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文檔簡介
1、食用菌有害生物綠色防控關(guān)鍵技術(shù)研究及應(yīng)用技術(shù)報告課題協(xié)作組二一年九月一、立題依據(jù)及設(shè)計指導(dǎo)思想(二)食用菌主要有害生物發(fā)生規(guī)律的研究通過項(xiàng)目組前期的大量系統(tǒng)調(diào)查結(jié)果表明,當(dāng)前嚴(yán)重危害我市食用菌產(chǎn)量和質(zhì)量的主要病害種類有木霉病、鏈孢霉病、毛霉菌病、胡桃肉狀菌病、黏菌病、假單胞菌??;蟲害種類主要有菇蠅、菇蚊。為了科學(xué)有效控制其發(fā)生為害,特對上述主要有害生物進(jìn)行了發(fā)生規(guī)律的研究,主要研究結(jié)果如下:1. 木霉?。ňG霉病)2. 食用菌鏈孢霉病鏈孢霉是食用菌生產(chǎn)中最常見易污染的惡性雜菌之一。在菌種分離、提純或轉(zhuǎn)管擴(kuò)大培養(yǎng)中,若受鏈孢霉菌污染后處理不及時或處理不當(dāng),會造成大批菌種災(zāi)難性報廢;菌袋接種后受污染
2、則影響食用菌菌絲生長和子實(shí)體發(fā)育,一般可減產(chǎn)15%以上。鏈孢霉病系半知菌類病害,主要有紅色鏈孢霉(粗糙鏈孢霉)(Nenrospora crassa)、白色鏈孢霉(好食鏈孢霉)(N.sitophila),以紅色鏈孢霉常見且為害大。主要發(fā)生在熟料栽培上,生料栽培上較少發(fā)生。發(fā)病后在培養(yǎng)料表面形成橙紅色、粉紅色或白色的霉層,特別是棉塞受潮或塑料袋有破洞時,橙紅色或白色的孢子,呈團(tuán)狀或球狀長在棉塞外面或塑料袋外,稍受震動,其分生孢子隨氣流擴(kuò)散到空氣中到處傳播,污染環(huán)境。鏈孢霉菌絲生長疏松, 呈白色棉絮狀, 在氣生菌絲頂端形成鏈狀分生孢子, 卵圓形,桔紅色或白色, 分生孢子在2530條件下6 h可萌發(fā),
3、 其菌絲444都能生長,2536生長最快,在含水量50%70%的培養(yǎng)基中菌絲生長迅速,培養(yǎng)基的pH39范圍內(nèi)鏈孢霉都能生長,但最適pH 為57.5。適宜條件下,一般菌種袋57天就能長滿。鏈孢霉病的發(fā)生與多種因素有關(guān)。鏈孢霉菌分布廣,在玉米芯、玉米稈、棉籽殼以及果核等各種有機(jī)物上均極易滋生;因此,菌種生產(chǎn)房間室內(nèi)外的環(huán)境衛(wèi)生條件,與雜菌污染有直接關(guān)系。培養(yǎng)料消毒滅菌不徹底、接種室或接種箱消毒滅菌不徹底、接種時工作人員沒有遵守?zé)o菌操作規(guī)程、棉塞受潮后未更換、菌種袋有傷損裂口,接種用的原種或母種中帶有雜菌等都可造成鏈孢霉菌對培養(yǎng)基或培養(yǎng)料的污染。此外,菌種培養(yǎng)室的空氣相對濕度大、通風(fēng)不良有助于此菌的
4、發(fā)生和傳播。鏈孢霉病一般接菌后35天即可出現(xiàn)癥狀,一周后癥狀即非常明顯。該病在冀北的菇棚內(nèi)一般34月開始發(fā)病,59月是發(fā)生鏈孢霉的高峰期,此期內(nèi)如管理不當(dāng)即可造成嚴(yán)重?fù)p失。圖7 受紅色鏈孢霉污染被廢棄的菌袋 圖8 受紅色鏈孢霉污染菌袋放大圖9 白色鏈孢霉污染的香菇菌袋 圖10 紅色鏈孢霉為害黑木耳圖11 紅色鏈孢霉皿內(nèi)純培養(yǎng) 圖12 白色鏈孢霉皿內(nèi)純培養(yǎng)圖13 白色鏈孢霉分生孢子梗及分生孢子 圖14 同左圖15 紅色鏈孢霉分生孢子梗及分生孢子 圖16 病菌放大圖3. 毛霉病食用菌毛霉?。‥dible fungi mucormycosis)發(fā)生比較普遍,已成為冀北食用菌的主要病害,造成的損失占整
