1、第第2講講 胚胎工程、生物技術(shù)的安全性和胚胎工程、生物技術(shù)的安全性和倫理問題及生態(tài)工程倫理問題及生態(tài)工程考綱點(diǎn)擊考綱點(diǎn)擊1.趨勢(shì)分析：(1)以最新的胚胎工程、干細(xì)胞培養(yǎng)的研究成果為背景考查胚胎工程的應(yīng)用；(2)多以當(dāng)今生態(tài)問題為背景考查生態(tài)工程的原理與應(yīng)用2.復(fù)習(xí)策略：(1)圖解分析法理解胚胎發(fā)育的過程和胚胎移植的程序；(2)列表比較法理解生態(tài)工程的五個(gè)原理與實(shí)例1.動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)()2.胚胎干細(xì)胞的移植()3.轉(zhuǎn)基因生物的安全性()4.生物武器對(duì)人類的威脅()5.生物技術(shù)中的倫理問題()6.生態(tài)工程的實(shí)例()7.胚胎工程的應(yīng)用()8.簡述生態(tài)工程的原理()備考指南

2、備考指南考綱要求考綱要求網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建知識(shí)自填知識(shí)自填必考點(diǎn)一必考點(diǎn)一 胚胎工程胚胎工程夯實(shí)基礎(chǔ)夯實(shí)基礎(chǔ)查漏補(bǔ)缺查漏補(bǔ)缺1.判斷下列有關(guān)胚胎工程及其應(yīng)用的敘述。(1)絕大多數(shù)精卵細(xì)胞的識(shí)別具有物種特異性。 ( )(2)哺乳動(dòng)物次級(jí)卵母細(xì)胞只有在精子的作用下才能形成成熟卵子。 ( )(3)早期胚胎培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需加入血清。( )(4)受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植。( )(5)試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。( )答案 (1) (2) (3) (4) (5)2.杜泊羊以其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，被稱為“鉆石級(jí)”肉用綿羊?？蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工

3、程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是( )A.為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需用雌激素對(duì)雌性杜泊羊進(jìn)行處理B.從卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接與獲能的精子進(jìn)行體外受精C.為避免代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D.為了進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖規(guī)模，可通過胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎答案 D解析 超數(shù)排卵用促性腺激素而不是雌激素，A項(xiàng)錯(cuò)。根據(jù)采集部位而定，如果是從輸卵管采集的卵細(xì)胞，已發(fā)育成熟，可直接與獲能的精子在體外受精；如果是從卵巢中采集的卵細(xì)胞，未發(fā)育成熟，都要經(jīng)過體外人工培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精，故B項(xiàng)錯(cuò)；受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，C項(xiàng)錯(cuò)；為了進(jìn)一步擴(kuò)大

4、繁殖規(guī)模，可通過胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎或多胎，故D項(xiàng)正確?？键c(diǎn)整合考點(diǎn)整合融會(huì)貫通融會(huì)貫通 1.胚胎工程的操作流程分析(1)胚胎移植過程中兩次使用激素，第一次常用孕激素對(duì)受、供體進(jìn)行同期發(fā)情處理；第二次用促性腺激素對(duì)供體做超數(shù)排卵處理。(2)胚胎移植過程中的兩次檢查：第一次對(duì)收集的胚胎進(jìn)行檢查；第二次對(duì)受體母畜是否妊娠進(jìn)行檢查。(3)胚胎移植是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎是由受精卵形成的，還是由核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育而成或胚胎分割形成的。2.早期胚胎發(fā)育(1)過程：受精卵卵裂期桑椹胚囊胚原腸胚(2)圖示：【典例示范1】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htP

5、A基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：(1)htPA基因與載體用_切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用_技術(shù)。(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要經(jīng)過_，才具備受精能力。(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是_。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行_。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的_。(4)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到_，說明目的基因成功表達(dá)。 【思維流程】 【解析】 (1)用同種限制酶切割質(zhì)粒和含有htPA基因的DNA片段可產(chǎn)

6、生相同的黏性末端，便于構(gòu)建基因表達(dá)載體；通常采用DNA分子雜交技術(shù)來檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA。(2)為獲得更多的卵母細(xì)胞，通常對(duì)供體母羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵；采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才具備受精能力。(3)通常用顯微注射法將重組表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物的受精卵；為了獲得母羊，移植前需要對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定；早期胚胎細(xì)胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體。(4)htPA基因的表達(dá)產(chǎn)物為人組織纖溶酶原激活物，若在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測(cè)到人組織纖溶酶原激活物，說明目的基因成功表達(dá)?！敬鸢浮?(1)同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交

