1、第 4 章 微生物的生長,微生物生長的概念 微生物生長量的測定 微生物的群體生長規(guī)律 環(huán)境因素對微生物生長的影響,內(nèi)容提要,1.微生物的生長 一個微生物細胞在合適的外界環(huán)境條件下，不斷地吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并按其自身的代謝方式進行新陳代謝。如果同化作用的速度超過了異化作用，則其原生質(zhì)的總量（重量、體積、大小）就不斷增加，于是出現(xiàn)了個體的生長現(xiàn)象。如果這是一種平衡生長，即各細胞組分是按恰當?shù)谋壤鲩L時，則達到一定程度后就會發(fā)生繁殖，從而引起個體數(shù)目的增加，這時，原有的個體已經(jīng)發(fā)展成一個群體。隨著群體中各個個體的進一步生長，就引起了這一群體的生長，這可從其重量、體積、密度或濃度作指標來衡量。 微生物的生

2、長表現(xiàn)在微生物的個體生長與群體生長兩個水平上。,4.1 微生物生長的概念,2.微生物個體生長 表現(xiàn)為個體質(zhì)量和體積的增加。 3.微生物群體生長 以微生物細胞的數(shù)量或微生物群體細胞物質(zhì)量的增加作為生長的指標。 個體生長個體繁殖群體生長 群體生長個體生長個體繁殖,4.1 微生物生長的概念,因而要了解微生物的生長規(guī)律，就要了解微生物的個體生長和群體生長兩個方面。,4.1 微生物生長的概念,4.2 微生物生長量的測定,微生物特別是單細胞微生物，體積很小，個體生長很難測定，意義也不大。通常測定微生物的生長是測群體的生長，而測定繁殖則都要建立在計數(shù)這一基礎上。,4.2 微生物生長量的測定方法 可根據(jù)菌體細

3、胞量、菌體體積、重量直接測定，也可以根據(jù)某種細胞物質(zhì)的含量或某個代謝活動速度間接測定。,微生物生長測量方法,個體計數(shù)法,重 量 法,生理指標法,一、測微生物總數(shù) 1、計數(shù)器直接計數(shù),缺點： 不能區(qū)分死菌與活菌； 不適于對運動細菌的計數(shù)； 需要相對高的細菌濃度； 個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察；,利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。,2、電子計數(shù)器計數(shù)（略） 3、染色涂片計數(shù) 將已知體積的待測材料均勻涂布在載玻片的已知面積內(nèi)，染色后顯微鏡下計數(shù)。一般1cm2 均勻涂片0.01ml樣品。選擇幾個至十幾個視野計數(shù)細胞數(shù)量。借助鏡臺測微尺測直徑可計算出視野的直徑： 每ml總數(shù)=

4、視野平均菌數(shù)1 cm2/視野面積100稀釋倍數(shù),涂片染色法,1視野菌液(ml)(0.01ml 1cm2)*視野面積(cm2),提問：數(shù)了125個小格中有90個細菌，樣品中的細菌濃度是多少？ (90個125) * 400 / 0.1ml =2880個/ml 適用范圍：測定個體較大的細菌或原生動物 細菌個體若太小、過多，由于每一小格中細菌層層疊加，相互遮擋，難以準確計數(shù)。,數(shù)數(shù)細菌（或其他微生物或細胞）數(shù)目，（一般數(shù)125個小格），折算樣品細菌濃度；,5、比例計數(shù)法 將菌液與等體積血液混合后涂片，計算細菌數(shù)與紅細胞比例。根據(jù)比例來計數(shù),4、比濁法 測定菌數(shù)的快速方法。菌液中細胞濃度與渾濁度成正比，

5、因此測定懸液的光密度就可以反映細胞濃度。將未知細胞數(shù)的懸液與已知細胞數(shù)懸液相比來計數(shù)。,比濁計數(shù)法,濁細菌懸浮液的濁度,細菌不完全透光，一定范圍內(nèi)菌溶液的混濁度與菌數(shù)量成正比,以生物量為指標測定微生物的生長,比濁法,在一定波長下，測定菌懸液的光密 度，以光密度(optical density, 即O.D.) 表示菌量。,實驗測量時應控制在菌濃度與光密度 成正比的線性范圍內(nèi)，否則不準確。,5.比濁法,（二） 測定活菌數(shù),1、液體稀釋培養(yǎng)基計數(shù)： 將待測樣品作連續(xù)10倍稀釋，一直稀釋到稀釋液的少量接種到新鮮培養(yǎng)基中沒有或極少生長。記錄每個稀釋度出現(xiàn)生長的試管數(shù)，再用最大或然率理論，查MPN（mos