5、個食用菌生長過程中各種病害損失的15%左右,尤其是生料栽培、管理粗放的平菇受害更重,受害后可減產(chǎn)2030,嚴(yán)重的可達(dá)40以上。調(diào)查發(fā)現(xiàn)冀北食用菌毛霉病主要由總狀毛霉(Mucor racemosus)、高大毛霉(M. mucedo)、微小毛霉(M.pusillus)引致,主要危害各種食用菌培養(yǎng)料與食用菌爭奪養(yǎng)料,也可直接為害菇體。受污染的培養(yǎng)基或培養(yǎng)料,初期生出灰白色粗壯稀疏的菌絲,其生長速度明顯快于食用菌的菌絲生長速度;后期,氣生菌絲頂端形成許多圓形小黑粒(孢子囊),初為黃白色后變?yōu)楹谏?。條件適宜時,不到一星期在培養(yǎng)料內(nèi)外布滿了毛霉菌菌絲,使料袋變黑,導(dǎo)致料面不能出菇。為害菇體一般多從菌柄基部
6、開始發(fā)生,逐漸向上發(fā)展,個別也有從菌蓋開始發(fā)生,軟腐后病菇呈淡黃褐色水漬狀軟腐,表面粘滑,但無惡臭氣味。毛霉在谷物、土壤、糞便及植物殘枝體上廣泛分布。毛霉的孢囊孢子通過空氣和工具傳播,生料栽培主要通過培養(yǎng)料傳播。菌種生產(chǎn)過程中培養(yǎng)料消毒滅菌不徹底,接種室或接種箱的滅菌不徹底,或工作人員操作時沒嚴(yán)格按無菌操作要求,或菌種瓶、菌種袋的棉塞受潮,或接種后菇棚高溫高濕、通風(fēng)不良、菌床長期積水、子實(shí)體過熟未采的條件下容易發(fā)生。在培養(yǎng)中適當(dāng)加大石灰用量,造成偏堿性條件,可有效抑制毛霉菌的發(fā)生。毛霉病的發(fā)生時期與栽培方式有關(guān),一般在偏北部的平泉等棚室栽培的菇棚4月下旬開始發(fā)病,5月上旬至6月下旬進(jìn)入發(fā)病高峰
7、期;在偏南部的寬城縣、遵化市,一般4月中旬開始發(fā)病,5月上旬至6月中旬進(jìn)入發(fā)病高峰期。此期如多雨高濕、管理粗放則發(fā)病更重。圖17 毛霉病感染的菌袋 圖18 微小毛霉的試管純培養(yǎng)圖19 微小毛霉的孢子囊梗及孢子囊及孢囊孢子 圖20 病菌放大圖21 微小毛霉的皿裝純培養(yǎng) 圖22 微小毛霉的子實(shí)體圖23 高大毛霉皿裝純培養(yǎng) 圖24 高大毛霉的孢子囊梗、孢子囊、孢囊孢子4. 胡桃肉狀菌病6. 假單胞菌病假單胞菌病又稱平菇細(xì)菌性腐爛病,廣泛發(fā)生于冀北各食用菌產(chǎn)地,以新建及技術(shù)水平較低的菇棚受害尤重。該病為害子實(shí)體,也直接污染菌棒,發(fā)病后,輕者減產(chǎn)1020%,重的減產(chǎn)70%以上以至絕收。假單胞菌病病原為熒
8、光假單胞菌(Pseudomonas fluoresens),一般最先污染菌袋(盤),在菌袋接種口附近產(chǎn)生成片的污白色粘滑的菌膿,導(dǎo)致不出菇;為害子實(shí)體則在菌蓋或菌柄出現(xiàn)淡黃色水漬狀病斑,在適宜條件下病斑擴(kuò)展迅速,引起菌蓋或菌柄呈淡黃色水漬狀腐爛,并散發(fā)出難聞的惡臭氣味,病菇失去了經(jīng)濟(jì)價值不能食用。假單胞菌病的發(fā)生為害與技術(shù)水平、環(huán)境條件等多種因素有關(guān)。一般新建菇棚技術(shù)水平較低、培養(yǎng)料滅菌不徹底易發(fā)生此病;菇棚有過此病史又未對菇棚、菇架及時消毒,操作時不規(guī)范、手和用具未消毒也易發(fā)生此??;高溫高濕(溫度25以上,相對濕度高于95%)易加重病情;跳蟲、線蟲、菇蠅、菇蚊多,子實(shí)體傷口多也易傳病爛菇。冀
9、北地區(qū)該病于4、5月即可發(fā)病,68月為發(fā)病高峰期。病菌除為害滑子菇外,也可為害其它食用菌,平菇受害也較重,香菇、杏鮑菇等受害較輕。圖33 滑子菇受細(xì)菌為害大量菌袋被移除 圖34 菌袋上的細(xì)菌菌膿圖35 純培養(yǎng)的假單胞桿菌 圖36 細(xì)菌的顯微形態(tài)圖圖37 細(xì)菌污染杏鮑菇菌袋7. 菇蠅菇蠅是多種危害平菇、香菇等各種食用菌的雙翅目蠅類的統(tǒng)稱,主要有果蠅科的黑腹果蠅(Drosophila melanogaster),蚤蠅科的白翅蚤蠅(Megaslia sp.),蠅科的廄腐蠅(Muscina stabulans (Fallen)等,是菇房中發(fā)生普遍的害蟲,不但取食食用菌菌絲影響出菇,也可為害子實(shí)體,還可