7、(或核酸探針)(2)超數(shù)排卵 獲能(處理)(3)顯微注射法 性別鑒定 全能性(4)htPA(或人組織纖溶酶原激活物)必考點(diǎn)二必考點(diǎn)二 生物技術(shù)的安全性和倫理問題生物技術(shù)的安全性和倫理問題夯實(shí)基礎(chǔ)夯實(shí)基礎(chǔ)查漏補(bǔ)缺查漏補(bǔ)缺下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，錯(cuò)誤的是( )A.我國已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B.國際上大多數(shù)國家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上答案 B解析 本題用直選法。對(duì)轉(zhuǎn)基因食品只是要求標(biāo)注“轉(zhuǎn)基因*”等字樣，并沒有在轉(zhuǎn)基因

8、食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害，B項(xiàng)錯(cuò)誤?？键c(diǎn)整合考點(diǎn)整合融會(huì)貫通融會(huì)貫通 1.轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題 (1)食品安全方面：可能合成毒蛋白、出現(xiàn)新的過敏原、改變食物的營養(yǎng)成分等。 (2)生物安全方面：有可能造成“基因污染”，危害生物的多樣性。 (3)環(huán)境安全方面：有可能打破物種界限，改變生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)和物質(zhì)循環(huán)；造成二次污染或產(chǎn)生危害動(dòng)植物和人類的生物或產(chǎn)物。2.生物技術(shù)引發(fā)的倫理問題(1)克隆人技術(shù)：克隆人流程圖倫理問題：違反人類倫理道德；沖擊現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)倫理道德觀念；人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人。(2)設(shè)計(jì)試管嬰兒流程圖：設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問題：把試管嬰

9、兒當(dāng)作人體零配件工廠，是對(duì)生命的不尊重；拋棄或殺死配型不合適的多余胚胎，無異于“謀殺”； (3)比較試管嬰兒與克隆人的不同：遺傳物質(zhì)主要來自核供體遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)個(gè)體遺傳物質(zhì)無性生殖有性生殖生殖方式核移植技術(shù)、胚胎移植體外受精、胚胎移植技術(shù)基礎(chǔ)克隆人試管嬰兒(4)設(shè)計(jì)試管嬰兒與試管嬰兒的不同點(diǎn)：所用的技術(shù)手段不同：前者在嬰兒胚胎移植前需進(jìn)行遺傳學(xué)診斷或基因診斷，后者不需要。應(yīng)用不同：前者主要用于白血病等災(zāi)難性疾病的治療，后者主要解決不孕夫婦的生育問題?！镜淅痉?】生物技術(shù)安全性和倫理問題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是( )A.應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)B.當(dāng)

10、今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對(duì)治療性克隆C.反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒D.生物武器是用微生物、毒素、干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力【解析】 在轉(zhuǎn)基因過程中，避免基因污染和對(duì)人類的影響，必須嚴(yán)格選擇目的基因，A項(xiàng)正確；我國不反對(duì)治療性克隆，堅(jiān)決反對(duì)生殖性克隆，B項(xiàng)正確；反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒原因之一是防止選擇性設(shè)計(jì)嬰兒，違背倫理道德，C項(xiàng)正確；生物武器是指有意識(shí)的利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo)，以達(dá)到戰(zhàn)爭目的的一類武器，干擾素為淋巴因子，非生物武器，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【答案】 D必考點(diǎn)三必考點(diǎn)三 生態(tài)工程生態(tài)工程夯實(shí)基礎(chǔ)夯實(shí)基礎(chǔ)查

11、漏補(bǔ)缺查漏補(bǔ)缺判斷正誤。(1)“無廢棄物農(nóng)業(yè)”遵循的是物種多樣性原理。( )(2)在建設(shè)高新農(nóng)業(yè)時(shí)，沼氣池的建立是遵循物質(zhì)循環(huán)再生原理。( )(3)根據(jù)協(xié)調(diào)與平衡原理，一個(gè)生態(tài)系統(tǒng)中種群的數(shù)量不應(yīng)超過環(huán)境容納量。( )(4)“總體功能大于各部分之和的效果”遵循的是系統(tǒng)學(xué)的結(jié)構(gòu)決定功能原理。( )(5)在建設(shè)生態(tài)工程時(shí)，既要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，還要考慮到經(jīng)濟(jì)和社會(huì)等系統(tǒng)的影響力。( )答案 (1) (2) (3) (4) (5)考點(diǎn)整合考點(diǎn)整合融會(huì)貫通融會(huì)貫通 生態(tài)工程的原理太湖富營養(yǎng)化問題、過度放牧等生物的數(shù)量不超過環(huán)境承載力，可避免系統(tǒng)的失衡和破壞生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡協(xié)調(diào)與平衡原理“三

