1、課 程： 分子免疫學(xué) 題 目：狂犬病病毒簡(jiǎn)介及致病機(jī)理學(xué) 院： 生命科學(xué)學(xué)院 姓 名： 樸佳芳 學(xué) 號(hào)： 2016226012 2016年 11月25日狂犬病病毒簡(jiǎn)介及致病機(jī)理摘要 狂犬病又稱恐水癥，為狂犬病病毒引起的一種人畜共患的中樞神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染病。多見(jiàn)于狗、狼、貓等食肉動(dòng)物。人多因被病獸咬傷而感染。臨床表現(xiàn)為特有的狂躁、恐懼不安、怕風(fēng)恐水、流涎和咽肌痙攣，終至發(fā)生癱瘓而危及生命為一種古老的侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)、可引起嚴(yán)重腦脊髓炎的烈性人畜傳染病，一旦發(fā)病，病死率幾乎為100。我國(guó)是狂犬病高發(fā)國(guó)家，每年的狂犬病病例數(shù)僅次于印度，居世界第二位?？袢∮煽袢〔《緦俨《疽?，其中作為代表種的RV

2、是引起狂犬病的主要病因。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展和研究手段的進(jìn)步，人們對(duì)于Rv的結(jié)構(gòu)、基因功能等有了深入的認(rèn)識(shí)，為狂犬病疫苗的研制和改造積累了豐富的資料和理論依據(jù)。本文結(jié)合狂犬病和Rv最新的研究進(jìn)展，對(duì)糖蛋白、細(xì)胞凋亡、感染與免疫、復(fù)制和轉(zhuǎn)錄等致病機(jī)理及Rv及宿主細(xì)胞對(duì)病毒感染應(yīng)答方面等方面作一綜述。關(guān)鍵詞：狂犬病 狂犬病毒 致病性 感染Abstract Rabies, also known as fear of water, for the rabies virus caused by a zoonotic acute infection of the central nervous s

3、ystem. More common in dogs, wolves, cats and other carnivores. Many people infected by the disease beast bites. Clinical manifestations of the unique manic, fear of fear, fear of the wind fear of water, salivation and pharyngeal muscle cramps, and finally paralyzed and endanger life as an ancient vi

4、olation of the central nervous system, can cause severe encephalomyelitis of violent human and animal infectious diseases, Once the disease, the mortality rate is almost 100%.China is a high incidence of rabies countries, the number of rabies cases each year after India, ranking second in the world.

5、 Rabies is caused by a rabies virus, in which RV as a representative species is the main cause of rabies. In recent years, with the development of molecular biology and the progress of research methods, people have a deep understanding of the structure and gene function of Rv, and accumulated rich d

6、ata and theoretical basis for the development and transformation of rabies vaccine. In this paper, we reviewed the recent advances in rabies and Rv, and reviewed the pathogenesis of Rv and host cells, such as glycoprotein, apoptosis, infection and immunity, replication and transcription, and the res

7、ponse to virus infection.Keywords: Rabies Rabies virus Pathogenic Infection目 錄摘要1一、狂犬病病毒的介紹和分類3二、狂犬病毒的特征和傳染情況4（一） 傳染源5（二） 傳播途徑5（三） 傳播對(duì)象5三、狂犬病病毒致病機(jī)理6（一）糖蛋白6（二）細(xì)胞凋亡7（三）感染與免疫病毒的復(fù)制7（四）復(fù)制和轉(zhuǎn)錄8參考文獻(xiàn)8狂犬?。╮abies）又稱恐水癥（hydrophobia），為狂犬病病毒引起的一種人畜共患的中樞神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染病。多見(jiàn)于狗、狼、貓等食肉動(dòng)物。人多因被病獸咬傷而感染。臨床表現(xiàn)為特有的狂躁、恐懼不安、怕風(fēng)恐水、流涎和咽

