1、尿液的其他檢查北京大學(xué)第三醫(yī)院檢驗(yàn)科內(nèi)容1.尿滲量測(cè)定2.尿液微量清蛋白測(cè)定3.尿液蛋白電泳4.免疫球蛋白輕鏈尿的篩查5.乳糜尿和脂肪尿6.尿液人絨毛膜促性腺激素7.尿沉渣自動(dòng)化分析儀1.尿滲量測(cè)定n尿滲量osmolality又稱尿滲透量，是反映溶解在尿液中具有滲透作用的溶質(zhì)顆粒(分子或離子等)數(shù)量的一種指標(biāo)，是表示腎臟排泄到尿液中所有溶質(zhì)顆粒的總數(shù)量。n尿滲量主要與尿液中溶質(zhì)顆粒數(shù)量有關(guān)，而與顆粒大小及電荷關(guān)系無(wú)關(guān)。n尿滲量能較好地反映腎臟對(duì)溶質(zhì)和水的相對(duì)排出速度，更確切地反映腎臟濃縮和稀釋功能，因此是評(píng)價(jià)腎臟濃縮功能較好的指標(biāo)。檢測(cè)原理n晶體滲透濃度計(jì)法，是根據(jù)冰點(diǎn)減低原理計(jì)算出尿滲量。冰

2、點(diǎn)是指溶液呈固相和液相處于平衡狀態(tài)時(shí)的溫度。n1個(gè)Osm濃度可使1kg水的冰點(diǎn)下降1.858n滲摩爾量Osm/(kgH2O)=觀察取得冰點(diǎn)下降數(shù)/1.858n冰點(diǎn)滲透計(jì)的工作原理是根據(jù)冰點(diǎn)減低 溶液結(jié)冰曲線計(jì)算出尿滲量。參考值：n尿滲量：6001000mOsm/kgH2O(相當(dāng)于SG1.0151.025)。n尿滲量/血漿滲量之比為(3.04.7):1操作注意n標(biāo)本應(yīng)收集在清潔干燥的容器中，不加防腐劑。n用較高速離心，除去全部不溶性顆粒。但尿中鹽類沉淀應(yīng)使之溶解，不可除去。n如不能立即測(cè)定，應(yīng)置冰箱內(nèi)保存，臨用前將標(biāo)本預(yù)溫，使鹽類沉淀完全溶解。n在測(cè)定尿滲量的同時(shí)，常需測(cè)定血漿的滲量，必須用肝素

3、抗凝，不能用草酸鹽抗凝。尿滲量和尿比密測(cè)定比較n兩者都能反映尿液中溶質(zhì)的含量。n尿比密（在4條件下，尿與同體積純水的重量之比稱為尿比密）測(cè)定比尿滲量測(cè)定操作簡(jiǎn)便，成本低，但尿比密測(cè)定容易受溶質(zhì)性質(zhì)的影響，如蛋白質(zhì)，葡萄糖等大分子物質(zhì)及體細(xì)胞等增多，尿比密也增高；尿比密測(cè)定可粗略反映腎小管的濃縮稀釋功能。n尿滲量主要與溶質(zhì)的顆粒數(shù)量有關(guān)，而受蛋白質(zhì)、葡萄糖等大分子物質(zhì)的影響較小，在評(píng)價(jià)腎臟濃縮和稀釋功能上，更優(yōu)于尿比密。尿滲量的臨床意義n尿滲量測(cè)定主要應(yīng)用于腎臟濃縮和稀釋功能的評(píng)價(jià)。 n減低：見(jiàn)于腎小球腎炎伴有腎小管和腎間質(zhì)病變；尿滲量300mOsm/kgH2O多見(jiàn)于腎臟濃縮功能不全。n顯著減低