6、t probable number，最大可能數(shù)量）表，根據(jù)樣品的稀釋倍數(shù)就可計算出其中的活菌含量。,無菌水,稀釋平板計數(shù)法固體培養(yǎng)法,第一步：菌樣巧妙稀釋,得到不同稀釋度 （10-x）菌液,菌樣被無菌水不同稀釋倍率后平板培養(yǎng)圖,各取1ml，均勻涂布于冷固體培養(yǎng)基平板上或與溫熱液態(tài)固體培養(yǎng)基混合冷卻。,第三步：培養(yǎng),稀釋度過低，菌落密集無法計數(shù),可以計數(shù)，但數(shù)量過多，費時費力,數(shù)量合適，統(tǒng)計計算，作為結果,數(shù)量太少，誤差因素太大，不做計數(shù),第二步：接種平板,每一個細菌會生成一個菌落,一般計數(shù)平板的細菌生長菌落數(shù)以30300個為宜。,第四步： 計數(shù),細菌數(shù)量=？ 細菌數(shù)量=數(shù)出的菌落數(shù)/稀釋度 例

7、如：10-5稀釋度時菌落數(shù)為125個 細菌數(shù)量=125/10-5=1.25107個/mL 平板計數(shù)法是采用最廣的一種活菌計數(shù)法 如國標法水中細菌總數(shù)的測定 。 注意：作空白及取平行樣（23組）均值減小誤差,平均,稀釋液體計數(shù)法,特點：液體培養(yǎng)、統(tǒng)計學查表計數(shù) 又稱MPN法 （或最可能數(shù)法） Most Probable Number 例如測定SRB（硫酸鹽還原菌，厭氧）的數(shù)量 提問：能用稀釋平板法計數(shù)嗎？為什么？ 一般不能，厭氧菌暴露在空氣中不能生長（除非厭氧培養(yǎng)箱）,對這類菌可以利用它們生長時產(chǎn)生的硫化亞鐵黑色特征進行深層隔氧液體培養(yǎng)，按MPN法進行計數(shù)。,（1）稀釋,（2）稀釋接種樣品,在液

8、體表面加一層無菌液體石蠟隔絕氧氣，,恒溫37培養(yǎng)14天,記錄變黑的試管情況,（3）培養(yǎng),1ml,+ 9ml,培養(yǎng)基,提問：為什么有些試管變黑有些沒有？,稀釋程度、取樣概率,The most probable number method（液體稀釋法）,主要適用于只能進行液體培養(yǎng)的微生 物，或采用液體鑒別培養(yǎng)基進行直接 鑒定并計數(shù)的微生物。,對未知樣品進行十倍稀釋，然后根據(jù)估算取三個連續(xù)的稀釋度 平行接種多支試管，對這些平行試管的微生物生長情況進行統(tǒng) 計，長菌的為陽性，未長菌的為陰性，然后根據(jù)數(shù)學統(tǒng)計計算 出樣品中的微生物數(shù)目。,比例計數(shù)法,比例樣品菌液與等體積的血液混合，觀測二者比例,提問：如果

9、平均每個視野中細菌數(shù)量/紅血球的數(shù)量比例為5.5：1，則細菌數(shù)量=？ 5.5400萬個/m l =2.2107個/mL樣品,紅血球數(shù)已知(男性400500萬個ml，女性350450萬個ml)，平均400萬個/ml,2、薄膜計數(shù)法：如果測定量大而含菌濃度很低的樣品（如空氣、水）中的活菌數(shù)，可將樣品用微孔薄膜（硝化纖維素薄膜）過濾，再與膜一起放到培養(yǎng)基或浸透培養(yǎng)液支持物表面培養(yǎng)。,膜過濾培養(yǎng)法,當樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣 品通過膜過濾器，然后將將膜轉(zhuǎn)到相應的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，對形 成的菌落進行統(tǒng)計。,以數(shù)量變化對微生物生長情況進行測定,3、菌落計數(shù)（平板菌落）計數(shù)法

