1、立克次體,第20章,主講人： 中 華 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 全 書 主 編 北華大學(xué)臨床微生物學(xué) 教 授 海 南 醫(yī) 學(xué) 院 外聘教授 李影林 2011年4月,1,目的要求,掌握：立克次體的概念、共同特點(diǎn)和生物學(xué)性狀。 熟悉：幾種主要致病立克次體的傳播媒介及所致疾病，外斐試驗(yàn)的原理和應(yīng)用。 了解：立克次體病的防治原則。,2,概 念 立克次體（Rickettsia）是一類生物學(xué)性狀介于細(xì)菌與病毒之間的，形態(tài)與結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相似，生活要求近于病毒,嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，并以節(jié)肢動物為媒介傳播疾病的原核生物界微生物。,第一節(jié) 概 述,3,通 性 1.大小介于細(xì)菌與V之間，形態(tài)結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相似（有C壁；二分裂；DNA+

2、RNA；有較復(fù)雜的酶系統(tǒng)；對抗生素敏感 ) 2.生活要求近于病毒 高度的專性細(xì)胞內(nèi)寄生，需在活C或具活組織的特殊培養(yǎng)基，供給養(yǎng)料才能繁殖。 但與病毒的不同點(diǎn)是在宿主C代謝低下時(shí)，繁殖發(fā)育旺盛。 3.在自然條件下，除Q熱外，均寄生在多種節(jié)肢動物的體內(nèi)（虱、蚤、蜱、螨等）?；?yàn)榧纳拗?，或?yàn)閮Υ嫠拗?，或同時(shí)為傳播媒介。 4.多為人畜共患。 5.對抗生素的敏感性：對多種抗生素敏感，磺胺可刺激其生長。,4,5,分 類,Bergeys鑒定細(xì)菌學(xué)手冊（1994） 第9版列為第9部分立克次體目立克次體科對人 類致病的有5個(gè)屬。,立克次體屬(Rickettsia) 柯克斯體屬(Coxiella) 東方體屬(O

3、rientia) 原恙蟲病群 埃立克體屬(Ehrlichia) 巴通體屬(Bartonella),斑疹傷寒群 斑點(diǎn)熱群,立克次體(Rickettsia) 貝納柯克斯體(Coxiella burnetii) 埃立克體(Ehrlichia) 活巴哈體(Wolbachia persica) 亞群 巴通體(Bartonella) 亞群 日本立克次體(R.japonica) 埃菲比體(Afibia) 查菲埃立克體(E.chaffeensis) 考德里體(Cowdria),遺傳學(xué)分類,(根據(jù)16SrRNA序列分析),6,寄生在宿主C內(nèi)，根據(jù)它在細(xì)胞內(nèi)分布的位置不同對鑒別立克次體有一定幫助。 普氏散在于宿主

4、C的胞漿中 恙蟲病靠近核旁成堆排列 斑點(diǎn)熱胞漿胞核內(nèi)均可找到 Q熱柯克斯體在胞漿空泡（吞噬溶酶體）內(nèi)繁殖,7,生物學(xué)性狀,形態(tài)與染色： 1.大小介于細(xì)菌和病毒之間，均可在光學(xué)顯微鏡下觀察到。 2.多形性，以球桿或桿狀為主。 3.有細(xì)胞壁，G-，但不易著染，Giemsa染色，被染成紫藍(lán)色，兩極濃染。也可用Gimenez法染色。 結(jié) 構(gòu)：結(jié)構(gòu)與G-細(xì)菌相似有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜。細(xì)胞壁由肽聚糖、蛋白質(zhì)、脂多糖和外膜組成；脂質(zhì)含量高于一般細(xì)菌 ；細(xì)胞膜由脂質(zhì)雙層組成，含大量磷脂。 DNA+RNA。 有微莢膜。 核糖體由50S和30S大小亞基組成。 培養(yǎng)特性：1.專性細(xì)胞內(nèi)寄生；2.生長速度緩慢；3.二分裂

5、； 3.可用細(xì)胞培養(yǎng)和雞胚卵黃囊接種；4.多種立克次體在豚鼠和小鼠體內(nèi)生長繁殖。,8,抗原構(gòu)造：,3.Ag構(gòu)造,寒,寒群,9,抵抗力 較弱,1.耐冷不耐熱 56 30min被滅活，冷凍干燥可 保存6個(gè)月。 2.對常用消毒劑（5g/L石炭酸、75%酒精）敏感。 3.對氯霉素、四環(huán)素敏感。 4.磺胺類藥物可刺激其生長。,10,致病性和流行環(huán)節(jié),流行環(huán)節(jié)：以節(jié)肢動物為傳播媒介/儲存宿主，嚙齒類動物為 寄生宿主/儲存宿主。 所致疾?。喝诵蠊不夹约膊　Ｗ匀灰咴葱约膊?。 致病機(jī)制：致病物質(zhì)為脂多糖（內(nèi)毒素）和磷脂A（破壞紅 細(xì)胞膜引起溶血；促進(jìn)立克次體從細(xì)胞內(nèi)的吞噬體釋放到細(xì)胞 質(zhì)中繁殖）。早期病變由內(nèi)毒

