1、第十章質(zhì)譜分析法,Mass Spectrometry, MS,李紅亮,2,第一節(jié) 基本原理與質(zhì)譜儀 basic principle and mass spectrometer 第二節(jié) 離子峰的主要類(lèi)型 main kinds of ion peaks 第三節(jié) 質(zhì)譜斷裂方式、規(guī)律與應(yīng)用 mode ,rule and application of Ms,3,一、 概述 generalization 二、質(zhì)譜儀與質(zhì)譜分析 mass spectrometer and mass spectrometry,第一節(jié)基本原理與質(zhì)譜儀basic principle and Mass spectrometer,4,

2、一、概述 generalization,利用電磁學(xué)原理，將化合物電離成具有不同質(zhì)量的離子，然后按其質(zhì)荷比（m/z）的大小依次排列成譜收集和記錄下來(lái)，稱(chēng)為質(zhì)譜。以質(zhì)譜為基礎(chǔ)建立起來(lái)的分析方法，稱(chēng)為質(zhì)譜分析法（mass spectromertry, MS）,5,第一臺(tái)質(zhì)譜儀：1912年； 早期應(yīng)用：相對(duì)原子質(zhì)量、同位素相對(duì)豐度等（無(wú)機(jī)質(zhì)譜）； 40年代：高分辨率質(zhì)譜儀出現(xiàn)，有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析; 60年代：色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀出現(xiàn)，有機(jī)復(fù)雜化合物的鑒定和結(jié)構(gòu)分析，促進(jìn)天然有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析的發(fā)展（有機(jī)質(zhì)譜）； 80年代：快原子轟擊電離源(FAB)以及串聯(lián)質(zhì)譜(MS-MS)等，使難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定化合物的質(zhì)

3、譜分析成為可能； 90年代：基質(zhì)輔助激光解吸電離源(MALDI)、電噴霧電離源(ESI)等質(zhì)譜新技術(shù)，使LC-MS聯(lián)用成為現(xiàn)實(shí)，發(fā)展了研究生物活性大分子的生物質(zhì)譜(bio-mass spectrometry)技術(shù)。,發(fā)展簡(jiǎn)史,6,b.1917,b.1959,b.1938,7,與NMR, IR, UV-vis等有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分構(gòu)四大工具比較，具有以下突出優(yōu)點(diǎn)： MS是唯一可以確定分子式的方法； 靈敏度高。只需微克級(jí)甚至更少的樣品，檢出限可達(dá)10-14g； 根據(jù)各類(lèi)有機(jī)物分子的斷裂規(guī)律，質(zhì)譜中的分子碎片離子峰提供其結(jié)構(gòu)的豐富信息。,8,二、 質(zhì)譜儀與質(zhì)譜分析原理mass spectrometer

4、and mass spectrometry,進(jìn)樣系統(tǒng),離子源,質(zhì)量分析器,檢測(cè)器,1.直接進(jìn)樣 2.間接進(jìn)樣,1.電子轟擊 2.化學(xué)電離 3.場(chǎng)致電離 4.激光解析,1.單聚焦 2.雙聚焦 3.飛行時(shí)間 4.四極桿,質(zhì)譜儀類(lèi)型主要取決于： 離子源和質(zhì)量分析器,9,原理與結(jié)構(gòu),電離室原理與結(jié)構(gòu),質(zhì)譜儀原理與結(jié)構(gòu) （以單聚焦質(zhì)譜儀為例）,10,1.進(jìn)樣系統(tǒng),將等測(cè)物質(zhì)（即試樣）送進(jìn)離子源。質(zhì)譜儀進(jìn)樣方法的選擇取決于試樣的物理化學(xué)性質(zhì)和所采用的離子化方式等； 一般分為兩種： 直接進(jìn)樣： 通過(guò)直接進(jìn)樣桿，將純樣或混合樣直接進(jìn)到離子源內(nèi)或經(jīng)注射器由毛細(xì)管直接注入。缺點(diǎn)是不能分析復(fù)雜的化合物體系。 間接進(jìn)

