1、 鴨瘟是鴨、鵝和其他雁形目禽類的一種急性、熱性、敗血性傳染病。 該病的特征是流行廣泛，傳播迅速，發(fā)病率高和死亡率大。該病由Baudet首次在荷蘭報(bào)道，之后在法國(guó)、英國(guó)等許多國(guó)家流行。 我國(guó)由黃引賢1957年在廣東首次報(bào)道本病，隨后該病在華南、華中和華東等養(yǎng)鴨較發(fā)達(dá)的地方發(fā)現(xiàn)并流行，給養(yǎng)鴨業(yè)造成巨大的損失。 第一部分：鴨瘟病毒簡(jiǎn)介1.1 流行特點(diǎn)自然感染只見(jiàn)于成鴨，尤其是母鴨，放養(yǎng)的成年母鴨，感染的機(jī)會(huì)較多。野鴨也感染，但抵抗力較強(qiáng)。自然感染潛伏期為 2-5d，人工感染潛伏期為 1-3d。病毒侵入鴨體后，在呈現(xiàn)急性敗血癥過(guò)程的同時(shí)，以侵害粘膜及神經(jīng)系統(tǒng)為特征。1.2臨床癥狀病初體溫升高至 43以

2、上，精神沉郁，病鴨發(fā)生頑固性下痢，糞便呈綠色，故在美國(guó)又稱為鴨病毒性腸炎。泄殖腔呈現(xiàn)水腫、充血和出血變化嚴(yán)重粘膜外翻。病的晚期，常在泄殖腔粘膜表面形成黃綠偽膜。病鴨頭部粘膜的癥狀很特征：病初眼內(nèi)流出澄清透的漿液性分泌物，逐漸變?yōu)檎吵砟撔?，?jīng)常發(fā)生眼臉腫脹，膜充血，并常有散在的點(diǎn)狀出血和小塊潰瘍；從鼻腔流出薄或粘稠的分泌物，呼吸困難，叫聲粗厲；某些病鴨的頭部嚴(yán)重浮腫，俗稱“大頭瘟”。單側(cè)角膜渾濁也是本病的特征之一。1.3 病理變化病鴨全身性出血，尤其是頭頸部彌漫性水腫，壞死性咽炎和實(shí)質(zhì)器官嚴(yán)重變性。肝、脾表面和切面有大小不一和數(shù)目不等的灰黃色或灰白色壞死灶，少數(shù)壞死灶中央有點(diǎn)狀出血，有的壞死灶繞

3、以環(huán)行出血帶，90%的病鴨肝臟有這種壞死灶變化，具有一定的診斷價(jià)值。另外，膽囊常腫大，充滿濃綠色膽汁。腸粘膜呈出血和壞死變化，以十二指腸和直腸更為嚴(yán)重。泄殖腔粘膜呈現(xiàn)不同程度的充血、出血、水腫和壞死變化，壞死部呈灰綠色，并有痂塊樣物質(zhì)，95%以上的病鴨有這種病變，因此其診斷意義不亞于肝臟病變。肝臟灰黃色或灰白色壞死灶第二部分：鴨瘟病毒病原及分子生物學(xué)特性1.形態(tài)和結(jié)構(gòu)鴨瘟病毒，在分類上屬于皰疹病毒科，-皰疹病毒亞科。鴨瘟病毒為球形帶囊膜的較大病毒，直徑約為160180nm。主要由核心、衣殼、外膜、囊膜四部分組成。鴨瘟病毒核酸為線狀、雙股DNA。雙股DNA與蛋白纏繞形成病毒核心，直徑約為3540

