1、南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科第1頁共6頁交叉配血試驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程微柱凝集法一、目的為保證臨床輸血的相容性,保證臨床輸血平安,對全血、紅細胞懸液、洗滌紅細胞、濃縮紅細胞、少白細胞紅細胞、冰凍紅細胞、機采濃縮白細胞懸液等血液成分進行交叉配血試驗.二、方法采用微柱凝集法；三、原理將人紅細胞血型抗原與相應(yīng)的抗體發(fā)生的凝集反響在微柱檢測系統(tǒng)中進行.微柱檢測系統(tǒng)的上端為反響室,將葡萄聚糖凝膠作為凝集反響的介質(zhì)裝入檢測卡微柱凝集檢測管中,微柱凝集檢測管中的凝膠的間隙起分子篩作用.凝集反響陽性的紅細胞凝決留在微柱凝集檢測管的上面或中間,反響陰性未凝集的紅細胞將通過凝膠的間隙,沉積在微柱凝集檢測管的底部.四、適用

2、范圍適用于輸血前需進行交叉配血試驗的血液及血液成分.五、儀器設(shè)備普通離心機；血型血清學(xué)多用離心機；37c免疫微柱孵育器；六、試劑1、試劑名稱：抗人球蛋白交叉配血卡微柱凝集法SOPREG012.01第1頁共6頁2、試劑生產(chǎn)廠家：長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司；3、批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字S20050061;4、包裝規(guī)格：聚丙烯卡12卡X3檢測人份/盒；5、貯藏條件；18-25C避光保存.6、有效期：自檢定合格之日起12個月；七、檢測樣本要求1、標(biāo)本類型：靜脈血EDTA抗凝劑:血液=1:10.2、標(biāo)本采集：見輸血科標(biāo)本治理標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程.3、標(biāo)本儲存和運輸：新鮮血28c貯存時間不超過72小時.4、標(biāo)本拒收

3、狀態(tài)：標(biāo)識不準(zhǔn)確、標(biāo)本稀釋、細菌污染,嚴(yán)重溶血等不能測定.八、操作步驟1、將受血者與獻血者的紅細胞血清別離；2、分別配制受血者與獻血者0.5%-0.8%紅細胞懸液3、將受血者血清50ul與獻血者紅細胞懸液50ul參加主側(cè)管中；4、將受血者紅細胞懸液50ul與獻血者血清50ul參加次側(cè)管中；5、將加樣后的試劑卡置37c免疫微柱孵育器中孵育15分鐘；6、使用血型血清學(xué)多用離心機900rpm離心2分鐘,1500rpm離心3分鐘,取出肉眼觀察結(jié)果.7、結(jié)果判斷：陰性結(jié)果：紅細胞完全沉降于凝膠管層底部,說明受血者與獻血者血型相合；陽性結(jié)果：紅細胞凝集塊位于凝膠外表或凝膠中,說明受血者與獻血者血型不相合九

4、、質(zhì)量限制1、此檢測工程應(yīng)參加衛(wèi)生部臨床檢驗中央組織的室間質(zhì)評,且成績合格；2、每日做室內(nèi)質(zhì)量限制,且要求在控.3、嚴(yán)格執(zhí)行查對制度,判斷結(jié)果后應(yīng)仔細核對、記錄,防止筆誤等引起的過失.4、交叉配血標(biāo)本應(yīng)在28c保存留一周,以備復(fù)查.十、生物參考區(qū)間相合,不相合.十一、考前須知與干擾因素1、本方法可結(jié)合鹽水介質(zhì)交叉配血相合后進行臨床發(fā)血.2、交叉配血標(biāo)本必須正確有標(biāo)識,其血液量、紅細胞或血漿的質(zhì)量符合實驗要求和受血者當(dāng)前的免疫學(xué)狀態(tài)；3、交叉配血試驗血樣要求是輸血前3天內(nèi)的血樣預(yù)防受血者在輸血前的3個月之內(nèi)可能有妊娠或輸血等免疫史而可能產(chǎn)生不規(guī)那么抗體.4、標(biāo)本血液離體后要求盡快送檢,至檢測完畢

5、最長不能超過3d,每次檢測后受血者和供血者的血標(biāo)本應(yīng)在2c8C保存7天；5、試劑使用前應(yīng)仔細檢查試劑的貯存條件是否符合要求、是否變質(zhì)失效；6、患者使用的藥物影響的處理：如果使用右旋糖酊、PVP等治療,應(yīng)注意將紅細胞洗滌；如果受者使用肝素治療,那么應(yīng)用硫酸魚精蛋白對抗,使樣本凝結(jié)；7、交叉配血試驗不相合時應(yīng)注意紅細胞緡錢狀的假陽性鑒別,可結(jié)合鹽水介質(zhì)交叉配血試驗鏡下觀察或離心去上清液后重懸觀察.8、抗體篩選試驗陰性,而交叉配血結(jié)果陽性,提示有未檢測明的同種抗體存在.9、交叉配血結(jié)果不相合提示有未查明的同種抗體存在.10、注意交叉配血試驗過程中離心力、溫度、紅細胞濃度、抗原抗體的比例；11、血清或

6、血漿中如含有溶血性抗體,那么相應(yīng)紅細胞被溶解而不凝集,交叉配血結(jié)果陽性,如排除標(biāo)本中補體干擾因素的影響,可來活后重新試驗.12、注意在室溫反響中或抗球蛋白試驗中顯示有自身抗體,應(yīng)加做自身對照試驗或直接抗人球蛋白試驗加以鑒別.十二、參考文獻南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科第5頁共6頁1、胡麗華主編,臨床輸血檢驗,第1版.中國醫(yī)藥科技出版社,2004;2、葉應(yīng)嫵,等主編,全國臨床檢驗操作規(guī)程,第3版.東南大學(xué)出版社,2006,11;3、抗人球蛋白交叉配血卡微柱凝集法說明書.質(zhì)量與技術(shù)記錄1、 輸血科室內(nèi)質(zhì)量限制實施記錄表2、 輸血科室內(nèi)質(zhì)量限制失控處理記錄表3、 輸血科工作量統(tǒng)計記錄表4、 輸血科感染性垃圾登記表a.,200U(,3.a,*,一)mi.820rb-a光“,*2001.).1.,I0),e,-ofg,ngtarUl.r.i-