1、特種檢驗(yàn)項(xiàng)目的臨床應(yīng)用,主講人：潘 超,杭 州 艾 迪 康 醫(yī) 學(xué) 檢 驗(yàn) 中心,ADICON Clinical Laboratories, Inc.,1,獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室 肝纖維化指標(biāo) 微量元素檢驗(yàn) 過敏源檢測,結(jié)束,2,獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的產(chǎn)生,五六十年代，發(fā)達(dá)國家醫(yī)學(xué)的發(fā)展給社會(huì)帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，美國尤為突出，為減輕國民負(fù)擔(dān)，美國政府推出“合理利用資源減少醫(yī)療開支”的策略及一系列醫(yī)療體制改革進(jìn)行干預(yù)，同時(shí)引入市場機(jī)制，加劇行業(yè)競爭，最終導(dǎo)致醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)行業(yè)中以集約化為核心競爭力的醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室的產(chǎn)生。 CLLIA88的影響。,3,獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)狀,美國 40%的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)由獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室完成，此比

2、例每年都在增長。美國Quest有1300個(gè)檢驗(yàn)服務(wù)中心，在全美有150家實(shí)驗(yàn)室， 每年處理標(biāo)本量超過一億，執(zhí)行2.5億次診斷實(shí)驗(yàn)，年經(jīng)濟(jì)收入約41億美元,4,5,加拿大 加拿大MDS雇員超過一萬人，是加拿大最大的診斷實(shí)驗(yàn)提供者,6,7,日本 日本的BML，其本國員工達(dá)1160多人，每天處理10萬份標(biāo)本，在全日本有40多家分支機(jī)構(gòu)，檢測項(xiàng)目超過4000項(xiàng)。,8,9,獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室在中國,20世紀(jì)80年代中期，揚(yáng)州醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心便開始涉足檢驗(yàn)業(yè)務(wù)的社會(huì)化服務(wù)，獲得了較好的經(jīng)濟(jì)效益。以后又陸續(xù)有一些不同形式的檢驗(yàn)業(yè)務(wù)服務(wù)，部分醫(yī)院的對外開放實(shí)驗(yàn)室，但均未成規(guī)模。21世紀(jì)初，廣州金域，達(dá)安，杭州艾迪康相

3、繼成立。,10,獨(dú)立醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的作用,1、對醫(yī)院 獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室優(yōu)質(zhì)高效的服務(wù)避免了中、小醫(yī)療單位不必要的檢驗(yàn)儀器的投入和人員的配置 。,11,2、 對臨床醫(yī)生 獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室眾多的檢測項(xiàng)目彌補(bǔ)了中小醫(yī)院檢測項(xiàng)目的不足，也是對大型醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目的有益補(bǔ)充，醫(yī)生在診治病人時(shí)有了更多的選擇余地。,12,3、對患者： 病人能就近享受高質(zhì)量的檢驗(yàn)診斷服務(wù),13,4、對社會(huì)醫(yī)療 獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行商業(yè)化運(yùn)作，潛在的市場競爭和醫(yī)療風(fēng)險(xiǎn)迫使其進(jìn)行優(yōu)質(zhì)、高效和規(guī)范化管理，有利于降低整體醫(yī)療成本，提升服務(wù)質(zhì)量。,14,5、對項(xiàng)目的普及與推廣 一些需要政府大力提倡和普及的項(xiàng)目，如先天性疾病的產(chǎn)前診斷，新生兒遺傳性疾病篩查等的

4、推廣,15,杭州艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心是由留美博士創(chuàng)辦的浙江省第一家大型的獨(dú)立醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu).,杭州艾迪康,16,17,18,19,20,ADICON 按照ISO/IEC17025:1999標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，已于2004年8月底順利通過中國國家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委現(xiàn)場評審，2004年11月25日取得中國國家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委認(rèn)可證書。 本中心是浙江省第一家，全國第五家通過ISO質(zhì)量體系認(rèn)證的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室。,21,22,標(biāo)記印章,返回,23,何為肝纖維化？,肝纖維化是指肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，此增生以膠原纖維、彈性纖維及基質(zhì)成分氨基多糖增生為主，但以膠原纖維增生更為突出。,24,肝纖維化與肝硬化有什么不同？,肝纖維化的病理特點(diǎn)