8、肌痙攣，終至發(fā)生癱瘓而危及生命為一種古老的侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)、可引起嚴(yán)重腦脊髓炎的烈性人畜傳染病，一旦發(fā)病，病死率幾乎為100。幾乎所有溫血?jiǎng)游锞梢愿腥究袢〔《?Rabiesvinls，Rv)，其中包括人等多種哺乳動(dòng)物?？袢∮煽袢〔《緦俨《疽?，其中作為代表種的RV是引起狂犬病的主要病因1。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展和研究手段的進(jìn)步，人們對(duì)于Rv的結(jié)構(gòu)、基因功能等有了深入的認(rèn)識(shí)2，為狂犬病疫苗的研制和改造積累了豐富的資料和理論依據(jù)。一、狂犬病病毒的介紹和分類狂犬病病毒屬核糖核酸型彈狀病毒?？袢《揪哂袃煞N主要抗原。一種為病毒外膜上的糖蛋白抗原，能與乙酰膽堿受體結(jié)合使病毒具有神經(jīng)毒性，并

9、使體內(nèi)產(chǎn)生中和抗體及血凝抑制抗體2。中和抗體具有保護(hù)作用。另一種為內(nèi)層的核蛋白抗原，可使體內(nèi)產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體和沉淀素，無(wú)保護(hù)作用。從患者和病獸體內(nèi)所分離的病毒，稱自然病毒或街毒（stree virus），其特點(diǎn)是毒力強(qiáng)，但經(jīng)多次通過(guò)兔腦后成為因定毒（fixed virus），毒力降低，可制做疫苗。Rv屬于彈狀病毒科(Rhabdovridae)、狂犬病病毒屬(Lyssavirus)的代表種。Rv屬于負(fù)鏈RNA病毒，其基因組為不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA，約為12000 m。病毒粒子呈子彈狀，一端呈平坦或略凹狀，另一端呈半圓形。病毒粒子直徑約為75nm、長(zhǎng)為100 nm300 nm。（圖1）RV基因組

10、從3到5端依次編碼5種結(jié)構(gòu)蛋白基因，分別為核蛋白基因(Nucleoprotein，N)、磷蛋白基因(Phosphoprotein，P)、基質(zhì)蛋白基因(Matrix protein，M)、糖蛋白基因(G1ycoprotein，G)和依賴RNA的RNA聚合酶基因(Large protein，L)，分別被2、5、5和423個(gè)非編碼核苷酸序列隔開(kāi)。這5種結(jié)構(gòu)蛋白基因在基因組中的排列方式在整個(gè)彈狀病毒科家族的病毒中都是保守的。在RV基因組的兩端，存在一個(gè)50 nt100 nt的3先導(dǎo)RNA序列(Leader）和5尾部序列(Trailer)，其中含有基因轉(zhuǎn)錄和基因組復(fù)制的調(diào)控信號(hào)。Rv粒子的核心是由基因組

11、RNA、N、P和L蛋白組成的核糖核酸蛋白體(Ribonucleoprotein，RNP)復(fù)合物。RNP是負(fù)責(zé)病毒基因轉(zhuǎn)錄和基因組復(fù)制的功能單位，呈子彈狀，為右手螺旋結(jié)構(gòu)，每螺旋大約為7.5 nm，大小為165 nm60 nm，完全舒展時(shí)長(zhǎng)4.2 nm4.6 nm。病毒粒子的外被是一層緊密而完整的脂蛋白雙層囊膜，厚度約為7.5 nm10 nm，為病毒粒子出芽時(shí)從細(xì)胞質(zhì)膜處獲得。在病毒囊膜表而為G蛋白三聚體組成的長(zhǎng)為8.3 nm10 nm的突出結(jié)構(gòu)(spike)，參與病毒與宿主之間的相互作用以及決定Rv的免疫原性和致病力。病毒囊膜和RNP之間由M蛋白連接，M蛋白在調(diào)控病毒復(fù)制、病毒裝配和出芽過(guò)程中