10、傳播線蟲、螨蟲及病害,蚤蠅還可排泄出影響子實(shí)體生長的毒氣,使菌絲體顏色變紅。菇蠅為害對食用菌產(chǎn)量和品質(zhì)影響很大,食用菌受害后可減產(chǎn)1030%。菇蠅分布范圍廣,食性復(fù)雜。常生活在廄肥、有機(jī)物殘體、爛水果或野生菇上。幼蟲可隨培養(yǎng)料進(jìn)入菇房,成蟲也可隨菇房通風(fēng)進(jìn)入菇房。菇蠅產(chǎn)卵于培養(yǎng)料或子實(shí)體上,幼蟲孵出后即開始為害。為害平菇、香菇等食用菌時,幼蟲危害培養(yǎng)料和菌絲體,受害部位濕化,白色菌絲體消失,進(jìn)而引起雜菌感染;以后幼蟲從基部侵入菌柄,蛀食子實(shí)體,嚴(yán)重時將整個菇體食為海綿狀;為害黑木耳時直接產(chǎn)卵于黑木耳的耳片上,孵化后幼蟲鉆入耳肉內(nèi)取食營養(yǎng),導(dǎo)致爛耳,使子實(shí)體萎縮,并使菌塊易感染雜菌,嚴(yán)重影響產(chǎn)量
11、和質(zhì)量。 菇蠅以成蟲在菜窖、牲畜棚或舊菇房內(nèi)越冬,或以蛹于廢菌棒、廄肥堆及腐殖土內(nèi)越冬。待春季氣溫回升時開始活動,58月為發(fā)生高峰期。菇蠅繁殖力極強(qiáng),在承德等周邊地區(qū)的菇棚內(nèi)每年可繁殖68代,夏季半個月左右即可繁殖1代,在通風(fēng)不良及潮濕的環(huán)境下繁殖更快。一只雌蠅可產(chǎn)卵300粒。菇蠅有較強(qiáng)的趨光性、趨化性和趨腐性,菇房的菇香味和爛菇味對菇蠅都有很強(qiáng)的吸引力。圖38 香菇菌袋中的菇蠅幼蟲 圖39 菇蠅幼蟲的局部放大圖40 菇蠅(家蠅)幼蟲為害杏鮑菇 圖41 菇蠅成蟲圖42 菇蠅幼蟲為害杏鮑菇 圖43 麻蠅()8. 菇蚊菇蚊是雙翅目多種小型蚊類的統(tǒng)稱,冀北菇房中常見的有菌蚊科的多菌蚊(Mycetop
12、hilidae Docosia)、中華新蕈蚊(Neoempheria sinica Wu et Yang)、草菇折翅菌蚊(Allactoneuta valvaceae Yang et Wang)、韭菜遲眼蕈蚊(韭蛆)(Bradysia odoriphaga Yang et Zhang)、小菌蚊(Sciophila sp.),眼菌蚊科的平菇菇蚊(Mycetophila sp.)、平菇厲眼蕈蚊(Lycoriella pleuroti Yang et Zang),廮蚊科的嗜菇癭蚊(Mycophila fungicola Felt)和異翅癭蚊(Heteropera pygmaen Winnertz)。
13、菇蚊同菇蠅一樣也是食用菌的主要害蟲,常致食用菌品質(zhì)下降,一般減產(chǎn)1020%。菇蚊的危害方式主要是咬食菌絲,破壞菌絲的正常生長,導(dǎo)致菌絲衰弱或死亡,同時給其它雜菌的侵染創(chuàng)造了良好的條件,使一些競爭性雜菌在菇蚊的危害斑上大量繁殖并產(chǎn)生抗菌素,引發(fā)病害而進(jìn)一步破壞香菇菌絲,造成危害的惡性循環(huán)。也可從子實(shí)體基部鉆蛀,繼續(xù)往上鉆進(jìn)菇蓋,受害子實(shí)體外多有白色絲網(wǎng),菇體被蛀得千瘡百孔。此外,跳蟲、螨蟲、線蟲等也趁機(jī)在菇蚊的咬斑內(nèi)大量繁殖危害,加重危害程度。蟲病的綜合危害造成香菇等的菌絲自溶,子實(shí)體污染成褐色并伴有難聞腥臭味,培養(yǎng)基松散,黑水橫流。在冀北地區(qū)菇蚊類一年發(fā)生35代,在溫暖的菇棚內(nèi)可常年為害并越冬
14、,如低溫冷棚則可在廢菌棒或冷棚周圍的韭菜等越冬作物的根部附近以蛹越冬。冷棚及附近的蛹春季5月底前后羽化,之后雌雄成蟲交尾產(chǎn)卵,每只雌蟲約產(chǎn)卵100300粒,卵產(chǎn)在床料面或子實(shí)體上,孵化出的幼蟲取食菌絲及子實(shí)體。菇蚊喜歡在潮濕、骯臟的環(huán)境繁衍。菇段因受害后所產(chǎn)生的特殊氣味,對菇蚊的成蟲有很強(qiáng)的誘集性,因而菇蚊往往又會回到病斑上產(chǎn)卵,引起下一個世代對香菇等的危害。成蟲均有明顯的趨光性。韭蛆幼蟲對環(huán)境的濕度較為敏感,存活的最佳濕度在60%80%之間,寄主濕度過大立即爬離寄主,不再取食;對溫度要求不高,2025是其最適生長溫度;韭蛆幼蟲極為怕光,強(qiáng)光刺激下表現(xiàn)為不停翻滾且四處爬動。而韭蛆成蟲雖然喜陰濕
