畢 業(yè) 論 文 （本科生） 中文標(biāo)題 雌雄銀杏根、莖、葉的顯微觀察 英文標(biāo)題 學(xué)生姓名 高慶劍 指導(dǎo)教師 馬志剛 學(xué) 院 藥學(xué)院 專 業(yè) 藥學(xué) 年 級(jí) 2007 級(jí) 蘭州大學(xué)教務(wù)處 高慶劍：雌雄銀杏的根、莖、葉 誠信責(zé)任書 本人鄭重聲明：本人所呈交的畢業(yè) 論文（設(shè)計(jì)） ，是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。畢業(yè) 論文（設(shè)計(jì)） 中凡引用他人已經(jīng)發(fā)表或未發(fā)表的成果、數(shù)據(jù)、觀點(diǎn)等，均已明確注明出處。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，不包 含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或在網(wǎng)上發(fā)表的論文。 特此聲明。 論文作者簽名： 日 期： 高慶劍：雌雄銀杏的根、莖、葉 1 目錄 摘要 . 1 英文摘要 . 2 第一章 前言 . 3 1 銀杏概況 . 3 銀杏 . 3 銀杏 . 3 銀杏 . 3 銀杏 . 3 銀杏 . 4 銀杏 . 4 銀杏 . 4 銀杏 . 4 2 甘肅銀杏的資源調(diào)查和雌、雄銀杏植物體形態(tài)學(xué)區(qū)別及意義 . 4 資源調(diào)查 . 4 雌、雄銀杏植物體形態(tài)學(xué)區(qū)別 . 5 樹枝的形態(tài)區(qū)別 . 5 樹形區(qū)別 . 5 葉片形狀的區(qū)別 . 5 3 本課題的重要意義 . 5 第二章 實(shí)驗(yàn)部分 . 6 1 實(shí)驗(yàn)材料、儀器、試劑 . 6 實(shí)驗(yàn)材料 . 6 儀器 . 6 試劑 . 6 2 實(shí)驗(yàn)方法 . 6 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論 . 7 1 雌銀杏 . 7 雌銀杏根 . 7 雌銀杏莖 . 7 雌銀杏葉 . 8 2 雄銀杏 . 9 雄銀杏根 . 9 雄銀杏莖 . 9 雄銀杏葉 . 9 3 雌雄銀杏的比較 . 10 4 小結(jié)與討論 . 11 草酸鈣簇晶 . 11 分泌腔 . 11 參考文獻(xiàn) . 12 致謝 . 13 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 1 雌雄銀杏的根、莖、葉的顯微觀察 學(xué)生： 高慶劍 指導(dǎo)老師 :馬志剛教授 （蘭州大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000） 摘要： 目的：通過觀察 雌雄銀杏根、莖、葉的顯微構(gòu)造，比較雌雄顯微結(jié)構(gòu)的不同之處。方法 : 應(yīng)用來源、性狀、顯微及理化鑒別等方法。結(jié)果：雌雄銀杏根莖葉的顯微結(jié)構(gòu)有所差別，詳細(xì)描述了其橫切片顯微特征。 結(jié)論：雌雄銀杏的根、莖、葉有所差別，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為該藥的鑒別、開發(fā)利用及補(bǔ)充生藥學(xué)資料提供參考依據(jù)。 