12、北防護(hù)林”建設(shè)中的單純林問題，珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)的生物多樣性問題生物多樣性程度高，可提高系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性，提高系統(tǒng)的生產(chǎn)力生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性物種多樣性原理無廢棄物農(nóng)業(yè)可避免環(huán)境污染及其對(duì)系統(tǒng)穩(wěn)定和發(fā)展的影響物質(zhì)循環(huán)物質(zhì)循環(huán)再生原理實(shí)例意義理論基礎(chǔ)項(xiàng)目整體性原理社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、自然構(gòu)成復(fù)合系統(tǒng)統(tǒng)一協(xié)調(diào)各種關(guān)系，保障生態(tài)系統(tǒng)的平衡與穩(wěn)定林業(yè)建設(shè)中自然系統(tǒng)與社會(huì)、經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)的關(guān)系問題系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理：分布式優(yōu)于集中式和環(huán)式改善和優(yōu)化系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)以改善功能?；~塘系統(tǒng)整體性原理：整體大于部分之和保持很高的系統(tǒng)生產(chǎn)力珊瑚礁、藻類和珊瑚蟲的關(guān)系【典例示范3】 現(xiàn)有一生活污水凈化處理系統(tǒng)，處理流

13、程為“厭氧沉淀池曝氣池兼氧池植物池”，其中植物池中生活著水生植物、昆蟲、魚類、蛙類等生物。污水經(jīng)凈化處理后，可用于澆灌綠地?；卮鸹仡}。(1)污水流經(jīng)厭氧沉淀池、曝氣池和兼氧池后得到初步凈化。在這個(gè)過程中，微生物通過_呼吸將有機(jī)物分解。(2)植物池中，水生植物、昆蟲、魚類、蛙類和底泥中的微生物共同組成了_(生態(tài)系統(tǒng)/群落/種群)。在植物池的食物網(wǎng)中，植物位于第_營養(yǎng)級(jí)。植物池中所有蛙類獲得的能量最終來源于_所固定的_能。(3)生態(tài)工程所遵循的基本原理有整體性、協(xié)調(diào)與平衡、_和_等原理。(4)一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對(duì)_進(jìn)行修復(fù)，對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力

14、。 【思維流程】 【解析】 (1)污水流經(jīng)厭氧沉淀池、曝氣池和兼氧池的過程中，厭氧沉淀池中厭氧微生物通過無氧呼吸將有機(jī)物分解，曝氣池中需氧型微生物通過有氧呼吸將有機(jī)物分解，兼氧池中微生物則通過有氧呼吸和無氧呼吸將有機(jī)物分解。(2)群落是一定的自然區(qū)域內(nèi)相互間有直接或間接關(guān)系的各種生物的總和，故該植物池中的生產(chǎn)者、消費(fèi)者和分解者共同組成了群落；植物為生產(chǎn)者，屬于第一營養(yǎng)級(jí)；生態(tài)系統(tǒng)中消費(fèi)者和分解者的能量都是最終來源于生產(chǎn)者固定的太陽能。(3)生態(tài)工程的建立要考慮社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和自然的統(tǒng)一，生物與環(huán)境相協(xié)調(diào)，充分利用廢棄物中的物質(zhì)和能量，并增加生物的種類以增強(qiáng)生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，故生態(tài)工程需遵循的基本原

15、理有整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、物質(zhì)循環(huán)再生原理和物種多樣性原理等。(4)隨著人口激增、資源破壞、能源短缺、環(huán)境污染和食物供應(yīng)不足等問題，表現(xiàn)出不同程度的生態(tài)與環(huán)境危機(jī)，這些問題催生了生態(tài)工程，通過生態(tài)工程對(duì)已被破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行修復(fù)和改善，可提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力?！敬鸢浮?(1)無氧和有氧(或細(xì)胞)(2)群落 一 生產(chǎn)者 太陽(3)物質(zhì)循環(huán)再生 物種多樣性(4)已被破壞的生態(tài)環(huán)境(或受損的生態(tài)系統(tǒng))課堂課堂10分鐘落實(shí)鞏固分鐘落實(shí)鞏固1.軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病，基因型為HH的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者，希望通過胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法錯(cuò)誤的是( )A.首