4、：見(jiàn)于腎小管、腎間質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能受損所致腎臟濃縮功能障礙者。慢性腎盂腎炎、多囊腎、阻塞性腎病等，慢性間質(zhì)性腎病患者，尿滲量/血漿滲量比可明顯減低。2.尿液微量清蛋白測(cè)定n微量清蛋白尿微量清蛋白尿是指尿液中清蛋白超過(guò)正常水平、但低于常規(guī)試帶法可檢出的范圍。n微量清蛋白尿是早期糖尿病腎病的臨床主要征象。n檢測(cè)原理：放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法、免疫比濁法n報(bào)告方式：n定時(shí)尿法：計(jì)算出單位時(shí)定時(shí)尿法：計(jì)算出單位時(shí)間內(nèi)的排出率間內(nèi)的排出率(ug/min或或mg/24h)n隨機(jī)尿法：用肌酐比值報(bào)告排出率(mg/mmolCr或mg/Cr)。n晨尿法：報(bào)告每升尿排出量(mg/L)n推薦以24h尿清蛋白排泄

5、總量，即尿清蛋白排泄率尿清蛋白排泄率(UAER)表示。nUrine albumin excretion rate臨床意義n尿微量清蛋白檢測(cè)主要用于早期腎損害的診斷，尤其當(dāng)尿清蛋白排泄率持續(xù)超過(guò)20ug/min（III期），常常作為糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等全身性疾病早期腎損害的敏感指標(biāo)。n微量清蛋白尿還見(jiàn)于：n大多數(shù)腎小球疾病、狼瘡性腎炎、腎小管間質(zhì)疾病n妊娠子癇前期、自身免疫性疾病、多發(fā)性骨髓瘤的腎功能衰竭、充血性心力衰竭、肝癌、肝硬化n高血壓、肥胖、高脂血癥、吸煙、劇烈運(yùn)動(dòng)與飲酒等。3.尿液蛋白電泳n尿蛋白電泳常用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),亦稱尿蛋白SDS盤狀

6、電泳。n尿蛋白可與十二烷基硫酸鈉反應(yīng)，形成帶有負(fù)電荷的復(fù)合物n聚丙烯酰胺交聯(lián)網(wǎng)具有分子篩效應(yīng)，因此，尿液中各種蛋白組分在向正極移動(dòng)的過(guò)程中，可通過(guò)泳動(dòng)速度將蛋白質(zhì)按其相對(duì)分子量大小的順序，彼此分離出蛋白區(qū)帶。n將尿蛋白定性檢查陽(yáng)性的尿液標(biāo)本與已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)一起進(jìn)行SDS盤狀電泳，通過(guò)對(duì)照比較，可以判斷蛋白組分的性質(zhì)和相對(duì)分子質(zhì)量范圍，可以進(jìn)行蛋白尿選擇性和非選擇性分析。正常免疫球蛋白由多克隆漿細(xì)胞產(chǎn)生，所以血清蛋白電泳顯示不均一性的波形。骨髓瘤患者漿細(xì)胞克隆異常增殖，產(chǎn)生分子結(jié)構(gòu)相同的單克隆免疫球蛋白或輕鏈片段。因此75%的患者血清或尿液在電泳時(shí)可見(jiàn)一濃而密集的染色帶，掃描呈現(xiàn)基

7、底較窄單峰突起的M 蛋白蛋白(Myeloma protein/monoclonal protein)免疫固定電泳原理免疫固定電泳原理n包括蛋白電泳和免疫沉淀兩個(gè)過(guò)程。n將1個(gè)患者的血清重復(fù)加入6個(gè)電泳孔中，其中1個(gè)孔的血清為普通電泳，另外5個(gè)孔的血清經(jīng)普通電泳分離后分別加入抗人IgG、IgA、IgM、IgD、的抗血清進(jìn)行免疫固定，n被分離出的免疫球蛋白或輕鏈與其相應(yīng)抗體發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生不溶解的抗原抗體反應(yīng)物沉淀，n未反應(yīng)的蛋白隨后被清洗掉，而抗原抗體反應(yīng)物經(jīng)染色后，形成可見(jiàn)條帶，n通過(guò)比較普通電泳條帶與免疫固定后的沉淀帶，可檢出某種單克隆球蛋白。正常血清在電泳每個(gè)泳道中均顯示洗染的多克隆免疫球蛋

