1、Perkinelmer氣質(zhì)聯(lián)用儀用戶常見問題解答,根據(jù)用戶來電整理的內(nèi)容 那順 PE色譜產(chǎn)品技術(shù)支持 北京,TurboMass Physical Components,GC,離子源,質(zhì)量分析器,檢測器,真空表,真空腔,分子渦輪泵,機械泵,數(shù)據(jù)系統(tǒng),MS Electronics,傳輸線,1 軟件主界面部分,項目文件夾都有哪些東西（了解文件管理辦法）：Tutorial_SVOA.pro中包含六個文件夾,ACQUDB 中有色譜方法文件，質(zhì)譜方法文件，調(diào)諧文件,實際數(shù)據(jù)文件在DATA中，后綴為raw。MethDB中有定量方法文件。SampleDB中有樣品列表文件,說明：每個項目文件中都有六個文件夾，它

2、們分別為ACQUDB，MethDB，Data，Curve DB， Sample DB，Peak DB） 我們創(chuàng)建的氣相方法文件（mth），質(zhì)譜方法（exp），調(diào)諧文件（ipr），校準文件（caj）保存在ACQDB中。 原始數(shù)據(jù)到Data中。 樣品列表文件到SampleDB中。 標準曲線文件在CurveDB中。 峰鑒定文件在peak DB中。 定量方法在METH DB中。,這是樣品列表界面在這里可以輸入文件名，質(zhì)譜方法文件名，氣相色譜方法文 件名（GC），自動進樣器小瓶位置，進樣口位置等信息。,建立新的項目文件,點擊project wizard,輸入項目名稱及保存盤符位置,建立一個新的項目文件時

3、以前叫c:/turbomass//defult.ipr會變成c:/turbomass//defult.ipr所以溫度等參數(shù)會發(fā)生變化，應加以注意.,如何打開項目文件,我們的儀器有好幾個人在用，如何將大家的分析內(nèi)容分類？,可以建立不同的樣品列表 sample list 可以建立不同的項目文件（片子中這樣顏色的問題都有超級鏈接，在播放狀態(tài)下單擊就可）。,2 質(zhì)譜方法部分,質(zhì)譜方法的組成：溶劑延遲，總離子掃描，選擇離子掃描,溶劑延遲的設(shè)定（設(shè)定溶劑延遲的目的：在溶劑延遲期間燈須關(guān)閉，防止大量溶劑進入質(zhì)譜 時燒壞燈絲。,MS Scan（總離子掃描）及SIR（選擇離子掃描）的

4、設(shè)定過程見下面的內(nèi)容：MS Scan（總離子掃描）界面參數(shù)的設(shè)定： 質(zhì)量掃描范圍：輸入起始和結(jié)束的質(zhì)量掃描范圍（根據(jù)所分析化合物種類確定范圍）質(zhì)量范圍超出 603 后需做高質(zhì)量校準。掃描時間范圍：可以跟氣相色譜的運行時間一致。Scan time（掃描時間）：每次全掃描需要的時間。本例中由140-1000的掃描需要0.2秒時間（缺省值）。Interscan delay（兩次掃描間隔時間）：缺省值0.1s。,基本概念：色譜圖和質(zhì)譜圖的區(qū)別,橫坐標：時間軸 縱坐標：吸收強度,橫坐標：質(zhì)核比 縱坐標：吸收強度,色譜數(shù)據(jù)點的構(gòu)成（每個點都是一次質(zhì)譜掃描）,本例中色譜峰大約0.5min的寬度，等于30秒。

5、如果掃描時間0.2s，掃描間隔時間0.1s 。則一次完整的掃描需要0.3s。所以30秒內(nèi)可以形成100個點。（至少要有10個點，才能準確定量）,色譜圖實際上由多個點構(gòu)成。,選擇離子方法的設(shè)定：（選擇離子選取原則）1） 在化合物質(zhì)譜圖中選擇吸收較強的離子。2） 選擇那些不易受到其它雜質(zhì)干擾的離子。Dwell時間的意義： 監(jiān)測某個離子一次需要的時間。Interchannel delay：兩次掃描之間的間隔時間，缺省值0.1s（最短不能小于0.015s）。,質(zhì)譜方法中既有總離子掃描，又有選擇離子的時候，怎么計算？,總離子掃描時間0.2s，掃描間隔時間0.1s 。則一次完整的掃描需要0.3s。 選擇離

