第九章生物堿類藥物分析小結(jié)學(xué)習(xí)目標(biāo)知識目標(biāo)了解常見生物堿類藥物的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)理解常用生物堿藥物的理化性質(zhì)與質(zhì)量分析方法的關(guān)系掌握常用生物堿的特殊鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查及含量測定方法能力目標(biāo)能夠根據(jù)生物堿的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，選擇合適的鑒別方法能夠解釋生物堿常用含量測定方法的原理、操作特點(diǎn)和計(jì)算方法學(xué)會(huì)依據(jù)藥典，分析此類藥物質(zhì)量一、藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)關(guān)系分析1生物堿類藥物大多具有堿性；有的藥物兼有兩性，如嗎啡；茶堿顯酸性；2游離生物堿大都不溶或難溶于水，溶于或易溶于有機(jī)溶劑，生物堿的鹽類多易溶于水，不溶或難溶于有機(jī)溶劑。3常見各類生物堿的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)（了解）二、鑒別試驗(yàn)（重點(diǎn)）（一）生物堿類一般鑒別試驗(yàn)（熟悉）1熔點(diǎn)測定如磷酸可待因的鑒別2生物堿顯色反應(yīng)如鹽酸嗎啡加鉬硫酸試液，顯紫色，即變藍(lán)色，最后棕綠色。3生物堿沉淀反應(yīng)如氫溴酸東莨菪堿、咖啡因和磷酸川芎嗪的鑒別4紫外分光光度法中國藥典（2010年版）中利用藥物的紫外吸收特征進(jìn)行鑒別主要采用以下方法（1）對比吸收光譜的特征參數(shù)。（2）對比吸收光譜的一致性。（3）對比吸光度比值的一致性。5紅外分光光度法6薄層色譜法（二）生物堿類特征鑒別試驗(yàn)（掌握）1具有氨基醇結(jié)構(gòu)生物堿的特征反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)堿性溶液中與硫酸銅發(fā)生雙縮脲反應(yīng)；苯烴胺類生物堿鹽酸麻黃堿的鑒別加硫酸銅試液，在20的氫氧化鈉溶液中顯藍(lán)紫色；加乙醚振搖后，乙醚層即顯紫紅色，水層變?yōu)樗{(lán)色。2托烷生物堿的特征反應(yīng)VITAILI反應(yīng)托烷類生物堿結(jié)構(gòu)中具有莨菪酸，可與發(fā)煙硝酸和醇制氫氧化鉀發(fā)生特征維他立（VITALI）反應(yīng)。中國藥典（2010年版）對氫溴酸東莨菪堿、消旋山莨菪堿、硫酸阿托品均采用此法鑒別取供試品與發(fā)煙硝酸反應(yīng)，產(chǎn)物置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，加乙醇和固體氫氧化鉀，顯深紫色。36位含氧喹啉衍生物的特征反應(yīng)綠奎寧（THALLEIOQUIN）反應(yīng)6羥基喹啉衍生物奎寧和奎尼丁在酸性溶液中，與溴水（或氯水）及氨水發(fā)生綠奎寧反應(yīng)中國藥典（2010年版）鑒別上述藥物本品與溴試液和氨試液混和，即顯翠綠色。4嗎啡生物堿的特征反應(yīng)（1）MARQUIS反應(yīng)與甲醛硫酸反應(yīng)，產(chǎn)物為具有特征紫紅色的醌式化合物。（2）FROHDE反應(yīng)嗎啡與鉬硫酸試液發(fā)生顯色反應(yīng)，呈紫色藍(lán)色棕綠色的漸變。（3）還原反應(yīng)鐵氰化鉀試液可將其氧化生成偽嗎啡，自身被還原為亞鐵氰化鉀，再與三氯化鐵反應(yīng)生成普魯士藍(lán)（亞鐵氰化鐵）。5吲哚生物堿的特征反應(yīng)官能團(tuán)反應(yīng)利血平與香草醛縮合顯玫瑰紅色，與對二甲氨基苯甲醛縮合顯綠色。6黃嘌呤類生物堿的特征反應(yīng)紫脲酸銨反應(yīng)黃嘌呤生物堿與鹽酸及氯酸鉀加熱后，遇氨氣即縮合生成四甲基紫脲酸銨，顯紫色。