8、白的滲透區(qū)帶單克隆免疫球蛋白血癥則以深染的擴(kuò)散區(qū)帶為特征。參考范圍NormalRangeUrineTotalProtein( 140 mg/24hr )UrineAlbumin( 30 mg/24hr )Urinealpha-1 Urinealpha-2 Beta-globulin Gamma-globulin 按尿蛋白電泳結(jié)果，可分為蛋白尿類型相對(duì)分子質(zhì)量(萬(wàn))電泳特征低相對(duì)分子質(zhì)量 17主要在清蛋白及其以下區(qū)帶中相對(duì)分子質(zhì)量 510主要在清蛋白及其附近區(qū)帶高相對(duì)分子質(zhì)量 5100主要在清蛋白區(qū)帶以上混合型1100低、高相對(duì)分子質(zhì)量及清蛋白區(qū)帶均有臨床意義n尿蛋白電泳主要用于蛋白尿的分型。n

9、低相對(duì)分子質(zhì)量蛋白尿：見(jiàn)于以腎小管損害腎小管損害為主的疾病，如急性腎盂腎炎、腎小管性酸中毒、慢性間質(zhì)性腎炎早期、重金屬及藥物引起腎損害等。n中及高相對(duì)分子質(zhì)量蛋白尿：見(jiàn)于以腎小球損害腎小球損害為主的疾病，如各類原發(fā)性、繼發(fā)性腎小球腎炎、腎病綜合征等。n混合性蛋白尿 見(jiàn)于整個(gè)腎單位受損整個(gè)腎單位受損的病理情況，如慢性腎炎晚期、嚴(yán)重間質(zhì)性腎炎累及腎小球，以及各種病因引起的慢性腎衰竭等。免疫球蛋白n所有Ig的基本單位都是由一對(duì)長(zhǎng)的和一對(duì)短的四條多肽鏈構(gòu)成。nIg的兩條長(zhǎng)鏈稱為重鏈(H鏈)，兩條短鏈稱為輕鏈（L鏈）。n根據(jù)H鏈的恒定區(qū)氨基酸的組成和排列順序的差異及其抗原特異性不同，可將Ig的H鏈分為

10、鏈、鏈、鏈、鏈、鏈，由它們組成的Ig分別稱為IgA、IgG、IgM、IgD和IgE。n根據(jù)L鏈的結(jié)構(gòu)和抗原特異性不同，可將Ig的L鏈分為 鏈與 鏈 。由它們組成的Ig又分別稱為 型與 型Ig。每個(gè)Ig分子上的兩條L鏈總是同型的。人類血清中 型與型Ig之比約為2：1；Schematic diagram of an typical antibody showing two Ig heavy chains (blue) linked by disulphide bonds to two Ig light chains (green). The constant (C) and variable (V

11、) domains are shown. 免疫固定電泳n鑒別何種類型骨髓瘤，以及判斷其對(duì)腎臟的損害程度，可采用免疫固定電泳。n即血、尿標(biāo)本在電泳后，用特異的抗或抗單克隆抗體檢測(cè)克隆性增生的輕鏈，用抗、抗、抗、抗鏈、抗鏈單克隆抗體檢測(cè)克隆性增生的重鏈。n由于輕鏈分子量很小，可自由通過(guò)腎小球，聚集在腎小管中，腎臟的損害主要是由于輕鏈在系膜區(qū)和腎小管上皮基底膜的沉積所致。血清蛋白電泳The interpretation of the SPE results was for decreased prealbumin, albumin, alpha-2, and gamma globulins; and

12、 a paraprotein spike of approximately 1.2 g/dL detected in the beta region. Serum immunofixation electrophoresis identified the beta region paraprotein as a monoclonal IgD/lambda.The interpretation is consistent with a tubular pattern of proteinuria, with monoclonal free lambda light chains detected

13、 in the gamma region.尿蛋白電泳報(bào)告NormalRangeUrineTotalProtein 104.4 mg/dL( 140 mg/24hr )UrineAlbumin13.42 %14.0 mg/dL( 30 mg/24hr )Urinealpha-13.00 % 3.1 mg/dL Urinealpha-212.70 %13.3 mg/dL Beta-globulin8.40 %8.8 mg/dL Gamma-globulin62.47 %65.2 mg/dL 4.免疫球蛋白輕鏈尿的篩查n臨床常用的一項(xiàng)對(duì)多發(fā)性骨髓瘤輔助診斷和判斷療效的簡(jiǎn)便試驗(yàn)，過(guò)去曾稱為Bence-