6、子弛域時間（dwell time）0.1s ，兩次掃描之間的間隔時間0.02s，則一次完整的掃描需要0.12s。 所以30秒內(nèi)可以形成30秒/0.42秒=71個點。既是總離子色譜圖上有71個點，選擇離子色譜圖上有71個點。 所以選擇離子越多，構(gòu)成色譜圖的點數(shù)越少。建立方法時要注意至少要有10個點，才能準確定量。,dwell 時間對于信噪比和采樣點數(shù)的影響,Diffirent dwell time：0.2 0.02 0.01,1ppm濃度甲苯：同一個樣品采用不同的dwell 時間分析（條件一樣）,Deffirent dwell time（不同dwell時間的面積基本一致，但信噪比差別較大）,不同

7、dwell時間的信噪比的比較,0.2,0.02,0.01,s/n ratio 采樣點數(shù)多少的比較：色譜峰開始到結(jié)束（第一張圖基線噪音明顯）,40point,170 point,220point,MS方法設(shè)定注意的問題,MS方法設(shè)定注意的問題,總離子掃描和選擇離子同時存在的時候： 要避免第一組SIR的開始時間與全掃描的開始時間相同，要在0.2分鐘后開始,總離子排到后面的時候會出現(xiàn)的問題,在實時采集界面，首先出現(xiàn)的不是總離子色譜圖。而是三個選擇離子的加和色譜圖,首先出現(xiàn)的( 功能組一）不是總離子色譜圖。而是三個選擇離子的加和色譜圖.想要顯示總離子通道，在display中選擇tic即可,3 色譜方法

8、部分,點擊“大拇指”圖標可以進入氣相色譜的設(shè)定界面： 依次可以設(shè)定進樣方式，柱箱，進樣口，載氣（包括分流流量），檢測器及儀器時間事件的 設(shè)定界面。,1）下面是進樣方式的設(shè)定界面，可以設(shè)定手動和自動進樣方式。,進樣可以采用手動及自動進樣的模式（接有頂空等外圍設(shè)備時需要選擇manual）,1,2,3,4,2）下面是柱箱和進樣口的設(shè)定界面：柱箱程序中輸入初始溫度，升溫速率，下一階溫 度，保持時間等。進樣口A為前側(cè)進樣口，進樣口B為后側(cè)進樣口。（氣相色譜總運行時間由 柱箱程序確定）。,2）柱溫箱和進樣口的設(shè)定（設(shè)定色譜柱的升溫程序及汽化室的溫度）,1,3,2,3,4,總的程序時間為,2,3）下面為載氣

9、的設(shè)定窗口：載氣有三種控制方式，分別為壓力模式、流速模式和線速度 模式。為了使載氣壓力和流速正確轉(zhuǎn)換，在這里需要輸入色譜柱的詳細信息。分流控制可以 選擇流量設(shè)定模式及分流比模式?？梢愿鶕?jù)樣品濃度選擇分流量。,1,2,3分流出口 （毛細柱）,3.載氣流速及分流的設(shè)定界面（如果裝有兩個色譜柱 則流速需要分別設(shè)定）,4）下面是檢測器的設(shè)定界面：當帶有氣相色譜檢測器時在這里設(shè)定。如果只用質(zhì)譜不用氣相 色譜檢測器則在溫度欄中輸入零度，并使檢測器氣體均為零。,下面是儀器時間事件的設(shè)定界面：在這里可以設(shè)定分流大小和閥的開關(guān)載氣節(jié)約模式的設(shè)定,如果載氣使用的氣體是較昂貴的氦氣，如何在參數(shù)設(shè)定中實現(xiàn)節(jié)氣模式？,