關(guān)鍵詞 : 根；莖；葉；顯微特征；區(qū)別 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 2 730000) o of of he of he a of of be 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 3 第一章 前 言 1 銀杏概況 銀杏 (.)又名公孫樹、平仲樹、白果樹，雌雄異株植物，落葉喬木， 是裸子植物門銀杏綱銀杏科銀杏屬植物，為我國稀有的珍貴樹種 。銀杏樹 5 月開花， 10 月成熟，果實(shí)為橙 黃色核果。銀杏屬于現(xiàn)存裸子植物中最古老的孑遺植物之一。銀杏姿態(tài)優(yōu)美，苗體高大，是非常理想的園林綠化、景觀園林樹種，與松、柏、槐并列為中國四大長(zhǎng)壽觀賞樹種。 杏 銀杏樹為落葉喬木，高約 40m，直徑可至 4m，幼年樹皮較平滑，大樹之皮呈灰褐色，有長(zhǎng)枝與發(fā)育緩慢的距狀短枝，無規(guī)則縱裂。壽命很長(zhǎng)，可達(dá)千余年，生長(zhǎng)比較慢。銀杏樹高大挺拔，葉似扇形，葉形古雅，是著名的無公害樹種。 杏 銀杏最早出現(xiàn)于大約 炭紀(jì) ，與動(dòng)物界的 恐龍 一樣，稱霸于世。大約在50萬年前，發(fā)生了第四紀(jì) 冰川運(yùn)動(dòng) ，導(dǎo)致地球驟冷，絕大多數(shù)的銀杏類植物瀕于絕種，只有在中國奇跡般的保留下來。所以被稱之為“植物界的熊貓”、“活化石”。至今，只有在我國的四川、浙江、云南等少數(shù)省份還保留著少量幸存的的銀杏樹，因此可以說 :“銀杏起源于中國” 1,2。 杏 - 觀賞價(jià)值 銀杏具有很好的觀賞價(jià)值，銀杏樹干通直，造型獨(dú)特，春夏翠綠，深秋金黃，姿態(tài)優(yōu)美，給人以華貴典雅、俊俏雄奇之感。銀杏樹是著名的長(zhǎng)壽樹種，銀杏樹制作的銀杏盆景，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和觀賞價(jià)值。銀杏盆景干粗、根露、枝曲、古特幽雅、妙趣橫生，是中國盆景中的一絕。 杏 - 經(jīng)濟(jì)價(jià)值 銀杏是中國特有而豐富的植物經(jīng)濟(jì)資源。隨著銀杏研究的不斷深入 和研究 范圍的擴(kuò)大，又發(fā)現(xiàn) 了 銀杏葉 的 提取物還具有改善、增強(qiáng)記憶力、減肥、抗衰老美容、補(bǔ)充體內(nèi)各種維生素等保健功效 。 由于 在 銀 杏葉中 ，有 些活性成分具有 特殊 的調(diào)節(jié)功能 和 生理作用，世界上 許多 國家把銀杏葉 的 制劑開發(fā) 作為 重點(diǎn) ，逐漸 從藥用 的 研究 范疇 擴(kuò)展到保健、 食品 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 4 添加劑 等方面， 而 且己經(jīng)取得了 大量的 重要成果 3。 杏 - 生態(tài)價(jià)值 據(jù)科學(xué)測(cè)定，銀杏是抗城市中大氣污染能力最強(qiáng)的第二類樹種。銀杏的枝和葉富含水分， 樹皮 具有栓質(zhì)層，不容易燃燒，所以具有 較強(qiáng)的抗火燒能力。由于銀杏樹冠較大且蔭濃，夏季的降溫效果非常好。而且，銀杏在生長(zhǎng)季節(jié)夏季時(shí)，在銀杏樹附近， 蒼蠅 、 蚊子明顯減少。 杏 - 地區(qū)分布 銀杏在 中國 、 日本 、 美國 、 朝鮮 、 加拿大 、 韓國 等國家和地 區(qū)都有大量分布。 銀杏主要分布于中國的亞熱帶和 溫帶 的氣候區(qū)內(nèi)，邊緣分布為“東至浙江省的舟山普陀島，西抵西藏自治區(qū)的昌都，南達(dá)廣東省的廣州，東南到臺(tái)灣省的南投，北至遼寧省的沈陽”，遍及中國的 3 個(gè)直轄市和 22 個(gè)省（自治區(qū)）。 