1、關于發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌第一張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 發(fā)酵工業(yè)原料及其處理第一節(jié) 培養(yǎng)基的成分及來源第二節(jié) 培養(yǎng)基的類型及選擇第三節(jié) 淀粉水解糖的制備第四節(jié) 發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌第二張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、培養(yǎng)基如何分類？ 在發(fā)酵生產(chǎn)中常用的固體還是液體培養(yǎng)基？2、說說培養(yǎng)基的六大營養(yǎng)要素？復習根據(jù)培養(yǎng)基的用途(特殊用途)不同，可將培養(yǎng)基分成：孢子種子發(fā)酵 增殖、選擇和鑒別培養(yǎng)基 根據(jù)培養(yǎng)基狀態(tài)不同，可將培養(yǎng)基分成： 固體、液體和半固體培養(yǎng)基 根據(jù)營養(yǎng)物質的來源不同，培養(yǎng)基可分為： 天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基 第三張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022

2、年6月問題1在發(fā)酵生產(chǎn)中，為什么要進行滅菌操作？ 1、由于雜菌的污染，使生物反應中的培養(yǎng)物質因雜菌的消 耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降； 2、由于雜菌所產(chǎn)生的一些代謝產(chǎn)物，或在染菌后改變了培養(yǎng)液的某些理化特性，使產(chǎn)物 的提取和分離變得困難，造成收率降低或使產(chǎn)品的質量下降；3、雜菌會大量繁殖，會改變反應介質的PH值，從而使生物反應發(fā)生異常變化；4、雜菌可能會分解產(chǎn)物，從而使生產(chǎn)過程失?。?、發(fā)生噬菌體污染，微生物細胞被裂解，而使生產(chǎn)失敗第四張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月問題21、為防止雜菌的污染，整個生化生產(chǎn)過程哪些需要注意滅菌？培養(yǎng)基、發(fā)酵設備、空氣、菌種制作第五張，PPT共六十三頁

3、，創(chuàng)作于2022年6月發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌一、滅菌的原理和方法二、濕熱滅菌原理三、培養(yǎng)基的濕熱滅菌方式四、滅菌時間計算與影響因素第六張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一、滅菌的原理和方法 消毒與滅菌的區(qū)別？基本概念第七張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月消毒殺死物體表面及內部一部分對人體有害的病原菌的營養(yǎng)體，而對被消毒的物體基本無害的措施，如對皮膚、水果、飲用水的消毒，啤酒、牛奶、果汁等消毒。滅菌 殺死任何物體內外的一切微生物的方法，滅菌后的物體不再有可存活的微生物。第八張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、化學試劑滅菌法 化學試劑：甲醛、乙醇或新潔爾滅、高錳酸鉀等 適用范圍：

4、環(huán)境空氣、皮膚及器械的表面消毒2、射線滅菌法 電磁波、紫外線或放射性物質適用范圍：無菌室、接種箱第九張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3、干熱滅菌法 常用烘箱，滅菌條件為在160下保溫1h 適用范圍：金屬或玻璃器皿4、濕熱滅菌法 利用飽和蒸汽進行滅菌、條件為：121，30 適用范圍：廣泛應用于生產(chǎn)設備及培養(yǎng)基的滅菌 例：高壓滅菌鍋第十張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月5、過濾除菌法 利用過濾方法阻留微生物 適用范圍：制備無菌空氣 6、火焰滅菌法 酒精燈火焰 適用范圍：接種針、玻璃棒、三角瓶口 第十一張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月滅菌方法連線題接種針、試管口環(huán)境空氣、

5、皮膚表面無菌室、接種箱培養(yǎng)基的滅菌空氣過濾除菌法火焰滅菌法濕熱滅菌法射線滅菌法化學試劑滅菌法第十二張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、濕熱滅菌原理 濕熱滅菌原理滅菌條件滅菌不利方面由于蒸汽具有很強的穿透能力，而且在冷凝時會放出大量的冷凝熱(潛熱)，很容易使蛋白質凝固而殺死各種微生物。 121，30min。 同時也會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，甚至會產(chǎn)生不利于菌體生長的物質。因此，在工業(yè)培養(yǎng)過程中，除了盡可能殺死培養(yǎng)基中的雜菌外，還要盡可能減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的損失 第十三張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、衡量熱滅菌指標致死溫度：殺死微生物的極限溫度。致死時間：在此溫度下，殺死

