濕熱滅菌驗主方案 文件號：文件號：Q/JHB-ZG068-Q/JHB-ZG068- 版本號：第版本號：第 A A 版版 頁頁 碼：第碼：第 1 1 頁頁 共共 2626 頁頁 濕熱滅菌驗主方案 驗證方案的審批驗證方案的審批 項目項目 （ItemsItems） 內容（內容（ContentContent） 姓名姓名 （Name） 部門部門/ /職位職位 （Dep./Post） 簽名簽名 （Signatur e） 日期日期 （Date） 起草人起草人 （Prepared by） QCQC 審核人審核人 (Reviewed by) 梁召權梁召權設備部設備部 審核人審核人 (Reviewed by) 柴景明柴景明質量部質量部 批準人批準人 (Approved by) 于紅梅于紅梅質量負責人質量負責人 河北金環(huán)包裝有限公司河北金環(huán)包裝有限公司 目目 錄錄 1 目的3 2 范圍3 3 概述3 4 驗證類別5 5 驗證前準備5 5.1 驗證人員及職責 5 5.2 驗證引用文件的確認 6 5.3 儀器儀表校驗的確認 6 6 驗證內容及合格標準7 6.1 相關條件的確認 7 6.2 驗證步驟 8 6.3 驗證合格標準 .10 6.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析 .11 7 偏差分析.11 8 變更處理.11 9 驗證結論及評價11 10 再驗證周期11 11 文件修訂12 12 附錄及附表12 1 目的 本驗證是為了確認滅菌器的各種功能可以達到生產(chǎn)要求，設備能夠在預定的操作 范圍之內穩(wěn)定運行，其性能滿足生產(chǎn)工藝的要求。 2 范圍 本驗證范圍是確認微生物實驗室滅菌柜能夠滿足生理鹽水、微生物檢測用具等物 品的滅菌要求，此次驗證主要包括空載熱分布測試、滿載熱分布測試、滿載熱穿透實 驗。 此驗證方案計劃于 2014 年 1 月 17 日-10 月 25 日給予實施。 3 概述 3.1 設備描述 設備名稱壓力蒸汽滅菌器設備編號 制造商 合肥華泰醫(yī)療設 備有限公司 滅菌容積150L 安裝地點材質 設備結構描述 設備主要由主體、密封圈、滅菌筐、加熱盤管幾部分組成。 最高工作壓力0.165MPa 額定工作溫度125 熱均勻度1 電源電壓220V50Hz 主要技術參數(shù) 電熱管功率45KW 工作原理描述 預熱階段：將水溫升至 100。 升溫階段：放入物品后繼續(xù)加熱，使柜內溫度逐漸升高。 滅菌階段：升溫至設定值后，保持一定時間滅菌。 冷卻階段：排放內部蒸汽。 結束：當柜內壓力達到安全壓力時，工作結束。 主要用途 用于*等物品的滅菌。 3.2 滅菌程序描述 滅菌程序采用不低于 121，30min。濕熱滅菌程序包括以下階段或步驟： 通飽和蒸汽； 加熱； 滅菌； 冷卻。 實現(xiàn)滅菌的三個重要條件分別是：溫度，時間和飽和蒸汽。 典型的滅菌 Tt 曲線如下： 3.3 驗證方法學描述 3.4 D、Z、F0值 D 值是微生物的耐熱參數(shù)，是指在一定溫度下將微生物殺滅 90%，即使之下降一個 對數(shù)單位所需的時間。D 值越大，微生物耐熱性越強。 Z 值是滅菌溫度系數(shù)，是指某一種微生物的 D 值變化一個對數(shù)單位，滅菌溫度應升 高或下降的度數(shù)。其描述的是微生物對溫度變化的敏感程度，Z 值越大，微生物對溫度 變化的敏感程度越弱；通常 Z 取 10。 F0值為 121下的標準滅菌時間。滅菌采用過度殺滅（Over Kill）的概念，即 F030。非 121時的 F0值按下公式進行計算： Z T F 121 0 10t ：滅菌時間； t Z：滅菌溫度系數(shù)，Z 通常取 10； 3.5 工藝參數(shù)設定 項目溫度/運行時間 空載熱分布測試121/30min 滿載熱分布測試121/30min 滿載熱穿透測試及微生物挑戰(zhàn)測試121/30min 4 驗證類別 再驗證 5 驗證前準備 5.1 驗證人員及職責 5.1.1 QC 5.1.1.1 負責起草、審核驗證方案和報告；負責對參與驗證的所有人員進行方案的培訓， 確定所有人員有能力實施本方案。 