杏 - 食用價(jià)值 銀杏又稱白果，屬 干果 類。中國白果約占世界總產(chǎn)量的 90%，銀杏的葉和果是出口創(chuàng)匯的重要材料，特別是在防治 高血壓 、 心臟病 等方面，是重要的醫(yī)藥原料。銀杏葉提取物可以“捍衛(wèi)心臟，保護(hù)大腦”，同時(shí)，還用于預(yù)防和治療老年性反應(yīng)遲鈍、動(dòng)作緩慢、老年癡呆等作用 4。銀杏果中的營養(yǎng)非常豐富，極具天然的保健作用，長(zhǎng)期食用就 能達(dá)到延年益壽、延緩衰老的作用，在宋代被列為皇家貢品。 杏 - 藥用價(jià)值 銀杏的藥用價(jià)值主要表現(xiàn)在醫(yī)藥、農(nóng)藥和獸藥 3 個(gè)方面。明代李時(shí)珍在著作本才綱目中說：“銀杏氣薄、味厚，益肥氣，定咳嗽，縮小便，又能殺蟲消暑” 5。我國的清代學(xué)者張璐璐在本經(jīng)逢源中記載，由于白果有降痰、殺菌清毒、殺蟲的功能，因而可將其用于治療“瘡疥疽瘤、牙齒蟲齲、乳癰潰爛、赤白帶下、小兒腹瀉、慢性淋濁、遺精遺尿 等癥” 6。 2 甘肅銀杏的資源調(diào)查和 雌、雄銀杏植物體形態(tài)學(xué)區(qū)別 源調(diào)查 銀杏是我國特有的珍稀樹種 ， 雌雄異株 ，是 全球最古老的孑遺植物 之一。 自然界 的 被 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 5 子植物多 數(shù) 是雌雄同株，雌雄異株的植物 只 占 約 6%7，雌雄不同的同種植物 通常具 有不同的利用價(jià)值， 許多 藥用植物 的 雌雄植株在藥用 有效 成分 的 含量上有很大 的 區(qū)別 7,8。銀杏具有藥用、營養(yǎng)及保健功能 ， 也是園林綠化、行道、防風(fēng)林帶、田間林網(wǎng)的理想種植樹種。由于銀杏 葉可 以 吸收空氣中的粉塵和有毒氣體， 能夠 提供 良 好的大氣環(huán)境 ，而且銀杏的樹干虬曲、蔥郁莊重 ，因此銀杏樹成為 街道樹的最佳選擇 。 、雄銀杏植物體形態(tài)學(xué)區(qū)別 本課題 在銀杏異株的差異方面做了 相關(guān)的 文獻(xiàn)研究 ，且在 當(dāng)?shù)刈隽?一些 觀察， 希望在種植 銀杏的早期 ，可以 采用 相對(duì)較 簡(jiǎn)單的方法鑒別雌 、 雄 ，能為 合理的 銀杏 栽培布局 和銀杏 葉 的用料 資源 選擇 提供一定的參考 依據(jù)。 根據(jù)當(dāng)?shù)?的 考察 和相關(guān) 文獻(xiàn)查閱，總結(jié)了雌、雄 銀杏之 間的一些鑒別方法，如下 : 枝的形態(tài)區(qū)別 雌株 的 主枝與主干的夾角相對(duì)較大，可達(dá) 50 度 左右 ，向四周 方向 擴(kuò)展生長(zhǎng)，生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)相對(duì)于雄株處于劣勢(shì)，短枝 由于 連年 的 開花結(jié)果， 因 重力所壓等 作用 導(dǎo)致枝條延伸 的 相對(duì)較長(zhǎng) ，同時(shí) 弧度較大 9； 雄株 的 成齡樹，主枝與主干夾角 約 30 度，長(zhǎng)勢(shì)兇猛，挺直 ，短枝相對(duì)較短，一般僅 為 1 形區(qū)別 雄株 分布于 雌株同齡樹之間，雌株比雄株相對(duì)矮小， 多半 雌株的樹 形是 廣卵圓形， 因常年掛果 而 造成樹枝下垂 ;雄株形成樹冠 的 時(shí)間相對(duì)雌株 稍 早一些，樹枝 較 多而密亂， 切多數(shù) 是 塔形的樹冠形狀。 