10、比如在進樣的時候采用的50ml的分流流量，在進樣完成后可以將分流流量關(guān)閉或改小流量.,進樣的時候分流流量為50ml/min,進樣之后的某個時間可以將分流流量關(guān)閉,返回,重復性為什么不好？GC部分可能原因分析如下,采用自動進樣器時：檢查針是否堵塞，吸樣時是否有氣泡 如果沒有備用自動進樣針，則可以手動進樣測試計算5次以上進樣的重復性（相對標準偏差RSD的計算請參考相關(guān)分析化學文獻）. 檢查進樣口是否添裝玻璃毛(對重復性影響很大） 如果所分析的化合物性質(zhì)不穩(wěn)定則可以先分析一下甲苯等典型樣品確認儀器是否存在問題.,返回,4 調(diào)諧部分,調(diào)諧界面,調(diào)諧的目的：獲得好的靈敏度，獲得好的質(zhì)量分辨率，獲得好的峰

11、形,調(diào)諧界面 調(diào)諧采用的標準物為全氟三丁胺，全氟三丁胺的結(jié)構(gòu)式和質(zhì)譜圖如下，從中我們可以看出特征峰為69，131，219，502。覆蓋了0-600的質(zhì)量范圍。并且各離子比例穩(wěn)定，這是為什么采用全氟三丁胺（FC43）作為標準物的原因。下面圖中為四級桿質(zhì)譜的結(jié)構(gòu)圖?；衔锓肿佑擅氈┒怂腿腚x子源。經(jīng)70mv電子的轟擊后碎裂。在推斥極（repelar）的作用下推入透鏡組中進行加速，飛入四級桿中實現(xiàn)質(zhì)量分離并被光電倍增管檢測到。此界面各參數(shù)的意義 如下:,將標氣打入到離子化室中（打開的一瞬間可以觀察到真空度的下降）,通過FC43的4個最具有代表性的峰來判斷調(diào)諧的好壞,打開燈絲：通過觀察燈絲電流判斷燈

12、絲的開閉,普通分析中采用：自動調(diào)諧就可以了。分析的化合物質(zhì)量范圍或靈敏度有特殊要求的時候采用手動調(diào)諧。,自動調(diào)機的過程,調(diào)諧結(jié)束后要關(guān)閉標準氣并泵出標準氣。注意在開始分析樣品之前要把泵出參比氣的選項拿掉。,在這里可以看到分子渦輪泵旋轉(zhuǎn)是否正常（要注意：真空度沒有達到一定程度之前分子渦輪泵是不工作的）,注意事項,1.如果收集極臟了或者燈絲未準直，離子源電流會顯示較高，同時，收集極電流會顯示較低值。 2. 如果內(nèi)離子源是潔凈的，推斥極的讀數(shù)會接近于零。 3.當離子源變臟時，就需較高的推斥極電壓來迫使離子推出離子源。當推斥極的讀數(shù)較高時，內(nèi)離子源應該予以清洗。,5 校準部分,校準界面,什么是校準（如

13、同天平的校準一樣）：采用全氟三丁胺這樣的化合物將儀器質(zhì)量軸調(diào)校到準確的位置。就像把不太準的天平用已知重量的砝碼調(diào)準一樣。,經(jīng)過校準后質(zhì)量峰峰尖應該對準下面的刻度,校準時的采集參數(shù)（一般按缺省參數(shù)進行，就可以）,校準過程,校準文件的后綴為cal。要調(diào)用正確的校準文件。如果分析的化合物具有高質(zhì)量數(shù)，則開始分析之前需要調(diào)用高質(zhì)量校準文件。（質(zhì)量數(shù)在700以上化合物在分析的時候需要做高質(zhì)量校準，采用的化合物不是全氟三丁胺，而是trizine。）,未校準時質(zhì)量軸偏移,重新校準后保存校準文件，就可以將質(zhì)量軸糾正過來。,質(zhì)量軸已經(jīng)校準,一般情況下請勿將倍增器電壓升到600，對光電倍增器的壽命由影響,6 實際