5.1.1.2 按照驗證方案執(zhí)行驗證，收集驗證數(shù)據(jù)并分析、總結報告； 5.1.1.3 負責記錄驗證執(zhí)行過程中出現(xiàn)的所有偏差，對關鍵的偏差應調查，在偏差關閉 之前不得執(zhí)行隨后的驗證工作。 5.1.2 質量部 5.1.2.1 負責審核驗證方案和報告； 5.1.2.2 負責驗證過程樣品的檢測。 5.1.2.3 負責審核方案和驗證報告； 5.1.2.4 參與驗證過程偏差的調查； 5.1.2.5 負責驗證技術支持； 5.1.2.6 負責對環(huán)境進行監(jiān)測； 5.1.3 質量負責人 5.1.3.1 負責批準驗證方案和報告。 5.1.2 驗證小組成員及分工 姓名部門 在本驗證 小組中擔 任的職務 崗位職責 柴景明 質管部組長 負責方案的起草，對驗證方案進 行培訓并組織實施。 質管部組員質微生物檢驗員 負責設備運行前各項目檢查及設 5.1.3 人員資格審查及方案培訓的確認 本驗證小組所有成員在驗證之前應接受相關的培訓，如驗證方案、設備操作 SOP、 安全注意事項等，并有記錄。培訓記錄見附表 1人員培訓記錄 。 審查項目審查方法存放地點 人員培訓檔案檢查職工培訓記錄卡職工檔案 驗證方案的培訓記錄檢查培訓記錄卡驗證報告 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 5.2 驗證引用文件的確認 5.2.1 審查項目、審查方法、接受標準 審查項目審查方法接受標準 文件的審批檢查文件文件經(jīng)有資格的人員起草、審核和批準 文件的執(zhí)行檢查文件文件在執(zhí)行期內 5.2.2 驗證引用文件的確認 序 號 文件/資料名稱文件編碼執(zhí)行日期版本號 1濕熱滅菌標準操作規(guī)程 3*滅菌標準操作規(guī)程 4 潔凈服、潔凈鞋滅菌標準 操作規(guī)程 5藥品生產(chǎn)驗證指南 2003 6驗證管理標準 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 5.3 儀器儀表校驗的確認 5.3.1 審查項目、審查方法、接受標準 審查項目審查方法接受標準 校驗記錄儀器儀表校驗記錄儀器儀表都經(jīng)過了校驗，且都在校驗期內、 備運行的操作。 質量部組員負責生物指示劑的培養(yǎng)檢測。 王瑩質量部組員監(jiān)督過程的實施，并負責取樣 及其校驗合格證校驗結果為合格。 儀器儀表校驗的確認見附表 2儀器儀表校驗記錄 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6 驗證內容及合格標準 6.1 相關條件的確認 6.1.1 設備確認 6.1.1.1 檢查方法：確認設備安裝位置及安裝牢固性，各附件完整性，檢查設備密封圈 密封性能及滅菌器各接口處密封是否良好。 6.1.1.2 接受標準：設備安裝位置正確，安裝牢固，各附件完整，密封圈密封性能及滅 菌器各接口處密封良好，均符合技術參數(shù)要求和工藝要求。 6.1.1.3 測試記錄：見附表 3設備確認記錄 。 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.1.2 公用設施連接確認 6.1.2.1 檢查方法：檢查滅菌柜是否連接電源、水源、管路開關等設施。 6.1.2.2 接受標準：均已連接。 6.1.2.3 測試記錄：見附表 4公用設施連接檢查記錄 。 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.1.3 清洗確認 6.1.3.1 檢查方法：要求用不脫落纖維的已清潔的抹布擦拭滅菌器內部。 6.1.3.2 接受標準：清潔部位光亮，用潔凈抹布擦拭無黑點等異物。 6.1.3.3 測試記錄：見原始記錄濕熱滅菌器清潔記錄 。 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.1.4 水位檢查。 6.1.4.1 檢查方法：查看滅菌器內水位是否在現(xiàn)位器以上，以確認滅菌柜使用的水源是 否合格。 6.1.4.2 可接受標準：水位在現(xiàn)位器以上。 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.1.5 生物指示劑確認 6.1.5.1 可接受標準：指示劑在有效期內；每支指示劑含芽孢不少于 1106。 