15、環(huán)境,但濕度大于70%則不能存活。多菌蚊適宜于中低溫環(huán)境下生活,當(dāng)溫度在026之間,都能完成正常的生活周期,以1525之間為活躍期,成蟲喜歡在袋口上和菌床上飛行和交尾,適溫下成蟲壽命較長,可達(dá)35天。在食源豐富,溫度適宜的條件下,成蟲產(chǎn)卵量達(dá)100250粒。通過系統(tǒng)誘集觀察明確平菇厲眼蕈蚊成蟲及韭菜遲眼蕈蚊成蟲一年中春、秋季各出現(xiàn)一個發(fā)生高峰,以秋季發(fā)生數(shù)量較大,為害較重,傳播的病害較多。圖44 韭蛆的成蟲 圖45 韭蛆的幼蟲圖46 多菌蚊成蟲 圖47 多菌蚊幼蟲食害平菇圖48 多菌蚊的蛹圖49 袋內(nèi)大量的菇蚊成蟲 圖50 菇蚊成蟲放大圖圖51 菇蚊的幼蟲為害杏鮑菇附其它食用菌病蟲害及天敵部分
16、生態(tài)彩圖(四)藥劑篩選試驗(yàn)及示范為既有效控制食用菌有害生物的發(fā)生為害,又防止高毒、高殘留農(nóng)藥對食用菌的污染,實(shí)現(xiàn)食用菌綠色安全生產(chǎn),課題組進(jìn)行了一系列的藥劑室內(nèi)毒力試驗(yàn),篩選出了一些適用的高效、低毒、無污染的安全藥劑,并進(jìn)行了大面積的試驗(yàn)示范,取得了良好的防控效果?,F(xiàn)將結(jié)果匯總?cè)缦拢?. 食用菌木霉病、鏈孢霉病、毛霉?。?)室內(nèi)抑菌試驗(yàn)試驗(yàn)于20062007年在河北旅游職業(yè)學(xué)院植保實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。供試材料取自平泉縣食用菌棚內(nèi)采回菌袋上的病菌進(jìn)行組織分離、培養(yǎng)、提純。抑菌效果試驗(yàn)采用抑菌圈法測定,用滅菌蒸餾水將供試藥劑配制成3個梯度濃度。在10×10倍顯微鏡下,以每視野50個左右孢子濃度制
17、備孢子懸浮液。加熱融化定量的PDA培養(yǎng)基(pH自然),冷卻至48左右加入1ml孢子懸浮液,充分混合均勻后迅速倒入培養(yǎng)皿,待凝固后制成平板備用。用消毒的鑷子夾取滅菌的直徑為6mm的濾紙片分別浸在配制好的各個藥劑的3個濃度梯度的藥液中,1min后取出放在濾紙片上停留2min,然后放在盛有PDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中每皿4個,即重復(fù)4次。設(shè)滅菌水為對照,之后倒置于27恒溫箱中培養(yǎng)定時觀察,72h時取出觀察測量抑菌圈的直徑取平均值。根據(jù)抑菌圈直徑占含菌培養(yǎng)基直徑的百分率表示抑菌率,以確定不同藥劑及濃度對食用菌木霉菌、鏈孢霉菌、毛霉菌孢子萌發(fā)及菌絲生長的抑制能力,并用新復(fù)極差法對所獲數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,確定各處
18、理藥劑間的差異顯著性。結(jié)果詳見表1、表2、表3。表1 不同藥劑不同濃度對綠色木霉抑菌效果藥劑名稱稀釋倍數(shù)重 復(fù)72h抑菌圈抑菌率(%)差異顯著性平均直徑(mm)0.050.0170%菌絕殺SP50012.612.311.912.712.313.67aA100%克霉先鋒WP50011.212.111.411.311.512.78bB海精靈50010.311.610.911.21112.22cBC70%菌絕殺SP100010.611.211.310.91112.22cBC高效綠霉凈WP100011.310.811.110.81112.22cBC3%中生菌素AS3009.811.511.11010.