4、nm。衣殼為對(duì)稱的二十面體，外觀呈六角形。衣殼的形態(tài)結(jié)構(gòu)是皰疹病毒的重要特征。成熟病毒子近似球形，直徑160180nm。皰疹病毒的外膜是一種比較特殊的結(jié)構(gòu)。它相當(dāng)于其他病毒的基質(zhì)結(jié)構(gòu)，但比一般的基質(zhì)厚多了。近來(lái)的研究表明，外膜的功能與基質(zhì)相似。它一側(cè)與衣殼相連，另一側(cè)通過(guò)糖蛋白的細(xì)胞質(zhì)尾巴與一些囊膜成分相連，確保了病毒的完整性。2.基因組特征鴨瘟病毒的DNA具典型的a-皰疹病毒的特征。如圖所示，基因組為雙股DNA，大小約為150kb。整個(gè)基因組分為Ul和Us區(qū)，兩端為TR區(qū)，Ul和Us連接處有IR區(qū)。病毒的基因依次取名為Ul1、Ul2和Us1、Us2等，如糖蛋白D就處于Us6區(qū)，為Us6基因所

5、編碼。TRTRIRUIUs基因組示意圖3.裝配和釋放病毒在核內(nèi)進(jìn)行DNA的復(fù)制、病毒的轉(zhuǎn)錄、核衣殼的組裝和包裹。隨后，核衣殼與核膜內(nèi)層作用，獲得了一層外膜，介導(dǎo)病毒從核內(nèi)的釋放。病毒從核內(nèi)釋放后，并不直接進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中。它先與核外膜融合，脫掉早期的外膜，轉(zhuǎn)到細(xì)胞質(zhì)中。接著，進(jìn)行外膜的裝配。最后，在一些糖蛋白的作用下，包裹上囊膜，釋放出細(xì)胞。4.病毒蛋白4.1 囊膜蛋白在病毒的吸附與穿入的過(guò)程中起重要作用 囊膜蛋白通過(guò)與相應(yīng)的細(xì)胞受體結(jié)合介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞，并在細(xì)胞之間相互轉(zhuǎn)染。 目前研究較多的囊膜糖蛋白主要gB、gC、gD、gE、gI、gH等。(1)糖蛋白BgB是a-皰疹病毒囊膜蛋白中最保守的一種

6、，所有的病毒都有g(shù)B或其同源物。gB在病毒結(jié)合到細(xì)胞膜后與質(zhì)膜的融合起重要作用。另外，在病毒的釋放中也起重要作用。據(jù)推測(cè)，gB的細(xì)胞外區(qū)近跨膜的位置有融合多肽，它的作用與流感病毒和愛(ài)滋病毒的誘導(dǎo)融合蛋白相似，起與細(xì)胞膜融合的作用。(2)糖蛋白D在單純皰疹病毒進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程中，囊膜蛋白與細(xì)胞表面受體的作用分為兩步。第一步是gB/gC與細(xì)胞表面的磷酸化位點(diǎn)結(jié)合。第二步才是gD與相應(yīng)的受體發(fā)生反應(yīng)，使病毒囊膜與細(xì)胞膜融合。在第二步的融合過(guò)程中，必須有g(shù)B、gD、gH和gL協(xié)同作用才能完成。之后，病毒在細(xì)胞質(zhì)中脫去衣殼蛋白和外膜蛋白，并把這些蛋白運(yùn)輸?shù)教囟ǖ奈稽c(diǎn)。糖蛋白D對(duì)病毒進(jìn)入動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)胞間感染

7、和神經(jīng)侵染都是必需的。缺失gD的病毒突變體能吸附在細(xì)胞表面，但不能進(jìn)入細(xì)胞。(3)糖蛋白E/糖蛋白I糖蛋白E與糖蛋白I組成復(fù)合體，介導(dǎo)病毒在細(xì)胞之間的轉(zhuǎn)染，但此復(fù)合體在外來(lái)病毒子進(jìn)入細(xì)胞過(guò)程中不起作用。沒(méi)有糖蛋白I/糖蛋白E復(fù)合體，a-皰疹病毒體外培養(yǎng)時(shí)只能產(chǎn)生很少的CPE，在體內(nèi)組織的擴(kuò)散也很有限。值得注意的是，gI-gE復(fù)合體主要在聯(lián)合細(xì)胞的互相感染中起介導(dǎo)作用，對(duì)于細(xì)胞外病毒的入侵則作用不大。4.2 其他蛋白在病毒離子的包裝和形成的過(guò)程中，還有其他的許多結(jié)構(gòu)蛋白起了很重要的作用。鴨瘟的相關(guān)研究也很少，除了Ul6和Ul7的部分基因序列已經(jīng)公布以外，其他基因序列都未見(jiàn)報(bào)道。第三部分：鴨瘟病毒