6、素引起，晚期主要是免疫病理所致。 疾病過程出現(xiàn)兩次菌血癥。 免疫力：細(xì)胞免疫為主。病后可獲得持久的免疫力。,11,大?。航橛诩?xì)菌和支原體之間,染色：G- 常用Giemsa和 Giemenez染色,形態(tài)：多形態(tài)， 主要為球桿狀。 排列不規(guī)則,結(jié)構(gòu)：有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜， 結(jié)構(gòu)似G- 菌,第二節(jié) 主要致病性立克次體,Macchiavello紅色,紫色 藍(lán)色,形態(tài)結(jié)構(gòu)：,一、立克次體屬,（一）普氏立克次體,12,培養(yǎng)特性：,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生 ，以二分裂方式繁殖 常用培養(yǎng)方法： 動物接種、雞胚卵黃囊接種及細(xì)胞培養(yǎng),抵抗力： 1. 與一般細(xì)菌繁殖體相似。對熱敏感,耐低溫和干燥。 2. 5石炭酸和來蘇兒可滅活

7、。 3.對四環(huán)素、氯霉素、土霉素等藥物敏感 磺胺類藥物能促進(jìn)其繁殖,基因組：Madrid E株染色體由1 111 523bp組成為環(huán)形DNA。,13,這里值的提出的是 斑疹傷寒等立克次體具有的耐熱多糖Ag與變形桿菌的某些菌株OX2、OX19、OXK有共同Ag，可發(fā)生交叉反應(yīng)。因此，可利用這些變形桿菌代替有關(guān)立克次體做凝集反應(yīng)，以檢查人或動物血清中的相應(yīng)Ab這種交叉凝集反應(yīng)稱為外-斐（Weill-Felix）反應(yīng)。,立氏立克次體,+,+,貝納柯克絲體,-,-,-,14,致病物質(zhì),內(nèi)毒素：與腸道桿菌內(nèi)毒素相似 磷脂酶A：溶解吞噬體膜 微莢膜樣黏液層 立克次體的直接破壞：在血管內(nèi)皮細(xì)胞中繁殖 血管通

8、透性增加, 血壓降低，休克。 抗原抗體復(fù)合物 ：血管炎(皮疹),對抗宿主的免疫作用,15,致病機(jī)制,1.傳播途徑,16,傳染源：病人 傳播媒介：體虱,人虱,人,人虱,人,叮咬（抓傷接種感染）、呼吸道吸入、眼結(jié)膜,病后有持久免疫力,普氏立克次體 流行性斑疹傷寒（虱傳斑疹傷寒）的病原體,發(fā)熱、頭痛、肌痛、皮疹、淋巴結(jié)腫大、皮膚蟲咬潰瘍（焦痂 ）、眼結(jié)膜充血、DIC、休克。,17,典型癥狀：黑色焦痂，恙螨幼蟲叮咬處先出現(xiàn)紅色丘疹，成水皰后破裂，中央潰瘍而成,18,微生物學(xué)檢查法,1.標(biāo)本的采集 （1）病人血液標(biāo)本分離立克次體或做免疫學(xué)試驗(yàn)。 (2)血清學(xué)診斷，需在病程早期及恢復(fù)期分別采集血清（即雙份

9、血清）試驗(yàn)。 （3）活檢或尸檢材料：采集野生小動物和家畜器官及節(jié)肢動物等供流行病學(xué)調(diào)查用。,19,1.標(biāo)本直接檢查 (1)直接鏡檢意義不大（因立克次體量太低） (2)免疫熒光檢測多用臟器標(biāo)本 (3)核酸檢測PCR敏感性高，早期診斷，鑒別流行病調(diào)查均有意義。 2.分離培養(yǎng) (1)動物接種分離斑疹傷寒立克次體常用雄性豚鼠。 (2)活檢標(biāo)本（皮膚、組織病變）雞胚卵黃囊或細(xì)胞培養(yǎng)，用免疫學(xué)試驗(yàn)加以鑒定。,檢驗(yàn)方法,20,(1)外斐反應(yīng) (2)間接免疫熒光（IFA）試驗(yàn)常用 (3)ELISA:間接法常用，捕捉IgM對早期診斷更有價(jià)值 。 (4)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）方法繁瑣敏感性不如IFA和ELISA，但