14、Jones蛋白篩查試驗(yàn)。n先將尿液用磺基水楊酸法磺基水楊酸法作蛋白定性試驗(yàn)，如呈陰性反應(yīng)，則可認(rèn)為尿液標(biāo)本中本-周蛋白陰性。如呈陽(yáng)性：兩種方法：n熱沉淀-再溶解法：在pH4.90.1條件下，加熱至40-60時(shí)可發(fā)生凝固，溫度升至90-100時(shí)可再溶解，而溫度減低至56左右，又可重新凝固。故又稱為凝溶蛋白，此為本周蛋白的重要特性之一。n鹽析法：輕鏈與普通蛋白質(zhì)相比，在總鹽濃度較低的磷酸鹽緩沖液中可被鹽析。n靈敏度都不高。最好選用免疫固定電泳。5.乳糜尿和脂肪尿n尿中含有淋巴液，外觀呈牛奶狀稱為乳糜尿，由呈膠體狀的乳糜微粒和蛋白質(zhì)等組成。乳糜尿中如混有血液，則稱為乳糜血尿。n尿中混有脂肪小滴時(shí)稱為

15、脂肪尿。n二者經(jīng)乙醚提取，蘇丹染色后纖維鏡下可見(jiàn)橘黃色脂肪小滴。對(duì)于不易鑒定的標(biāo)本可采用直接測(cè)定甘油三酯的生化方法。n經(jīng)過(guò)腸道吸收的乳糜液，由于淋巴管阻塞，不能沿正常淋巴道引流入血而逆流至泌尿系淋巴管中，引起該處淋巴管內(nèi)壓力增高、曲張破裂，乳糜液流入尿中所致。n絲蟲(chóng)病、腹膜結(jié)核、腫瘤、胸腹部創(chuàng)傷或手術(shù)、先天性淋巴管畸形等均可引起乳糜尿。n腎病綜合征、腎小管變性疾病、脂肪組織創(chuàng)傷、骨折或骨手術(shù)后骨髓脂肪栓塞等可引起脂肪尿。6.尿液人絨毛膜促性腺激素 human chorionic gonadotropin， HCGnHCG是受精卵子移行到子宮內(nèi)著床后，形成胚胎，在胚胎的發(fā)育過(guò)程中，胎盤合體滋養(yǎng)層

16、細(xì)胞大量產(chǎn)生的，是一種具有促性腺發(fā)育的糖蛋白類激素，可通過(guò)孕婦血液循環(huán)而排泄到尿中。n在妊娠1周時(shí)，約為50IU/L，其后6周血清和尿中HCG水平迅速升高，每1.5-3天血HCG增加一倍。第10周左右達(dá)到高峰，此后開(kāi)始下降，第16周大約將至峰值的1/5，并一直維持到妊娠末期。nHCG功能：主要功能是刺激黃體，有利于雌激素和黃體酮的持續(xù)分泌，以促進(jìn)子宮蛻膜的形成，使胎盤生長(zhǎng)成熟HCG結(jié)構(gòu)特點(diǎn)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)n是由兩個(gè)非共價(jià)鍵相連的肽鏈(亞基及亞基)組成的糖蛋白激素，單個(gè)亞基不具有生物活性，當(dāng)其連接成為完整的化合物時(shí)才具有活性。nHCG亞基的氨基酸數(shù)量及其排列順序與卵泡刺激素（FSH）、黃體生長(zhǎng)激素（LH

17、）、促甲狀腺激素（TSH）等的亞單位相似，故用完整的抗HCG分子的抗體測(cè)定HCG時(shí)，與FSH 、LH 、TSH有免疫交叉反應(yīng)；而HCG鏈則具有特異性。n為了避免交叉反應(yīng)，目前一般采用高效的抗抗-HCG單克隆抗體單克隆抗體進(jìn)行特異的HCG檢測(cè)尿液HCG測(cè)定方法1.膠體凝集抑制試驗(yàn)（LAI）2.放射免疫吸附試驗(yàn)（RIA）3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）4.膠體金標(biāo)記免疫試驗(yàn)1)膠體凝集抑制試驗(yàn)（LAI）v原理：nHCG免疫家兔產(chǎn)生相應(yīng)的抗HCG抗體,當(dāng)這種抗體與抗原（HCG）相遇即可發(fā)生免疫反應(yīng)，但此反應(yīng)肉眼不能看見(jiàn)。n采用化學(xué)方法將HCG交聯(lián)在聚苯乙烯顆粒上，制成的HCG膠乳抗原（聚苯乙烯膠乳

