ICS

G

中華人民共和國中華人民共和國國國家標(biāo)準(zhǔn)家標(biāo)準(zhǔn)

GB29703—2013

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

動(dòng)物性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的測定

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

DeterminationofSodiumnifurstyrenateresiduesinanimalderivedfoodbyLiquid

Chromatography-tandemMassSpectrometricmethod

（電子版本僅供參考，以標(biāo)準(zhǔn)正式出版物為準(zhǔn)）

2013-09-16發(fā)布2014-01-01實(shí)施

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部

中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)

發(fā)布

I

目目次次

目次.........................................................................I

前言........................................................................II

動(dòng)物性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法........................1

1范圍.........................................................................1

2規(guī)范性引用文件...............................................................1

3原理.........................................................................1

4試劑和材料..................................................................1

5儀器和設(shè)備...................................................................2

6樣品的制備與保存.............................................................2

6.1試料的制備..................................................................2

6.2試料的保存..................................................................2

7測定步驟.....................................................................2

7.1提取........................................................................2

7.2凈化........................................................................3

7.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備..............................................................3

7.4測定........................................................................3

7.5空白試驗(yàn)....................................................................4

8結(jié)果計(jì)算與表述...............................................................4

9檢測方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度...............................................5

9.1靈敏度......................................................................5

9.2準(zhǔn)確度......................................................................5

9.3精密度......................................................................5

附錄A.........................................................................6

II

前前言言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)系國內(nèi)首次發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)。

1

動(dòng)物性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的測定

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1范圍范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量檢測的制樣和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬和雞的肌肉和肝臟組織中呋喃苯烯酸鈉殘留量的檢測。

2規(guī)范性引用文件規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所

有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的

各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

GB/T1.1-2000標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3原理原理

試料中殘留的呋喃苯烯酸鈉，用0.5%甲酸-乙酸乙酯提取，固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)

質(zhì)譜ESI正離子模式測定，外標(biāo)法定量。

4試劑和材料試劑和材料

以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純?cè)噭?，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

4.1呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品：含量≥98.0％。

4.2甲醇

4.3正己烷

4.4乙睛：色譜純。

4.5乙酸乙酯

4.6甲酸

4.7HLB固相萃取柱：60mg/3mL，或相當(dāng)者。

4.80.5%甲酸溶液：取甲酸0.5mL，用水溶解并稀釋至100mL。

4.90.5%甲酸-乙酸乙酯溶液：取乙酸乙酯200mL，加0.5%甲酸溶液10mL，混勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。

4.101mg/mL呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液：精密稱取呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品10mg，于10mL量瓶中，

用二甲亞砜溶解并稀釋至刻度，配制成濃度為1mg/mL的呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液。-20℃以下保

2

存，有效期6個(gè)月。

4.1110μg/mL呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液：精密量取1mg/mL呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液1.0mL，

于100mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，配制成濃度為10μg/mL的呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)

工作液。-20℃以下保存，有效期6個(gè)月。

5儀器和設(shè)備儀器和設(shè)備

5.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。

5.2分析天平：感量0.00001g。

5.3天平：感量0.01g。

5.4冷凍高速離心機(jī)

5.5振蕩器

5.6旋渦混合器

5.7均質(zhì)機(jī)

5.8氮吹儀

5.9旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀

5.10離心管：50mL。

5.11茄形瓶

5.12濾膜：0.22μm。

6樣品的制備與保存樣品的制備與保存

6.1試料的制備

取新鮮或冷凍空白或供試組織，絞碎，并使均質(zhì)。

——取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試材料。

——取均質(zhì)后的空白樣品，作為空白材料。

——取均質(zhì)后的空白樣品，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，作為空白添加試料。

6.2試料的保存

-20℃以下保存。

7測定步驟測定步驟

7.1提取

取試料（2±0.05）g，于50mL離心管中，加0.5%甲酸-乙酸乙酯溶液15mL，漩渦混合，振

3

蕩5min，8000r/min離心10min，取乙酸乙酯層于茄形瓶中，殘?jiān)?.5%甲酸-乙酸乙酯溶液10mL，

重復(fù)提取一次，合并兩次乙酸乙酯層，于45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用50％乙腈水溶液3mL溶解殘余物，