片形狀的區(qū)別 雌葉相對(duì) 較 小，葉端相對(duì) 于 雄株多為淺裂 ； 雄株 的 葉片相對(duì)雌株較大，葉 片 上 的 鋸齒較 深 。但是， 由于雄樹營養(yǎng)充足， 且 吸收豐富，葉子顏色比雌樹的 稍微 深一些，雌葉 的 秋季變色期、落葉期 都 較早，即物后期相對(duì)雄株 較 長(zhǎng) 10。 3 本課題的重要意義 銀杏是裸子植物門銀杏綱銀杏科銀杏屬植物，為我國稀有的珍貴樹種，集藥用、食用、觀賞、生態(tài)價(jià)值于一體。銀杏最主要的有效成分是黃酮和內(nèi)酯這兩大類化合物，具有重要的藥用價(jià)值，用于治療心腦血管方面的疾病，現(xiàn)在各種銀杏制劑已廣泛應(yīng)用于臨床。雌雄銀杏的根、莖、葉有一定差別，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為該藥的鑒別、開發(fā)利用及補(bǔ)充生藥學(xué)資料提供參考依據(jù)。 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 6 第二章 實(shí)驗(yàn)部分 1 實(shí) 驗(yàn)材料、儀器、試劑 驗(yàn)材料 雌雄銀杏的根、莖、葉均采自甘肅省徽縣地區(qū)，采集時(shí)間均為 2002 年 10 月。經(jīng)過蘭州大學(xué)藥學(xué)院馬志剛教授鑒定為銀杏 （ .） 的根、莖、葉 。 為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)的平行性，減少外界因素所引起的顯微結(jié)構(gòu)差異，雌雄銀杏樹均采自地區(qū)差異小，生長(zhǎng)環(huán)境一致，生長(zhǎng)過百年的雌、雄銀杏樹。最后，雌雄的判斷以是否掛果和當(dāng)?shù)卣{(diào)查這兩方面作為判斷依據(jù)。在采集雌雄銀杏的根、莖、葉時(shí)，采集部位均大致相同，并且要求根、莖的粗細(xì)一致。 樣品采集后，先用水沖洗干凈， 再用 定液（ 福爾馬林，醋酸，酒精的混合物 ）儲(chǔ)存待用。 器 刀片 ,尖頭鑷 ,蓋玻片 ,載玻片 ,酒精燈 ,吸水紙 ,顯微鏡 ,擦鏡紙。 劑 水合氯醛 ,間苯三酚試液 ,濃鹽酸 ,稀甘油 ,蒸餾水。 2 實(shí)驗(yàn) 方法 取銀杏葉制作臨時(shí)裝片 :取葉片 ,做徒手切片，取橫切 ,加水合氯醛加熱透化，滴間苯三酚 ,再加濃鹽酸一滴 ,加稀甘油幾滴，再蓋上蓋玻片，然后進(jìn)行觀察（可觀察到細(xì)胞壁呈櫻桃紅或紅紫色 ,即為木質(zhì)化）。其他部位用同法制作 ,并分別加以標(biāo)注。 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 7 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論 1 雌銀杏 銀杏根 橫切面顯微特征 木栓層為 20類方形棕色木栓細(xì)胞，栓內(nèi)層不明顯。皮層約為 7列類圓形細(xì)胞組成，細(xì)胞大小不等；石細(xì)胞偶見， 2成群或單個(gè)散在，呈類方形或不規(guī)則形，胞腔明顯；分泌細(xì)胞密集分布，類圓形或長(zhǎng)橢圓形。韌皮部寬厚，厚度與皮層相當(dāng)，射線寬 2細(xì)胞，向外漸彎曲變寬，韌皮纖維束眾多，非木化；分泌細(xì)胞隨處可見，比皮層中較小。形成層環(huán)明顯。木質(zhì)部占根的半徑的一半，導(dǎo)管 2，徑向排列成放射狀 ；導(dǎo)管木質(zhì)化，射線寬 1 列細(xì)胞，由內(nèi)向外逐漸變寬。