19、611.78cC高效綠霉凈WP150011.110.710.21010.611.78cC100%克霉先鋒WP10009.310.510.210.11011.11dD3%中生菌素AS50010.210.49.79.71011.1dD海精靈1000910.79.5109.810.89dD100%克霉先鋒WP15008.89.699.49.210.22eE高效綠霉凈WP200089.28.78.98.79.67fEF70%菌絕殺SP15007.88.68.78.18.39.22hF3%中生菌素AS80000000072%農(nóng)用鏈霉素SP200000000072%農(nóng)用鏈霉素SP300000000072%
20、農(nóng)用鏈霉素SP400000000099%冰醋酸AS10000000099%冰醋酸AS20000000099%冰醋酸AS30000000089.5%乳酸AS20000000089.5%乳酸AS50000000089.5%乳酸AS80000000099.5%水楊酸10000000099.5%水楊酸30000000099.5%水楊酸500000000海精靈1500000000清水(CK)00000表1測驗(yàn)結(jié)果表明:70%菌絕殺SP的500倍液72h抑菌圈平均直徑達(dá)13.67mm,抑菌率達(dá)40.89%,培養(yǎng)基上綠色木霉菌絲的生長受到抑制,極顯著優(yōu)于其它各不同藥劑不同濃度對綠色木霉抑菌效果,其次是100
21、%克霉先鋒WP的500倍液顯著優(yōu)于其它各不同藥劑不同濃度對綠色木霉抑菌效果;其余不同藥劑不同濃度間對綠色木霉抑菌效果不明顯。表2 不同藥劑不同濃度對鏈孢霉抑菌效果藥劑名稱稀釋倍數(shù)重復(fù)72h抑菌圈抑菌率(%)差異顯著性平均直徑(mm)0.050.01100%克霉先鋒WP50039.635.636.435.636.840.89aA100%克霉先鋒WP100035.62733.63332.335.89bB100%克霉先鋒WP150026.730.529.228.628.832cC99.5%水楊酸10015.316.617.416.716.518.33dD70%菌絕殺SP50011.712.812.5
22、12.212.313.67eE海精靈50010.212.211.410.31112.22fE70%菌絕殺SP100010.510.911.411.21112.22fE海精靈10008.810.710.49.19.810.89gF高效綠霉凈WP10009.610.49.59.79.810.89gF99.5%水楊酸3009.29.79.49.79.510.56gF高效綠霉凈WP15008.29.69.48.8910ghFG99.5%水楊酸5007.78.28.68.78.39.22hiFG70%菌絕殺SP150087.88.58.98.39.22hiFG89.5%乳酸AS2007.67.96.88
23、.27.68.4ijG高效綠霉凈WP200067.26.67.46.87.55jH3%中生菌素AS3000000003%中生菌素AS5000000003%中生菌素AS80000000072%農(nóng)用鏈霉素SP200000000072%農(nóng)用鏈霉素SP300000000072%農(nóng)用鏈霉素SP400000000099%冰醋酸AS10000000099%冰醋酸AS20000000099%冰醋酸AS30000000089.5%乳酸AS50000000089.5%乳酸AS800000000海精靈1500000000清水(CK)00000表2測驗(yàn)結(jié)果表明:100%克霉先鋒WP對鏈孢霉抑菌效果最好,72h抑菌圈平
24、均直徑分別為36.8mm、32.3mm、28.8mm,達(dá)13.67mm,抑菌率分別達(dá)到40.89%、35.89%、32%,說明100%克霉先鋒WP是鏈孢霉的有效抑制劑,在生產(chǎn)中考慮到藥劑的投入成本,可以選擇100%克霉先鋒WP的1000倍液或1500倍液。其余不同藥劑不同濃度間對鏈孢霉抑菌效果不明顯。表3 不同藥劑不同濃度對毛霉抑菌效果藥劑名稱稀釋倍數(shù)重復(fù)72h抑菌圈抑菌率(%)差異顯著性平均直徑(mm)0.050.01高效綠霉凈WP100010.612.311.611.511.512.78aA高效綠霉凈WP15001111.610.911.711.312.56aA高效綠霉凈WP20009.5
25、9.710.29.89.810.89bB黃斑消5009.89.298.89.210.22cB100%克霉先鋒WP50099.276.888.89dC99.5%水楊酸1006.77.47.76.67.17.89eD菌寶WP200067.16.97.36.87.56efDE菌寶WP30005.86.76.96.66.57.22fgDE99.5%水楊酸3006.565.76.46.26.89gE黃斑消10006.16.166.36.26.89gE100%克霉先鋒WP10006.266.26.16.16.78gE3%中生菌素AS300000000-3%中生菌素AS500000000-3%中生菌素AS8