14、樣品分析過程,真空度到什么程度才可以做樣？,不要在真空度大于1 104 Torr時單擊Press for Operate按鈕打開燈絲，否則將燒毀燈絲。,氮氣和氦氣的比例什么情況下算正常？空氣背景的觀察在什么情況下觀察？,氮氣峰不到氦氣峰的10% 觀察：請將進樣口載氣分流設(shè)為50ml/min 以防止空氣和水擴散入隔墊造成泄漏假相。,在開始分析樣品之前，應該注意除了色譜方法和質(zhì)譜方法之外應該選擇正確的調(diào)諧方法（ ipr文件）,在開始分析樣品之前，應該注意除了色譜方法和質(zhì)譜方法之外選擇正確的校準方法（cal文件，最后一次打開的校準文件）,開始分析樣品：下部狀態(tài)欄可以看到溶劑延遲的提示,溶劑進入真空腔

15、時真空度會明顯下降（判斷溶劑進入質(zhì)譜的時間）,溶劑通過后真空度馬上恢復。,觀察正在采集的色譜圖點擊此處,點擊實時采集可以看到色譜圖的采集情況,隨時間的變化，標尺會變化,色譜圖上如何顯示保留時間和面積,為什么提取離子色譜圖分叉：色譜峰過載（提取離子強度達到X.XX E9 ，TIC 達到 E10 時說明過載。需要稀釋樣品）,小技巧：如何查看歷史數(shù)據(jù)的測試條件在色譜圖界面點擊打開后點擊experiment,可以看到樣品分析時的詳細參數(shù),7 定量方法部分,定量方法 General paramaters（一般參數(shù)）的輸入界面如下，其中可以選擇內(nèi)外標法，曲線擬合類型，是 否過零點等參數(shù)。,Integrat

16、e parameter（積分參數(shù)）的輸入界面如下,積分參數(shù)的調(diào)整簡介,響應域值的限定 下面圖中相對高度10% 以下的峰均不顯示,Peak-to-peak amplitude2000 和20000時的比較（識別色譜峰的數(shù)目會發(fā)生很大變化,Peak detect （peak separation 90%和10%的比較）,如何手動積分,下面的界面中需要輸入化合物的保留時間，化合物名稱，內(nèi)標物的選擇，用于定量的離子。,A、 下面舉例建立一個定量方法：將定量用色譜圖界面和定量方法界面處于一個窗口中，點擊Name后轉(zhuǎn)到色譜圖界面右鍵拖曳便可以將保留時間和定量曲線輸入到定量界面中。 使色譜圖和定量方法窗口同

17、時存在，這樣可以方便快捷的輸入定量信息。,如果采用選擇離子來定量，則在 TIC 界面：選擇用于定量的選擇離子，使色譜圖顯示例 如m/z 799,使總離子和選擇離子色譜圖放到一塊,右鍵拖拉定量的色譜通道（799.40）就可以將保留時間和定量離子自動輸入。在如下界面給化合物命名，選擇濃度輸入列，保留時間窗等。,現(xiàn)在就可以另存定量方法了（123.Mdb），存到當前項目文件的Meth DB文件夾中就可以了。,B、下面舉例說明如何建立標準曲線：在樣品列表中涂黑3個濃度點的標樣文件，注意將樣品 類型選為Standard并輸入相應濃度。,點擊 quantify 下面的 process,選擇前面的兩項：積分樣

18、品，形成校準曲線（在形成標準曲線時不選擇Quantify Samples）,在這里選擇定量用的方法和定量用的曲線,在Quantify界面中就可以看到標準曲線了：在Display中選擇Curve就可（如果為單點校準曲線則需要選 擇過零點）。,在display中選擇要顯示的內(nèi)容：曲線curve和定量信息summary window,以下為定量曲線及曲線相關(guān)信息，點擊鍵，我們可以依次看到不同化合物的定量曲線。,C、在標準曲線形成后我們就可以定量未知化合物濃度了。涂黑要定量的樣品行，并在樣品類型 中選擇Analyte就可以開始定量了。,選擇積分樣品和定量樣品選項在定量未知樣品時在下面的圖中選擇Quan

