1、糖皮質激素在實驗性變態(tài)反響性腦脊髓炎中對調節(jié)性T細胞的作用【關鍵詞】糖皮質激素;,腦脊髓炎,自身免疫性,實驗性;,T細胞;,FXP3;,ILEffetfglurtiidnD4+D25+regulatryTellsinieithexperientalautiuneenephalyelitis【Abstrat】AI:TinvestigatethedifiatinbyglurtiidnD4+D25+regulatryTellsinieithexperientalautiuneenephalyelitis(EAE).ETHDS:Glurtiidrplaeb(ntrlgrup)asinjetedintB

2、alb/iethathadbeeniunizedithbvineyelinbasiprtEin(BP)extratedfrthefreshspinalrdfX.D4+D25+regulatryTellspeifiFXP3andbldIL10ereevaluatedithflytetryandELISA,respetively.RESULTS:parediththentrlgrup,lessEAEsyptserefundintheglurtiidinjetedgrup,andthelevelsfFXP3andbldIL10erestatistiallydifferentfrthseinthent

3、rlgrup.NLUSIN:GlurtiidanrelievethesyptsfEAEbyinreasingregulatryTellsandtheirativities,hihffersaptentialtheretibasisfritslinialappliatin.【Keyrds】glurtiid;enephalyelitis,experientalautiune;Tells;FXP3;IL10【摘要】目的：研究糖皮質激素在實驗性變態(tài)反響性腦脊髓炎EAE治療中對調節(jié)性T細胞的調變作用.方法：采用從新穎牛脊髓中提取的髓鞘堿性蛋白(BP)免疫誘導Balb小鼠成功誘發(fā)EAE后，分組注射糖皮質激

4、素或者撫慰劑，在采用指標評估根底上，分別采用流式細胞術和ELISA方法檢測D4+D25+調節(jié)性T細胞特異性FXP3和血中IL10的表達程度.結果：與對照組相比，糖皮質激素注射組小鼠發(fā)病程度輕，調節(jié)性T細胞特異性FXP3和血中IL10的表達程度均有明顯差異.結論：糖皮質激素可能通過增加調節(jié)性T細胞的數(shù)量及活性，減輕EAE的病癥，為臨床治療多發(fā)性硬化(S)提供理論根底.【關鍵詞】糖皮質激素;腦脊髓炎,自身免疫性,實驗性;T細胞;FXP3;IL100引言多發(fā)性硬化(ultipleslersis,S)是由T細胞介導的、以中樞神經系統(tǒng)(NS)白質脫髓鞘病變?yōu)樘攸c的自身免疫性疾病1.糖皮質激素可通過多種途

5、徑調節(jié)免疫功能，是目前治療S急性復發(fā)期的首選藥物2.在動物模型中，實驗性變態(tài)反響性腦脊髓炎(experientalautiuneenephalyelitis,EAE)是一種由Th細胞介導的局限于中樞神經系統(tǒng)的遲發(fā)性超敏反響型自身免疫性疾病，被認為是人類S公認的理想動物模型3.本實驗我們用從牛脊髓中提取出的髓鞘堿性蛋白(yelinbasiprtein,BP)，同時注射百日咳桿菌菌液，誘發(fā)Balb小鼠產生EAE后，輔以糖皮質激素治療，檢測D4+D25+調節(jié)性T細胞特異性FXP3和血中IL10的表達程度.1材料和方法1.2方法2結果2.1小鼠指征評估與文獻4描繪類似，Blab/小鼠在BP等免疫條件下

6、，最早第3日出現(xiàn)尾部無力、后肢稍外展的臨床病癥；第1015日，病癥到達頂峰，出現(xiàn)質量減輕、行動非常緩慢、推之不動、弓背、尾部無力、后肢無力、明顯外展、癱瘓等病癥，最高臨床分級達4級；第21日開始，病癥緩解，第30日根本恢復正常.但是在糖皮質激素治療組，最早第10日開始時，才出現(xiàn)細微的尾部無力、后肢稍外展的1到2級臨床病癥，第1315日，病癥到達頂峰，出現(xiàn)質量減輕等病癥，最高臨床分級到達3級，病情較快緩解，到第19日根本恢復正常.2.2小鼠調節(jié)性T細胞的檢測在糖皮質激素治療組，D4+D25+和FXP3+的調節(jié)性T細胞程度明顯高于對照組(15.83.2)%vs(2.41.6)%,P0.05,n=5