26、00000000-菌寶WP4000000000-99%冰醋酸AS100000000-99%冰醋酸AS200000000-99%冰醋酸AS300000000-89.5%乳酸AS200000000-89.5%乳酸AS500000000-89.5%乳酸AS800000000-99.5%水楊酸500000000-100%克霉先鋒WP1500000000-黃斑消1500000000-70%菌絕殺SP500000000-70%菌絕殺SP1000000000-70%菌絕殺SP1500000000-清水(CK)00000-表3測驗(yàn)結(jié)果表明:高效綠霉凈WP的1000稀釋倍液和1500稀釋倍液比其它不同藥劑不同濃
27、度對毛霉抑菌效果處理差異達(dá)到極顯著水平,72h抑菌圈平均直徑達(dá)11.5mm和11.3mm,抑菌率達(dá)12.78%和12.56%,但高效綠霉凈WP的1000稀釋倍液和1500稀釋倍液間差異不顯著。由于考慮到經(jīng)濟(jì)投入成本,高效綠霉凈WP的1500稀釋倍液為最優(yōu);其次是高效綠霉凈WP的2000稀釋倍液和黃斑消的500稀釋倍液比其它處理差異極顯著;其余不同藥劑不同濃度間對毛霉抑菌效果不明顯。(2)對食用菌菌絲生長影響的試驗(yàn)為確保供試藥劑對食用菌生長的安全性,課題組采用生長速率法對上述及后續(xù)室內(nèi)毒力試驗(yàn)顯效的多種藥劑相繼做了香菇、平菇兩種主要食用菌的抑菌率試驗(yàn),以評估其對食用菌菌絲生長的影響。試驗(yàn)方法和結(jié)
28、果如下:帶毒培養(yǎng)基(含毒介質(zhì))的制作:在無菌操作下,經(jīng)計算后加入一定量的藥液至冷卻到50左右的試管培養(yǎng)基中,混勻后倒入滅菌培養(yǎng)皿中制平板,即成帶毒培養(yǎng)基(含毒介質(zhì))。 接種病原菌菌餅:在無菌操作下,用切菌環(huán)盡可能從種菌皿的外緣生活力強(qiáng)的菌落處取材切取一塊香菇菌絲的菌餅,移入帶毒培養(yǎng)基的中央,然后將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱(27±1)中培養(yǎng)。結(jié)果檢查:菌餅接種后不同時間觀察菌絲的生長情況,每天采用十字交叉法測定菌餅的直徑,以其均數(shù)代表菌落大小,以第7天的菌餅直徑為依據(jù)計算抑菌率。 CK菌落直徑處理菌落直徑抑菌率
29、=-×100% CK菌落直徑試驗(yàn)結(jié)果詳見表4、表5。表4 幾種殺菌劑對香菇菌絲生長的影響藥劑稀釋菌絲平均生長速度(cm/d)長速均值抑菌率差異顯著性生長勢*倍數(shù)(cm/d)(%)0.050.01三生液8008.969.519.329.26-58.56aA+三生液5009.238.248.888.78-50.34abAB+三生液3008.268.51
30、8.488.42-44.18bB+接種一擦靈30006.67.026.926.85-17.29cC+接種一擦靈20006.366.56.326.39-9.41cdCD+再生素2406.556.216.36.35-8.73cdCD+水楊酸5007.115.656.146.3-7.88cdCD+3%中生菌素AS8005.826.216.036.02-3.08dDE+CK4.866.925.755.840dfDEF+再生素1205.195.365.725.427.19fgEFG+水楊酸3005.694.85.475.328.9fghEFGH+硫酸鏈霉素40005.255.295.345.299.42
31、fghEFGHI+3%中生菌素AS5004.885.325.175.1212.33ghiFGHI+硫酸鏈霉素30004.945.085.125.0513.53ghijFGHI+海精靈15005.274.854.464.8616.78ghijGHI+硫酸鏈霉素20004.285.164.934.7917.98ghijGHI+接種一擦靈10004.355.14.764.7421.1hijGHI+3%中生菌素AS3004.084.784.694.5222.6ijHIJ+綠丹苦參20004.444.164.794.4623.63jIJ+克霉先鋒15003.663.854.023.8434.25kJK+
32、黃斑消15004.233.483.583.7635.62klJK+綠丹苦參10003.654.063.473.7336.03klJK+再生素603.44.033.643.6936.82klJKL+海精靈10003.63.243.563.4740.58klmKL+乳酸5002.963.653.333.3143.32klmKLM+高效綠霉凈20003.233.123.173.1745.72lmnKLMN+黃斑消10002.762.833.092.8950.51mnoLMN+高效綠霉凈15002.822.952.82.8651.03mnoLMN+克霉先鋒100032.62.982.8651.03mn
