1、非洲豬瘟現(xiàn)場(chǎng)采樣規(guī)程 采樣所需材料清單一般材料1 標(biāo)簽和記號(hào)筆；2 數(shù)據(jù)記錄表、筆、寫(xiě)字板；3 盛放針頭和刀片的銳器盒；4 高壓滅菌袋；5 用于環(huán)境采樣的拭子和盛放拭子用的離心管；樣品包裝運(yùn)輸所需材料1 容器/離心管/小瓶(防漏并標(biāo)示清楚)；2 吸水紙； 3 密封性好的容器或袋子，作為二次包裝(即防漏)、用于儲(chǔ)存動(dòng)物樣品的容器和采血管；4 冷藏箱(+4)；5 便攜式-80冷凍箱/干冰/液氮罐(僅在遠(yuǎn)離設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行取樣時(shí)才需要)；保定動(dòng)物的材料(如，套索、木板)；采血所需材料1 消毒劑和脫脂棉（酒精棉）；2 不含抗凝劑的無(wú)菌采血管(10ml)(紅色蓋子)；3 含有EDTA的無(wú)菌采血管(1

2、0ml)(紫色蓋子)；4 根據(jù)豬的大小和采樣部位(頸靜脈、耳緣靜脈)選取真空采血管或10-20ml注射器；組織采樣所需材料1 樣品架或凍存盒，裝有足量冰/冰袋的冰盒；2 用于收集病料的2ml無(wú)菌凍存管(采完的樣品放在冰上)或小號(hào)密封袋；3 帶刀片的手術(shù)刀、鑷子和剪刀；4 盛有消毒劑的容器，用于對(duì)刀、剪刀進(jìn)行消毒，避免不同臟器和不同動(dòng)物個(gè)體之間的交叉污染；5 如進(jìn)行病理學(xué)檢查，可使用密封的塑料容器，內(nèi)裝10%中性福爾馬林緩沖液(動(dòng)物臟器體積:福爾馬林體積比為1:10)；處置動(dòng)物尸體所需的適當(dāng)材料1. 采樣方法全血采血過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)菌操作。采血前，先用酒精棉對(duì)采血部位進(jìn)行局部消毒。采血完畢，進(jìn)行局

3、部消毒并用干棉球按壓止血。使用含有抗凝血?jiǎng)‥DTA-紫色蓋）的真空采血管從頸靜脈、前腔靜脈或耳緣靜脈抽取全血。如果動(dòng)物已經(jīng)死亡，可立即從心臟中采血。避免使用含肝素的真空采血管（綠色蓋子）。血清使用未加抗凝劑（紅色蓋子）的真空采血管從頸靜脈、前腔靜脈、耳緣靜脈采血，或剖檢過(guò)程收集血液樣品。靜置分離后，收集血清。如果血清是紅色，這表明樣品發(fā)生了溶血。通常已經(jīng)死亡動(dòng)物的血液樣品易發(fā)生溶血。血清樣品在分離后可以立即開(kāi)展檢測(cè)，如果需要儲(chǔ)存，對(duì)于抗體檢測(cè)，儲(chǔ)存在-20，但是對(duì)于病毒檢測(cè)，最好儲(chǔ)存于-80。器官和組織樣品可采集脾臟、淋巴結(jié)、肝臟、扁桃體、心臟、肺和腎臟樣品。脾臟和淋巴結(jié)的病毒含量最高。對(duì)于

4、死亡時(shí)間較長(zhǎng)的動(dòng)物，可采集骨髓樣品，也可采集關(guān)節(jié)內(nèi)組織液。建議將樣品保持在4，盡快提交給實(shí)驗(yàn)室。如無(wú)法及時(shí)送樣，可將樣品儲(chǔ)存在冷庫(kù)或液氮中。樣品用10%緩沖福爾馬林浸泡30分鐘以上，病毒可被滅活，可用于PCR檢測(cè)。樣品的最小需求量：血清 1mL；全血 1mL；組織樣品 10g。環(huán)境樣品可多點(diǎn)采集養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境拭子，如糞便、泔水、飼料等。建議樣品4以下保存。2. 樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送為保證準(zhǔn)確診斷，必須在適當(dāng)溫度下、以最快速度，將樣品仔細(xì)包裝、做好標(biāo)記和相關(guān)記錄，以最快路線送到最近的農(nóng)業(yè)農(nóng)村部指定的實(shí)驗(yàn)室。采樣之前必須致電相關(guān)實(shí)驗(yàn)室，確保遵循正確的樣品提交程序，保證所送樣品能在第一時(shí)間完成檢測(cè)及儲(chǔ)存。做好樣品運(yùn)