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1、實(shí) 驗(yàn) 綠葉中色素的提取和分離,【實(shí)驗(yàn)原理】 1.提?。壕G葉中的色素溶于有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇而不溶于水,可用無(wú)水乙醇提取色素。 2.分離:各種色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快,反之則慢,從而使各種色素相互分離。,【實(shí)驗(yàn)步驟】 提取色素:稱(chēng)取5 g綠葉,剪碎,放入研缽中,加入 少量二氧化硅、碳酸鈣和10mL無(wú)水乙醇 研磨過(guò)濾收集到試管內(nèi)并塞嚴(yán)試 管口 制備濾紙條:將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長(zhǎng) 與直徑的濾紙條,將濾紙條一端剪去 兩角,在距離剪角一端1 cm處用鉛筆 畫(huà)一條細(xì)的橫線,畫(huà)濾液細(xì)線:用毛細(xì)吸管吸取少量的濾液,沿鉛筆 線均勻地畫(huà)一條細(xì)線,待濾液干后, 再畫(huà)一兩次
2、 分離色素:將適量的層析液倒入試管中,裝置如圖 所示,濾液細(xì)線,層析液,觀察結(jié)果:濾紙條上呈現(xiàn)四條顏色、寬度不同 的色素帶,如圖所示,橙黃色,葉黃素,葉綠素a,最多,黃綠色,1.為什么需要選用新鮮綠色的葉片做實(shí)驗(yàn)材料? 提示:新鮮綠色的葉片中色素含量高,從而使濾液 中色素含量較高,實(shí)驗(yàn)效果明顯。 2.為什么研磨時(shí)要迅速?為什么研磨時(shí)要加入少量的CaCO3和SiO2? 提示:(1)葉綠素不穩(wěn)定,易被破壞,因此研磨要迅 速、充分,以保證提取較多的色素。 (2)二氧化硅破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),使研磨充分。 (3)碳酸鈣可防止研磨過(guò)程中色素被破壞。,3.色素提取液呈現(xiàn)淡綠色的原因可能有哪些? 提示:(1)葉片顏
3、色太淺。(2)綠葉不新鮮。(3)研磨不充分。(4)未加碳酸鈣或加入量太少。(5)加入無(wú)水乙醇量太多。 (6)研磨時(shí)間過(guò)長(zhǎng),部分葉綠素被破壞。,4.為什么在制作濾紙條時(shí),需將一端的兩個(gè)角剪掉? 提示:由于液面的不同位置表面張力不同,紙條接近液面時(shí),其邊緣表面的張力較大,層析液沿濾紙邊緣擴(kuò)散過(guò)快,從而導(dǎo)致色素帶分離不整齊的現(xiàn)象。故需將插入層析液的濾紙條一端剪去兩個(gè)角。,5.為什么濾液細(xì)線要重復(fù)畫(huà),且線要細(xì)、直? 提示:重復(fù)畫(huà)線是為了增加色素的濃度,使分離出的色素帶清晰分明。畫(huà)線細(xì)、直是為了防止色素帶之間出現(xiàn)重疊。 6.層析時(shí),為什么不能讓濾液細(xì)線觸及層析液? 提示:濾紙條上的濾液細(xì)線觸及(或沒(méi)入)層析液,會(huì)使濾液中的色素溶解于層析液中,濾紙條上得不到色素帶,使實(shí)驗(yàn)失敗。 7.濾紙條上色素帶寬窄不同的原因有哪些? 提示:不同種類(lèi)的色素
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