6.1.5.2 確認記錄 名稱生產(chǎn)批號有效期至含芽孢量D 值生產(chǎn)廠家 嗜熱脂肪芽孢 桿菌孢子生物指 示劑 （ATCC7953） 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.2 驗證步驟 6.2.1 空載程序驗證 6.2.1.1 空載熱分布測試 （1）將 12 支留點溫度計入滅菌室內。 （2）一支留點溫度計放在溫度控制傳感器旁，其 于留點溫度計 均置于腔室各處 （留點溫度計 分布見下圖） ，留點溫度計 的測溫點不得與金屬其他表面接觸。 探頭分布整體透視圖 其他分布點的具體位置如上圖所示： （3） 啟動滅菌器 ，達到滅菌溫度后， 溫度應不低于 121，運行 30min。 （4）滅菌結束降溫后，取出溫度計記錄數(shù)據(jù)分析，如果符合空載熱分布 測試的 標準，依照此操作程序進行其余兩次測試。 （5）測試見附表 7空載熱分布測試記錄 。 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.2.1.2 滿載熱分布測試 （1）最大裝載量的確認 : 裝載方式：無菌服；（8 件/包） ；細布 20 塊、*。 正視圖 15 前門 后門 門 13 3 14 4 57 6 8 9 11 10 12 1 2 16 卸載側 A 層/俯視圖 A 層 B 層 C 層 （2）滿載熱分布測試 A、在滅菌器中按最差裝載方式放入*物品，把 12 支留點溫度計按照熱分布探頭布 局圖（照片見附表 16）所示放入室內。 B、啟動滅菌器，達到滅菌溫度后，溫度應不低于 121，運行 30min。 C、滅菌結束降溫后，取出溫度計記錄數(shù)據(jù)并分析，如果符合滿載熱分布測試的標準， 依照此操作程序進行其余一次測試。 D 見附表 8滿載熱分布測試記錄 。 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 6.2.1.3 熱穿透實驗 (1）打開滅菌器，按照指定的最差裝載方式將被滅菌物品放置在腔室中，隨后將 12 個 溫度計按預先確定的布點圖，放置在被滅菌物品內部，同時每只溫度計上放置一個生 物指示劑，其中在最差裝載條件下得出的冷點位置放置兩個生物指示劑，上蓋密封。 (2） 使用嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑 Bacillus stearothermophilus。 (3）啟動滅菌器，達到滅菌溫度后，溫度應不低于 121，運行 30min。 (4）滅菌結束，待冷卻后，立即取出所有生物指示劑，進行微生物培養(yǎng)。 (5）分別在嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度 55-60，24h 后、48h 后及 7 天后記錄指示劑變化情況，并記錄，同時取一支未經(jīng)處理的生物指示劑 作為陽性對照。 (6）培養(yǎng)后的生物指示劑如有任何一支指示劑變黃，則表明有細菌生長，如果顏色沒 有變化，則表明滅菌有效。 (7）滅菌結束降溫后，取出溫度計記錄數(shù)據(jù)并分析。 (8）見附表 9-11滿載熱穿透測試記錄 、 生物指示劑測試記錄 生物指示劑孢子數(shù) 量確認記錄 。 結論： 確認人/日期： 6.2.1.4 滅菌后物品質無菌檢查 （1）測試程序：滿載測試時，每次選取接近滅菌柜最冷點的物品兩套。同時將上述三 批物品放置至有效期（24 小時）后，再進行一次無菌檢查。 （2）檢查方法 A、滅菌后檢查：按照潔凈區(qū)微生物監(jiān)測標準操作規(guī)程對滅菌后的物品進行菌落檢 查。接觸面積 2430cm2，迅速蓋好蓋，放入 3035倒置恒溫培養(yǎng) 72 小時，同時取 三個空白雙碟做陰性對照，計菌落數(shù)，填寫物品菌落檢測記錄。 B、有效期檢查：將物品存放在* 級下，放置 24 小時后取出，按照按照潔凈區(qū)微 生物監(jiān)測標準操作規(guī)程進行檢測，樣品編號分別為（A24、）。 C 標準：滅菌后及放置到有效期后的物品菌落數(shù)為 0，檢查合格率 100%。