轉(zhuǎn)至離心管中，用50％乙腈水溶液3mL洗滌茄形瓶，合并兩次洗液，加正己烷3mL，振蕩混勻

后，5000r/min離心5min，取下層液，備用。

7.2凈化

HLB柱依次用甲醇3mL和水3mL活化，取備用液過柱。用水6mL淋洗，抽干，加乙腈3mL

洗脫，收集洗脫液，于50℃氮?dú)獯蹈?，用流?dòng)相1.0mL溶解殘余物，轉(zhuǎn)入1.5mL離心管中，10000

r/min離心10min，取上清液，濾膜過濾，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

7.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別精密量取10μg/mL呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液適量，用流動(dòng)相稀釋，配制成濃度為0.2、0.5、

2、5和8μg/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)，

標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

7.4測定

7.4.1液相色譜條件

色譜柱：C18（150mm×2.1mm，粒徑5μm），或相當(dāng)者；

流動(dòng)相：乙腈+水（40+60，v/v）；

柱溫：40℃；

進(jìn)樣量：10μL。

7.4.2質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源；

掃描方式：正離子掃描；

檢測方式：選擇反應(yīng)監(jiān)測；

噴霧電壓：4000V；

離子傳輸管溫度：330℃；

鞘氣壓力：40arb；

輔助氣壓力：6arb；

選擇反應(yīng)監(jiān)測的優(yōu)化參數(shù)見表1。

4

表表1呋喃苯烯酸鈉選擇反應(yīng)監(jiān)測的優(yōu)化參數(shù)呋喃苯烯酸鈉選擇反應(yīng)監(jiān)測的優(yōu)化參數(shù)

藥物名稱

相對(duì)保留時(shí)間

min

定性離子對(duì)

m/z

定量離子對(duì)

m/z

碰撞能量

eV

呋喃苯烯酸鈉

6.5290.18＞202.43

290.18＞228.26

15

290.18＞228.2620

7.4.3測定法

取試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液，多點(diǎn)校準(zhǔn)，外標(biāo)法計(jì)算。試樣溶液及標(biāo)準(zhǔn)溶液中呋喃苯烯酸鈉的峰面

積均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍之內(nèi)。試樣溶液中的離子相對(duì)豐度與標(biāo)準(zhǔn)溶液中的離子相對(duì)豐度相

比，符合表2的要求。標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白添加試樣溶液中特征離子的質(zhì)量色譜圖見附錄A。

表表2定性測定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差定性測定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度50%20%至50%10%至20%≤10%

允許的相對(duì)偏差±20%±25%±30%±50%

7.5空白試驗(yàn)

除不加試料外，采用完全相同的步驟進(jìn)行平行操作。

8結(jié)果計(jì)算與表述結(jié)果計(jì)算與表述

由標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)：由bsaCAs，，求得a和b，則ab(AC/)

試料中呋喃苯烯酸鈉的殘留量（μg/kg）：按下式計(jì)算

mA

VCsA

X

s

式中:

X——試料中呋喃苯烯酸鈉的殘留量，μg/kg；

Cs——標(biāo)準(zhǔn)溶液中呋喃苯烯酸鈉的濃度，ng/mL；

A——試樣溶液中呋喃苯烯酸鈉的峰面積；

As——標(biāo)準(zhǔn)溶液中呋喃苯烯酸鈉的峰面積；

V——溶解殘余物所用流動(dòng)相體積，mL；

m——供試試料質(zhì)量，g。

注：計(jì)算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。

5

9檢測方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度檢測方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度

9.1靈敏度

本方法的檢測限為0.2μg/kg，定量限為0.5μg/kg。

9.2準(zhǔn)確度

本方法在0.5～2μg/kg添加濃度水平上的回收率為60%～120%

9.3精密度

本方法批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤20%，批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤25%。

6

附附錄錄A

（資料性附錄）

RT:0.00-10.00SM:7B

0123456789

Time(min)

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

70

75

80

85

90

95

100

RelativeAbundance

6.54

6.58

6.48

6.67

6.75

6.852.15

2.18

7.747.70

3.41

8.920.83

4.21

1.345.584.35

9.59

NL:5.03E4

TICF:+pESISRM

ms2290.180

[102.251-102.261,

202.421-202.431,

228.187-228.197]MS

12

圖A1呋喃苯烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液離子色譜圖（0.5μg/L）

RT:0.00-12.00SM:7B

0123