5、樣： 即通過(guò)GC或HPLC色譜進(jìn)樣，混合物的質(zhì)譜分析。,11,2.真空系統(tǒng),質(zhì)譜儀的離子源、質(zhì)量分析器及檢測(cè)器等必須處于高真空狀態(tài)。 離子源真空度達(dá)1.310-41.310-5Pa； 質(zhì)量分析器中應(yīng)達(dá)1.310-6Pa,商業(yè)化中常采用：渦輪分子泵，直接與離子源或分析器相連，抽出的氣體再由機(jī)械真空泵排到系統(tǒng)外。,質(zhì)譜中要求高真空的原因?yàn)椋?避免大量氧存在造成離子源燈絲損壞； 消除本底干擾； 減少離子-分子反應(yīng)，避免圖譜過(guò)復(fù)雜化； 有利于離子源中電子束的調(diào)節(jié)，避免加速極放電等問(wèn)題。,12,3.離子源或電源室,Electron Ionization (EI) 電子電離源,電加熱萊或鎢的燈絲至2K度,

6、產(chǎn)生1070eV的電子束對(duì)試樣分子進(jìn)行碰撞,使其電離。,13,EI 源的特點(diǎn)：,電離效率高,靈敏度高； 應(yīng)用最廣，標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖基本都是采用EI源得到的； 穩(wěn)定，操作方便，電子流強(qiáng)度可精密控制； 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，控溫方便；,EI源：可變的離子化能量 (10240eV),對(duì)于易電離的物質(zhì)降低電子能量，而對(duì)于難電離的物質(zhì)則加大電子能量（ 常用70eV ）。,電子能量,電子能量,分子離子增加,碎片離子增加,14,離子室內(nèi)的反應(yīng)氣體（CH4,NH3,H2等；10100Pa，i濃度為樣品的103105倍），電子（100240eV）轟擊，產(chǎn)生正離子，再與試樣分離碰撞，產(chǎn)生準(zhǔn)分子離子。, 化學(xué)電離源（Chemical

7、 Ionization，CI）:,最強(qiáng)峰為準(zhǔn)分子離子； 譜圖簡(jiǎn)單； 不適用難揮發(fā)試樣；,15,惰性氣體Ar或Xe的原子首先被電離并被加速， 使之具有高的動(dòng)能，在原子槍(atom gun)內(nèi)進(jìn)行電荷交換反應(yīng)：,Ar+(高動(dòng)能的)+ Ar(熱運(yùn)動(dòng)的)Ar(高動(dòng)能的)+ Ar+(熱運(yùn)動(dòng)的),高動(dòng)能的Ar或Xe原子束再轟擊樣品分子使其離子化。,快原子轟擊源Fast Atom Bombardment（FAB）,常用于極性強(qiáng)、相對(duì)分子質(zhì)量較大的試樣分析； 主要用于磁式雙聚焦質(zhì)譜儀。,16,流出液在高電場(chǎng)下形成帶電噴霧，在電場(chǎng)力作用下穿過(guò)氣簾； 氣簾的作用：霧化；蒸發(fā)溶劑；阻止中性溶劑分子。,電噴霧離子源e

8、lectron spray ionization（ESI）,常應(yīng)用于LC-MS中，與四極桿質(zhì)量分析器或飛行時(shí)間質(zhì)量分析器聯(lián)用； 作為軟電離方式分析蛋白質(zhì)及肽等極性強(qiáng)、熱穩(wěn)定性差的有機(jī)大分子。,17,MALDI可使熱敏感或不揮發(fā)的化合物由固相直接得到 離子。,待測(cè)物質(zhì)與基質(zhì)溶液混合后蒸發(fā)，使分析物與基質(zhì)成為晶體或半晶體，用一定波長(zhǎng)激光進(jìn)行照射時(shí)，基質(zhì)分子吸收激光的能量，使基質(zhì)分子和樣品分子電離。,MALDI是一種軟電離技術(shù)，適用于混合物及生物大分子的測(cè)定。此電離方式特別適合于飛行時(shí)間質(zhì)譜儀。,基質(zhì)輔助激光解析電離Matrix-Assisted Laser Desorption Ionizatio