12、發(fā)揮關(guān)鍵作用2。 圖1 狂犬病病毒結(jié)構(gòu)最初，根據(jù)血清學(xué)的方法，可以將狂犬病病毒屬分為 4個(gè)血清型和幾個(gè)尚待定的病毒株。血清型是經(jīng)典的Rv，為地理分布最廣、流行性最大的一類；血清型為L(zhǎng)agos蝙蝠病毒，最早分離自尼日利亞的蝙蝠腦；血清 型為Mokola病毒，最早分離自尼日利亞的地鼠；血清型為Duvellllage病毒，首次在南非病人中分離。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，DNA測(cè)序技術(shù)被越來(lái)越多地用于狂犬病病毒屬的分類。Bourhy等根據(jù)N蛋白基因N端500 nt核苷酸序列的保守性，可以將狂犬病病毒屬分為7種基因型(Genotype)：基囚型與血清型吻合3。基因型和1分別為歐洲蝙蝠狂犬病毒1(Eumpea

13、Ilbat lyssavims 1)和歐洲蝙蝠狂犬病毒2(European bat lyssavims 2)；而在澳大利亞果蝠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的澳大利亞蝙蝠狂犬病毒(Australia bat virus)被定為基因型。Badrane 等根據(jù)G蛋白膜外區(qū)氨基酸的同源性分析，進(jìn)一步將狂犬病病毒屬的7種基因型病毒株分為兩個(gè)遺傳譜系(Phylogroup)，分別為Phylogroup 和Phylogroup 。Phylogroup 包括基因型、和；Phylogroup 包括基因型、。序列分析表明，G蛋白膜外區(qū)氨基酸同源性在同一遺傳譜系的病毒株中大于74而在不同遺傳譜系間的病毒株中小于644。二、狂犬病毒的特

14、征和傳染情況狂犬病病毒為嗜神經(jīng)病毒，其傳播是通過(guò)快速突觸轉(zhuǎn)送發(fā)生的。(1)向心性擴(kuò)散：病毒從入侵部位，通過(guò)神經(jīng)肌接頭或神經(jīng)感受器侵入外周神經(jīng)，再沿脊髓到達(dá)中樞神經(jīng)，導(dǎo)致腦脊髓炎；(2)離心性擴(kuò)散：病毒從中樞神經(jīng)向周圍神經(jīng)系統(tǒng)，特別是高度受神經(jīng)所支配的器官擴(kuò)散，如唾液腺，病毒在唾液腺內(nèi)大量增殖并可經(jīng)唾液排出體外，最終導(dǎo)致全身神經(jīng)系統(tǒng)的衰竭和死亡1。 狂犬病毒易被紫外線、甲醛、5070%乙醇、升汞和季胺類化合物（新潔爾滅）等滅活。其懸液經(jīng)563060分鐘或1002分鐘即失去活力，對(duì)酚有高度抵抗力。在冰凍干燥下可保存數(shù)年5。狂犬病在世界很多國(guó)家均有發(fā)生。我國(guó)解放后由于采取各種預(yù)防措施，發(fā)病率明顯下降

15、6。近年因養(yǎng)狗逐漸增多，故發(fā)病率有上升的趨勢(shì)。（表1） 表1 2014年18月全國(guó)狂犬病死亡統(tǒng)計(jì)表（1） 傳染源 發(fā)展中國(guó)家的狂犬病主要傳染源是病犬，人狂犬病由病犬傳播者約占8090%，其次為貓和狼，發(fā)達(dá)國(guó)家由于狗狂犬病被控制，野生動(dòng)物如狐猩、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等逐漸成為重要傳染源7?；疾?dòng)物唾液中含有多量的病毒，于發(fā)病前數(shù)日即具有傳染性。隱性感染的犬、貓等獸類亦有傳染性8。（2） 傳播途徑 主要通過(guò)被患病動(dòng)物咬傷、抓傷，病毒自皮膚損傷處進(jìn)入人體。粘膜也是病毒的重要侵入門(mén)戶，如眼結(jié)合膜被病獸唾液沾污，肛門(mén)粘膜被狗觸舔等，均可引起發(fā)病。此外，亦有經(jīng)呼吸道及消化道感染的報(bào)道。（3） 傳播對(duì)象 人