10、特異性強(qiáng)。常用于Q熱診斷。 (5)其他試驗(yàn) 如微量凝集（MA）、間接血凝（IHA）、乳膠凝集（LA）等也有應(yīng)用。,3.抗體檢測,21,防治原則,滅鼠、滅蜱、滅恙 個(gè)人防護(hù) 特異預(yù)防：尚未有理想的疫苗。 特異治療：氯霉素、四環(huán)素、強(qiáng)力霉素。,22,（二） 斑疹傷寒立克次體,生物學(xué)性狀 基本同普氏立克次體。但鏈狀排列少見。,致病性和免疫性,傳播媒介：鼠蚤、鼠虱 儲存宿主：嚙齒類,鼠,鼠蚤,鼠虱,鼠蚤,鼠,人虱,人,人,人虱,發(fā)病（較輕）,又稱為莫氏立克次體,引起地方性斑疹傷寒,23,微生物學(xué)檢查法基本同普氏立克次體,接種雄性豚鼠腹腔，可出現(xiàn)發(fā)熱，同時(shí)伴有明顯的陰囊紅腫和鞘膜反應(yīng)（- ）,24,防治

11、原則,1.改善居住條件。 2.提高民族素質(zhì)，講究個(gè)人衛(wèi)生。 3.滅虱、滅蚤和滅鼠。 4.接種疫苗。 5.治療原則同流行性斑疹傷寒。,25,斑點(diǎn)熱群立克次體,斑點(diǎn)熱的病原體,傳播媒介：蜱、野生動物、家禽 儲存宿主：蜱,家禽、鼠 蜱 卵 蜱 人 家禽、鼠,26,微生物學(xué)檢查,1.標(biāo)本的采集： 2.分離培養(yǎng)： （1）動物接種： （2）細(xì)胞培養(yǎng): （3）卵黃囊接種。 3.血清學(xué)檢測：采取雙份血清 補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng) 群特異性 免疫熒光 種特異性 外斐反應(yīng)： 非特異性 4.早期快速診斷：PCR,27,二、恙蟲病立克次體,恙蟲病立克次體 在宿主細(xì)胞內(nèi)近核內(nèi)（姬姆薩染色）,生物學(xué)性狀,形態(tài)染色,短桿狀法染色呈暗紅

12、色，其他染色特性同普氏立克次體。 結(jié)構(gòu)：無肽聚糖、脂多糖和微莢膜樣黏液層。 培養(yǎng)特點(diǎn)：對小白鼠不致病?？稍陔u胚卵黃囊和傳代細(xì)胞中生長。 抵抗力：在外界環(huán)境中較其他立克次體低。,恙蟲病立克次體又叫東方立克次體（R.orientalis）是引起恙蟲病的立克次體。,28,致病性,.傳播媒介及儲存宿主 恙螨既是傳播媒介，又是儲存宿主。 恙蟲病立克次體在恙螨體內(nèi)可經(jīng)卵傳代 . 主要流行地區(qū) 主要流行于東南亞，西南太平洋島嶼。我國：東南和西南特別是沿海各省、 自治區(qū)如臺灣、福建、浙江、江蘇、廣東、廣西。,29,恙螨在叢林雜草或河流沿岸雜草中 生 活,叮咬鼠或其他動物,卵 成蟲 稚蟲 幼蟲 幼蟲 稚蟲 成蟲 卵,第二代叮咬人或其他動物,.傳染過程,恙蟲病是一種自然疫源性疾病。,（1）傳染源：主要流行于嚙齒類動物，野鼠、家兔感染后多無癥狀，但體內(nèi)長期保留病原體故為主要傳染源。 此外兔類、鳥類也能感染或攜帶恙螨而成為傳染源。,人畜進(jìn)入疫源地也受感染。 叮咬處先出現(xiàn)紅色丘疹水皰破潰中央潰瘍形成黑色焦痂。,30,典型癥狀：黑色焦痂，恙螨幼蟲叮咬處先出現(xiàn)紅色丘疹，成水皰后破裂，中央潰瘍而成,病后有較持久的免疫力,31,三、埃立克體屬,（一）傳播媒介：蜱，患埃立克體病寵物 如犬、貓也可通過節(jié)肢動物傳染給人。 （二）致病性 查菲埃立克體 人類病原性埃立克體 腺熱埃立克體 嗜吞