9、n (MALDI),18,又稱(chēng)原子質(zhì)譜法，是將單質(zhì)離子按照質(zhì)荷比的不同進(jìn)行分離和檢測(cè)的方法。廣泛應(yīng)用于試樣元素的識(shí)別和濃度測(cè)定。,電感耦合等離子體Inductively Coupled Plasma (ICP) 無(wú)機(jī)質(zhì)譜,HPLC-ICP-MS,ELAN公司HPLC-ICP-MS,19,3. 質(zhì)量分析器原理,質(zhì)量分析器作用是將離子源產(chǎn)生的離子按照質(zhì)荷比的大小分開(kāi)，使符合條件的離子通過(guò)，并過(guò)濾掉不符合條件的離子。 離子在磁場(chǎng)中的軌道半徑R取決于： m/e 、 B 、 V 改變加速電壓V, 可以使不同m/e 的離子進(jìn)入檢測(cè)器。,20,單聚焦磁場(chǎng)分析器,方向聚焦； 相同質(zhì)荷比，入射方向不同的離子會(huì)聚

10、； 分辨率不高,21,雙聚焦分析器,方向聚焦： 相同質(zhì)荷比，入射方向不同的離子會(huì)聚； 能量聚焦： 相同質(zhì)荷比，速度(能量)不同的離子會(huì)聚；,質(zhì)量相同，能量不同的離子通過(guò)電場(chǎng)和磁場(chǎng)時(shí)，均產(chǎn)生能量色散；兩種作用大小相等，方向相反時(shí)互補(bǔ)實(shí)現(xiàn)雙聚焦；,22,飛行時(shí)間質(zhì)量分析器 Time Of Flight, TOF,原理：離子在電場(chǎng)作用下加速飛過(guò)飛行管道，根據(jù)到達(dá)檢測(cè)器的飛行時(shí)間不同而被檢測(cè)即測(cè)定離子的質(zhì)荷比（M/Z）與離子的飛行時(shí)間成正比 ，從而檢測(cè)離子。,MALDI-TOF-MS具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高及分辨率高等特點(diǎn)，為生命科學(xué)等領(lǐng)域提供了一種強(qiáng)有力的分析測(cè)試手段。,23,離子阱質(zhì)量分析器Ion

11、Trap,原理： 利用電荷與電磁場(chǎng)間的交互作用力來(lái)牽制帶電粒子的運(yùn)動(dòng)，以達(dá)到將其局限在某個(gè)小范圍內(nèi)的目的。 主要分三部分：上下兩片圓蓋狀電極，以及中間具雙曲面外型的環(huán)狀電極。,24,四極桿質(zhì)量分析器Quadrupole,原理： 由四根帶有直流電壓（DC）和疊加的射頻電壓（RF）的準(zhǔn)確平行桿構(gòu)成，相對(duì)的一對(duì)電極是等電位的，兩對(duì)電極之間的電位則是相反的。 從離子源出來(lái)的離子，進(jìn)入分析器中心，只有滿(mǎn)足一定條件下的離子才能沿著兩對(duì)電極的中心軸飛行，到達(dá)質(zhì)量檢測(cè)器。 廣泛地與ESI聯(lián)用。,25,26,4. 檢測(cè)器,用以測(cè)量、記錄離子流強(qiáng)度，從而得出質(zhì)譜圖。 電子倍增器 1518級(jí)；可測(cè)出10-17A微弱

12、電流； 渠道式電子倍增器陣列,27,第一節(jié) 基本原理與質(zhì)譜儀 basic principle and mass spectrometer 第二節(jié) 離子峰的主要類(lèi)型 main kinds of ion peaks 第三節(jié) 質(zhì)譜斷裂方式、規(guī)律與應(yīng)用 mode ,rule and application of Ms,一、質(zhì)譜圖與質(zhì)譜表 Ms figure and table 二、離子峰 ion peak,第二節(jié)質(zhì)譜與離子峰的主要類(lèi)型Ms and main types of ion peaks,29,一、 質(zhì)譜圖與質(zhì)譜表Ms figure and table,（一）表示： 各條譜線(xiàn)表示一個(gè)離子峰。 橫

13、坐標(biāo)是m/e，縱坐標(biāo)是相對(duì)豐度 相對(duì)豐度：原始質(zhì)譜圖上最強(qiáng)的離子峰為基峰，100%。其它離子峰以此基峰的相對(duì)百分值表示。,30,31,丙 酸 的 質(zhì) 譜 表,32,（二）分辨本領(lǐng),所謂分辨本領(lǐng)，是指質(zhì)譜儀分開(kāi)相鄰質(zhì)量數(shù)離子的能力，一般定義是：對(duì)兩個(gè)相等強(qiáng)度的相鄰峰，當(dāng)兩峰間的峰谷不大于其峰高10時(shí)，則認(rèn)為兩峰已經(jīng)分開(kāi)，其分辨率,其中m1、m2為質(zhì)量數(shù)，且叫m1m2。，故在兩峰質(zhì)量數(shù)較小時(shí)，要求儀器分辨率越大。 R10000高分辨率，R10000低分辨率,33,34,二、離子峰 ion peak,（一）分子離子峰： 分子受電子撞擊后，失去一個(gè)電子而生成帶正電荷的離子分子離子或母離子 M+e- M

