1、,南京曉莊學(xué)院 生命科學(xué)系實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心,實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞膜的滲透性,指導(dǎo)教師：吳雨龍 上課班級(jí)：,1. 了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機(jī)制。 2. 了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障，是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。 將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這種現(xiàn)象稱為溶血。,二、實(shí)驗(yàn)原理：,將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細(xì)胞膜對(duì)各種溶質(zhì)的通透性不同，有的溶質(zhì)可進(jìn)入，有的溶質(zhì)不能進(jìn)入，進(jìn)入紅細(xì)胞的溶質(zhì)能提高紅細(xì)胞的滲透壓，使水進(jìn)入

2、紅細(xì)胞，引起溶血。由于溶質(zhì)透入速度不同，溶血時(shí)間也不同，因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時(shí)間長短可作為測(cè)量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)選用紅細(xì)胞作為細(xì)胞膜透性的實(shí)驗(yàn)材料，將其放入不同的介質(zhì)溶液中，觀察紅細(xì)胞的變化。,二、實(shí)驗(yàn)原理：,1. 器材： 50ml燒杯、10ml移液管、滴管、試管12支、試管架 2. 試劑： 0.9%生理鹽水； 2種低滲溶液：0.017mol/L氯化鈉和0.032mol/L葡萄糖；10種等滲溶液：0.17mol/L氯化鈉、0.32mol/L葡萄糖、0.17mol/L氯化銨、0.17mol/L醋酸銨、0.17mol/L硝酸鈉、0.12mol/L草酸銨、0.12mol/L硫酸鈉

3、、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮。 3. 兔血,三、實(shí)驗(yàn)材料：,1. 兔紅細(xì)胞懸液的制備： 取50ml小燒杯一只，加1份兔血和10份0.17mol/L氯化鈉溶液，形成一種不透明的紅色液體，此即稀釋兔血。,四、實(shí)驗(yàn)步驟：,2. 溶血現(xiàn)象的觀察： 取試管2支，分別加入0.017mol/L氯化鈉和0.032mol/L葡萄糖低滲溶液5ml ，再加入0.5ml制備好的兔紅細(xì)胞懸液，注意觀察溶液顏色的變化，由不透明的紅色懸液變成透明的血紅蛋白溶液（紅細(xì)胞發(fā)生破裂，造成100%紅細(xì)胞溶血，使光線比較容易透過溶液）。,四、實(shí)驗(yàn)步驟：,3. 紅細(xì)胞的滲透性 （1）取試管一

4、支，加入0.17mol/L氯化鈉溶液5ml，再加入0.5ml制備好的兔紅細(xì)胞懸液，輕輕搖動(dòng)，混勻后靜置于溫室中，觀察試管中發(fā)生溶血的時(shí)間及其變化。 注意是否有顏色變化？是否有溶血現(xiàn)象？為什么？,四、實(shí)驗(yàn)步驟：,（2）分別在下列幾種等滲溶液中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，步驟同（1）。 0.32mol/L葡萄糖 0.17mol/L氯化銨 0.17mol/L醋酸銨 0.17mol/L硝酸鈉 0.12mol/L草酸銨 0.12mol/L硫酸鈉 0.32mol/L甘油 0.32mol/L乙醇 0.32mol/L丙酮,四、實(shí)驗(yàn)步驟：,1、離心機(jī)使用時(shí)，要將配平后的離心管對(duì)稱放置在離心機(jī)內(nèi)，禁止未配平就放入離心機(jī)和非對(duì)稱放置離心管。 2、試管中有紅細(xì)胞和測(cè)試溶液時(shí)，不應(yīng)強(qiáng)力搖晃，以免造成人為的紅細(xì)胞破裂。 3、目測(cè)