16、對(duì)狂犬病普遍易感，獸醫(yī)、動(dòng)物飼養(yǎng)者與獵手尤易遭感染。一般男性多于女性。冬季發(fā)病率低于其他季節(jié)?？袢〔《緦?duì)神經(jīng)組織有很強(qiáng)的親和力。發(fā)病原理分為三個(gè)階段：局部組織內(nèi)小量繁殖期。病毒自咬傷部位入侵后，在傷口附近橫紋細(xì)胞內(nèi)緩慢繁殖，約46日內(nèi)侵入周圍神經(jīng)，此時(shí)病人無(wú)任何自覺(jué)癥狀。從周圍神經(jīng)侵入中樞神經(jīng)期。病毒沿周圍傳入神經(jīng)迅速上行到達(dá)背根神經(jīng)節(jié)后，大量繁殖，然后侵入脊髓和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，主要侵犯腦干及小腦等處的神經(jīng)元。但亦可在擴(kuò)散過(guò)程中終止于某部位，形成特殊的臨床表現(xiàn)。向各器官擴(kuò)散期。病毒自中樞神經(jīng)系統(tǒng)再沿傳出神經(jīng)侵入各組織與器官，如眼、舌、唾液腺、皮膚、心臟、腎上腺髓質(zhì)等。由于迷走神經(jīng)核、舌咽神經(jīng)核

17、和舌下神經(jīng)核受損，可以發(fā)生呼吸肌、吞咽肌痙攣。臨床上出現(xiàn)恐水、呼吸困難、吞咽困難等癥狀。交感神經(jīng)受刺激，使唾液分泌和出汗增多。迷走神經(jīng)節(jié)、交感神經(jīng)節(jié)和心臟神經(jīng)節(jié)受損時(shí)，可發(fā)生心血管系統(tǒng)功能紊亂或猝死9。病理變化主要為急性彌漫性腦脊髓炎，腦膜多正常。腦實(shí)質(zhì)和脊髓充血、水腫及微小出血。脊髓病變以下段較明顯，是因病毒沿受傷部位轉(zhuǎn)入神經(jīng)，經(jīng)背根節(jié)、脊髓入腦，故咬傷部位相應(yīng)的背根節(jié)、脊髓段病變常很嚴(yán)重。延髓、海馬、腦橋、小腦等處受損也較顯著。多數(shù)病例在腫脹或變性的神經(jīng)細(xì)胞漿中，可見(jiàn)到1至數(shù)個(gè)圓形或卵圓形、直徑約310m的嗜酸性包涵體，即內(nèi)基小體（Negribody）9。常見(jiàn)于海馬及小腦浦頃野組織的神經(jīng)細(xì)

18、胞中，偶亦見(jiàn)于大腦皮層的錐體細(xì)胞層、脊髓神經(jīng)細(xì)胞、后角神經(jīng)節(jié)、交感神經(jīng)節(jié)等。內(nèi)基小體為病毒集落，是本病特異且具有診斷價(jià)值的病變，但約20%的患者為陰性。此外，唾液腺腺泡細(xì)胞、胃粘膜壁細(xì)胞、胰腺腺泡和上皮、腎上管上皮、腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞等可呈急性變性。三、狂犬病病毒致病機(jī)理（一）糖蛋白糖蛋白(Glycoprotein，G蛋白)與RV的感染與免疫有密切關(guān)系，是唯一能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生病毒中和抗體的蛋白，其免疫作用與全病毒疫苗相當(dāng)。其膜外區(qū)決定RVG蛋白的抗原性、組織親嗜性及毒力，是有效的保護(hù)性抗原，能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體和刺激細(xì)胞免疫，并且G蛋白是RV具有神經(jīng)致病性的決定簇，因?yàn)镚蛋白的一些結(jié)構(gòu)可使病毒有效