14、 +2e 故：分子離子峰m/e數(shù)值，相當(dāng)于該化合物的相對(duì)分子質(zhì)量。 位于質(zhì)譜圖的右端，因?yàn)閙/e最大。 相對(duì)強(qiáng)度取決于分子離子相對(duì)于裂解產(chǎn)物的穩(wěn)定性。 芳香環(huán)共軛多烯烯環(huán)狀化合物羰基化合物醚酯胺酸醇高度分支的烴類(lèi),35,由于同位素的存在，可以看到比分子離子峰大一個(gè)質(zhì)量單位的峰；有時(shí)還可以觀(guān)察到M+2，M+3。；,（二）同位素離子峰isotopic ion peak,36,37,在低分辨的質(zhì)譜儀上，則可以通過(guò)同位素相對(duì)豐度法推導(dǎo)其化學(xué)式，同位素離子峰相對(duì)強(qiáng)度與其中各元素的天然豐度及存在個(gè)數(shù)成正比，對(duì)于一個(gè)CwHxNyOz的化合物，其同位素離子峰(M+l)+、(M2)+與分子離子峰M+的強(qiáng)度之比為

15、:,38,忽略2H,17O影響，則上述二式略為,39,含S化合物,含Cl,Br化合物,40,(三)碎片離子峰,在高能量電子源轟擊情況下，分子離子處于激發(fā)狀態(tài)，原子間的一些鍵進(jìn)一步斷裂，產(chǎn)生質(zhì)量數(shù)較低的碎片，獲取分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)信息。,正己烷,41,碎片離子峰,42,（四）亞穩(wěn)離子峰,離子離開(kāi)電離室到達(dá)收集器之前的過(guò)程中，發(fā)生分解而形成低質(zhì)量的離子所產(chǎn)生的峰。（子離子與中性碎片）,43,（五）重排離子峰,兩個(gè)或兩個(gè)以上鍵的斷裂中，某些原子或基團(tuán)從一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置生成的離子。轉(zhuǎn)移基團(tuán)多為氫原子。 分子中有一個(gè)雙鍵 在碳位置上有H原子 酮，醛，酸，酯羰基化合物，烯烴類(lèi)和含苯環(huán)等化合物。,44,

16、重排離子峰產(chǎn)生過(guò)程,45,Next：,第一節(jié) 基本原理與質(zhì)譜儀 basic principle and mass spectrometer 第二節(jié) 離子峰的主要類(lèi)型 main kinds of ion peaks 第三節(jié) 質(zhì)譜斷裂方式、規(guī)律與應(yīng)用 mode ,rule and application of Ms,一、斷裂方式、規(guī)律 Ms figure and table 二、質(zhì)譜應(yīng)用 Application of Ms,第三節(jié)質(zhì)譜斷裂方式、規(guī)律與應(yīng)用mode ,rule and application of Ms,47,一、 斷裂方式及一般規(guī)律,(一)、斷裂方式： 均裂：一個(gè)鍵兩電子裂開(kāi)，各碎

17、片； 異裂：鍵兩電子都?xì)w屬于其中某一個(gè)碎片； 半異裂：離子化鍵開(kāi)裂。,48,49,(二)、重要有機(jī)化合物的斷裂規(guī)律和斷裂圖象,一）脂肪類(lèi)化合物 1飽和烴類(lèi)：對(duì)直鏈烷烴分子離子，先通過(guò)半異裂失去一個(gè)烷基游離基，形成正離子，后連續(xù)失去28個(gè)質(zhì)量單位。（CH2=CH2）,50,在質(zhì)譜圖上 獲得CnH2n+1(m/e,29,43,57) 比個(gè)碎片離子峰低兩個(gè)質(zhì)量單位處出現(xiàn)一些鏈烯小峰，得CnH2n-1(失去一個(gè)分子H，m/e，27，41，55) 分子離子峰的強(qiáng)度隨分子量增加而減小。 支鏈的斷裂，易出現(xiàn)在被取代的碳原子上，穩(wěn)定性為：,51,52,53,2.羧酸、酯、酰胺：容易發(fā)生開(kāi)裂，產(chǎn)生?；?yáng)離子或另

