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1、t-spot.tb,結(jié)核感染t細胞斑點檢測,t細胞斑點試驗(t-spot),又叫作結(jié)核感染干擾素釋放試驗(interferon gamma release assays,igras,結(jié)核的現(xiàn)狀,結(jié)核病是全球嚴重的公共衛(wèi)生問題之一。據(jù)who統(tǒng)計,全球約有20億人感染結(jié)核分枝桿菌,每年有約200萬人死于結(jié)核。 我國是世界上22個結(jié)核病高負擔國家之一,結(jié)核感染導致的死亡人數(shù)是其他傳染性疾病總死亡人數(shù)的2倍以上。,基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,t-spot.tb在診斷結(jié)核感染方面具有良好的敏感性和特異性,在現(xiàn)有結(jié)核診斷方法存在缺陷的今天, t-spot.tb 可以給臨床診斷提供參考。 基于結(jié)核抗原
2、特異性t細胞向病變部位集中的特點, t-spot.tb的檢測物已不局限于靜脈血,支氣管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、腦脊液等也可用于對肺內(nèi)及肺外結(jié)核的診斷。,t-spot的意義,1:菌陰,結(jié)核病患者的輔助診斷 2:肺外結(jié)合的鑒別診斷 3:免疫力低下/受抑制患者的結(jié)核診斷/感染篩查 4:兒童結(jié)核病的輔助診斷,t-spot注意事項,1:肝素抗凝全血,常溫保存,不得冷凍或冷藏。 2:采血量:三歲以下2ml,3-9歲4ml,9歲以上6ml,免疫力低下或白細胞低下采6ml(本公司一律兩管) 3:樣本必須4小時內(nèi)送達。 4:輸血受試者或pet-ct受試者,兩周后檢測。 5:受試者需閱讀知情同意書并填寫申請單。
3、,基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,結(jié)核的傳統(tǒng)診斷手段,結(jié)核菌素皮試: 低敏感性:免疫力低下人群中其敏感性大大降低。 低特異性:與卡介苗接種和其他環(huán)境分枝桿菌有交叉,易造成“假陽性”結(jié)果。 細菌學檢查:常規(guī)培養(yǎng):2月;快速培養(yǎng):1周; 陽性率取決于采集標本中細菌數(shù)量,不利于早期診斷。 病理學檢查:陽性率低,對取材標本有較高要求,有創(chuàng)傷,對肉芽腫性病變需進一步鑒別。,基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,結(jié)核感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)以細胞免疫為主,結(jié)核感染后體內(nèi)長期存在抗原特異性的記憶性t細胞 當再次遇到抗原刺激時,能迅速活化增殖,釋放r干擾素 r干擾素是結(jié)核分枝桿菌感染后機體免疫應(yīng)答中最重要的細胞因子,
4、基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,t-spot.tb技術(shù): 利用結(jié)核桿菌感染者外周血單個核細胞(pbmc)中存在結(jié)核特異性t細胞,這些淋巴細胞在受到結(jié)核特異 抗原刺激后分泌r干擾素而設(shè)計的t細胞免疫斑點試驗。 檢測外周血中受結(jié)核特異抗原刺激釋放r干擾素的t淋巴細胞,經(jīng)酶聯(lián)免疫顯色后,通過elispot分析系統(tǒng) 對斑點進行計數(shù),1個斑點代表一個細胞,計算出抗原特異性細胞的頻率。,基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,空白對照孔內(nèi)斑點數(shù)小于10且陽性對照孔內(nèi)斑點數(shù)大于20時視為試驗有效 t-spot.tb試驗結(jié)果用每106 pbmcs中斑點形成細胞(sfcs)的數(shù)目來描述,即sfcs/106 pbmcs,基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,包,基于t淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,t-spot.tb的臨床意義,t-spot.tb高靈敏度,提 問,出報告時間:一、三、五檢測三個工作日出。 標本類型:肝素抗
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