自動血細胞分析儀復檢規(guī)則的制定和驗證，制定血細胞復檢規(guī)則的必要性制定血液涂抹檢查國際和國內(nèi)現(xiàn)狀要求制定ISO15189血液涂抹檢查規(guī)則的原則制定，一是制定血細胞復檢規(guī)則的必要性，血細胞分析主要包括血細胞數(shù)和質(zhì)量分析在內(nèi)的白細胞、紅細胞、血小板計數(shù)和三種細胞形態(tài)學檢查。 單用儀器法進行血細胞分析，不復查可能誤診為貧血、血小板減少性紫癜等不能反映血細胞形態(tài)學變化的醫(yī)療糾紛，血細胞分析儀的作用主要是血細胞數(shù)和形態(tài)基本正常時，儀器檢查結(jié)果可以直接報告，免除檢查白細胞數(shù)和形態(tài)正常的標本，減少工作壓力。 血細胞分析儀檢測出細胞數(shù)和形態(tài)異常時，需要進一步通過顯微鏡檢查進行確認。 血細胞復查的概念是，制定適合本實驗室的血細胞復查規(guī)則，不觸發(fā)儀器分析結(jié)果制定的復查規(guī)則時，儀器得到的白細胞組(類)的結(jié)果可以客觀反映血像的狀況，相反，觸發(fā)儀器分析結(jié)果制定的復查規(guī)則時，涂片鏡檢查是必要的。 因此，合理制定篩選標準是正確使用儀器、保證結(jié)果質(zhì)量的重要因素，二是涂抹檢查國際和國內(nèi)現(xiàn)狀，CAP問卷調(diào)查： 263個實驗室，涂抹檢查率中值為26.7%。 國內(nèi)復查率為0-15.0%，大部分醫(yī)院血涂膜復查率低于5.0%，未行顯微鏡觀察。 有些實驗室過分依賴自動血細胞分析儀的分析結(jié)果，未行血液檢查或極少發(fā)生高漏診率，影響臨床診療效果。 2005年國際血液學復查專家對13298份血樣進行了詳細分析，制定了“41份自動血細胞分析和分類復查規(guī)則”，真陽性率為11.2%，假陽性率為18.6%，真陰性率為67.3%，假陰性率為2.9%，血涂片復查率為29.8%。 三、ISO15189的要求，血液學檢測部門應制定以下標準/程序并制作文件(不限于以下標準/程序):1、血細胞分析的顯微鏡檢測標準(檢測結(jié)果出現(xiàn)異常計數(shù)、警告標記、異常散布圖等時結(jié)果的確認方法和程序)。 血涂片的制備和檢查書面程序/過程2 .血液計數(shù)結(jié)果超出儀器線性范圍的，規(guī)定識別和解決方法(適當稀釋血樣，重復檢查等)。 檢測樣品中存在某些影響因素(如有核紅細胞、紅細胞聚集、小紅細胞、紅細胞中存在內(nèi)容物或瘧原蟲、血小板聚集塊、巨大血小板等)時，測定結(jié)果可靠性的判定和糾正措施必須書面規(guī)定。 四、血涂膜復檢規(guī)則的制定原則，一、根據(jù)所用儀器對細胞形態(tài)識別能力的不同，建立復檢規(guī)則2 .篩選標準的相關(guān)參數(shù)為：所用儀器可提供的3 .在保證重要病理細胞無漏檢的原則下，盡量減少涂膜檢測率4， 有診斷意義的重要參數(shù)不出現(xiàn)假陰性，其他參數(shù)的總假陰性率也應低于5.0%，國際血液學復檢專家認為5.0%是保證患者檢查結(jié)果安全性的最可接受的假陰性率，4、血涂膜復檢規(guī)則制定的原則是： 5、以低假陰性率為前提降低假陽性率6、血液病或臨床醫(yī)生提交讀片時，需要涂片鏡檢查。 五、按照血涂膜復檢規(guī)則的制定、人員準備、衛(wèi)生部醫(yī)政司頒布的全國臨床檢驗操作規(guī)程和國家衛(wèi)生行業(yè)標準白細胞分類計數(shù)參考方法制定的血涂膜檢測操作程序，對參加實驗的人員進行訓練，統(tǒng)一判斷標準，探討問題和解決的措施。 準備儀器，包括校準、靈敏度調(diào)節(jié)和報警信息系統(tǒng)參數(shù)設置。評估前，供應商工程師應校準全血校準物中使用的儀器，將儀器靈敏度調(diào)整至適當水平，以確保性能評估符合廠家標準。 實驗室采用全血質(zhì)量控制物進行嚴格的室內(nèi)質(zhì)量控制，保證了結(jié)果的準確性和穩(wěn)定性。 確定標本的數(shù)量和類型，國際血液學復核組成各研究機構(gòu)的標本數(shù)量至少有1000例，其中包括80%的首批檢驗標本，20%的復驗標本，用于三角規(guī)則的驗證。 