10、,統(tǒng)計查表計算,根據(jù)不同稀釋度變黑試管 統(tǒng)計出數(shù)量指標 三位數(shù)及其中最低稀釋度 （取變黑的管數(shù)最多、稀釋度又最低的生長管數(shù)，為第一位數(shù)字，后面兩個稀釋度的生長管數(shù)后兩位數(shù)）,查表 表MPN表,（三） 計算生長量：測細菌重量,（1） 測細胞干重：一般干重為濕重的20-25%。收集單位體積培養(yǎng)液中菌體，干燥器內(nèi)加熱或減壓干燥，直接用儀器測定。,（2） 測細胞含N量確定細胞濃度： 凱氏定氮法測N，總蛋白含量=含N量%6.25,（3） 通過DNA測定計算濃度： 熒光法，每個菌平均含DNA 8.410-5ng,（4） 生理指標： 測定微生物對氧的吸收、發(fā)酵糖產(chǎn)酸量或二氧化碳產(chǎn)量。,二、研究微生物生長的方

11、法 微生物生長分個體生長和群體生長。培養(yǎng)方法有分批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)。,4.3.1 分批培養(yǎng) 分批培養(yǎng)是在一個封閉的、有一定體積的液體培養(yǎng)基的容器中接種少量細菌在特定條件下進行培養(yǎng)。在分批培養(yǎng)中微生物只完成一次生長循環(huán)。 細菌的生長曲線：將少量細菌接種到一定體積的新鮮液體培養(yǎng)基中進行分批培養(yǎng)，定時取樣，以細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標，培養(yǎng)時間為橫坐標，可繪制出細菌的生長曲線。,停滯期,生長曲線可分：,對數(shù)期,靜止期,衰亡期,1、停滯期（遲滯期或適應期）（lag phase）: 將細菌接種到某一培養(yǎng)基后，細菌并不立即繁殖而是經(jīng)過一段適應期才能生長繁殖。調(diào)整適應表現(xiàn)在合成多種酶、完善體內(nèi)的酶系統(tǒng)及其他細胞成

12、分。,特點： （1）細胞質(zhì)均勻 （2）代謝活力強 （3）蛋白質(zhì)和RNA含量增加 （4）體積顯著增加，許多桿菌可長成長絲狀 （5）形成誘導酶的能力強 （6）對環(huán)境變化敏感,影響因素： （1）接種量。接種量大，停滯期可縮短 （2）菌齡。菌種年輕，對數(shù)生長期接種，停滯期可能很短甚至不明顯,（3）營養(yǎng)。如果種子培養(yǎng)基與新接種的培養(yǎng)基成分相同，則對菌生長有利。從豐富培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入貧營養(yǎng)基，停滯時間拉長，反之減少； （4）菌種特性。大腸桿菌停滯期長，分枝桿菌長,2、對數(shù)期（指數(shù)期）log phase 細菌生長速度達到最大，數(shù)量以幾何級數(shù)增加。,特點： （1）細菌迅速分裂，菌數(shù)按幾何級數(shù)增加； （2）世代時間最

13、短，而且恒定； （3）生長速度最高而且恒定； （4）代謝活力強無死亡； （5）菌體整齊，體積恢復到原來大??； （6）對環(huán)境敏感，生理性狀及菌體成分較一致,世代時間的計算：,x2=x12n,以對數(shù)表示：lgx2=lgx1+nlg2,生長速率常數(shù),平均世代時間,世代：由1個細胞分裂成為2個細胞的間隔被稱為世代。 代時：就是一個世代所需的時間，因而也就是群體細胞數(shù)目擴大1倍所需的時間，有時也被稱為倍增時間。,影響因素： （1）溫度。在適溫范圍內(nèi)，每增加10，生長速度提高1倍；,（2）營養(yǎng)；營養(yǎng)越豐富，代時越短 （3）氧氣。好氧菌若能供給充足的氧，可能使對數(shù)期延長。,對數(shù)期的實踐意義 是代謝、生理研究