5、為匯管區(qū)和肝小葉內(nèi)有大量纖維組織增生和沉積，但尚未形成小葉內(nèi)間隔，肝硬化則有假小葉形成，中心靜脈區(qū)和匯管區(qū)出現(xiàn)間隔，肝的正常結(jié)構(gòu)遭到破壞，肝纖維化進(jìn)一步發(fā)展即為肝硬化。,25,肝纖維化能逆轉(zhuǎn)嗎？,體內(nèi)有纖維降解的生理過程，我們就完全有理由認(rèn)為肝纖維化(甚至肝硬化)并不是不可逆的。,纖維化的過程是由體內(nèi)膠原纖維的合成與降解相互作用的結(jié)果。當(dāng)前者亢進(jìn)時(shí)，后者被抑制，則出現(xiàn)纖維化過程，反之則纖維化可消退。,26,如何防止肝臟纖維化？,1、抗病毒 2、調(diào)整機(jī)體免疫 3、保護(hù)肝細(xì)胞,27,肝纖維化指標(biāo) （1995中華醫(yī)學(xué)會(huì)病毒性肝炎防治方案推薦） HA - 透明質(zhì)酸 P-P - 型前膠原 CV- - 型

6、膠原 Ln - 層粘連蛋白,28,HA（透明質(zhì)酸） 為基質(zhì)成分之一，由間質(zhì)細(xì)胞合成，可較準(zhǔn)確靈敏地反映肝內(nèi)已生成的纖維量及肝細(xì)胞受損狀況，有認(rèn)為本指標(biāo)較之肝活檢更能完整反映出病肝全貌，是肝纖維化和肝硬變的敏感指標(biāo)。正常值120 ng/mL。,29,P-P （III型前膠原）： 反映肝內(nèi)III型膠原合成，血清含量與肝纖程度一致。 P-P與肝纖維化形成的活動(dòng)程度密切相關(guān)，持續(xù)P-P升高的慢活肝，提示病情可能會(huì)惡化并向肝硬變形成發(fā)展，而P-P降至正常可預(yù)示病情緩解，說明P-P不僅在肝纖維化早期診斷上有價(jià)值，在慢性肝病的預(yù)后判斷上也有意義。正常值12ng/mL。,30,CV-IV（IV型膠原）： 為構(gòu)

7、成基底膜主要成份，反映基底膜膠原更新率，含量增高可較靈敏反映出肝纖過程，是肝纖的早期標(biāo)志之一。正常值140ng/mL。,31,LN（層粘連蛋白）： 為基底膜中特有的非膠原性結(jié)構(gòu)蛋白，與肝纖維化活動(dòng)程度及門靜脈壓力呈正相關(guān)，慢活肝和肝硬變及原發(fā)性肝癌時(shí)明顯增高 ，LN也可以反映肝纖維化的進(jìn)展與嚴(yán)重程度。另外，LN水平越高，肝硬變病人的食管靜脈曲張?jiān)矫黠@。 正常值50-180 ng/mL。,返回,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42,43,44,45,46,47,48,49,基于在原子化器中，試樣中的待測元素在高溫的作用下變成原子蒸氣，從光源輻射出待測元素的特征波長光，

8、該特征波光通過原子化器時(shí)，被待測元素的基態(tài)原子所吸收。由輻射強(qiáng)度減弱的程度，可以求出樣品中待測元素的含量。,原子吸收分光光度計(jì)的原理,50,原子蒸氣受具有特征波長的光源照射后，其中一些自由電子被激發(fā)躍遷到較高能態(tài)，然后去激發(fā)躍遷到某個(gè)較低能態(tài)（常常是基態(tài)）而發(fā)射出特征光譜的物理現(xiàn)象。,原子熒光光譜儀的原理,51,返回,52,臨床流式分析（clinical flow analysis)就是采用流式細(xì)胞儀對臨床標(biāo)本中的生物顆粒（細(xì)胞、細(xì)胞成分或微生物）進(jìn)行分析,這一技術(shù)稱為流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry, FCM)。,53,PMT,PMT,PMT,PMT 4,長波通二色性反射鏡,濾光片,