8、診斷技術(shù) 病毒的分離通常采取發(fā)病極期或死亡后的病鴨血液、肝、脾或腎作為分離病毒的檢樣。采用 9-14 日齡鴨胚進(jìn)行病毒分離。鴨胚在接種后 4-10 天死亡，胚胎有典型的病變。如初次分離結(jié)果為陰性，可收獲絨毛尿囊膜，繼續(xù)盲傳 3代。鴨瘟病毒可在鴨胚成纖維細(xì)胞和雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)物上增殖，病毒能致細(xì)胞病變和形成蝕斑，受感染的細(xì)胞于接種后 24-36h 形成極小的葡萄狀集團(tuán)，細(xì)胞病灶逐漸擴(kuò)大和發(fā)生壞死。鴨瘟的分子診斷方法主要為PCR快速診斷，在國(guó)外Plummer等最早建立此種方法。在Ul6基因內(nèi)選取了一段保守序列作PCR擴(kuò)增，來(lái)檢測(cè)鴨瘟病毒。Hansen等隨后選取了鴨瘟DNA聚合酶的一段編碼基因做P

9、CR，建立了一套檢測(cè)方法。PCR作為一種新的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)具有靈敏度高、快速特異、操作簡(jiǎn)便、易標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。地高辛標(biāo)記核酸探針檢測(cè)鴨瘟病毒，利用PCR擴(kuò)增鴨瘟病毒DNA聚合酶基因一段保守序列，制備地高辛標(biāo)記的核酸探針，建立地高辛標(biāo)記核酸探針檢測(cè)鴨瘟病毒的方法。核酸探針核酸雜交技術(shù)是利用核酸堿基互補(bǔ)的原理檢測(cè)目的核酸片段，具有敏感性高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，已經(jīng)用于臨床疾病的檢測(cè)。間接ELISA檢測(cè)鴨瘟抗體，應(yīng)用提純的鴨瘟病毒作為包被抗原建立間接ELISA方法，用于鴨瘟抗體的檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果表明，該法特異性強(qiáng)，與血清中和試驗(yàn)的符合率為100%。該方法敏感、快速、準(zhǔn)確性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好,可用于大

10、批量樣品的檢測(cè)，是一種適合于對(duì)鴨群進(jìn)行免疫抗體水平檢測(cè)簡(jiǎn)便實(shí)用的方法。應(yīng)用間接免疫熒光法檢測(cè)新型鴨瘟病毒第四部分：鴨瘟病毒防制防 制目前對(duì)鴨瘟尚無(wú)特效治療藥物，對(duì)該病的防制主要使用鴨瘟雞胚化弱毒疫苗對(duì)鴨進(jìn)行預(yù)防注射，其免疫效果很好。不管是疫區(qū)還是非疫區(qū)，鴨群都應(yīng)進(jìn)行免疫預(yù)防。在 15-20日齡，30-35 日齡免疫注射一次。一旦發(fā)生鴨瘟應(yīng)及時(shí)進(jìn)行封鎖，嚴(yán)禁病鴨流動(dòng)，妥善處理病、死鴨和污染物，舍內(nèi)外環(huán)境、場(chǎng)地及用具嚴(yán)格消毒。同時(shí)，對(duì)受威脅的鴨群和發(fā)病鴨群實(shí)施緊急疫苗接種?？锅單粮呙庋寤蚵腰S抗體緊急接種，配合使用抗菌藥物，多種維生素和清熱解毒的中草藥制劑對(duì)發(fā)病早期的有一定的治療效果，待疫情穩(wěn)定后 10-14d 應(yīng)需緊急接種疫苗。謝謝大家！(1)Ul31和Ul34。Ul34編碼一種型膜蛋白，它是一種C端錨定的膜蛋白，在PrV感染細(xì)胞的核膜兩端都有。Ul31基因編碼一種核磷酸化蛋白，它也位于感染細(xì)胞的核膜上。Ul34