19、地結(jié)合細(xì)胞受體10。神經(jīng)細(xì)胞對(duì)RV的特異受體如p75神經(jīng)調(diào)理受體(p75 Neurotrophinreceptor，p75NTR)、神經(jīng)細(xì)胞支持分子(Neuronal ceIl adhesion moIecular，NCAM)或煙堿酸型乙 酰膽堿受體(Nicotinicac etylcholine recteptor，NAChR)，可以結(jié)合Rv和/或使RV更容易進(jìn)入細(xì)胞。病毒與受體結(jié)合后，病毒釋放RNP進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。RV在細(xì)胞內(nèi)吞作用后，RV 與細(xì)胞膜的融合作用是一種pH依賴形式。在G蛋白最主要的抗原區(qū)G的333位氨基酸存在一突變體，可減慢病毒在細(xì)胞中的傳播速度。該突變體幾乎存在于所有RV中，但

20、并不會(huì)使病毒成為減毒株。EtesSami等(2000年)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)G基因不能消除RV的傳播，并證實(shí)了G蛋白在Rv感染和發(fā)病過(guò)程中起著重要作用10。Faber M等通過(guò)克隆Rv銀頭蝙蝠分離株18的全長(zhǎng)cDNA，并將高致病性Rv毒株的蛋白基因編碼和基因序列與弱毒株的進(jìn)行交換，結(jié)果發(fā)現(xiàn)RV不能識(shí)別wT SHBRV-18。除了G蛋白在Rv從外周神經(jīng)侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system，CNS)過(guò)程中起主要作用外，尾序列、L基因及假基因，在Rv的致病機(jī)理中都有著重要作用。其中，P蛋白決定著Rv在軸突中的逆行傳導(dǎo)。Rv侵襲引起致命性神經(jīng)疾病的致病機(jī)理仍不是十分清楚，但是導(dǎo)致

21、RV感染致死的關(guān)鍵步驟是因強(qiáng)烈抑制維持神經(jīng)功能所需蛋白的合成，從而導(dǎo)致神經(jīng)紊亂2。（二）細(xì)胞凋亡雖然Rv具有神經(jīng)致病性的必備條件是神經(jīng)的特異受體可以結(jié)合Rv的G蛋白，但不能據(jù)此而否認(rèn)其它因素的作用。細(xì)胞膜的其它成分，如神經(jīng)節(jié)苷脂，可能也參與RV進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程11。但尚不清楚這些分子在體內(nèi)的情況。一個(gè)增強(qiáng)RV致病性的特殊因素是避免細(xì)胞凋亡。在病毒感染過(guò)程中，因細(xì)胞凋亡而引起的感染細(xì)胞破壞可以認(rèn)為是細(xì)胞限制病毒繁殖的一種本能反應(yīng)。細(xì)胞凋亡或由感染細(xì)胞自身作用，或由T細(xì)胞的細(xì)胞毒素作用而發(fā)生，通過(guò)觸發(fā)病毒感染細(xì)胞分泌細(xì)胞活素如TNFa而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。然而，病毒以發(fā)展抗細(xì)胞凋亡的方式或者以逃避T淋巴細(xì)

22、胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)和NK細(xì)胞的侵襲的途徑，使得Rv在體內(nèi)的分布更加容易。細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)潛力與RV病毒毒力減弱有相關(guān)性，呈負(fù)相關(guān)。主要感染細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)機(jī)制(包括病毒通過(guò)神經(jīng)軸突的遠(yuǎn)距離傳導(dǎo))的破壞，可以防止cNS的感染。實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡進(jìn)行體內(nèi)和體外觀察，不能解釋自然毒株對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)聯(lián)性。Rv中至少有兩種蛋白(G蛋白和M蛋白)可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。僅僅只需再插人一個(gè)RV G蛋白基因拷貝，就足以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。雖然神經(jīng)致病性RV中和細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)的準(zhǔn)確機(jī)制尚不清楚，但知道神經(jīng)致病性RV毒株是通過(guò)干擾促細(xì)胞凋亡因子和保持病毒基因表達(dá)水平高于起始水平來(lái)避