9、激光,1,2,3,4,流動(dòng)池,儀器的構(gòu)造和原理,光電管,光電倍增管,54,Flow Cell,55,56,90 Degree Scatter,0,200,400,600,800,1000,8,15,20,30,40,50,100,200,1000,Lymphocytes,Monocytes,Neutrophils,Side Scatter Projection,Light Scatter Gating,Scale,57,Log FITC,1000,100,10,1,.1,單參數(shù)直方圖,58,免疫分型,CD2,CD4,59,G2,M,G0,G1,s,0,200,400,600,800,1000,

10、s,DNA Analysis,DNA content,Count,正常細(xì)胞周期,60,0,200,400,600,800,1000,PI Fluorescence,DNA Analysis,Aneuploid peak,61,B細(xì)胞減少：見于體液免疫功能抑制者。,NK細(xì)胞：參于機(jī)體抗腫瘤、寄生蟲和病毒及II型變態(tài)反應(yīng)等。,62,CD4細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,T細(xì)胞,B細(xì)胞,NK細(xì)胞,CD8細(xì)胞,即輔助性T細(xì)胞,就是大顆粒淋巴細(xì)胞，它無需致敏、即可殺傷靶細(xì)胞（腫瘤或被感染的細(xì)胞）,擔(dān)負(fù)體液免疫功能，是合成抗體的細(xì)胞,擔(dān)負(fù)細(xì)胞 免疫功能,TH1細(xì)胞,TH2細(xì)胞,細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc）,抑制性T細(xì)胞（Ts）

11、,釋放細(xì)胞毒素殺死靶細(xì)胞,能抑制某些淋巴細(xì)胞的活性,介導(dǎo)細(xì)胞免疫、參與 自身免疫病和炎癥反應(yīng),介導(dǎo)體液免疫、促進(jìn)抗體產(chǎn)生、參與過敏反應(yīng)和體液免疫性疾病,淋巴細(xì)胞亞群分析,63,淋巴細(xì)胞亞群絕對計(jì)數(shù)參考值范圍 （單位：M/L 即細(xì)胞/l）,64,淋巴細(xì)胞增多癥,成人4000 M/L，兒童7200 M/L, 嬰幼兒9000 M/L 可能的情況包括：急性或慢性淋巴細(xì)胞白血病，感染性白細(xì)胞增多（尤為兒童），傳染性單核細(xì)胞增多癥（EB病毒抗體陽性），其他病毒感染（上呼吸道病毒感染、巨細(xì)胞病毒感染、麻疹、流行性腮腺炎、水痘、急性HIV感染或病毒性肝炎）及弓形蟲病，某些細(xì)菌感染（結(jié)核病、布魯氏病或百日咳），

12、血清病，藥物過敏，腎上腺皮質(zhì)功能減低（Addison?。约凹谞钕俣景Y等。,65,淋巴細(xì)胞減少癥,成人1000 M/L，兒童2500 M/L 可能的情況包括：化療，放射治療，免疫抑制藥物治療，使用ACTH或皮質(zhì)類固醇后，患有分泌ACTH的垂體瘤，由于淋巴管阻塞導(dǎo)致淋巴細(xì)胞從胃腸道丟失增加，再生障礙性貧血，Hodgkin病(淋巴網(wǎng)狀細(xì)胞瘤)及其他惡性腫瘤，遺傳性免疫失調(diào)，艾滋病，重癥結(jié)核?。ɡ趿罱Y(jié)核），腎功能衰竭，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE），各種原因造成的極度衰弱，以及充血性心衰等 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)500細(xì)胞/l表明患者極易感染（尤其是病毒感染）,66,CD4細(xì)胞減少,免疫機(jī)能障礙，尤其是艾滋?。?/p>

13、200細(xì)胞/l）, 急性微小病毒感染等 CD4細(xì)胞（與CD8細(xì)胞同時(shí)）減少見于各種嚴(yán)重的免疫缺陷,67,CD4細(xì)胞增加,可能有過強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng) 或某些免疫增強(qiáng)藥物的有效結(jié)果 請注意晝夜變化（傍晚的峰值可為上午的兩倍）,68,CD8細(xì)胞增多,見于機(jī)體對各種病毒感染的免疫反應(yīng) 以及腫瘤患者具有抗腫瘤免疫反應(yīng)時(shí),69,CD8細(xì)胞（與CD4細(xì)胞同時(shí)）減少,見于各種嚴(yán)重的免疫缺陷 以及腫瘤患者晚期或免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p傷后,70,CD4/CD8比值異常,CD4CD8的比值正常成人一般在1.42.0 若其比值2.0或1.0，表明可能處于某種免疫反應(yīng)中或存在細(xì)胞免疫功能紊亂。,71,CD4/CD8比值升高,多見