14、的良好材料 是增殖噬菌體的最適宿主菌齡 是發(fā)酵生產(chǎn)中用作“種子”的最佳種齡 G+染色鑒定時采用此期微生物,3、穩(wěn)定期（stationary phase） 由于營養(yǎng)消耗，供應不足及代謝產(chǎn)物的積累，這時一部分菌死亡，細菌進入穩(wěn)定期。,穩(wěn)定期到來的原因主要是： 營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡； 營養(yǎng)物的比例失調(diào)，例如CN比值不合適等； 酸、醇、毒素或H2O2等有害代謝產(chǎn)物的累積； pH、氧化還原勢等物化條件越來越不適宜。,特點： （1）菌數(shù)達到最高峰； （2）活菌數(shù)達到動態(tài)平衡； （3）生長速率為零； （4）開始積累貯存物質(zhì),影響因素： （1）前期主要是營養(yǎng)，補充營養(yǎng)可延長靜止期； （2）后期主要是

15、代謝產(chǎn)物的積累； （3）離子、pH等物化條件失去平衡,4、衰亡期 decline phase 由于營養(yǎng)缺乏和代謝產(chǎn)物積累造成自身中毒，細胞生長受阻，時間和菌數(shù)對數(shù)呈反比，生長曲線直線下降。 特點： （1）生長速率為負值，活菌數(shù)減少； （2）細菌發(fā)生自溶現(xiàn)象autolysis （3）代謝產(chǎn)物大量積累； （4）形態(tài)多變，出現(xiàn)畸形或衰退形。,4.3.2 連續(xù)培養(yǎng) 原理：如果在培養(yǎng)器中不斷補充新鮮營養(yǎng)物質(zhì)并及時不斷地以同樣速度排出培養(yǎng)物，理論上講，對數(shù)生長期可以無限延長。,1、恒濁連續(xù)培養(yǎng) 不斷調(diào)節(jié)流速而使細菌培養(yǎng)液濁度保持恒定的培養(yǎng)方法。根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度，并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速

16、，以取得菌體密度高、生長速度恒定的微生物細胞 。,恒濁連續(xù)培養(yǎng)可以不斷提供具有一定生理狀態(tài)的細胞，可以得到以最高生長速率進行生長的培養(yǎng)物，在微生物工業(yè)上運用此法可得到大量菌體及相應的代謝產(chǎn)物如乳酸、乙醇。,2、恒化連續(xù)培養(yǎng) 維持進水中的營養(yǎng)成分恒定，從而保持細菌的恒定生長速率稱恒化連續(xù)培養(yǎng)，也稱恒組成連續(xù)培養(yǎng)。 恒化連續(xù)培養(yǎng)基中，某種必須的營養(yǎng)物質(zhì)必須在低濃度作為限制性因子，其他成分過量。這樣，細菌的生長速率取決于限制性因子的濃度。 常用的限制性營養(yǎng)物質(zhì)有作為N源的氨、氨基酸；作為C源的葡萄糖、麥芽糖、乳酸；生長因子、無機鹽等。,稀釋度（率）：新鮮培養(yǎng)基流入的速度為f，培養(yǎng)器中培養(yǎng)液體積為V，

17、稀釋度為D=f/V，表示單位時間內(nèi)，新加入的培養(yǎng)基體積與培養(yǎng)器內(nèi)培養(yǎng)基總體積之比。 隨著D增大，細菌濃度先升后降，但在相當大范圍內(nèi)這種變化不明顯。當稀釋度增大到最大比生長速率時，微生物的增長速率趕不上流出速率，結果必然是到某一時刻，微生物濃度降到維持生長所必需的最低濃度（臨界濃度）之下，這時培養(yǎng)器內(nèi)微生物濃度趨于零。這時的D為臨界稀釋度。,同步生長：一個細胞群體中各個細胞都在同一時間進行分裂的狀態(tài)，稱為同步生長（synchronous growth） ，進行同步分裂的細胞稱為同步細胞。 同步細胞群體在任何一時刻都處在細胞周期的同一相，彼此間形態(tài)、生化特征都很一致，因而是細胞學、生理學和生物化學