（三）無機(jī)酸根的鑒別試驗(yàn)（了解）三、特殊雜質(zhì)檢查（次重點(diǎn)）（一）利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異進(jìn)行檢查（熟悉）（1）利用旋光性的差異檢查硫酸阿托品中的莨菪堿（2）利用溶解性的差異檢查硫酸奎寧、奎尼丁中的三氯甲烷乙醇中不溶物（3）中國藥典（2010年版）利用光學(xué)性質(zhì)的差異檢查利血平中的氧化產(chǎn)物（二）利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的區(qū)別進(jìn)行檢查（掌握）鹽酸嗎啡中特殊雜質(zhì)阿撲嗎啡的檢查利用阿撲嗎啡具有還原性，檢查時(shí)，規(guī)定乙醚層不得顯紅色，水層不得顯綠色；檢查罌粟酸要求在加入2滴三氯化鐵試液后，溶液不得顯紅色。（三）利用藥物與雜質(zhì)在色譜學(xué)行為上的差異進(jìn)行檢查（熟悉）常用的薄層色譜法有雜質(zhì)對照品法，如鹽酸小檗堿中有機(jī)腈供試品溶液的自身稀釋對照法，如硫酸奎寧中其它金雞鈉堿雜質(zhì)對照品法與供試品溶液自身稀釋對照法并用高效液相色譜法檢查雜質(zhì)中國藥典（2010年版）對長春新堿、鹽酸嗎啡中有關(guān)物質(zhì)四、含量測定（重點(diǎn)）（一）非水滴定法（掌握）1高氯酸滴定法基本原理對生物堿的鹽的滴定。其滴定過程，實(shí)際是高氯酸置換出與生物堿結(jié)合的較弱的酸的置換反應(yīng)。多用于生物堿原料藥物的含量測定。HCLO4BHAHABHCLO42一般方法除另有規(guī)定外，精密稱取供試品適量消耗高氯酸滴定液（01MOL/L）約8ML，加冰醋酸1030ML使溶解，加各品種項(xiàng)下規(guī)定的指示液12滴，用高氯酸滴定液（01MOL/L）滴定。終點(diǎn)顏色應(yīng)以電位滴定時(shí)的突躍點(diǎn)為準(zhǔn)，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。3滴定過程的注意事項(xiàng)（1）方法的適用對象。本法主要適于KB108的有機(jī)堿、有機(jī)酸的堿金屬鹽的含量測定。當(dāng)生物堿的KB為1081010，宜選冰醋酸作溶劑；KB為10101012時(shí)，選用冰醋酸與醋酐的混合溶劑；KB1012，選擇醋酐作溶劑。（2）不同酸根的影響。磷酸鹽及有機(jī)酸鹽可直接滴定。生物堿的氫鹵酸鹽不可直接滴定，需加入5醋酸汞冰醋酸試液35ML后，使其生成在醋酸溶劑中難解離的鹵化汞，再進(jìn)行滴定；或電位法指示終點(diǎn)；硝酸鹽不宜用結(jié)晶紫作指示劑，改用電位法指示終點(diǎn)。玻璃電極作為指示電極，飽和甘汞電極（玻璃套管內(nèi)裝氯化鉀的飽和無水甲醇溶液）為參比電極。生物堿的硫酸鹽僅滴定至硫酸氫鹽為止。鹽酸麻黃堿原料的含量測定1MOL的鹽酸麻黃堿與1MOL的高氯酸反應(yīng)硫酸阿托品原料的含量測定1MOL的硫酸阿托品可與1MOL的高氯酸反應(yīng)硫酸奎寧的含量測定1MOL的硫酸奎寧可與3MOL的高氯酸反應(yīng)硫酸奎寧片的含量測定1MOL的硫酸奎寧可消耗4MOL的高氯酸（3）滴定終點(diǎn)指示硝酸鹽類采用電位法；其余生物堿、有機(jī)堿性藥物的終點(diǎn)判定多使用指示劑法。常用指示劑為結(jié)晶紫。（4）滴定劑的注意事項(xiàng)（了解）（二）提取酸堿滴定法（熟悉）經(jīng)堿性試劑堿化、有機(jī)溶劑提取后，采用直接酸堿滴定法測定含量1基本原理利用生物堿鹽與游離生物堿在水相和有機(jī)相溶解性質(zhì)的顯著差異，將供試品溶于水或稀酸中，加人適當(dāng)?shù)膲A性試劑使生物堿游離，用有機(jī)溶劑振搖提取游離生物堿，分取有機(jī)相并用水洗，除去混存的堿性試劑和水溶性雜質(zhì)，再用無水硫酸鈉和西黃蓍膠脫水，濾過后采用酸堿滴定法測定。將有機(jī)溶劑蒸干后，殘?jiān)刹捎弥行砸掖既芙?，酸滴定液直接滴定；也可用過量的酸滴定液溶解，用堿滴定液回滴剩余的酸；亦可不蒸干有機(jī)溶劑，加入定量過量的酸滴定液使游離生物堿重新成鹽溶于水相，再用堿滴定液回滴水相。