空白培養(yǎng)基 對照均無菌生長。 D、見附表 12-13物品菌落檢測記錄 、 物品菌落檢測記錄 結論： 確認人/日期： 復核人/日期： 復核人/日期： 6.3 驗證合格標準 項目溫度/運行時間 保壓實驗壓力達到 0.15MPa,保持 15min，密封圈無泄 漏。 連續(xù)三次空載熱分布溫度計全部在 121123，滅菌時間 30min，滅菌溫度波動2，滅菌溫度均 勻性1。 連續(xù)三次滿載熱分布溫度計全部在 121123，滅菌時間 30min，滅菌溫度波動2，滅菌溫度均 勻性1。 連續(xù)三次滿載熱穿透實驗及生物指示劑 實驗 各點溫度均在 121.1以上，滅菌時間 30min，F(xiàn)o 值30min。 在 55-60下嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指 示劑培養(yǎng) 7 天后，指示劑不變色，對照樣在 24h 內，指示劑變黃色。 滅菌后物品無菌檢查滅菌后及放置到有效期后的物品菌落數(shù)為 0，檢查合格率 100%?？瞻着囵B(yǎng)基對照均無 菌生長。 6.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析 對驗證結果進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析確認脈動真空滅菌柜測試符合要求。 7 偏差分析 對驗證過程中所發(fā)生的偏差進行處理和分析，并制定糾正預防措施，必要時要重 新進行驗證。如有偏差，要完成偏差處理與分析報告表。見附表 15。 在驗證過程中如果出現(xiàn)個別項目的不合格情況，應該對不符合項進行偏差分析， 找出原因進行整改。對不符合項重新確認。 在檢測過程中如果出現(xiàn)檢測項目不合格的情況，認真分析原因，如果屬系統(tǒng)問題， 進行整改，整改后重新驗證。如果是取樣或化驗原因，重新取樣對不合格的指標重新 化驗。 結論： 評價人/日期： 8 變更處理 本方案在實施過程中如發(fā)生變更，應將與變更有關的所有信息記錄下來，并進行 分析與評價，填寫驗證變更申請表。見附表 16。 結論： 評價人/日期： 9 驗證總結及評價 通過對滅菌器性能的檢測結果進行數(shù)據(jù)分析總結，確認滅菌器及輔助系統(tǒng)的每一 部分功能都能達到生產(chǎn)工藝要求，由驗證小組組長對驗證過程及結果進行綜合評價， 評價所要驗證的內容是否已達到驗證合格標準，驗證結論是否有效。確定本次驗證的 結論。 結論 評價人/日期： 10 再驗證周期 滅菌器驗證周期為 1 年；發(fā)生以下變更時，需要再驗證： （1）設備更換、改造或大修后；滅菌工藝發(fā)生改變； （2）滅菌物品發(fā)生改變； （3）滅菌物品裝載形式、裝載量發(fā)生變化。 11 文件的修訂 根據(jù)本方案實施過程中所發(fā)現(xiàn)的問題，對相應的 SOP 進行補充和完善，補充及完 善的內容列入下表中。 文件編號文件名稱修訂內容 12 附表及附錄 附表清單 序號編號名稱 1培訓確認表 2儀表校驗檢查記錄 3設備確認記錄 4泄漏測試記錄 5空載熱分布測試記錄 6滿載熱分布測試記錄 7滿載熱穿透測試記錄 8生物指示劑測試記錄 9生物指示劑孢子數(shù)量確認記錄 10物品菌落檢測記錄 11物品菌落檢測記錄 12偏差處理與分析報告 13驗證變更申請表 附表 1 培訓確認表 培訓確認表 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 主講人日期 培訓 內容 參加人員： 確認內容 該驗證所有參與成員均經(jīng)過了培訓且能勝任本次驗證工作 是 否 備注： 確認人/日期 附表 2 儀表校驗檢查記錄 儀表校驗檢查記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 儀表名稱型號編號有效期至檢查結果檢查人檢查日期 溫度傳感器 壓力變送器 溫度驗證儀 附表 3 設備確認記錄 設備確認記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 檢查項目檢查方法檢查結果檢查人檢查日期 設備型號檢查設備銘牌是 