23、免細(xì)胞凋亡，從而確保了神經(jīng)的完整性，這在病毒傳播中是極其關(guān)鍵的。在RV侵襲成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞早期，激活刪L一依賴路徑，包括半胱天冬酶一8及nwL受體與TRAIL間的相互作用12。病毒脫殼和復(fù)制是起動(dòng)細(xì)胞凋亡的必要步驟，感染的質(zhì)粒中M蛋白表達(dá)能誘導(dǎo)相似事件發(fā)生，這表明在TRAIL一調(diào)停細(xì)胞凋亡早期誘導(dǎo)中M蛋白起重要的作用。然而到目前為止，還沒(méi)有實(shí)驗(yàn)證明PDLC 1相互作用對(duì)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)能產(chǎn)生影響。（三）感染與免疫病毒的復(fù)制 與其他病毒一樣，RV侵入宿主細(xì)胞也會(huì)引起宿主細(xì)胞產(chǎn)生一系列的免疫應(yīng)答反應(yīng)，在進(jìn)化的過(guò)程中，病毒也相應(yīng)進(jìn)化出一些躲避或者抑制宿主細(xì)胞免疫應(yīng)答的機(jī)制，從而可以建立有效感染13。宿主

24、細(xì)胞免疫應(yīng)答包括先天性免疫反應(yīng)和特異性免疫反應(yīng)兩個(gè)方面。先天性免疫反應(yīng)是抵御病毒侵染的第一道防線，主要通過(guò)激活一些模式識(shí)別受體如Tut等，產(chǎn)生類型干擾素(Intemron，IFN)，包括IFN和IFN等例。Rv在細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外均可以誘導(dǎo)先天性免疫反應(yīng)，包括通過(guò)視黃酸誘導(dǎo)基因(Retinoic acid inducible gene )介導(dǎo)的類型 IFN的激活。研究發(fā)現(xiàn)，IFN的表達(dá)可以極大降低RV的致病性和病毒復(fù)制，表明IFN參與宿主防御病毒感染。RV磷蛋白P可以阻斷TANK結(jié)合蛋白激酶1磷酸化IFN調(diào)節(jié)因子3(IFN regulatory factor 3，IRF3)，從而抑制類型IFN應(yīng)答

25、例。此外，P蛋白也可以抑制類型和類型 IFN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，通過(guò)與IFN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中重要下游底物sTATl轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合，使其滯留在細(xì)胞質(zhì)中，從而使sTATl不能入核激活基因表達(dá)，阻斷IFN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，但P蛋白不影響sTATl的磷酸化，也不會(huì)造成其降解。此外，有研究表明，只有發(fā)生酪氨酸磷酸化的sTATl和sTAT2才能被P蛋白結(jié)合，暗示只有當(dāng)吲信號(hào)通路被激活后，P蛋白才與sTATl和sTAT2結(jié)合。進(jìn)一步的研究表明，在RV感染的細(xì)胞內(nèi)，會(huì)產(chǎn)生5種類型的P蛋白，不僅有全長(zhǎng)的P蛋白P1，還可以通過(guò)內(nèi)部起始翻譯的方式產(chǎn)生另外4種截短型的P蛋白，分別為P2P526。研究發(fā)現(xiàn)，不同P蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位

26、是通過(guò)入核信號(hào)序列和核輸出信號(hào)序列調(diào)節(jié)的，序列分析表明，所有的P蛋白均含有一個(gè)入核信號(hào)，位于蛋白的羧基末端，但P3P5缺少位于氨基末端的核輸出信號(hào)，該信號(hào)僅存在丁P1和P2蛋白中，從而造成P1和P2主要分布在細(xì)胞質(zhì)中，而P3P5主要定位在細(xì)胞核內(nèi)。因此，P蛋白不但可以通過(guò)阻斷sTATl入核，而且可以在細(xì)胞核內(nèi)阻斷IFN激活的生長(zhǎng)因子3(IsGF3)與IFN激活應(yīng)答元件結(jié)合。此外，核內(nèi)的P蛋白也可以直接與sTATl同源二聚體結(jié)合，阻斷其余活化序列(一activated sequence，GAs)的結(jié)合鯽。同時(shí)，有研究表明P3也可以促進(jìn)sTATl與微管相互作用，從而抑制sTATl的入核。最后，有研

