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文檔簡介
1、動物細(xì)胞工程1精選ppt動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程技術(shù)與植物細(xì)胞工程技術(shù)的原理基本相同常用的技術(shù)手段動物細(xì)胞培養(yǎng)核移植胚胎移植單克隆抗體動物細(xì)胞融合2精選ppt一、動物細(xì)胞培養(yǎng)動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維、膠原蛋白)10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)未改變3精選ppt動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:無菌、無毒的環(huán)境培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理措施:培養(yǎng)液中加抗生素,定期更換培養(yǎng)液營養(yǎng)糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、促生長因子(維生素、激素等)和動物血清溫度和PH 36.50.5 7.2-7.4氣體環(huán)境 O2 CO2 95空氣 5的
2、CO24精選ppt思考:2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料?1、動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組織培養(yǎng)基有何獨特之處?3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞?4、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有:1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能,動物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動物個體5精選ppt動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用1、獲得細(xì)胞產(chǎn)物,如蛋白質(zhì)生物制品病毒疫苗、干擾素
3、、單克隆抗體等2、獲得燒傷病人植皮所需的細(xì)胞3、獲得細(xì)胞用于檢測有毒物質(zhì)6精選ppt二、核移植技術(shù)克隆羊培育過程黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利體細(xì)胞核移植 胚胎細(xì)胞核移植7精選ppt供體細(xì)胞培養(yǎng)(M卵母細(xì)胞)減數(shù)第二次分裂中期去核的卵母細(xì)胞供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞受體細(xì)胞激活,完成減數(shù)分裂、發(fā)育胚胎移植8精選ppt思考討論P499精選ppt動物體細(xì)胞核移植技術(shù)將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體用核移植的方法得到的動物稱為克
4、隆動物10精選ppt體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用前景1加速家畜遺傳改良進程,促進優(yōu)良畜群繁育2保護瀕危物種,增加動物 的存活數(shù)量3可作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白克隆動物細(xì)胞、組織、器官可作為移植的供體了解胚胎發(fā)育及衰老過程、做疾病模型等11精選ppt12精選ppt體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題胚胎移植動物幼體產(chǎn)出 概率10克隆動物存在著健康問題克隆動物的食品安全性問題存在爭議P50 思考與討論13精選ppt二、動物細(xì)胞融合(細(xì)胞雜交)2個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒離心振動電激聚乙二
5、醇14精選ppt用滅活的病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合過程細(xì)胞核病毒顆粒細(xì)胞核15精選ppt動物細(xì)胞的融合與植物細(xì)胞之間融合植物細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞雜交的比較比較項目原理方法誘導(dǎo)手段用途植物動物細(xì)胞膜流動性去壁原生質(zhì)體融合細(xì)胞分散細(xì)胞融合物理化學(xué)物理化學(xué)生物克服遠(yuǎn)緣雜交不親合制備單克隆抗體種間、屬間、科間甚至動植物之間細(xì)胞融合都已獲得成功16精選ppt讀下面一段文字資料,思考以下問題:長期以來,為了獲得抗體,采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi),然后從動物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體,不僅產(chǎn)量低,而且抗體的特異性差,純度低,反應(yīng)不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中,體內(nèi)的B細(xì)
6、胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體,但是每個B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必須用單個B細(xì)胞進行無性繁殖,即克隆。怎樣才能獲得單克隆抗體?僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎?我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的?有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無限增殖能力同時具備呢?17精選ppt 單克隆抗體制備過程 注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體18精選ppt思考:1、本過程利用了哪些原理?免疫原理,細(xì)胞融合原理和動物細(xì)胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)
7、胞融合?這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞,繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力,而且還有無限增殖的本領(lǐng),因而可以獲得大量單克隆抗體19精選ppt單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體產(chǎn)量高,特異性強,靈敏度高,優(yōu)越性十分明顯。1、作為診斷試劑20精選ppt單克隆抗體的應(yīng)用2、用于治療疾病和運載藥物 作為載體,運載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈”治療腫瘤資料:目前世界各國已經(jīng)研制出數(shù)以百計的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病,用單克隆抗體作為診斷手段,是一個必然趨勢。另外,用單克隆抗體做體內(nèi)診斷,借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意,目前
8、,主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。21精選ppt小結(jié)兩個過程動物細(xì)胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒一個新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢22精選ppt 下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實驗方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?為什么?4、圖中B為_過程,常用_作為誘導(dǎo)劑,該細(xì)胞繼承_的遺傳特性,既能_,又能_。1、該實驗方案的目的是_3、A是從小鼠的脾臟中取得_,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng),該過程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個階段,其中_代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒
9、雙親細(xì)胞分泌抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC23精選ppt世界上第一只克隆羊“多莉”的培育過程如圖所示,請據(jù)圖回答:乙甲abcdef(1)圖中的甲為蘇格蘭綿羊,乙為多莉羊。那么,a和b是通過_分裂形成的,其DNA含量是體細(xì)胞的 _ ;c肯定是_ 細(xì)胞,乙的遺傳性狀與提供 _的綿羊 一致.減數(shù)一半體細(xì)胞核24精選ppt乙甲abcdef(2)產(chǎn)生 甲和乙的過程分別是和(3)在形成乙是的過程中,需要將d的細(xì)胞核取出,將c細(xì)胞核移入d細(xì)胞內(nèi),此技術(shù)叫。所需的受體細(xì)胞大多采用動物卵細(xì)胞的原因是(4)綿羊的白色對黑色為顯色。若甲是白色綿羊,要判斷它是否純合體,選用與它交配的綿羊最好是-有性生殖克隆核移植卵細(xì)胞大,易于操作;卵細(xì)胞具有繼續(xù)分化的潛能。黑毛25精選ppt乙甲abcdef(5)在產(chǎn)生多莉羊時,需將e細(xì)胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊(f)子宮里,這種技術(shù)在細(xì)胞工程中叫(6)繼植物組織培養(yǎng)后,克隆綿羊的培育成功,證明動物細(xì)胞也有(7)在繁殖多莉羊的過程中,是否遵循孟德爾遺傳規(guī)律?多莉羊的性狀與d羊、c羊及f羊的關(guān)系是什么?
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