33、oLMN+乳酸3002.463.252.872.8651.03mnoLMN+克霉先鋒5002.782.542.32.5456.51noMNO+綠丹苦參5002.182.572.822.5256.85oMNO+高效綠霉凈10002.32.422.712.4857.53oMNO+水楊酸1002.312.462.182.3260.27oNOP+黃斑消5001.281.862.11.7573.03pOPQ+海精靈5001.621.311.751.5773.12pPQ+乳酸1001.521.41.381.4375.51pQR+冰醋酸3001.0601.10.7287.67qRS+冰醋酸100000010
34、0rS冰醋酸2000000100rS*:+表示菌落圓整,菌絲潔白、濃密、粗壯; +表示菌落圓整,菌絲白色、較密;+表示菌落不整齊,菌絲灰白色,稀疏。表4測驗(yàn)結(jié)果表明:不同藥劑、不同濃度的殺菌劑對平菇菌絲生長的影響明顯不同。與對照比,三生液肥300倍800倍對菌絲生長不但沒有抑制作用,反而具有明顯的促進(jìn)作用,促進(jìn)作用隨著稀釋倍數(shù)的提高而增加,菌絲生長潔白、濃密、粗壯,即用三生液肥對平菇菌絲生長效果最優(yōu),其次是接種一擦靈20003000倍液。優(yōu)于其他藥劑及濃度。上述試驗(yàn)結(jié)果同時表明,除冰醋酸的各個處理及乳酸、水楊酸、海精靈及黃斑消的第一個處理對平菇和香菇菌絲的生長抑制作用較強(qiáng)在食用菌病害防治中需慎
35、用外,其它供試藥劑的各個處理均對平菇和香菇菌絲的生長沒有影響,其中三生液各個處理及再生素240倍液、水楊酸500倍液、中生菌素800倍液處理的平菇、香菇菌絲的生長勢都超過了對照,可安全用于平菇和香菇的生產(chǎn)中進(jìn)行病害防治。表5 幾種殺菌劑對平菇菌絲生長的影響藥劑稀釋菌絲平均生長速度(cm/d)長速均值抑菌率差異顯著性生長勢*倍數(shù)(cm/d)(%)0.050.01冰醋酸1000000100aA冰醋酸2000000100aA冰醋酸30001.211.150.7986.12abcdAB+乳酸1001.751.11.321.3975.57abcdeABC+海精靈5001.551.281.861.5672
36、.58abcdefABCD+黃斑消5001.282.322.11.966.61abcdefgABCDE+水楊酸1001.22.752.12.0264.5abcdefghABCDE+克霉先鋒50032.352.22.5255.71abcdefghiABCDEF+綠丹苦參5002.322.682.872.6253.95abcdefghiABCDEF+克霉先鋒100032.12.782.6353.78abcdefghiABCDEF+高效綠霉凈100032.62.652.7551.67abcdefghijABCDEF+高效綠霉凈15002.72.952.82.8250.44abcdefghijkABC
37、DEF+黃斑消10002.652.873.012.8450.09abcdefghijkABCDEF+乳酸5002.62.653.432.8949.21abcdefghijkABCDEF+乳酸3002.653.752.462.9548.15abcdefghijkABCDEF+高效綠霉凈20002.953.013.13.0246.92abcdefghijkABCDEF+克霉先鋒15002.753.34.023.3640.95abcdefghijklABCDEF+海精靈10003.23.363.523.3640.95abcdefghijklABCDEF+綠丹苦參10003.654.13.223.66
38、35.68bcdefghijklABCDEF+黃斑消15004.123.563.423.734.97cdefghijklABCDEF+再生素603.254.23.883.7833.57defghijklABCDEF+綠丹苦參20004.354.284.664.4322.14efghijklABCDEFG+海精靈15005.014.264.394.5520.04efghijklBCDEFG+3%中生菌素AS3004.354.844.664.6218.8efghijklBCDEFG+硫酸鏈霉素20004.525.224.734.8215.29efghijklBCDEFGH+接種一擦靈10004.5
39、5.34.84.8714.41efghijklBCDEFGH+硫酸鏈霉素30004.895.125.035.0111.95fghijklBCDEFGH+3%中生菌素AS5004.955.215.085.0810.72fghijklBCDEFGH+硫酸鏈霉素40005.025.185.225.149.67ghijklBCDEFGH+CK4.756.955.385.019ghijklmnBCDEFGH+再生素1205.155.555.645.434.57hijklmnCDEFGH+水楊酸3006.34.75.325.444.39hijklmnCDEFGH+3%中生菌素AS8005.756.016.