18、顆粒-HCG），當(dāng)此抗原與HCG抗體結(jié)合就能夠產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)凝集反應(yīng)。膠體凝集抑制試驗(yàn)（LAI）n尿標(biāo)本中如果含有大量的HCG，當(dāng)加入抗HCG抗血清后，可發(fā)生抗原抗體的免疫反應(yīng)，如果再加入HCG膠乳抗原則不會(huì)發(fā)生肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)，則為HCG（+）。n如果尿液中不含HCG，先加入的HCG抗體與后加入的HCG膠乳抗原結(jié)合，出現(xiàn)明顯的特異性凝集反應(yīng)，此時(shí)，妊娠試驗(yàn)陰性。n該方法靈敏度100-500mol/ml，特異性差HCG膠體凝集抑制試驗(yàn)（膠體凝集抑制試驗(yàn)（LAI）原理示意圖）原理示意圖正常尿妊娠尿抗血清HCG抗原抗原抗抗HCG抗體抗體吸附有吸附有HCG的膠乳的膠乳吸附有HCG的膠乳未產(chǎn)生免疫反應(yīng)

19、產(chǎn)生肉眼不可見(jiàn)的免疫反應(yīng)膠乳呈均勻乳狀HCG測(cè)定法2)放射免疫吸附試驗(yàn)（RIA）n原理：利用放射標(biāo)記(放射性125I)的HCG抗原(Ag+)與被檢測(cè)尿中未標(biāo)記的HCG抗原(Ag)競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合專一性抗體，當(dāng)Ag+和Ag保持一定的有限量，而且Ag和Ag+之和大于Ab的有效結(jié)合位點(diǎn)時(shí)，則Ag+Ab復(fù)合物的形成量受Ag所制約。n當(dāng)被檢尿中HCG增加時(shí)，結(jié)合物的放射性減低，與不同含量標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比可測(cè)出尿中測(cè)出尿中HCG含量含量。n該方法繁瑣，需要一定的設(shè)備，且有核素污染，不適用于臨床常規(guī)應(yīng)用。n靈敏度為：15IU/L。 HCG測(cè)定法RIA模式圖模式圖標(biāo)記HCG抗原未標(biāo)記HCG抗原抗HCG抗體HCG測(cè)定法n

20、原理原理：n用抗HCG抗體包被聚苯乙烯酶標(biāo)孔，加入待測(cè)樣品或HCG標(biāo)準(zhǔn)品后，樣品中的HCG與包被在小孔上的抗體反應(yīng)，形成抗體-抗原復(fù)合物，再加入酶標(biāo)抗體，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，即雙抗體夾心法，再加酶作用底物顯示劑，顯色，可用肉眼或酶標(biāo)光度計(jì)比色定量。HCG測(cè)定法3)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）4)膠體金標(biāo)記免疫試驗(yàn)n金標(biāo)試驗(yàn)原理n膠體金是由氯化金與還原劑反應(yīng)形成的一種膠體顆粒，其顏色隨顆粒大小呈桔紅色到紫紅色變化。n膠體金具有吸附蛋白質(zhì)的特性，吸附機(jī)制可能是膠體金顆粒表面帶負(fù)電荷與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)靠靜電相互吸引而形成牢固結(jié)合。n被吸附在膠體金顆粒表面的蛋白質(zhì)（抗體）不影響其活性。n免

