1、肝炎病毒Hepatitis virus,新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室 周亞莉,目 的 要 求,掌 握,肝炎病毒的概念、型別及其主要特征,甲肝病毒的致病性、免疫性與特異性預(yù)防,乙肝病毒的病毒學(xué)特性、致病性、免疫性、病毒學(xué)檢查與人工自動免疫,熟 悉,甲肝病毒病毒學(xué)特征及抗原檢測的意義,了 解,其他類型肝炎病毒的特點及其與HAV、HBV的區(qū)別,肝 炎 病 毒,肝炎病毒是指侵害肝臟為主并引起病毒性肝炎的一組不同種屬的病毒 甲型肝炎病毒與戊型肝炎病毒由消化道傳播，引起急性肝炎，不轉(zhuǎn)為慢性肝炎或慢性攜帶者。 乙型與丙型肝炎病毒主要由輸血、血制品或注射器污染而傳播，除引起急性肝炎外，可致慢性肝炎，并與肝硬化及肝

2、癌相關(guān)。 丁型肝炎病毒為一種缺陷病毒 已型肝炎病毒（HFV） 庚型肝炎病毒（HGV） TT型肝炎病毒（TTV）,HAV的結(jié)構(gòu),1、核心+ssRNA,2、衣殼20面體立體對稱,3、無包膜,4、極少變異，只有一個血清型,6、抵抗力較強(qiáng),5、對人、猴源細(xì)胞敏感,增殖緩慢，CPE少見,在水中，泥沙和毛蚶等水生貝類中可存活較長時間,HAV的致病性,糞口途徑傳播,口咽部或唾液腺中早期增殖,腸道與局部淋巴結(jié)中大量增殖,入血并形成病毒血癥,肝臟為最終靶器官（主要是免疫病理作用）,通過膽汁隨糞便排出體外,傳 染 源:病人,免疫性,主要為體液免疫，預(yù)后良好。,所致疾病:甲型肝炎,常見癥狀,流感樣癥狀 厭食 惡心

3、黃疸（眼部及皮膚呈黃色） 尿黃 腹痛 乏力,隱性感染多；無慢性病例和病毒攜帶者，與肝癌無關(guān)；99%預(yù)后良好。,常見癥狀： 感冒加胃炎， 警惕是肝炎。,病 毒 學(xué) 檢 查,標(biāo)本的采集,糞便,血清,病毒學(xué)檢查不作為常規(guī)方法,血清學(xué)檢查,早 期 診 斷 檢測抗HAV-IgM,流行病學(xué)調(diào)查 檢測抗HAV-IgG,PCR快速檢測HAV RNA以診斷甲肝,甲 肝 的 防 治,控制傳染源 隔離治療急性期病人. 切斷傳播途徑：嚴(yán)防病從口入 養(yǎng)成良好的衛(wèi)生飲食習(xí)慣;水產(chǎn)品不宜生吃;水果蔬菜 要洗干凈. 保護(hù)易感人群:未感染者，主要為兒童及病人接觸者 (1)被動免疫可用丙種球蛋白 (2)減毒活疫苗或滅活疫苗 治療

4、以休息、飲食為主，適當(dāng)用護(hù)肝藥物,毛蚶,乙 型 肝 炎 病 毒,（Hepatitis B Virus， HBV）,概述,1963年Blumberg首先發(fā)現(xiàn)了HAA。 1970年Dane在電鏡下觀察到了完整病毒。 1991年將乙肝病毒列入嗜肝DNA病毒科。 HBV流行久遠(yuǎn)、傳播廣泛，是全球性公共衛(wèi)生問題：全球3.5億人攜帶HBV 我國是乙型肝炎的高流行區(qū)，人群HBV攜帶率為10%,大球形顆粒（Dane顆粒）,管形顆粒,小球形顆粒,電鏡下的乙肝病毒,病毒裝配過剩的表面蛋白 及少量的前S蛋白,由小球形顆粒串聯(lián)聚合而成,乙肝病毒Dane顆粒結(jié)構(gòu)模式圖,DNA多聚酶,雙股DNA,核心,HBcAg,HBe

5、Ag,內(nèi)衣殼,外衣殼,脂質(zhì)雙層,外殼蛋白,PreS1,PreS2,HBsAg,有逆轉(zhuǎn)錄酶活性 有合成DNA功能,雙股的DNA,短正股,長負(fù)股,負(fù)股DNA核酸序列分區(qū),S區(qū),HBsAg、PreS1、PreS2,C區(qū),HBcAg、HBeAg,P區(qū),DNA多聚酶,X區(qū),HBxAg,HBV的基因組結(jié)構(gòu),3.2Kb不完全雙鏈環(huán)狀DNA，含4個ORF,HBV的復(fù)制,乙 肝 病 毒 的 抗 原 組 成,外殼蛋白,PreSI抗原,PreS2抗原有多聚人血清白蛋白的結(jié)合位點,HBsAg,抗原決定簇a亞型共有,抗原決定簇d/y 抗原決定簇w/r,亞型特異性，兩組互為排斥。,內(nèi)殼蛋白,HBcAg血中不易檢出,HBe

