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1、微生物的實驗室培養(yǎng)【課程目標】了解培養(yǎng)基的基礎知識,進行微生物培養(yǎng)和無菌技術的操作。基礎知識 一、培養(yǎng)基1概念:人們按照微生物對 的不同需求,配制出供其 的營養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基??煞譃?培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基。 2營養(yǎng)構成:各種培養(yǎng)基一般都含有 、 、 和 ,此外還要滿足微生物生長對 、 以及 的要求。 3培養(yǎng)乳酸桿菌時需在培養(yǎng)基中添加 、培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基PH調(diào)至 、培養(yǎng)細菌時需將PH調(diào)至 、培養(yǎng)厭氧微生物則需提供 條件。思考1從細胞的化學元素組成來看,培養(yǎng)基中為什么都含有這些營養(yǎng)成分?【補充1】碳源:如CO2、糖類、脂肪酸等有機物,構成微生物的結構物質(zhì)和分泌物,并提供能量?!狙a充2】培養(yǎng)基包括哪些
2、營養(yǎng)成分:碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子等,蔗糖是提供碳源的,也就是提供能源的,瓊脂是凝固劑氮源:如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等,主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源,又可以作為氮源,如氨基酸等。 二、無菌技術:閱讀“無菌技術”,討論回答下列問題: (一)獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是 ,具體操作如下:1對實驗操作的 、操作者的 和 進行 。2將用于微生物培養(yǎng)的 、 和 等器具進行 。3為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應在 附近進行。4實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸。(二)消毒和滅菌1消毒指 。常用的方法有 、 、 消毒法。
3、滅菌是指 。常用的方法有: 、 、 滅菌。分別適用于那些用具?思考2無菌技術除了防止培養(yǎng)物被污染外,還具有的目的是什么? 思考3利用干熱滅菌箱對玻璃器皿滅菌時物品不能擺得太擠,目的是什么? 思考4物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后,要首先打開排氣閥,煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣,其目的是 ;隨后關閉排氣閥繼續(xù)加熱,氣壓升至 ,溫度為 ,并維持 min;最后切斷熱源,使溫度自然降溫,氣壓務必降至 時打開鍋蓋,其目的是防止 思考5消毒與滅菌的相同點與區(qū)別分別是什么? 一、選擇題1下列有關培養(yǎng)基的敘述正確的是( ) A培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì) B培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 C固體培養(yǎng)基
4、中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基 D微生物在固體培養(yǎng)基上生長時,可以形成肉眼可見的單個細菌2.關微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是A.是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機物只提供無機鹽 D.無機氮源也能提供能量3作為自養(yǎng)生物唯一碳源的是( )A糖類 B石油 C 二氧化碳 D 花生粉餅4下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是A.防止雜菌污染 B.消滅雜菌C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設備都必須滅菌 D.滅菌必須在接種前5為了檢測飲用水中是否含有某種細菌,配制如下培養(yǎng)基:成分 乳糖蔗糖磷酸氫鉀伊紅Y美藍蒸餾水PH含量5g5g2g0.4g0.065g1000g7.2(1)該培養(yǎng)基所含的碳源是 ,其功能是 。(2)該培養(yǎng)基所含的氮源是 ,其功能是 。(3)該培養(yǎng)基除含碳源、氮源外,還有微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)是- 。(4)該細菌在同化作用上的代謝類
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