40、075.94-4.39ijklmnoDEFGH+再生素2406.356.16.166.2-8.96jklmnoEFGH+水楊酸5007.25.356.286.28-10.37klmnoEFGH+接種一擦靈20006.66.76.456.58-15.64lmnoFGH+接種一擦靈30006.66.826.926.78-19.17lmnoFGH+三生液3008.388.48.468.41-47.8mnoGH+三生液5009.18.038.728.62-51.49noGH+三生液8008.99.39.219.14-60.63oH+*:+表示菌落圓整,菌絲潔白、濃密、粗壯; +表示菌落圓整,菌絲白色、
41、較密;+表示菌落不整齊,菌絲灰白色,稀疏。以下為七天后部分平菇生長速率試驗(yàn)結(jié)果圖片。圖1 冰醋酸處理的平菇生長結(jié)果 圖2 再生素處理的平菇生長結(jié)果圖3 三生液處理的平菇生長結(jié)果 圖4 對照平菇的生長結(jié)果表5測驗(yàn)結(jié)果表明:不同藥劑、不同濃度的殺菌劑對香菇菌絲生長的影響明顯不同。與對照比,三生液300倍800倍對菌絲生長不但沒有抑制作用,反而具有明顯的促進(jìn)作用,促進(jìn)作用隨著稀釋倍數(shù)的提高而增加,菌絲生長潔白、濃密、粗壯,即用三生液肥對平菇菌絲生長效果最優(yōu),其次是接種一擦靈20003000倍液。優(yōu)于其他藥劑及濃度。上述試驗(yàn)結(jié)果同時表明,除冰醋酸的各個處理及乳酸、水楊酸、海精靈及黃斑消的第一個處理對平
42、菇和香菇菌絲的生長抑制作用較強(qiáng)在食用菌病害防治中需慎用外,其它供試藥劑的各個處理均對平菇和香菇菌絲的生長沒有影響,其中三生液處理的平菇、香菇菌絲的生長勢都超過了對照,可安全用于平菇和香菇的生產(chǎn)中進(jìn)行病害防治。(3)菇棚田間試驗(yàn)示范2007年在平泉縣臥龍鎮(zhèn)進(jìn)行了試驗(yàn)示范,試驗(yàn)選取了在室內(nèi)抑菌毒力試驗(yàn)及對食用菌安全評估試驗(yàn)中安全有效的6個藥劑,利用其經(jīng)濟(jì)有效濃度進(jìn)行了試驗(yàn)處理,每個處理10m2,三次重復(fù),隨機(jī)區(qū)組排列。為實(shí)現(xiàn)既能有效控制病害的發(fā)生為害,又能促進(jìn)食用菌菌絲生長和子實(shí)體分化,以提高產(chǎn)量,我們在每個處理藥劑中均佐以菌肥,菌肥一般在配料時加入,部分在出菇時噴施,主要包括三生液500倍液、綠
43、風(fēng)95 800倍液、滑子菇高產(chǎn)素1000倍液、“保菇王牌”氨基酸800倍液等。于食用菌開袋時開始噴施,噴施前先調(diào)查病情指數(shù),噴施后7天(第一潮菇出菇后至第二潮菇出菇前)再調(diào)查病情指數(shù),同時計算校正防效。試驗(yàn)依據(jù)的病害分級標(biāo)準(zhǔn)、病指和校正防效公式如下,試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果詳見表6、表7、表8。病害分級標(biāo)準(zhǔn):0級, 沒有綠色木霉斑;1級,15個面積小于2cm2的病斑;2級,5個以上面積小于2cm2的病斑至1/3面積發(fā)?。?級, 1/3面積以上至1/2面積發(fā)?。?級, 1/2以上面積發(fā)病。病情指數(shù)=(各級樣本數(shù)×各級病情級值)/(調(diào)查總樣本數(shù)×最高病情級值)×100校正防效(%
44、) =1-(處理區(qū)處理后病指×對照區(qū)處理前病指)/ 處理區(qū)處理前病指×對照區(qū)處理后病指×100%表6 6種藥劑防治木霉病的效果藥劑稀釋倍數(shù)施藥前病情指數(shù)施藥后病情指數(shù)校正防效(%)高效綠霉凈15000.90.996.0克霉先鋒10001.81.896.0黃斑消10001.21.794.2海精靈10001.52.892.3中生菌素5001.42.692.4菌絕殺10001.61.995.1CK1.024.4根據(jù)上表可見,上述藥劑防治木霉病均有優(yōu)良的的效果,尤以高效綠霉凈和克霉先鋒為佳,相對防效達(dá)100%,校正防效也達(dá)96%。最后確定以高效綠霉凈和克霉先鋒兩種藥劑做為
45、生產(chǎn)實(shí)踐中大力推廣應(yīng)用的藥劑。表7 6種藥劑防治紅色鏈孢霉病的效果藥劑稀釋倍數(shù)施藥前病情指數(shù)施藥后病情指數(shù)校正防效(%)高效綠霉凈15001.81.996.0水楊酸3002.02.295.8克霉先鋒10001.61.696.7黃斑消10001.41.793.0海精靈10001.01.893.2菌絕殺10001.11.196.7CK0.923.7根據(jù)上表可見,上述藥劑防治紅色鏈孢霉病均有優(yōu)良的的效果,以菌絕殺和克霉先鋒為佳,相對防效達(dá)100%,校正防效也達(dá)96%以上;其次為高效綠霉凈和水楊酸。據(jù)此確定以菌絕殺、克霉先鋒和高效綠霉凈三種藥劑做為生產(chǎn)實(shí)踐中大力推廣應(yīng)用的藥劑。表8 5種藥劑防治毛霉病的效果藥劑稀釋倍數(shù)施藥前病情指數(shù)施藥后病情指數(shù)相對防效(%)高效綠霉凈15001.71.796.2水楊酸3001.31.894.8克霉先鋒10001.81.996.0黃斑消10001.01.195.8菌寶WP10
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