18、一種離子。,54,對(duì)酯和仲、叔酰胺，主要是2斷裂。 有H存在，發(fā)生麥?zhǔn)现嘏?，失去一個(gè)碎片，產(chǎn)生一個(gè)奇電子的正離子：,55,對(duì)酸與酯，得到奇電子離子的m/e，符合60+14n， n: C數(shù) 而酰胺符合59+14n NH2,56,醛、酮,R,C,H,O,57,58,59,60,（一）由同位素離子峰確定分子式,拜諾表Beynon：相對(duì)分子質(zhì)量500以下，只含C，H，N，O的化合物同位素離子峰M+1，M+2與分子離子峰的M的相對(duì)強(qiáng)度編成的表。 如102處有分子離子峰，M+1，M+2相對(duì)其強(qiáng)度為7.81%，0.35%。從表中可知C6H2N2，C7H2O，C7H4N。相對(duì)分子質(zhì)量為偶數(shù)。從氮數(shù)規(guī)律，可以排

19、除C7H4N。,二、質(zhì)譜法的應(yīng)用application of Ms,61,貝農(nóng)(Beynon)表 例如： M=150 化合物 M+1 M+2 化合物 M+1 M+2 C6H14NOCl 8.15 0.49 C7H11N4 9.25 0.38 C6H14O4 6.86 1.0 C8H6 O3 8.36 0.95 C7H2 O4 7.75 1.06 C8H8N O2 9.23 0.78 C7H4N O3 8.13 1.06 C8H11N2 O 9.61 0.61 C7H6N2 O2 8.50 0.72 C8H12N3 9.98 0.45 C7H8N3 O 8.88 0.55 C9H10 O2 9.

20、96 0.84,62,（二）用高分辨率質(zhì)譜確定分子式,63,（三）相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定 1分子離子峰必須符合氮律，有C,H,O,N,S,鹵族元素等有機(jī)化合物中，有偶數(shù)氮（含0個(gè)），分子離子峰m/e一定是偶數(shù)。若有奇數(shù)N，分子離子峰m/e是奇數(shù)。 (由于C，H，N，O，S，X中，只有N化合價(jià)是3，奇數(shù)，而質(zhì)量數(shù)是偶數(shù)。) 2分子離子峰與鄰近離子峰的質(zhì)量差應(yīng)合理。 不可能連續(xù)失去4個(gè)H或不夠一個(gè)CH2的碎片，所以分子離子峰與鄰近離子峰出現(xiàn)質(zhì)量差為413是不合理的。,64,3當(dāng)化合物中含S,Br,Cl時(shí)，可利用M,M+2等同位素離子峰的比例來(lái)確認(rèn)分子離子峰； 4. 改變質(zhì)譜儀的操作條件，提高分子離子峰的

21、相對(duì)強(qiáng)度。,65,第一步 對(duì)分子離子區(qū)進(jìn)行解析（推斷分子式） （1）確認(rèn)分子離子峰，并注意分子離子峰對(duì)基峰的相對(duì)強(qiáng)度比，這對(duì)判斷分子離子的穩(wěn)定性以及確定結(jié)構(gòu)是有一定幫助的。 （2）注意是偶數(shù)還是奇數(shù)，如果為奇數(shù)，而元素分析又證明含有氮時(shí)，則分子中一定含有奇數(shù)個(gè)氮原子。 （3）注意同位素峰中M+1/M及M+2/M數(shù)值的大小，據(jù)此可以判斷分子中是否含有S、CI、Br，并可初步推斷分子式。 （4）根據(jù)高分辨質(zhì)譜測(cè)得的分子離子的m/z值，推定分子式。,（四）結(jié)構(gòu)鑒定（質(zhì)譜解析）,66,第二步 對(duì)碎片離子區(qū)的解析 （推斷碎片結(jié)構(gòu)） （1）找出主要碎片離子峰。并根據(jù)碎片離子的質(zhì)荷比，確定碎片離子的組成。常