19、tify Sample，不選擇Calibrate Standards。選擇正確的定量方法和定量曲線就可以定量了。,在Quantify界面的display中選擇show summary window就可以顯示未知化合物的積分面積及含量了。在conc中可以看到計算結(jié)果 10.37,如何進行單點外標法,鏈接用文件 ，在這個文件夾中屏幕動畫單點-平均響應因子法單點-平均響應因子法.html,8 如何進行普庫搜索（扣除背景）,如果想要觀察8.23min化合物的質(zhì)譜圖，就需要局部放大,點擊背景扣除：需要輸入信號和噪音的區(qū)段（實際為掃描區(qū)段）,右鍵選擇信號區(qū)段,右鍵選擇噪音區(qū)段,點擊ok就會進行扣除計算,9

20、58到964的質(zhì)譜圖平均（樣品）后減掉931935的質(zhì)譜圖（背景）。之后點擊檢索即可。,為什么普庫搜索匹配率不好,質(zhì)量偏移：進行質(zhì)量校準 調(diào)機不夠理想：重新進行調(diào)機 譜庫搜索條件設(shè)定不合適：重新設(shè)定,9 維護信息：如何更換燈絲,如果肉眼不容易確定燈絲是否已經(jīng)熔斷，可以采用萬用電表的電阻檔測量。如下：應該都能聽到電路通路的鳴叫。,卸掉真空，拿出EI插拔源,正確的方向,采用隨機專用的內(nèi)六角扳手旋松燈絲的銅腳,將銅腳上到新的燈絲上，方向要對,10 附加內(nèi)容手動調(diào)諧的幾個內(nèi)容,改變質(zhì)量分辨率對峰形的影響：高質(zhì)量分辨率14.1時,改變質(zhì)量分辨率對峰形的影響：高質(zhì)量分辨率10時（質(zhì)量分辨率變差）,Ion

21、energy ramp 3.0 時：高質(zhì)量端靈敏度提高（分辨率下降）,12 附加內(nèi)容如何更換氣質(zhì)聯(lián)機真空油,什么時候換油,油的顏色變深。 機械泵的聲音變大。,換油時儀器要卸掉真空,在這里觀察油位,擰開此處，放掉舊油（需要將機械泵墊高。,擰開此處，倒入新油。要用專用EDWARD真空油。,13 安裝色譜柱,長度要正確,色譜柱斷到源中時，應如何處理？,14 有關(guān)關(guān)機,注意：在源溫和傳輸線溫度到達100度以下，再卸真空，否則會使真空腔氧化。源溫和傳輸線溫度下降較慢，要留有充分的時間。,正確的開機關(guān)機程序,檢查儀器的硬件是否全部聯(lián)好，確認He鋼瓶的不銹鋼供氣管道無泄露后，將He鋼瓶上的主閥開足，再調(diào)節(jié)輸

22、出減壓閥上有70psig（約0.5MPa）He供氣壓力（ppc的配置）。 按此順序即計算機、打印機、GC和TurboMass打開其電源開關(guān)。待GC自檢程序結(jié)束，進入Ready狀態(tài)后，再使計算機進入TurboMass主頁。 在TurboMass主頁上，用鼠標按動 圖標，進入Tune頁面。 在Tune頁面上，選擇Other中下拉式菜單的pump項啟動抽真空的軟件，同時可觀察和聽到前級泵與渦輪分子泵的啟動情況和正常的運轉(zhuǎn)聲響。 大約需要3分鐘就能使渦輪分子泵達到全速的80%，此時所連接的繼電器打開，就能正常操作質(zhì)譜。 按動真空規(guī) 圖標，從Pirani規(guī)上應見到從FAIL到OFF，并在30秒鐘內(nèi)開始有讀數(shù)。 注意：如果在3分鐘后Pirani規(guī)還沒有讀數(shù)，整個系統(tǒng)沒有啟動，表明系統(tǒng)有嚴重漏氣，應立 即關(guān)閉整個抽真空的軟件，以避免渦輪分子泵出現(xiàn)故障。 通常在2分鐘之內(nèi)，即可看到Pirani規(guī)達到其低真空讀數(shù)的極限值，而渦