（圖 1） 圖 1 雌根（ *60） 銀杏莖 橫切片顯微 特征 木栓層發(fā)達(dá)，約為 20 多列類方形棕色木栓細(xì)胞組成細(xì)胞壁平直略彎曲，栓內(nèi)層為 3類方形細(xì)胞。皮層約 10 列類圓形或長(zhǎng)方形細(xì)胞組成，分泌細(xì)胞隨處可見，其內(nèi)充滿黃色分泌物；草酸鈣簇晶可見；類圓形分泌腔有規(guī)律的分布于皮層外側(cè)，直徑為 60柱鞘外側(cè)由石細(xì)胞和纖維束斷續(xù)組成環(huán)狀，均木化，石細(xì)胞數(shù)個(gè)成群，外壁較厚，常呈不規(guī)則形或類圓形，其內(nèi)側(cè)均有纖維束斷續(xù)成環(huán)狀，非木化；韌皮部寬厚，厚度與皮層相當(dāng)，其外側(cè)分泌細(xì)胞隨處可見，其內(nèi)含黃色分泌物。形成層明顯。木質(zhì)部發(fā) 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 8 達(dá)，約占半徑的一半，導(dǎo)管單列，呈放射狀排列。 髓由薄壁細(xì)胞組成，細(xì)胞類圓形，大小不等；分泌細(xì)胞偶見，草酸鈣簇晶隨處可見直徑為 66圖 2） 圖 2 雌莖（ *60） 銀杏葉 橫切面顯微特征 呈兩面葉型構(gòu)造。上表皮由一列較小類方形細(xì)胞組成，排列緊密，外被角質(zhì)層。下表皮細(xì)胞類圓形，排列緊密，角質(zhì)層呈嵴狀突出，氣孔內(nèi)陷式，在維管束之間均有 6 個(gè)，等距離分布。柵欄組織由 3不規(guī)則細(xì)胞組成。海綿組織細(xì)胞為長(zhǎng)圓形，呈水平分布。葉脈維管束為有限外韌型，在葉肉中等距離排列；維管束鞘為 3類圓形細(xì)胞，草酸鈣簇晶偶見，直徑約為 84下維管束鞘細(xì)胞內(nèi)含有棕黃色分泌物。纖維束下表皮有纖維組織。分泌道在維管束之間時(shí) 有時(shí)無。 (圖 3) 圖 3 雌葉（ *100） 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 9 2 雄銀杏 銀杏根 橫切面顯微特征 木栓層為 25類方形棕色木栓細(xì)胞，栓內(nèi)層為 1細(xì)胞。皮層約 6 列類圓形細(xì)胞組成，細(xì)胞大小不等；分泌細(xì)胞隨處可見，類圓形或長(zhǎng)橢圓形；石細(xì)胞偶見，單個(gè)散在，呈不規(guī)則形， 壁較厚。韌皮部寬厚厚度比皮層較厚；射線寬 1細(xì)胞，向外漸寬稍彎曲；分泌細(xì)胞偶見，外側(cè)較多，內(nèi)側(cè)漸少，呈類圓形，細(xì)胞比皮層中較?。豁g皮纖維眾多，非木化。形成層環(huán)明顯。木質(zhì)部占根的半徑的一半，導(dǎo)管由 2細(xì)胞組成，徑向排列成放射狀；木質(zhì)部射線由 1 列細(xì)胞組成，由內(nèi)向外逐漸變寬。（圖 4） 圖 4 雄根（ *100） 銀杏莖 橫切面顯微特征 木栓層約為 15 多層棕色木栓細(xì)胞 ，栓內(nèi)層為 1類圓形細(xì)胞。皮層中，約 9 列類圓形或長(zhǎng)圓形細(xì)胞組成，分泌細(xì)胞隨處可見；分泌道有規(guī)律的分布在皮層外側(cè)，直徑為 60柱鞘外側(cè)由石細(xì)胞和纖維束斷續(xù)成環(huán)狀，均木化，石細(xì)胞 3呈不規(guī)則形；中柱鞘內(nèi)側(cè)有纖維束斷續(xù)排列成環(huán)狀，非木化。韌皮部較窄，厚度約為皮層的一半，其外側(cè)分泌細(xì)胞偶見，比皮層中較小，內(nèi)含黃色分泌物；韌皮部外側(cè)纖維成束，較多，壁較薄，非木化。形成層環(huán)明顯。