27、究指出，P蛋白也會(huì)引起IFN誘導(dǎo)的人早幼白血病(Promyelocytic leukaemia，PML)蛋白滯留在細(xì)胞質(zhì)中。PML是PML核體組分，可能在細(xì)胞核蛋白分選、病毒防御和凋亡過(guò)程中發(fā)揮重要作用2。盡管目前還不清楚PML在RV感染中的作用，但考慮到P蛋白可以結(jié)合并保持PML在細(xì)胞質(zhì)，推測(cè)PML可能具有抗病毒的功能。（四）復(fù)制和轉(zhuǎn)錄Rv基因組中存在兩個(gè)抑制病毒復(fù)制的核苷酸序列，分別位于N基因和P基因。采用細(xì)胞培養(yǎng)的方法，應(yīng)用ELISA和熒光免疫檢驗(yàn)法分別檢測(cè)細(xì)胞表面RV G蛋白的表達(dá)及細(xì)胞內(nèi)RV N蛋白的表達(dá)，來(lái)檢測(cè)RV復(fù)制的抑制現(xiàn)象。對(duì)RV復(fù)制的抑制情況進(jìn)行研究有助于研制抗病毒化合物從

28、而對(duì)狂犬病進(jìn)行有效的治療。該方法還可以用于任何病毒，尤其是溶解宿主細(xì)胞的病毒。 能否更清楚地了解RV感染cNs及隨后傳播給其它組織取決于病毒遠(yuǎn)距離傳播機(jī)制的完整性。病毒在體內(nèi)向cNs傳播的速度是50100 mm/d。病毒傳播可能是下調(diào)Rv基因轉(zhuǎn)錄的一種方式；Rv M蛋白是下調(diào)轉(zhuǎn)錄的另一方式。當(dāng)缺少M(fèi)蛋白或低水平M蛋白時(shí)，Rv RNA則反常合成，表明M蛋白在RNA合成中起調(diào)整作用。也就是說(shuō)，M蛋白下調(diào)轉(zhuǎn)錄酶的活性，同時(shí)支持RNP的復(fù)制。此外，M蛋白中的氨基酸在RNA合成調(diào)節(jié)中起著至關(guān)重要的作用；在整個(gè)病毒基因轉(zhuǎn)錄高度增加時(shí)，可以產(chǎn)生高轉(zhuǎn)錄(HIT)突變Rv。隨著HIT突變體病毒基因表達(dá)的增加，在

29、感染的細(xì)胞培養(yǎng)中可以看到細(xì)胞病變，然而WT病毒感染不能破壞宿主細(xì)胞。Rv的堿性RNA合成受M蛋白調(diào)節(jié)可能是一個(gè)重要的病毒致病性因素13。參考文獻(xiàn)1.唐丹丹; 朱駿; 曹向英; 孫文梅, 狂犬病研究進(jìn)展. 畜牧獸醫(yī)科技信息 2014, (11), 4-6.2.鞠美芳; 殷相平; 焦文強(qiáng); 柳紀(jì)省, 狂犬病病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展. 中國(guó)畜牧獸醫(yī) 2012, 39 (2), 159-163.3.Hampson, K.; Coudeville, L.; Lembo, T.; Sambo, M.; Kieffer, A.; Attlan, M.; Barrat, J.; Blanton, J. D.;

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32、by, E.; Knopf, L.; Leanes, F.; Meslin, F. X.; Metlin, A.; Miranda, M. E.; Muller, T.; Nel, L. H.; Recuenco, S.; Rupprecht, C. E.; Schumacher, C.; Taylor, L.; Antonio, M.; Vigilato, N.; Zinsstag, J.; Dushoff, J.; Global Alliance for Rabies Control Partners for Rabies, P., Correction: Estimating the global burden of endemic canine rabies. PLoS neglected tropical diseases 2015, 9 (5), e0003786.5.Yousaf, M. Z.; Qasim, M.; Zia, S.; Khan, M.; Ashfaq, U. A.; Khan, S., Rabies molecular virology, diagnosis, prevention and treatment. Virology jo