22、見(jiàn)碎片離子的組成見(jiàn)表6-2,67,離子 失去的碎片 可能存在的結(jié)構(gòu) M-1 H 醛，某些醚及胺 M-15 CH3 甲基 M-18 H2O 醇類(lèi)，包括糖類(lèi) M-28 C2H4，CO，N2C2H4， 麥?zhǔn)现嘏?，CO M-29 CHO，C2H5 醛類(lèi)，乙基 M-34 H2S 硫醇 M-35 CI M-36 HCI 氯化物 M-43 CH3CO，C3H7 甲基酮，丙基 M-45 C00H 羧酸類(lèi) M-60 CH3COOH 醋酸酯,68,（2）注意分子離子有何重要碎片脫去,m/e 離子 可能的結(jié)構(gòu)類(lèi)型 29 CHO、C2H5 醛類(lèi)、乙基 30 CH2NH2 伯胺 43 CH3CO CH3CO C3H7

23、丙基 29、43、57、71 等 C2H5、C3H7 直鏈烷烴 39、50、71 芳香化合物 芳香化合物 52、65、77 60 CH3COOH 羧酸類(lèi)、醋酸類(lèi) 91 C6H5CH2 芐基 105 C6H5CO 苯甲?；?69,（3）找出亞穩(wěn)離子峰，利用m* = m22 / m1，確定m1與m2的關(guān)系，確定開(kāi)裂類(lèi)型。 第三步 提出結(jié)構(gòu)式 根據(jù)以上分析，列出可能存在的結(jié)構(gòu)單元及剩余碎片，根據(jù)可能的方式進(jìn)行連接，組成可能的結(jié)構(gòu)式,70,例： 某未知物經(jīng)測(cè)定是只含C、H、O的有機(jī)化合物，紅外光譜顯示在3 100-3 600 cm1之間無(wú)吸收，其質(zhì)譜如圖10.10，試推測(cè)其結(jié)構(gòu)。,圖10.10 未知物

24、質(zhì)譜圖,71,解：第一步 解析分子離子區(qū) （1）分子離子峰較強(qiáng)，說(shuō)明該樣品分子離子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，可能具有苯環(huán)或共軛系統(tǒng)。分子量為136。 （2）根據(jù)M+1/M=9%，可知該樣品約含8個(gè)C原子，查貝農(nóng)表（一般專(zhuān)著中都有此表），含C、H、O的只有下列四個(gè)式子： （a）C9H12O (= 4) （b）C8H8O2 （= 5） （c）C7H4O3 （= 6） （d）C5H12O4 （= 0）,72,第二步 解析碎片離子區(qū) （1）質(zhì)荷比105為基峰，提示該離子為苯甲?；–6H5CO），質(zhì)荷比39、51、77等峰為芳香環(huán)的特征峰，進(jìn)一步肯定了苯環(huán)的存在。 （2）分子離子峰與基峰的質(zhì)量差為31，提示脫去的可能

25、是CH2OH或CH3O，其裂解類(lèi)型可能是簡(jiǎn)單開(kāi)裂。 （3）質(zhì)荷比33.8的亞穩(wěn)離子峰表明有m/z77 m/z51的開(kāi)裂，56.5的亞穩(wěn)離子峰表明有 m/z105 m/z77的開(kāi)裂，開(kāi)裂過(guò)程可表示為： CO C2H2 C6H5CO+ C6H5+ C4H3+ m/z105 m/z77 m/z51,73,第三步 提出結(jié)構(gòu)式 （1）根據(jù)以上解析推測(cè)，樣品的結(jié)構(gòu)單元有 （2）上述結(jié)構(gòu)單元的確定，可排除分子式中的C9H12O (= 4 )、C7H4O3（H原子不足）、C5H12O4（= 0），所以唯一可能的分子式為C8H8O2。由此可算出剩余碎片為CH3O，可能剩余的結(jié)構(gòu)為CH2OH或CH3O。,74,（3）連接部分結(jié)構(gòu)單元和剩余結(jié)構(gòu)，可得下列兩種可能的結(jié)構(gòu)式： a b （4）由于該樣品的紅外光譜在3100-3600cm1處無(wú)吸收，提示結(jié)構(gòu)中無(wú)-OH，所以該未知化合物的結(jié)構(gòu)為（a）。,75,Next：,第一節(jié) 基本原理與質(zhì)譜儀 basic prin