木質(zhì)部寬廣，木質(zhì)部占整個(gè)半徑的2/3，導(dǎo)管單列，呈放射狀排列。髓由薄壁細(xì)胞組成，分泌細(xì)胞偶見。（圖 5） 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 10 圖 5 雄莖（ *60） 銀杏葉 橫切面顯微特征 呈兩面葉型構(gòu)造。上表皮由一列較小類圓形細(xì)胞組成，排列緊密。下表皮細(xì)胞類圓形，排列緊密，氣孔內(nèi)陷式，在維管束之間等距 離分布。柵欄組織由 1綿組織細(xì)胞為長(zhǎng)圓形，呈水平分布。 葉脈維管束為有限外韌型，在葉肉中等距離排列，構(gòu)造相同，大小相當(dāng)，無主次之分，維管束鞘為 1類圓形細(xì)胞。離生式分泌道分布于維管束之間。維管束之間平均有一個(gè)分泌道，氣孔均有 4 個(gè)，均勻分布。（圖 6） 圖 6 雄葉（ *100） 3 雌雄銀杏的比較 不同部 位 雌 雄 根 木栓層 20 25 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 11 栓內(nèi)層 不明顯 1細(xì)胞 韌皮部分泌細(xì)胞 隨處可見 偶見 莖 木栓層 18 13 皮層、髓 有草酸鈣簇晶 無草酸鈣簇晶 分泌腔 6060皮部 占 1/8 半徑 占 1/16 半徑 葉 分泌道 678孔 （維管束之間） 平均 2 個(gè) 平均 4 個(gè) 4 小結(jié)與討論 酸鈣簇晶 在最初的顯微觀察中，銀杏葉中沒 有草酸鈣簇晶，但是，如果不對(duì)其進(jìn)行染色而制作切片，就能觀察到很多草酸鈣簇晶。這可能是因?yàn)樵跈M切片制作過程中，用間苯三酚和濃鹽酸染色，其中濃鹽酸與草酸鈣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，使草酸鈣簇晶在后期觀察中消失不見。 泌腔 在光學(xué)顯微鏡下銀杏的根、莖、葉各器官中，對(duì)分泌腔的發(fā)生和發(fā)育進(jìn)程進(jìn)行觀察與研究。結(jié)果表明除根中無分泌腔外，其它器官的分泌腔都以相同的方式發(fā)生。分泌腔以裂溶生方式形成，分泌腔的原始細(xì)胞是一團(tuán)染色較深、排列緊密、原生質(zhì)很濃的細(xì)胞，它被液泡化細(xì)胞所包圍。伴隨著分泌腔的發(fā) 育，這一部分細(xì)胞慢慢液泡化，并逐漸向四周移動(dòng)，形成一個(gè)空腔。當(dāng)空腔增走到一定程度后，內(nèi)層的分泌細(xì)胞部分溶解，并且脫落于腔內(nèi) 11。到分化后期，分泌腔由一層染色較深的環(huán)帶結(jié)構(gòu)的分泌細(xì)胞和薄壁鞘狀細(xì)胞所包圍。各種器官中分泌腔的結(jié)構(gòu)沒有明顯差別，成熟的分泌腔由一層分泌細(xì)胞圍繞著的一個(gè)近圓形的腔道和周圍的鞘細(xì)胞所構(gòu)成 。 銀杏的分泌腔在莖、葉器官中均有分布，在莖中分布于皮層和髓部之中，主要分布在皮層；在葉中分布于近上表皮的柵欄組織與海綿組織之間，與葉中的二叉脈交替出現(xiàn)。 高慶劍：雌雄銀杏的 根、莖、葉 12 參考文獻(xiàn)： 1林清洪 , 黃維南 , 林光榮 , 等 . 銀杏資源的合理開發(fā)與利用 . 福建農(nóng)業(yè)科技 , 2006, 28(3): 152崔月菱 , 施建芝 , 王梅榮 , 等 . 銀杏資源的開發(fā)利用 . 河北林業(yè)科技 , 1995, 23(2): 473陳國華 , 鄧福良 , 劉健平 , 等 . 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