18、等研究的良好材料。,4.3.3同步生長（synchronous growth）,同步培養(yǎng)技術（synchronous culture）：設法使群體中的所有細胞盡量都處于同樣的細胞生長和分裂周期中。 同步培養(yǎng)法：能獲得處于同一生長階段的群體細胞的培養(yǎng)方法,獲得同步生長的方法：,獲得同步生長的方法主要有兩類： 環(huán)境條件誘導法：變換溫度、光線、培養(yǎng)基等。造成與正常細胞周期不同的周期變化。 機械法：選擇性過濾、梯度離心。物理方法，隨機選擇，不影響細胞代謝。,4.4.1溫度對微生物生長的影響 溫度是影響微生物生長的最重要因素之一。 溫度對微生物的影響具體表現(xiàn)在： 影響酶活性，溫度變化影響酶促反應速率，最

19、終影響細胞合成。 影響細胞膜的流動性，溫度高，流動性大，有利于物質(zhì)的運輸，溫度低，流動性降低，不利于物質(zhì)運輸，因此，溫度變化影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與代謝產(chǎn)物的分泌。 影響蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)。,4.4 環(huán)境因素對微生物生長的影響,從微生物整體來看:生長的溫度范圍一般在-10 100 極端下限為-30 ，極端上限為105300 但對于特定的某一種微生物： 只能在一定溫度范圍內(nèi)生長，在這個范圍內(nèi)，每種微生物都有自己的生長溫度三基點，即最低、最適、最高生長溫度,處于最適生長溫度時，生長速度最快，代時最短。 超過最低生長溫度時，微生物不生長，溫度過低，甚至會死亡。 超過最高生長溫度時，微生物不生長，溫

20、度過高，甚至會死亡。,（1）微生物生長的三個溫度基點,微生物類型,生長溫度,最低 最適 最高,嗜冷微生物 兼性嗜冷微生物 嗜溫微生物 嗜熱微生物 超嗜熱或嗜高溫微生物,45 45 5565 80 65 8090 100,根據(jù)微生物的最適生長溫度的不同，可將微生物劃為五個類型,高溫對微生物的影響 高溫下蛋白質(zhì)不可逆變性，膜受熱出現(xiàn)小孔，破壞細胞結構（溶菌）。 低溫對微生物的影響 當環(huán)境溫度低于微生物的最適生長溫度時，微生物的生長繁殖停止，當微生物的原生質(zhì)結構并未破壞時，不會很快造成死亡并能在較長時間內(nèi)保持活力，當溫度提高時，可以恢復正常的生命活動。 低溫保藏菌種就是利用這個原理。一些細菌、酵母菌

21、和霉菌的瓊脂斜面菌種通?？梢蚤L時間地保藏在4的冰箱中。 當溫度過低，造成微生物細胞凍結時，有的微生物會死亡，有些則并不死亡。,（2）高溫與低溫對微生物的影響,造成死亡的原因： 凍結時細胞水分變成冰晶，冰晶對細胞膜產(chǎn)生機械損傷，膜內(nèi)物質(zhì)外漏。 凍結過程造成細胞脫水。,2.氧氣對微生物生長的影響 微生物對氧的需要和耐受力在不同的類群中變化很大，根據(jù)微生物與氧的關系,可把它們分為幾種類群: 好氧菌:專性好氧菌;微好氧菌 兼性厭氧菌:耐氧厭氧菌： 厭氧菌:(專性)厭氧菌,專性好氧菌（strict aerobe）,必須在有分子氧的條件下才能生長，有完整的呼吸鏈，以分子氧作為最終氫受體，細胞含有超氧物歧化

22、酶（SOD，superoxide dismutase）和過氧化氫酶。,在有氧或無氧條件下均能生長，但有氧情況下生長得更好，在有氧時靠呼吸產(chǎn)能，無氧時接發(fā)酵或無氧呼吸產(chǎn)能；細胞含有SOD和過氧化氫酶。,微好氧菌（microaerophilic bacteria）,只能較低的氧分壓下才能正常生長，通過呼吸鏈并以氧為最終氫受體而產(chǎn)能,兼性好氧菌（facultative aerobe）,耐氧菌（aerotolerant anaerobe）,可在分子氧存在下進行厭氧生活的厭氧菌。生活不需要氧，分子氧也對它無毒害。不具有呼吸鏈，依靠專性發(fā)酵獲得能量。細胞內(nèi)存在SOD和過氧化物酶，但缺乏過氧化氫酶。,厭氧菌