14、于各種自身免疫病（SLE、RA、MCTD和自身免疫性溶血性貧血等） 注意分清主要是CD4細(xì)胞增多還是CD8減少,72,CD4/CD8比值降低,艾滋病（0.5） 以及其他免疫缺陷病 病毒感染 惡性腫瘤（復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移） 某些白血病 再生障礙性貧血等 注意分清主要是CD8細(xì)胞增多還是CD4減少,73,NK細(xì)胞計(jì)數(shù)異常,NK細(xì)胞增多：見于病毒感染，腫瘤早期患者（尚有抗腫瘤免疫反應(yīng)時(shí)） NK細(xì)胞減少：免疫功能低下，免疫抑制藥物使用后，腫瘤晚期,74,淋巴細(xì)胞亞群絕對計(jì)數(shù)的主要用途,確認(rèn)免疫機(jī)能缺陷病或免疫機(jī)能低下 確認(rèn)感染性疾病及機(jī)體的反應(yīng) 確認(rèn)自身免疫病或自身免疫反應(yīng) 了解機(jī)體對化療或免疫抑制療法的影響

15、 便于發(fā)現(xiàn)某些血液病,75,淋巴細(xì)胞亞群分析的臨床意義,CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞都減少： 見于各種嚴(yán)重的免疫缺陷。,76,CD4/CD8比例異常：見于免疫功能紊亂或各種自身免疫病。,CD4細(xì)胞低于200/ul已定為艾滋病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。,77,在全世界，變態(tài)性疾病影響著20-40%人的生活,78,過敏性疾病的盛行率逐年增加,1960,1970,1980,1990,2000,年,盛行率, %,5,10,15,20,25,30,35,Reference: Strannegrd 56:91-102,79,什麼是過敏？,過敏是指生物體對外來的異物（過敏原，即抗原）所產(chǎn)生的一種不適當(dāng)反應(yīng)而言，此種引起過敏反應(yīng)

16、的異物，我們通稱為過敏原，而我們身體會(huì)對過敏原產(chǎn)生過敏性抗體，即通常所稱IgE抗體。,80,81,82,常見的過敏疾病,過敏性腸胃炎 過敏性鼻炎 異位性皮膚炎 氣喘,83,不同過敏疾病與年齡間的關(guān)係,0,0.5,1,3,7,15,Years,腸胃炎,過敏性鼻炎,氣喘,異位性皮膚炎,84,過敏原是無所不在的,85,檢驗(yàn)過敏的方法,體內(nèi) 皮膚試驗(yàn)(skin test) 體外 IgE的測定,86,要找出過敏原，就要找出IgE,要找出IgE是不容易的，問題在於 其他免疫球蛋白分子 血液中含量極低 多樣化的過敏原,87,華東地區(qū)常見變應(yīng)原,類別：吸入性變應(yīng)原 常見種類： d1（戶塵螨） m6 （交鏈孢霉

17、） d2（粉塵螨） m8 （蠕孢霉） h1（屋 塵） t8 （榆 樹） e1（貓毛皮屑） t11 （法國梧桐） e5（狗毛皮屑） t12 （蠕孢霉） m1 (點(diǎn)青霉） t14 （三角葉楊） m2（分枝孢霉） t17 （日本杉） m3（煙曲霉） t18 （桉 樹） m5（白色念珠菌） w1 （矮豚草）,88,華東地區(qū)常見變應(yīng)原,類別：食物變應(yīng)原 常見種類： f1 （雞蛋白） f23 （蟹） f2 （牛 奶） f24 （蝦） f4 （小 麥） f27 (牛肉） f10（芝 麻） f35 （土豆） f13（花 生） f37 （青貝） f14（黃 豆） f91 （芒果）,89,華東地區(qū)常見變應(yīng)原,類別：混合變應(yīng)原 Phadiatop（吸入性變應(yīng)原篩查） 常見種類： hx2（屋塵，戶塵螨，粉塵螨，蟑