7、和未治療組(15.83.2)%vs(2.91.5)%,P0.05,n=5,對照組和未治療組間沒有明顯差異(2.41.6)%vs(2.91.5),P0.05,n=5(圖1).圖1糖皮質治療組調節(jié)性T細胞的分布略2.3小鼠外周血IL10程度的檢測在糖皮質激素治療組，IL10程度高于對照組(80.58.6)ng/Lvs(18.65.6)ng/L,P0.05,n=5和未治療組(80.58.6)ng/Lvs(20.46.3)ng/L,P0.05,n=5,對照組和未治療組間沒有明顯差異(18.65.6)ng/Lvs(20.46.3)ng/L,P0.05,n=5.3討論S是T細胞介導的NS脫髓鞘疾病，已致敏

8、的T淋巴細胞通過血腦屏障進入腦內,在抗原呈遞細胞作用下再次活化6.以往發(fā)現(xiàn)，S發(fā)病時,小膠質細胞作為NS內最重要的抗原呈遞細胞,對激活T細胞具重要作用7.對于針對S或者EAE糖皮質激素治療的T淋巴細胞的研究中，往往著重于效應細胞，如D4+Th1/Th2細胞，或者D8+的殺傷性T細胞，但是對于這幾年的研究熱點D4+D25+FXP3+調節(jié)性T細胞在糖皮質激素治療下的調變，迄今未見文獻報道.李茂全等8發(fā)現(xiàn)，在體外利用小膠質細胞系N9模型模擬EAE糖皮質激素治療后，N9外表的抗原遞呈分子HII和共刺激分子X40L表達都顯著下調.T細胞活化的雙信號學說指出,抗原呈遞細胞將抗原處理成肽段與H結合形成復合物

9、提供T細胞活化所需的第一信號,而抗原呈遞細胞與T細胞外表的共刺激分子互相作用提供第二信號9.X40及其配體X40L是近年發(fā)現(xiàn)的一對共刺激分子,研究證實X40/X40L的作用為抗原呈遞細胞維持活化后T淋巴細胞功能所必需10.與此同時，It等11發(fā)現(xiàn)X40L分子可以從誘發(fā)階段到效應階段以及記憶性調節(jié)性T細胞的功能喪失.所以我們考慮是否在EAE模型中，糖皮質激素一方面通過削弱小膠質細胞的AP功能，減低特異性T細胞殺傷效應；另一方面減弱X40L的表達，從而減弱對局部調節(jié)性T細胞的“失能效應.我們的實驗結果顯示，糖皮質激素作用后，小鼠的EAE無論從發(fā)病的時間還是周期都明顯改善，調節(jié)性T細胞的數(shù)量與單純B

10、P免疫組和對照治療組比較都有明顯增加.對應地，反映調節(jié)性T細胞功能的IL10分泌程度也明顯增加.IL10也是抑制D4+和D8+T細胞的重要細胞因子12.糖皮質激素對整個免疫過程的調節(jié)是多角度和多層次的13，我們的實驗結論在一定根底上解釋了臨床上激素治療對S的緩解的原因.由于小鼠的EAE模型和人類的S有一定差距，基于臨床患者中調節(jié)性T細胞的研究需要進一步進展.【參考文獻】1HaflerDA,SlavikJ,AndersnDE,etal.ultipleslersisJ.IunlRev,2022,204:208-231.2RizviSA,BashirK.thertherapyptinsandfutu

11、restrategiesfrtreatingpatientsithultiplelersisJ.Neurlgy,2022,63(12Suppl6):S47-S54.3SkundriDS.Experientaldelsfrelapsingreittingultipleslersis:urrentneptsandperspetiveJ.urrNeurvasRes,2022,2(4):349-362.4賈怡，陳文捷，李虹，等.牛BP誘導BALB/和57BL/6小鼠實驗性變態(tài)性腦脊髓炎樣反響的研究J.現(xiàn)代免疫學,2022,25(3):187-190.5KnDH，UrbanJL，HrvathSJ，eta

12、l.TinrdeterinantsfyelinbasiprtEinindueEAEinSJL/JieJ.JExped,1988,168:213-227.6KanarJR.Antiinflaatryiuntherapyfrultipleslersis/experientalautiuneenephalyelitis(EAE)diseaseJ.urredhe,2022,12(25):2947-2962.7Jak,RuffiniF,BarrA,etal.irgliaandultipleslersisJ.JNeursiRes,2022,81(3):363-373.8李茂全,王艷艷,余曉東,等.糖皮質激

13、素對活化后小膠質細胞株N9中HII和X40L表達的影響J.中國神經免疫學和神經病學雜志,2022,13(2):69-72.9PeggsKS,AllisnJP.stiulatrypathaysinlyphyteregulatin:theiunglbulinsuperfailyJ.BrJHaeatl,2022,130(6):809-824.10BertraE,Daiki,attsTH.RlefTellstiulatininantiviraliunityJ.SeinIunl,2022,16(3):185-196.11ItT,angYH,Duraad,etal.X40ligandshutsdnIL10prduingregulatryTellsJ.PrNatlAadSiUSA,2022,103(35)