6、Ag可溶性蛋白，游離于血清中，其消長 與病毒體、DNA多聚酶成正比,HBxAg可反式激活細(xì)胞的癌基因及某些病毒基因,主要乙肝病毒的抗原及其抗體的意義,Pre-S,肝細(xì)胞表面受體結(jié)合表位,阻止HBV與肝細(xì)胞結(jié)合，說明病情好轉(zhuǎn),HBsAg,是HBV感染的重要標(biāo)志,主要的保護(hù)性抗體，機(jī)體對HBV有免疫力,HBcAg,HBV正在復(fù)制,HBeAg,HBV正在復(fù)制，有強(qiáng)傳染性,復(fù)制減弱，傳染性減小,HBxAg,與肝癌的發(fā)生與發(fā)展有關(guān),HBsAb,抗Pre-S,HBcAb-IgM,HBeAb,血中不易檢出,既往感染,HBcAb-IgG,HBV的其它生物學(xué)性狀,培養(yǎng),黑猩猩動物模型、鴨動物模型 組織細(xì)胞培養(yǎng)尚

7、未成功，目前采用DNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),抵抗力-較強(qiáng),不被70%乙醇滅活。 對低溫、干燥、紫外線耐受 高壓蒸汽滅菌法、10010min和環(huán)氧乙烷等均可滅活。,致 病 性,（一）傳染源 ： 患者、HBsAg（+）攜帶者 （二）傳播途徑： 1.血或血制品傳播 微量污染血經(jīng)皮膚黏膜 微小傷口進(jìn)入即可感染。 2.母嬰傳播 胎兒期、圍生期、哺乳傳播。 3.性傳播,（傷口滲出液）,（精液）,陰道分泌液,唾液,非傳播方式,致 病 機(jī) 理,機(jī)體對病毒感染所產(chǎn)生的免疫病理細(xì)胞介導(dǎo)的免疫損傷為主,病毒在肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制,膜表面表達(dá)病毒抗原,自身抗原,肝細(xì)胞損傷,感染細(xì)胞少，免疫應(yīng)答正常,急性肝炎,感染細(xì)胞多，免疫應(yīng)

8、答強(qiáng),重癥肝炎,免疫應(yīng)答低下,慢性肝炎,自身免疫反應(yīng)的免疫損傷：肝特異性脂蛋白抗原(LPS),病毒變異：逃逸免疫,免疫復(fù)合物性的免疫損傷：肝外損傷,病毒對肝細(xì)胞的直接殺傷作用：次要作用 免疫病理損傷作用：主要作用,（三）致病機(jī)理-尚未完全清楚,機(jī)體不能有效地清除病毒，導(dǎo)致HBV持續(xù)性感染，造成長期攜帶者或慢性感染 。,2.細(xì)胞免疫及其介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng),機(jī)體免疫以殺傷性T細(xì)胞（CTL）為主,過度的細(xì)胞免疫反應(yīng)引起大面積的肝細(xì)胞肝細(xì)胞損傷，導(dǎo)致重癥肝炎。細(xì)胞免疫功能低下，不能有效清除病毒，導(dǎo)致慢性感染。,肝細(xì)胞表面的表達(dá)引起病毒特異性抗原 暴露出自身抗原LSP（liver specific pr

9、otein)。,3.體液免疫及其介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng),5.HBV 與原發(fā)性肝癌有關(guān),HBxAg可激活癌基因，是致癌的啟動因子。,三、微生物學(xué)檢查,HBV-DNA檢測:診斷乙肝及療效參考指標(biāo)。,HBV-DNA多聚酶的檢測：活動性肝炎指標(biāo)。,實驗室診斷方法主要是檢測血清標(biāo)志物,HBsAg+是HBV感染的指標(biāo)之一，急性肝炎恢復(fù)后，一般在14個月HBsAg即消失。若持續(xù)6個月以上則認(rèn)為已向慢性肝炎轉(zhuǎn)化。無癥狀HBsAg攜帶者是指肝功能正常，無明顯自覺癥狀，但HbsAg持續(xù)陽性6個月以上者。 抗-Hbs為主要保護(hù)性抗體，抗-HBs的出現(xiàn)常顯示患者已恢復(fù)或痊愈。 HBeAg陽性提示體內(nèi)HBV在復(fù)制，如轉(zhuǎn)為陰

