1、第三章 結核病管理及最新進展,第一節(jié) 結核病防治實驗室痰檢工作,第二講 顯微鏡讀片檢查,準備知識 顯微鏡簡圖 操作步驟 鏡油 顯微鏡讀片檢查 顯微鏡讀片 玻片的保存 廢棄物的處理 痰涂片鏡檢質(zhì)量保證 質(zhì)量保證 質(zhì)量控制,本節(jié)內(nèi)容導航,室間質(zhì)量評估 EQA的組織工作和關鍵技術措施 推行EQA 現(xiàn)場評價內(nèi)容 實驗室基本要求布局 生物安全 盲法復檢 批量測試 質(zhì)量提高,本節(jié)內(nèi)容導航,準備知識,顯微鏡簡圖,操作步驟,準備知識,鏡油（immersion oil)替代香柏油 香柏油易干燥凝結，損害油鏡頭 使用擦鏡紙清潔物鏡，避免用二甲苯 擦拭物鏡 易損壞鏡頭 對人體有害,準備知識,鏡油,顯微鏡讀片,讀片時

2、，首先從痰膜一端由左至右觀察相鄰的視野 當玻片移動到痰膜的另一端時，縱向向下轉換一個視野 然后從右向左觀察 避免跳躍或者閉合 環(huán)狀路線,顯微鏡的讀片檢查,紅色、桿狀、略彎曲,顯微鏡的讀片檢查,顯微鏡讀片,“V”- 字形,顯微鏡讀片,顯微鏡的讀片檢查,成簇的抗酸菌,顯微鏡的讀片檢查,顯微鏡讀片,在淡藍色背景下，抗酸桿菌呈紅色，其它細菌和細胞呈藍色鏡檢報告：涂片結果報告標準(萋尼氏抗酸菌染色法),顯微鏡讀片,顯微鏡的讀片檢查,玻片的保存,如果使用顯微鏡附帶的鏡油，或者是購買的鏡油（immersion oil），而不是香柏油（cedar oil），則不需使用二甲苯，直接使用鏡頭紙擦拭即可 干燥后的玻

3、片，按實驗室序號及涂片編號放置在玻片盒中，存放在陰涼干燥環(huán)境中。處于潮濕炎熱的環(huán)境中抗酸菌易于褪色,顯微鏡的讀片檢查,玻片的保存,鏡檢后的玻片上只注明實驗序號，不得標注鏡檢結果 全部涂片按實驗序號連續(xù)排列保存,顯微鏡的讀片檢查,顯微鏡的讀片檢查,玻片的保存,廢棄物的處理,污染源：所有可能與生物危險物接觸或被污 染的試驗器械和物品 ，例如痰標本 涂抹后的 竹簽 涂片 手套 口罩帽等 廢棄物處理方法 高壓滅菌 :高壓滅菌是首選的處理方法,顯微鏡的讀片檢查,1,廢棄物的處理,焚燒:如果沒有焚燒爐，簡單的燃燒是難以徹底 殺滅病菌，可能會使病菌擴散 化學消毒劑處理：避免使用化學消毒劑處理廢棄 污染物就直

4、接將其丟棄，很難保證殺滅效果,痰 液中的蛋白等物質(zhì)對消毒劑的殺滅效果影響很大,顯微鏡的讀片檢查,2,3,廢棄物處理,傳染性廢棄物對實驗員和環(huán)境危險性極大 在廢棄物離開實驗室前必須高壓滅菌或去污染處理 對濺出的標本應以5%石炭酸或者氯制劑進行消毒 酚類對標本有效 75% 酒精：只能皮膚消毒、或擦拭桌椅、臺面 （注意防火）,顯微鏡的讀片檢查,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,中國結核病防治規(guī)劃- 痰涂片鏡檢質(zhì)量保證手冊,結核病防治規(guī)劃,系統(tǒng)網(wǎng)絡,質(zhì)量控制,質(zhì)量檢查和評估,提高業(yè)務水平,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,質(zhì)量保證,是能持續(xù)提高實驗室服務效率和可信度的體系，包括室內(nèi)質(zhì)量控制、室間質(zhì)量評估和質(zhì)量提高,質(zhì)量控制 現(xiàn)場

5、評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,質(zhì)量控制,也稱室內(nèi)質(zhì)量控制：指實驗室內(nèi)部對實驗室服務整個過程各個環(huán)節(jié)的內(nèi)部檢查和監(jiān)測 質(zhì)量控制措施 日常工作的自我監(jiān)督 染色液的質(zhì)控,質(zhì)量控制 現(xiàn)場評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,涂片制備和染色、顯微鏡維護、顯微鏡鏡檢、結果登記和報告、以及痰片保存等 涂片的自查或互查 各種工作應有詳盡記錄 包括：操作規(guī)程、設備和耗材、痰標本收集、染色劑制備,質(zhì)量控制,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,質(zhì)量控制措施,室間質(zhì)量評估,室間質(zhì)量評估（EQA）是根據(jù)與其它網(wǎng)絡實驗室（中間級實驗室和中心實驗室