23、（anaerobe）,分子氧對它有毒害，短期接觸空氣，也會抑制其生長甚至致死；在空氣或含有10%CO2的空氣中，在固體培養(yǎng)基表面上不能生長，只有在其深層的無氧或低氧化還原電勢的環(huán)境下才能生長；生命活動所需能量通過發(fā)酵、無氧呼吸、循環(huán)光合磷酸化或甲烷發(fā)酵提供；細胞內(nèi)缺乏SOD和細胞色素氧化酶，大多數(shù)還缺乏過氧化氫酶。,影響膜表面電荷的性質(zhì)及膜的通透性，進而影響對物質(zhì)的吸收能力。 改變酶活、酶促反應的速率及代謝途徑：如：酵母菌在pH4.5-5產(chǎn)乙醇，在 pH6.5以上產(chǎn)甘油、酸。 環(huán)境pH值還影響培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的離子化程度，從而影響營養(yǎng)物質(zhì)吸收，或有毒物質(zhì)的毒性。,3.pH值對微生物生長的影響,

24、微生物的生長pH值范圍極廣，從pH28都有微生物能生長。但是絕大多數(shù)種類都生活在pH5.09.0之間。 微生物生長的pH值三基點： 各種微生物都有其生長的最低、最適和最高pH值。低于最低、或超過最高生長pH值時，微生物生長受抑制或?qū)е滤劳觥?不同的微生物最適生長的pH值不同，根據(jù)微生物生長的最適pH值，將微生物分為： 嗜堿微生物：硝化細菌、尿素分解菌、多數(shù)放線菌 耐堿微生物：許多鏈霉菌 中性微生物：絕大多數(shù)細菌，一部分真菌 嗜酸微生物：硫桿菌屬 耐酸微生物：乳酸桿菌、醋酸桿菌,不同微生物對pH要求不同,4.5 微生物生長繁殖的控制,幾個基本概念,滅菌（sterilization）采用強烈的理化

25、因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施，實質(zhì)上可分殺菌（bacteriocidation）和溶菌（bacterioly-sis）兩種，前者指菌體雖死，但形體尚存，后者則指菌體殺死后，其細胞發(fā)生溶化、消失的現(xiàn)象。,消毒（disinfection）是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌，而對被消毒的物體基本無害的措施。,防腐（antisepsis）是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖，從而達到防止食品等發(fā)生霉腐的措施。,化療（chemotherapy）即化學治療。利用具有高度選擇毒力（對病原菌具有高度毒力而對宿主無顯著毒性）的化學物

26、質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖，借以達到治療該傳染病的一種措施。,4.5.1控制微生物的化學物質(zhì),抗微生物劑,抗代謝物,抗生素,酸和堿：醫(yī)院病房常用乙酸消毒。,重金屬極其鹽類：升汞,有機化合物 ：醇、醛、酚是常用的殺菌劑。,氧化劑：高錳酸鉀、雙氧水等,鹵素：氯，碘是常用的消毒劑,染色劑,表面活性劑,抗微生物劑(antimicrobial agent),殺死微生物或抑制微生物生長的化學物質(zhì),抗代謝物(antimetabolite),有些化合物在結構上與生物體所必需的代謝物很相 似，以至可以和特定的酶結合，從而阻礙了酶的功 能。干擾代謝的正常代謝。這些物質(zhì)稱為抗代謝物。,葉酸 磺胺類藥物,嘌

27、呤 6巰基嘌呤,氨基酸 5甲基色氨酸,吡哆醇 異煙肼,每種抗生素都有一定的殺菌范圍，稱為抗菌譜。,抗生素(antibiotic),是由微生物在代謝過程中產(chǎn)生（有的可人工合成）具有一定濃度下抑制或殺死其他微生物的有機化合物。,抑制細胞壁的形成,干擾蛋白質(zhì)合成,抑制核酸復制,影響細胞膜的功能,高溫滅菌,輻射作用,過濾作用,高滲作用,超聲波,4.5.2 控制微生物的物理因素,1.高溫滅菌（消毒）法是最常用的物理方法。高溫可引起蛋白質(zhì)、核酸等活性大分子氧化或變性失活而導致微生物死亡。,煮沸消毒法 將水加熱至100，煮沸15min30min，可殺死所有營養(yǎng)細胞和部分芽孢，達到消毒物的目的。 巴斯德消毒法（Pa