10、性表示病毒停止復(fù)制?？?HBe陽性，表示HBV復(fù)制能力減弱，傳染性降低。乙肝病由“大三陽”轉(zhuǎn)為“小三陽”即指由HBeAg陽性轉(zhuǎn)為抗-HBe陽性 抗-HBc IgM陽性，提示HBV處于復(fù)制狀態(tài)，具有強(qiáng)的傳染性,不符合血清HBsAg（+）、 HBeAg （+）和抗-HBc（+） 的解釋是（） A.急性乙型肝炎 B.慢性乙型肝炎 C.乙型肝炎恢復(fù)期 D.無癥狀抗原攜帶者 E.血清有傳染性,牛刀小試,防 治 原 則,預(yù)防原則,控制傳染源,切斷傳播途徑,保護(hù)易感人群,易感人群,新生兒、兒童、醫(yī)護(hù)人員、乙型肝炎病人家庭成員、婚前檢查（其配偶為陽性者）,主動免疫,適用于所有新生兒以及所有血清中HBsAg、H

11、BsAb陰性的人,被動免疫,治療原則,疫苗（血源性、基因工程),高效價人血清球蛋白（HBIg）,廣譜抗病毒藥物、調(diào)節(jié)免疫功能、護(hù)肝,1、乙肝病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與抗原組成。 2、傳染源、傳播方式、臨床類型。 3、乙肝病毒抗原抗體系統(tǒng)的檢測及其臨床意義。 4、人工自動免疫的應(yīng)用,丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV ）,曾被命名為腸道外傳播的非甲非乙型肝炎病毒PT- NANB HCV主要經(jīng)血或血制品傳播，目前占輸血后肝炎的 80%90%。 在我國丙型肝炎流行率為2.1%。其臨床和流行病學(xué) 特點類似乙型肝炎，但癥狀較輕，感染易于慢性化， 部分患者可發(fā)展為肝硬化或肝癌。,HCV呈球

12、形 單股正鏈RNA病毒， 有包膜 有刺突,一、病毒結(jié)構(gòu),HCV的致病性與免疫性,傳播途徑似HBV 是引起輸血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因 潛伏期： 4-8周，75發(fā)展為慢性肝炎，有些發(fā)展為肝硬化 無癥狀HCV攜帶者和慢性丙肝者多見 誘發(fā)肝外損傷：腎小球腎炎 細(xì)胞免疫異常可能是丙肝發(fā)病的重要機(jī)制之一；免疫力不牢固,丙型肝炎的特點,我國丙肝病毒攜帶者的比例在2%-5% 隨著年齡的增長，丙肝病毒攜帶率亦增高 易感人群感染HCV后，慢性化的比例高達(dá)50%以上 乙肝患者容易重疊HCV感染,HCV的診斷及預(yù)防,檢查病毒RNA 檢測抗HCV：ELISA或Western blot 我國規(guī)定，檢測抗HCV作為篩

13、選獻(xiàn)血員的必須步驟 對血制品亦需檢測以防止被HCV污染 因HCV免疫原性不強(qiáng)及變異，目前尚無可用疫苗,丁 型 肝 炎 病 毒,單負(fù)鏈環(huán)狀RNA HDV是一種缺陷病毒，必須在HBV或其他嗜肝DNA病毒輔助下才能復(fù)制。 由HBsAg構(gòu)成其外殼。 HDV定位于肝細(xì)胞核內(nèi)，在血液中由HBsAg包被，形成35-40nm球形顆粒。,丁型肝炎的特點,只能感染HBsAg陽性的病人 我國丁肝感染率在1.6%-5%，西南地區(qū)感染率高 患者可不定期隔離，或隔離至肝功能正常，或HBsAg陰轉(zhuǎn)。 病原學(xué)檢查為HDAg、抗HD及HDV-RNA。持續(xù)高滴度IgG型抗HD是慢性HDV感染的主要血清學(xué)標(biāo)志。一旦乙肝患者感染了H

14、DV，尤其是在慢性乙肝的基礎(chǔ)上感染，容易發(fā)展成為重度慢性乙肝、重型肝炎，甚至肝硬化。,致 病 性,傳播方式：與乙肝基本相同，主要經(jīng)輸血或注射傳 播。與乙肝相比，HDV母嬰傳播少見,而 性傳播相對重要。,傳 染 源 ：HDV感染的病人和攜帶者,臨床特征,聯(lián)合感染 Coinfection,HDV與HBV同時或間隔時間不長感染同一病人,自限性的良性過程，一般不轉(zhuǎn)為慢性,血清轉(zhuǎn)氨酶有兩次升高,重疊感染Superinfection,在慢性乙型肝炎的基礎(chǔ)上再感染HDV,常表現(xiàn)為慢性乙型肝炎患者的病情突然惡化,HDV致病作用主要是病毒對肝細(xì)胞的直接損傷,戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）,無包膜的3234nm大小的球形單正鏈RNA病毒,復(fù)制方式可能與HAV相似,有3個ORF，兩個血清型,致病性及免疫,主要為糞口途徑傳播 由膽汁經(jīng)糞便排出體外 對肝細(xì)胞的直接損傷及免疫病理作用 多表現(xiàn)為急性戊型肝炎 孕婦感染常致流產(chǎn)，死亡率較高,五種肝炎病毒比較,HAV,HBV,HCV,HDV,HEV,小 結(jié),五種肝炎病毒的比較：甲肝和乙肝,甲肝：生物學(xué)性狀、致病