21、疫膠體金法原理n將羊抗鼠IgG（陰性對(duì)照）和羊抗人HCG抗血清分別固定在特制的纖維素試帶呈上下排列的兩條線，試帶條中均勻含有膠體金標(biāo)記的鼠抗人-HCG單克隆抗體和無(wú)關(guān)的金標(biāo)記鼠IgG。試驗(yàn)時(shí)，將試帶的下端浸入尿液中，迅速取出。金標(biāo)試驗(yàn)HCG金標(biāo)試紙條v帶條中均勻含有： 膠體金標(biāo)記鼠抗人-HCG單克隆抗體 膠體金標(biāo)記鼠IgG 。1：羊抗人HCG抗體（檢測(cè)線）2：羊抗鼠鼠IgG（陰性對(duì)照線） 膠體金標(biāo)記鼠IgG隨著尿液上行，到達(dá)陰性對(duì)照處與羊抗鼠鼠IgG形成抗原抗體復(fù)合物而顯色，作陰性對(duì)照1 2金標(biāo)試驗(yàn)w尿中-HCG與膠金標(biāo)記的鼠抗人-HCG結(jié)合形成免疫復(fù)合物w隨層析作用向上移動(dòng)，至檢測(cè)線與結(jié)合而

22、聚集顯色n尿液在上行的過(guò)程中，尿中-HCG與金標(biāo)記的鼠抗人-HCG結(jié)合形成免疫復(fù)合物，隨層析作用向上移動(dòng)，至檢測(cè)線與羊抗人HCG抗體結(jié)合而聚集顯色，隨著尿液上行，到達(dá)陰性對(duì)照處與羊形成金標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物而顯色作陰性對(duì)照。金標(biāo)試驗(yàn)金標(biāo)試驗(yàn)（標(biāo)本中）（標(biāo)本中）-HCG +金標(biāo)記的鼠抗人金標(biāo)記的鼠抗人-HCG-HCG-金標(biāo)記的鼠抗人金標(biāo)記的鼠抗人-HCG-羊抗人抗人HCG抗體抗體復(fù)合物-HCG-金標(biāo)記的鼠抗人金標(biāo)記的鼠抗人-HCG復(fù)合物+羊抗人羊抗人HCG抗體抗體（檢測(cè)線）（檢測(cè)線）金標(biāo)試驗(yàn)結(jié)果n含HCG的尿液試帶上可顯示上下兩條紫紅色線條。金標(biāo)試驗(yàn)w而陰性標(biāo)本則只顯示上邊一條紫紅色線條。金標(biāo)試

23、驗(yàn)結(jié)果n膠體金免疫法與RIA、ELISA等方法相比，有許多優(yōu)點(diǎn)：n它不需ELISA法中所要求的作用的底物和顯色劑，使操作更簡(jiǎn)便；n膠體金標(biāo)抗體在凍干狀態(tài)下室溫儲(chǔ)存較穩(wěn)定，有效期長(zhǎng)；n靈敏度高，10-25IU/L 金標(biāo)試驗(yàn)金標(biāo)試驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)HCG測(cè)定臨床意義n早期妊娠診斷 一般常用的HCG檢測(cè)方法能在妊娠35天時(shí)易顯陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性率達(dá)98以上，一些靈敏度高的試驗(yàn)可在更早期作出診斷，如膠體金試驗(yàn)，其靈敏度高，能檢出8-108-10天天妊娠尿中HCG。n對(duì)異常妊娠及與妊娠有關(guān)情況的觀察 宮外孕時(shí)，60HCG陽(yáng)性率，有助于與其它急腹癥的鑒別；不完全流產(chǎn)者子宮內(nèi)尚有胎盤組織存活時(shí)HCG(+) n在滋養(yǎng)細(xì)

24、胞腫瘤診療方面的應(yīng)用： 葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜癌等疾病時(shí)，尿中HCG顯著增高，可達(dá)10萬(wàn)U/L以上，可用稀釋試驗(yàn)診斷并與正常妊娠鑒別nHCG增高還可見(jiàn)于某些惡性腫瘤，如卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、肺癌等血中HCG也可升高，因此可將 HCG看作是腫瘤標(biāo)志物之一。但必需結(jié)合臨床情況和其他檢查結(jié)果綜合分析判斷。7.尿沉渣自動(dòng)化分析儀尿液干化學(xué)檢測(cè)方法的局限性例如：n白細(xì)胞：只能檢測(cè)含有酯酶的中性粒細(xì)胞n紅細(xì)胞：通過(guò)檢測(cè)血紅蛋白來(lái)反映紅細(xì)胞，有 許多因素會(huì)引起結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰 性n細(xì)菌： 只能檢測(cè)含有亞硝酸鹽還原酶的細(xì)菌nn定性結(jié)果，不能用于療效的監(jiān)測(cè) 結(jié)論：不能代替鏡檢鏡檢法的