6、）比較批量測試和盲法復檢結果評價基層實驗室能力的過程 EQA包括實驗室現(xiàn)場評估以評價操作質(zhì)量并且也包括現(xiàn)場對涂片的復讀。EQA是國際肺病和防癆聯(lián)合會描述的熟練度檢測的擴大,質(zhì)量控制 現(xiàn)場評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,-EQA的組織工作和關鍵技術措施,組織工作：實施技術措施的保障 主要組織和實施單位在地市級參比室，但常常力量相 對薄弱 縣級盲法復檢的第1復檢者由另一個縣的實驗人員擔 任市級盲法復驗由另一市實驗人員擔任 需策劃和協(xié)調(diào)標本及復檢結果的傳遞,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,室間質(zhì)量評估,科學的抽樣方法,盲法,提高技術水平和責任感,按序號排放不分涂陽

7、涂陰,玻片不作結果標記,復檢者不知初檢結果,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,關鍵技術措施,室間質(zhì)量評估,-EQA的組織工作和關鍵技術措施,-EQA的組織工作和關鍵技術措施,決定樣本量有科學依據(jù)：全年的復檢標本量，取決于前1年的陰性片數(shù)量和涂片陽性率。即：其涂片陽性率一定時，陰性片愈多，抽樣量愈多（抽出陽性片的概率增高） 反之，陰性片量一定時，涂片陽性率愈高，抽樣量便愈少（抽到陽性片的概率較高）節(jié)省復檢數(shù)量 (不是一概抽取規(guī)定的陰、陽性片數(shù)量),痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,室間質(zhì)量評估,隨機化：決定樣本量后，計算出抽樣間隔，從哪一張片開始抽取，在現(xiàn)場用簡單隨機方式?jīng)Q定 保證抽樣的科學，從而保證復檢結果的科學性,痰涂

8、片鏡檢質(zhì)量保證,室間質(zhì)量評估,-EQA的組織工作和關鍵技術措施,-推行EQA,EQA的實施將為各級細菌學實驗室積累大量、有價值的信息（各級EQA信息如何收集應進行研究） 為建立和健全細菌學服務網(wǎng)絡，檢索各實驗室的質(zhì)量，確定重點督導單位，培訓重點縣、市的實驗室人員和培訓內(nèi)容提供可靠依據(jù),痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,室間質(zhì)量評估,現(xiàn)場評價內(nèi)容,房屋及其布局 供應：水、電、耗材 人力資源 實驗室安全防護措施 顯微鏡等設備狀況,質(zhì)量控制 現(xiàn)場評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,試劑的可用性 涂片、染色和鏡檢操作各個環(huán)節(jié) 玻片保存 登記和記錄 現(xiàn)場復檢3張陽性涂片 盲

9、法復檢痰片抽樣,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,現(xiàn)場評價內(nèi)容,-實驗室基本要求布局,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,現(xiàn)場評價內(nèi)容,實驗室布局管理 廢棄物處理 化學品的安全事項 感染控制,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,現(xiàn)場評價內(nèi)容,-生物安全,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,現(xiàn)場評價內(nèi)容,染色架,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,現(xiàn)場評價內(nèi)容,染色架,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,現(xiàn)場評價內(nèi)容,盲法復檢,原則： 樣本：隨機性、代表性 復檢：盲法 第二復檢者最終裁決 結果及時反饋和上報,質(zhì)量控制 現(xiàn)場評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,盲法復檢,對地市實驗室的盲法復檢： 組織實施者：省級參比室 第一復檢者：地市實驗室 第二復檢者：省級參比室 對縣級實驗室的盲法復檢： 組織實施者：地市級實驗室 第一復檢者：縣級實驗室 第二復檢者：地市級實驗室,質(zhì)量控制 現(xiàn)場評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量保證,批量測試,指國家或省級參比室向外周實驗室發(fā)送測試片，以評價外周實驗室技術人員的染色和/或讀片能力（熟練度測試） 主要考核個人的操作技術，而不能代表實驗室的整體技術水平,質(zhì)量控制 現(xiàn)場評價 質(zhì)量保證 室間質(zhì)量評估 盲法復檢 質(zhì)量提高 批量測試,痰涂片鏡檢質(zhì)量