2磷酸可待因片（1）常用堿化試劑氨水（2）適宜提取溶劑及用量三氯甲烷（3）滴定指示劑甲基紅、溴酚藍(lán)、溴甲酚紫等。（三）酸性染料比色法1基本原理酸性染料是指一些具有酸性基團(tuán)的酸堿指示劑，如溴百里酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)、溴甲酚綠等，可在適宜條件下解離為陰離子（IN）。生物堿類及堿性藥物可在適宜介質(zhì)中與H結(jié)合，生成陽離子（BH）。兩種離子可定量結(jié)合，生成易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水的，有顏色的離子對（BHIN）。酸性染料比色法即是通過使用有機(jī)溶劑定量提取該有色離子對，并在一定波長處測定該有色溶液的吸光度，計(jì)算出堿性藥物的含量。亦可分離出有機(jī)提取相，然后用堿化試劑堿化有機(jī)相，將離子對中的酸性染料釋放出來，用水提取IN，測定水中染料的吸光度，間接計(jì)算出堿性藥物的含量。硫酸阿托品、氫溴酸東莨菪堿的片劑和注射劑的含量測定2測定影響因素的探討（1）試驗(yàn)最佳PH值選擇最佳PH值應(yīng)當(dāng)能夠使有機(jī)堿性藥物全部以BH存在，而溶液中產(chǎn)生的IN足夠與其定量結(jié)合。中國藥典（2010年版）多采用鄰苯二甲酸氫鉀緩沖液。（2）適宜的酸性染料及濃度的選擇常用的酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)（BTB）、溴酚藍(lán)（BPB）、溴甲酚紫（BCP）、溴甲酚綠（BCG）和甲基橙。（3）提取溶劑的選擇常用的溶劑有三氯甲烷、二氯甲烷、苯、甲苯、四氯化碳等。三氯甲烷最為常用。（4）水分的干擾及排除嚴(yán)格避免水分進(jìn)入有機(jī)相，當(dāng)待測有機(jī)相存在少許水分時(shí)，可采用加入脫水劑如無水硫酸鈉或用干燥濾紙過濾的方法除去。硫酸阿托品注射液的含量測定（四）紫外分光光度法（了解）如鹽酸嗎啡（片劑、注射劑）、硫酸長春堿、長春新堿（原料、注射劑）的含量測定即采用此法。五高效液相色譜法（了解）反相色譜系統(tǒng)；三乙胺；反相離子對色譜法同步測試答案一、單項(xiàng)選擇題題號123456答案DCABCB題號789101112答案BCDDCB題號131415161718答案DACDCD題號192021222324答案CBBADA二、簡答題1請分析鹽酸麻黃堿、硫酸奎寧、硝酸毛果蕓香堿在采用非水溶液滴定法進(jìn)行含量測定時(shí)有那些異同。藥物標(biāo)準(zhǔn)液終點(diǎn)指示終點(diǎn)顏色醋酸汞試液鹽酸麻黃堿硫酸奎寧硝酸毛果蕓香堿高氯酸高氯酸高氯酸結(jié)晶紫結(jié)晶紫電位法翠綠色藍(lán)綠色加入2簡述酸性染料比色法的基本原理及主要試驗(yàn)條件酸性染料是指一些具有酸性基團(tuán)的酸堿指示劑，如溴百里酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)、溴甲酚綠等，可在適宜條件下解離為陰離子（IN）。生物堿類及堿性藥物可在適宜介質(zhì)中與H結(jié)合，生成陽離子（BH）。兩種離子定量結(jié)合，生成易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水的，有顏色的離子對（BHIN）。酸性染料比色法即是通過使用有機(jī)溶劑定量提取該有色離子對，并在一定波長處測定該有色溶液的吸光度，計(jì)算出堿性藥物的含量。亦可分離出有機(jī)提取相，然后用堿化試劑堿化有機(jī)相，將離子對中的酸性染料釋放出來，用水提取IN，測定水中染料的吸光度，間接計(jì)算出堿性藥物的含量。鄰苯二甲酸氫鉀緩沖液常用的酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)（BTB）、溴酚藍(lán)（BPB）、溴甲酚紫（BCP）、溴甲酚綠（BCG）和甲基橙。其濃度應(yīng)保證足夠量溶劑有三氯甲烷避免水分進(jìn)入有機(jī)相三、計(jì)算題（1）本法采取的是什么方法酸性染料比色法（2）1027是什么系數(shù)分子量