25、缺點(diǎn)v費(fèi)時(shí)費(fèi)力v重復(fù)性差v不同檢驗(yàn)人員間的差異大v實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果不具可比性v難以標(biāo)準(zhǔn)化n離心的尿量不同n離心速度和時(shí)間不同n尿沉渣重懸的液量不同n尿沉渣重懸的方法不同n鏡檢一滴沉渣的液量不同n蓋片或計(jì)數(shù)板的差異n視野數(shù)目和位置的差異n成份識(shí)別上的人員差異n顯微鏡視野大小的差異用UF尿沉渣儀作篩選的好處n工作效率高，可以定量。n重復(fù)性良好，CV%比手工低10倍左右n臨床可以獲得更多的信息。n檢驗(yàn)的質(zhì)量將得到提高，信息更加準(zhǔn)確。n尿液檢查報(bào)告反饋的時(shí)間大大縮短，效率提高。特點(diǎn)n簡(jiǎn)化工作流程n無(wú)需人工干預(yù)n結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好n定量數(shù)據(jù)n標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)n可檢測(cè)紅細(xì)胞形態(tài)信息原理n全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)分析中

26、，應(yīng)用了流式細(xì)胞和電阻抗分析的原理。n在測(cè)試分析前，需先用菲啶與羰花氰燃料對(duì)尿液中有形成分進(jìn)行染色。n尿液中細(xì)胞等經(jīng)熒光染色后，在鞘流液的作用下，形成單個(gè)、縱列細(xì)胞流、快速通過(guò)氬激光檢測(cè)區(qū)，儀器檢測(cè)熒光、散射光和電阻抗的變化。n尿沉渣細(xì)胞信號(hào)可表達(dá)為三類，即前向散射光、熒光和電阻抗。March 6, 2000Sysmex Corporation (IHQ)489-氮雜菲（Phenanthridine）n染色DNA和RNA,熒光強(qiáng)度與核酸含量成正比n激發(fā)波長(zhǎng)480nm，熒光波長(zhǎng)610nmn發(fā)射熒光為: 橙色橙色n對(duì)細(xì)胞膜的穿透性差(對(duì)死細(xì)胞胞膜穿透性強(qiáng))羰花氰（Carbocyanine）n細(xì)胞膜

27、、核膜以及線粒體等膜性物質(zhì)被染色n激發(fā)波長(zhǎng)460nm，熒光波長(zhǎng)505nmn發(fā)射熒光為：綠色綠色UF-100UF-100染色原理原理尿沉渣細(xì)胞信號(hào)n前向散射光信號(hào)主要反應(yīng)細(xì)胞體積的大小。n前向散射光強(qiáng)度(Fsc)反映細(xì)胞橫截面積n前向散射光脈沖寬度(Fscw)反應(yīng)細(xì)胞的長(zhǎng)度。n熒光信號(hào)主要反映染色質(zhì)塊的大小。n熒光強(qiáng)度(Fl)主要反映細(xì)胞染色質(zhì)的強(qiáng)度n前向熒光脈沖寬度(Flw)反映細(xì)胞染色質(zhì)的長(zhǎng)度。n電阻抗反映細(xì)胞的體積。儀器對(duì)以上各種信號(hào)進(jìn)行綜合分析，可得出每個(gè)細(xì)胞的大小、細(xì)胞的長(zhǎng)度、染色性強(qiáng)度、染色部分的長(zhǎng)度以及細(xì)胞的體積等信息資料，并給出每類細(xì)胞的散射圖和直方圖，以及每微升尿中各中細(xì)胞的數(shù)

28、量和百分比等參數(shù)。Detection signalArgonlaserFlow celleCollecting LensPhotodiode+-ElectrodeForward scattered lightForwardscatterlight:The Forward scattered light intensity reflects the size (diameter) of the particle前向散射光強(qiáng)度(Fsc)The time of the electronic pulse derivedfrom the Forward scattered light(Fscw) ref

