、純度低;,產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏,傳統(tǒng)血清抗體的制備,抗原不純,每個(gè)淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體,由一個(gè)淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的細(xì)胞群分泌的抗體化學(xué)成份是單一的。,如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體?,體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能無(wú)限增殖嗎?,體外培養(yǎng)單個(gè)淋巴細(xì)胞,提取分泌的抗體,怎樣解決這個(gè)問(wèn)題?,.,設(shè)計(jì)方案: 一個(gè)
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