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文檔簡介

1、讀下面一段資料,找出單克隆抗體的概念,2.1單克隆抗體的概念,單克隆抗體:單個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體,制備原理:將單個B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞分泌的,設(shè)計方案: 一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,雜種細(xì)胞,B-B 、B-瘤 、瘤-瘤 (未融合的B、瘤),(一選)選擇性培養(yǎng)基:只有雜交瘤細(xì)胞才能存活,獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞,(二選):選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞,體外培養(yǎng),小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),雜交瘤細(xì)胞特點:既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量增殖。,2.3單克隆抗體的應(yīng)用,診斷試劑最廣泛應(yīng)用 準(zhǔn)確、高效、簡易、快速,單克隆抗體最主要

2、的優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,并能大量制備。,抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法,抗原,反復(fù)注射動物,從動物的血清中分離抗體,該法制備抗體的缺點: 產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差、靈敏度低。,如何解決這個問題呢?,單克隆抗體!,用于治療疾病和運載藥物 特異性強、靈敏度高 生物導(dǎo)彈單克隆抗體抗癌藥物 療效高、毒副作用小,結(jié)合同位素的單抗,-生物導(dǎo)彈,單抗,放射性同位素,兩個過程,動物細(xì)胞培養(yǎng)過程,單克隆抗體制備過程,三個“一”,一個誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒,一個新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢,本節(jié)小結(jié),重點,(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞,則B細(xì)胞是取自小鼠體內(nèi)的 細(xì)胞,從

3、小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前,應(yīng)給小鼠注射_類物質(zhì)。 (2)d過程是一個_過程,該過程的進行常用_或_的誘導(dǎo)。 (3)假設(shè)僅考慮某兩個細(xì)胞的融合,則可形成 種類型的C細(xì)胞,因此需用_培養(yǎng)基篩選出D細(xì)胞用于培養(yǎng),D細(xì)胞的名稱是 ,其特點是_。,效應(yīng)B,抗原,細(xì)胞融合,聚乙二醇 滅活的病毒,選擇性,3,既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體,雜交瘤細(xì)胞,(4)在培養(yǎng)時通過_分裂方式大量繁殖。D細(xì)胞體外培養(yǎng)需要注意的條件是(要求答5項)_。 (5)單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面,與常規(guī)抗體相比,其特點是_。,特異性強、靈敏度高,有絲,無菌、無毒的環(huán)境;充足的營養(yǎng);適宜的溫度和pH;適宜的氣體環(huán)境,15

4、、(1)單克隆抗體是指 。,(2)制備單克隆抗體的步驟: 將_注入小鼠體內(nèi),從小鼠脾臟中獲得淋巴細(xì)胞,其中至少1個淋巴細(xì)胞帶有抗該抗原的抗體。 將步驟獲得的B淋巴細(xì)胞與步驟培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞在_的誘導(dǎo)下融合。 將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞,放在_培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),篩選。 這樣獲得的雜交瘤細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞_的能力,又具有_的本領(lǐng)。 檢測和分離帶有抗X抗體的陽性細(xì)胞,培養(yǎng)板中每孔放一個細(xì)胞進行培養(yǎng)。 將陽性細(xì)胞進行增殖,從而制備出大量抗該抗原的單克隆抗體。,化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強的抗體,抗原,聚乙二醇,選擇性,無限增殖,產(chǎn)生專一抗體,(3)大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種: 體外培養(yǎng)法,可獲

5、得10g/mL的抗體;動物體內(nèi)誘生法可獲得520mg/mL的抗體。你選擇的方法及原因是 。,(4)用本法制備出的單克隆抗體仍具有局限性,因為它是用小鼠的_細(xì)胞制備的,其化學(xué)本質(zhì)是_,應(yīng)用于人體,會作為 產(chǎn)生 ,解決這個問題的方法是_。,大量生產(chǎn)選,小規(guī)模生產(chǎn)選,效應(yīng)B,蛋白質(zhì),異物,免疫反應(yīng),采用人的效應(yīng)B細(xì)胞制備,15、右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答:(1)該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?。原因是 _。(2)圖中為 過程,常用 作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了_ ,因此不僅能分泌_,還有 本領(lǐng)。,不能,沒有將抗原注入小鼠體內(nèi),無法獲得產(chǎn)生專一抗體的B淋巴細(xì)胞,細(xì)胞融合,滅活病毒,雙親細(xì)胞的遺傳

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