16、先經(jīng)超排卵處理后進(jìn)行體外受精B.從囊胚中分離細(xì)胞，培養(yǎng)后檢測(cè)基因型C.根據(jù)檢測(cè)結(jié)果篩選基因型為hh的胚胎D.將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮答案 D解析 通過胚胎工程輔助生育是利用試管嬰兒技術(shù)，首先需經(jīng)超數(shù)排卵處理獲得卵子，再與獲能的精子進(jìn)行體外受精；因健康孩子的基因型是hh，故需進(jìn)行基因型檢測(cè)；對(duì)人類來說，早期胚胎培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚階段進(jìn)行移植。2.下列關(guān)于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述，正確的是 ( )A.通過細(xì)胞分裂不斷增加細(xì)胞數(shù)量，并在一定時(shí)期發(fā)生細(xì)胞分化B.胚胎發(fā)育過程中細(xì)胞不斷分裂，但不發(fā)生凋亡C.隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加，蛙胚的有機(jī)物總量不斷增加D.發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)

17、逐漸增加答案 A解析 胚胎發(fā)育是個(gè)體發(fā)育的一個(gè)階段，在蛙的胚胎發(fā)育過程中，通過細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)，并在桑椹胚后細(xì)胞開始分化，故A項(xiàng)正確。胚胎發(fā)育過程中，有細(xì)胞的分裂，也進(jìn)行著細(xì)胞衰老和凋亡，B項(xiàng)錯(cuò)誤。C項(xiàng)，蛙胚胎發(fā)育的過程中，所需營養(yǎng)物質(zhì)主要來自于受精卵，隨分裂次數(shù)的增加，有機(jī)物的大量消耗，其總量不增反減，故C、D項(xiàng)錯(cuò)誤。3.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，錯(cuò)誤的是( )A.種植轉(zhuǎn)基因作物應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)隔離B.轉(zhuǎn)基因作物被動(dòng)物食用后，目的基因會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物體細(xì)胞中C.種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳多樣性D.轉(zhuǎn)基因植物的目的基因可能轉(zhuǎn)入根際微生物答案 B解析 種植轉(zhuǎn)基因作物(

18、如抗蟲棉)應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)(普通棉花)種植區(qū)隔離，否則傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)的產(chǎn)量會(huì)受到很大的影響；目的基因的本質(zhì)為DNA，動(dòng)物食用后會(huì)將其消化分解成小分子脫氧核苷酸，所以目的基因不會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物體細(xì)胞中；轉(zhuǎn)基因作物可能由于目的基因通過花粉擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳多樣性；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的目的基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因作物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對(duì)人類或其他生物有害的病原體。4.在“稻鴨魚”生態(tài)工程中，水稻為鴨和魚提供了蔭蔽條件和適宜的生存環(huán)境，鴨的糞便可作為魚的餌料，鴨和魚可減少稻田中的雜草和害蟲，其活動(dòng)又可增加水中的氧含量。下列有關(guān)該生態(tài)工程的敘述，錯(cuò)誤的是( )A.可以減少農(nóng)藥的使用量B.促進(jìn)了物質(zhì)和

19、能量的良性循環(huán)C.成本核算時(shí)應(yīng)包括投入的人工費(fèi)用D.水中氧含量的增加有利于水稻生長答案 B解析 該生態(tài)工程促進(jìn)了物質(zhì)的良性循環(huán)，能實(shí)現(xiàn)能量的多級(jí)利用，能量流動(dòng)是單向的，不能循環(huán)。5.Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：(1)步驟中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的_。(2)步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到_期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。(3)步驟中，需要構(gòu)建含有基因Rag2的表達(dá)載體?？梢愿鶕?jù)Rag2基因的_設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用Hind和Pst限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2

20、基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體，所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有_酶的酶切位點(diǎn)。(4)為檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的_，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。答案 (1)細(xì)胞核(2)囊胚(3)核苷酸序列 Hind和Pst(4)蛋白質(zhì)解析 (1)步驟是核移植過程。體細(xì)胞核移植前要除去受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，原因是若不去掉卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，就會(huì)造成細(xì)胞里面有兩個(gè)細(xì)胞核，使得遺傳物質(zhì)不穩(wěn)定。(2)ES細(xì)胞是由早期胚胎(囊胚)的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出來的一類細(xì)胞。(3)步驟過程是導(dǎo)入目的基因Rag2基因及ES細(xì)胞中的基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程。在生物體外可通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其條件是模板DNA、據(jù)Rag2基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)的引物、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶等，另外根據(jù)題干可知，獲得Rag2目的基因需要用Hind和Pst兩種限制酶，所以在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有Hind和Pst酶的酶切位點(diǎn)。(4)檢測(cè)目的基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)時(shí)，應(yīng)采用