29、lects the length of the particle 前向散射光脈沖寬度(Fscw) Epithelial cellRBCWBCCastBacteriumFsc (intensity) Fscw xyxyxxyyPhoto-multiplierDetection signal+-FluorescenceThe flourescence intensity (Fl) refelcts the stainability of the particle熒光強(qiáng)度(Fl) The time of the respective electronic pulse derived from the

30、 flourescence signal (Flw) represents the length of the stained area 前象熒光脈沖寬度(Flw)(Fl)(Flw)xyxyxxyyArgonlaserFlow cellCollecting lensePhotodiodeElectrodePhoto-multiplierEpithelial cellRBCWBCCastBacteriumFluorescence尿液有形成分的脈沖圖形尿液有形成分的脈沖圖形(詳見(jiàn)“報(bào)告”P.5)n尿中顆粒分成2類：n紅細(xì)胞、白細(xì)胞細(xì)菌分布在Fsc和FL的散點(diǎn)圖上n管型和上皮細(xì)胞分布在Fscw和Fl

31、w的散點(diǎn) 圖上n顯示屏上顯示兩幅散點(diǎn)圖和5種有形成分計(jì)數(shù)結(jié)果，以定量和定性方式報(bào)告結(jié)果數(shù)據(jù)顯示舉例數(shù)據(jù)顯示舉例臨床應(yīng)用n血尿來(lái)源鑒定血尿來(lái)源鑒定n尿紅細(xì)胞變形機(jī)理n腎小球機(jī)械性損傷伴腎小管內(nèi)pH、滲透壓作用n腎小管內(nèi)不同滲透壓作用n用于診斷尿道感染用于診斷尿道感染n定量計(jì)數(shù)白細(xì)胞數(shù)目，優(yōu)于鏡檢法n白細(xì)胞在散點(diǎn)圖中所出現(xiàn)的位置可幫助判定疾病是急性還是慢性，還可用來(lái)決定療程。March 6, 2000Sysmex Corporation (IHQ)58紅細(xì)胞信息紅細(xì)胞信息UF-100 屏幕屏幕顯顯示示結(jié)結(jié)果果紅細(xì)紅細(xì)胞信息胞信息(根據(jù)紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度直根據(jù)紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度直方圖判斷方圖判斷

32、) )Dysmorphic (不均一不均一小小紅細(xì)紅細(xì)胞胞)? = 提示紅細(xì)胞源于腎小球提示紅細(xì)胞源于腎小球Isomorphic (正常均一正常均一紅細(xì)紅細(xì)胞胞)? = 提示紅細(xì)胞非來(lái)源于腎小球提示紅細(xì)胞非來(lái)源于腎小球Mixed (混合型混合型)? = RBC前向散射光直方圖顯示前向散射光直方圖顯示出一個(gè)混合型細(xì)胞分布出一個(gè)混合型細(xì)胞分布 Isomorphic RBC Dysmorphic RBC顯示:Normocytic RBC Microcytic RBC例：張某，男，39歲，急性腎小球腎炎。尿干化學(xué)分析結(jié)果：SG： 1.025 KET： neg NIT： negLEU： + BIL： n

33、eg G LU： norm PRO： + pH： 7.0 UBG： norm ERY： +鏡檢結(jié)果： WBC： 510/HP RBC： 滿視野/HP EC：02/HP尿蛋白定量： 2.20g/24h UF-100分析儀測(cè)試結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)： 紅細(xì)胞位于散射圖的左下方,非均一性紅細(xì)胞占99.7%;經(jīng)相差顯微鏡檢查證實(shí)為多型紅細(xì)胞急性腎小球腎炎腎結(jié)石n例：李某，男，29歲，腎結(jié)石。n尿干化學(xué)分析結(jié)果：SG： 1.015 KET： neg NIT： negLEU： neg BIL： neg GLU： norm PRO： neg pH： 5.0 UBG： norm ERY： +n鏡檢結(jié)果： WBC： 03/HP RBC： 滿視野/HP n尿液標(biāo)本UF-100分析儀測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 紅細(xì)胞位于散射圖的左中下方,均一性紅細(xì)胞占96.0%;經(jīng)相差顯微鏡檢查證實(shí)為