1、氣相色譜法測定血清中丙戊酸鈉濃度,主講人：毛瓊瓊 2012年3月30日 彭海洲 宋飛,丙戊酸鈉 簡介,分析背景,分析步驟,思考題,謝謝 觀看,參考文獻(xiàn),丙戊酸鈉,常用劑型,原發(fā)性大發(fā)作和 失神小發(fā)作的首選藥 廣譜抗癲癇藥,片劑：200mg規(guī)格 糖漿劑：300ml規(guī)格,注射劑: 每瓶內(nèi)含400mg近白色 的無菌丙戊酸鈉凍干粉, 隨附1支4ml注射用水,丙戊酸鈉Sodium Valproate 別名 抗癇靈,丙戊酸鈉 簡介,分析背景,分析步驟,思考題,謝謝 觀看,參考文獻(xiàn),分析背景,監(jiān)測方法很多, 目前以免疫測定法 高效液相色譜法(HPLC) 等,缺點,找一種分析方法可以滿足臨床檢測血丙戊酸鈉濃度

2、的要求,臨床上使用的大多數(shù) 抗癲癇藥物, 均需要進(jìn)行治療藥物 監(jiān)測( TDM),抗癲癇藥物丙戊酸 鈉,操作程序復(fù)雜, 分析流程長, 費用昂貴, 不利于臨床推廣 應(yīng)用。,藥物分析人員,氣相色譜法GC,測定血清中丙戊酸鈉濃度,丙戊酸鈉 簡介,分析背景,分析步驟,思考題,謝謝 觀看,參考文獻(xiàn),儀器與試劑 樣品處理 色譜條件,GC對血清中丙戊酸鈉濃度分析步驟,線性關(guān)系與檢測限 精密度 回收率,討論,GC-15A 氣相色譜儀, 氫火焰檢測器,C2R4A 色譜工作站(shimadzu 產(chǎn)品) 、 LXJ2 離 心沉淀機(jī)(上海醫(yī)療器械三廠),儀器,樣品,儀器與試劑,丙戊酸鈉提取液 丙戊酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液,試劑,高

3、純氮氣和高純氫氣。 硫酸、三氯甲烷(長沙試劑公司) , 丙戊酸鈉(VPA) 、苯酚 (Phenol ,Sigma 公司產(chǎn)品) 。,GC-15A 氣相色譜儀,氫火焰檢測器,離心沉淀機(jī),樣品處理,色譜條件,取3 ml 全血于5 ml 速凝管內(nèi),離心, 取上層血清0. 5 ml 于5 ml 的玻璃離心管內(nèi),加50l 5 mol/ L 的H2SO4和0. 5 ml 提取液,加蓋,振蕩提取1 min ,3 000 r/ min 離心5 min。取1l 氯仿液于氣相色譜儀上進(jìn)樣(圖1 圖4) 。從圖1 可知,6 min 保留時間(RT) 便可以完成血清丙 戊酸鈉濃度的檢測,爐溫170 ,氫火焰檢測器 溫度

4、220 , 進(jìn)樣器溫度220 , 氫氣流速40 ml/ min , 氮氣 流速35 ml/ min , 空氣流速500 ml/ min,討論,本研究中丙戊酸鈉和內(nèi)標(biāo)苯酚的峰距較大, 不利于控制氣相色譜儀工作時各參數(shù)的微小變動所產(chǎn)生的誤差。,建立氣相色譜法定量測定血清中抗癲癇藥丙戊酸鈉濃度的關(guān)鍵,在于尋找合適的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。,為注意將收集到的臨床標(biāo)本 置于4 冰箱中保存,實驗證明 此條件下,一周內(nèi)對樣品的 測定結(jié)果沒有影響,在加入丙戊酸鈉提取液, 離心時常常由于樣品中蛋 白質(zhì)含量過高,仍不能分離, 此時可用微量加樣器沿壁攪動, 再離心,以達(dá)到分離的效果。,使用微量進(jìn)樣器時, 應(yīng)該保持干燥, 否則會

5、使測定的峰變寬, 延遲出峰時間,參考文獻(xiàn), 1 朱伊. 高效液相色譜法測定人血清中丙戊酸鈉含量分析J . 福 建醫(yī)藥雜志,2001 ,23 (4) :1272128. 2 陳堅,方維軍,吳芳,等. 高效液相色譜法測定丙戊酸血藥濃度 J . 上海醫(yī)院藥學(xué), 2000 ,11 (3) :33235. 3 程玲,羅雯紅,李慧,等. 高效液相色譜法測定癲癇病人血清中 丙戊酸的濃度J . 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2000 ,13 (3) :73274. 4 張敬軍,俞麗云,瞿治平. 高效液相色譜法測定癲癇病人血清中 丙戊酸的濃度J . 中華神經(jīng)科雜志,1999 ,32 (1) :57258. 5 郁健, 王

6、廣基,杜春波. 高效液相色譜法測定癲癇病人血清中丙 戊酸的濃度J . 中國藥科大學(xué)學(xué)報, 1998 , 29 (1) :45246. 6 鄭惠良,祁元明,楊瑩. 高效液相色譜法測定癲癇病人血清中丙 戊酸的濃度J . 河南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,1997 ,32 (4) :78279. 7 Kreher U , Darius J , Wien F. Establishing individual metabolite patterns for patients on valproate therapy J . Drug Metab Phar2 macokinet , 2001 ,26 (122) :992107. 8 Gopaul SV , Farrell K, Abbott FS. Gas chromatography/ negative,丙戊酸鈉 簡介,分析背景,分析步驟,思考題,謝謝 觀看,參考文獻(xiàn),思考題,怎樣尋找合適的 內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)？,當(dāng)你從事