否 設備定位檢查滅菌器安裝地點和位置，在* 是 否 材質 該蒸汽滅菌柜，采用 316L 不銹鋼材料制作， 密封圈材料為硅橡膠 是 否 外觀確認機器外觀是否良好，無缺陷和損壞 是 否 操作與維護有足夠的空間進行操作和維護 是 否 加熱形式電加熱 是 否 加熱功率按說明書技術參數(shù) 是 否 儀表型號能滿足工藝要求 是 否 動力電源三相四線、接地良好 是 否 附表 5 泄漏測試記錄 泄漏測試記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 測試日期 開始時間 t1 開始壓力 P1 結束時間 t2 結束壓力 P2 泄漏率 P2- P1 t2 - t1 標準泄漏率標準：保壓 15min,每分鐘不得超過 0.13Kpa 檢查人/日期復核人/日期 附表 7 空載熱分布測試記錄 空載熱分布測試記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 共運行 3 次第（ ）次運行驗證程序 日期溫度設定點 熱電偶編號 開始時間滅菌開始時間 結束時間滅菌結束時間 總時間滅菌總時間 滅菌階段熱溫度計 最低溫度 滅菌階段熱溫度計 最高溫度 最低溫度熱溫度計位置最高溫度熱溫度計位置 確認內容 全部熱溫度計溫度在 121-123是 否 滅菌時間30min是 否 每個測試點溫度波動2是 否 保溫期間測試點與平均值之間溫度差1是 否 備注： 確認人確認日期 復核人復核日期 附表 8 滿載熱分布測試記錄 滿載熱分布測試記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 滿載熱分布項目 第一次第二次第三次 預熱時間 滅菌開始時間 滅菌結束時間 開機溫度（） 滅菌溫度（） 相 關 數(shù) 據(jù) 驗證時間 最高溫度（） 熱電偶位置 最低溫度（） 熱電偶位置 驗 證 數(shù) 據(jù) 滅 菌 段 溫差（） 確認內容 全部熱電偶溫度在 121-123是 否 滅菌時間30min是 否 每個測試點溫度波動2是 否 保溫期間測試點與平均值之間溫度差1是 否 備注： 確認人確認日期 復核人復核日期 附表 9 滿載熱穿透測試記錄 滿載熱穿透測試記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 （ ）程序 滿載熱分布項目 第一次第二次第三次 預熱時間 滅菌開始時間 滅菌結束時間 開機溫度（） 滅菌溫度（） 相 關 數(shù) 據(jù) 驗證時間 最高溫度（） 溫度計位置 最低溫度（） 溫度計位置 溫差（） 最小 Fo 值 驗 證 數(shù) 據(jù) 滅 菌 段 熱電偶位置 生物指示劑實驗選點 確認內容 全部溫度在 121-123是 否 滅菌時間30min是 否 每個測試點溫度波動2是 否 保溫期間測試點與平均值之間溫度差1是 否 Fo 值30min是 否 備注： 確認人確認日期 復核人復核日期 附表 10 生物指示劑測試記錄 生物指示劑測試記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁共 1 頁 共運行 3 批 （ ）程序 第（ ）次運 行 生物指示劑名稱 生物指示劑批號 有效期至 每片孢子數(shù)量 D 值 生物指示劑生產(chǎn)廠家 生化培養(yǎng)箱設備編號 檢驗條件要求：55-600C；培養(yǎng) 7 天。 滅菌合格標準：指示劑無變色。 滅菌不合格：指示劑變?yōu)辄S色 培養(yǎng)溫度： 0C； 陽性對照 24 小時內是否變黃色 是 否 培養(yǎng)時間 日 時 分- 日 時 分 樣品顏色 不變色：- 變色：+ 指示劑編號24 小時48 小時168 小時 對照 指示劑編號24 小時48 小時168 小時指示劑編號24 小時48 小時168 小時 檢查人檢查日期 復核人復核日期 附表 11 生物指示劑孢子數(shù)量確認記錄 生物指示劑孢子數(shù)量確認記錄 編號： 版本號：00 第 1 頁 共 1 頁 日期 生物指示劑名稱 生物指示劑批號 生產(chǎn)廠家 有效日期 使用部門 熱處理溫度 熱處理時間自 ： 至 ： ，共 分鐘 培養(yǎng)基名稱 培養(yǎng)基批號 0