這些標本是從日常檢查中隨機抽取的，而且一定數(shù)量的標本中必須含有幼稚的細胞。 國內(nèi)實驗室研究時提取的病例應包括門診、急救、住院患者。 1、設計初步復查規(guī)則；(1)新生兒首次檢查標本；(2)WBC、RBC、HGB、PLT、Retics超過儀器線性范圍：稀釋標本，復查；(3)WBC、PLT低于實驗室驗證儀器線性范圍：根據(jù)實驗室SOP進行檢查WBC、RBC、HGB、PLT未檢測結(jié)果：檢測標本是否凝血，復查標本，如無結(jié)果，另行檢測，(5)WBC30.0，同時首次檢測標本：涂膜鏡檢查； (6)WBC30.0，三天內(nèi)DELTACHECK失敗：涂膜鏡檢查； (7)PLT1000，同時首次檢測樣品：涂膜鏡檢查； (8)PLT為任意值，DELTACHECK未通過：涂片鏡檢查(9)HGB105fl (成人)且取樣時間超過24小時：涂片檢查RBC是否有大細胞相關(guān)變化，如無大細胞相關(guān)變化， 臨床上如果沒有新鮮全血通知提取新鮮血標本，報告必須記錄標本提取時間超過24小時(12)MCV為任意值，DELTACHECK不通過， 同時取樣時間不足24 :檢查取樣完整性和取樣信息是否錯誤(13)MCHC=生物基準區(qū)間上限20g/L :檢查樣品是否存在高脂血癥、溶血、RBC凝集及球狀紅細胞(14)MCHC22同時首次檢查樣品：涂膜鏡檢查； (16 )未分類或分類不完全：涂片鏡檢查，手工分類(17)Neut#20.0同時首次檢查標本：涂片鏡檢查； (18)Lymph#5.0(成人)或7.0(1.5(成人)或3.0(2.0為同時首次檢體：涂片鏡檢查；(21)Baso#0.5同時首次檢測樣品：涂膜鏡檢查； (22)NRBC#為任意值，同時首次檢測標本：涂抹鏡檢查； (23)ReticAbsolute#0.100，同時首次檢測樣品：涂膜鏡檢查； (24 )懷疑性通報(幼稚粒細胞/棒狀核細胞的通報除外)，成人同時首次檢查樣本：涂膜鏡檢查； (25 )疑似報警，兒童同時首次檢查標本：涂片鏡檢查； (26)WBC不可靠的警告：檢查標本完整性，復查，必要時進行涂膜鏡檢查(27)RBC碎片：涂膜鏡檢查(28 )二相RBC同時首次檢查標本：涂膜鏡檢查； (29 )阻抗RBC :白細胞直方圖/散布圖無異常，涂膜鏡檢查有RBC形態(tài)異常，(30)PLT凝集警報，任意值：檢查標本是否凝血，涂抹顯微鏡檢查評價血小板數(shù)，發(fā)現(xiàn)血小板明顯凝集時， 根據(jù)實驗室SOP執(zhí)行，(31)PLT警報(包括PLTWBC和PLT數(shù)量評價)RBC和PLT的大小、染色和形態(tài)有無巨大PLT和PLT的集聚其他異常：NRBC、RBC凝結(jié)、寄生蟲等。 4、初步復查規(guī)則評價，涂片鏡檢查以陽性判定標準，評價制作的初步復查規(guī)則，計算真陽性(TP )、真陰性(TN )、假陽性(FP )、假陰性(FN )與血涂片復查的比率。 真陽性觸發(fā)至少1條血細胞再檢查規(guī)則，顯微鏡檢查滿足涂膜鏡檢查陽性判定標準，鏡檢查形態(tài)學異常無需與觸發(fā)的規(guī)則一一對應，真陰性不觸發(fā)再檢查規(guī)則，鏡檢查陰性假陽性觸發(fā)再檢查規(guī)則， 鏡檢未發(fā)現(xiàn)形態(tài)學異常假陰性不觸發(fā)復查規(guī)則，鏡檢符合涂膜鏡檢陽性判定標準，涂膜復查率=真陽性率假陽性率。5、制定預期指標，實驗室可根據(jù)所用血細胞分析儀的性能特點、醫(yī)院規(guī)模、病種差異、實驗室常規(guī)工作質(zhì)量控制要求等，制定相應的自動血細胞分析和白細胞分類涂片檢測預期指標，如假陽性率20%、假陰性率5%、復檢率30%等。 6、調(diào)整初步復檢規(guī)則，確定復檢規(guī)則，根據(jù)初步復檢規(guī)則的評價結(jié)果和臨床實際工作需求，確保診斷有意義的重要參數(shù)，如各種白血病細胞無漏檢，其他參數(shù)總假陰性率不超過5.0%， 盡量降低涂膜復檢率，修正初步復檢規(guī)則的條款，根據(jù)修正后的規(guī)則重新計算真陽性、真陰性、假陽性