6、全部微生物所需要的時間。熱 阻：對熱的抵抗力，指微生物在某一特定條件 （主要是溫度和加熱方式）下的致死時間。相對熱阻：幾種微生物對熱的相對抵抗能力。 指微生物在某一特定條件下的致死時間與 另一微生物在相同條件下的致死時間的比值。第十四張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月滅菌方式大腸桿菌霉菌孢子細菌芽孢噬菌體或病毒干熱滅菌12-1010001濕熱滅菌12-1031051-5苯酚11-2110930甲醛12-102502紫外線15-1002-55-10相對熱阻從表中可看出第十五張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 芽孢或孢子的熱阻要比生長期營養(yǎng)細胞的熱阻大得多，這是由于芽孢或孢子內吡啶

7、二羧酸含量對熱阻的增加有關。另外，芽孢子中蛋白質含水量較營養(yǎng)細胞低（特別是游離水分少），也是芽孢耐熱強的一個原因。第十六張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月對培養(yǎng)基和發(fā)酵設備的滅菌，廣泛使用濕熱滅菌法。工廠蒸汽比較容易獲得，控制操作條件方便，簡單而又價廉、有效處理培養(yǎng)基加熱受熱時間與滅菌程度和營養(yǎng)成分的破壞都有關系。營養(yǎng)成分的減少將影響菌種的培養(yǎng)和產(chǎn)物的生成所以滅菌程度和營養(yǎng)成分的破壞成為滅菌工作中的主要矛盾，恰當掌握加熱受熱時間是滅菌工作的關鍵。第十七張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月受熱時間如何確定？第十八張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共六十三頁，

8、創(chuàng)作于2022年6月2、 微生物的死亡速率：對數(shù)殘留定律 微生物受熱死亡的原因，主要是因高溫使微生物體內的一些重要蛋白質，如酶等，發(fā)生凝固、變性，從而導致微生物無法生存而死亡。微生物受熱而喪失活力，但其物理性質不變。 第二十張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 在一定溫度下，微生物的受熱死亡遵照分子反應速度理論。在滅菌過程中，活菌數(shù)逐漸減少，其減少量隨殘留活菌數(shù)的減少而遞減，即微生物的死亡速率與任一瞬時殘存的活菌數(shù)成正比， 第二十一張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 式中，N殘存的活菌數(shù)；t滅菌時間（s）；K滅菌速度常數(shù)（s-1），也稱反應速度常數(shù)或比死亡速度常數(shù)，此常數(shù)的大小與

9、微生物的種類與加熱溫度有關；dN/dt活菌數(shù)瞬時變化速率，即死亡速率。積分得： 式中：N0開始滅菌（t=0）時原有活菌數(shù)； Nt-經(jīng)時間t后殘存活菌數(shù)。 微生物的死亡速率與任一瞬時殘存的活菌數(shù)成正比， 第二十二張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月滅菌速度常數(shù)K是判斷微生物受熱死亡難易程度的基本依據(jù)。各種微生物在同樣的溫度下K值是不同的K值愈小，則此微生物愈耐熱。 問題 在121度，枯草桿菌FS5230的K為0.047s-1，梭狀芽孢桿菌PA3679的K值為0.03 s-1 ，請問哪一種微生物更耐熱？第二十三張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1）如微生物存在芽孢，其死亡速率呈現(xiàn)非對

10、數(shù)死亡定律 ; 2）同一種微生物在不同的滅菌溫度下，k值不同，滅菌溫度愈低，k值愈??；溫度愈高，k值愈大。3）如果要達到徹底滅菌，Nt等于0，則滅菌所需的 時間應為無限長，這在實際中是不可能的。工程上，Nt=0.001，即在1000次滅菌中，允許有一次失敗; 注：第二十四張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3、滅菌溫度和時間的選擇 當培養(yǎng)基被加熱滅菌時，常會出現(xiàn)這樣的矛盾，這就是，加熱時，微生物固然會被殺死，但培養(yǎng)基中的有用成分也會隨之遭到破壞，那么有何良策可以既達到滅菌要求，同時又不破壞或盡可能少破壞培養(yǎng)基中的有用成分呢？ 實踐證明，在高壓加熱的情況下，培養(yǎng)基中的氨基酸和維生素極易被破

11、壞，如在121，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當數(shù)量被破壞。因此，必須選擇一個既能滿足滅菌需要，又可使培養(yǎng)基的破壞盡可能小的滅菌工藝條件。 第二十五張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 微生物的受熱死亡屬于單分子反應，其滅菌速率常數(shù)K與溫度之間的關系可用阿累尼烏斯公式表示：A-頻率常數(shù)，也稱阿累尼烏斯常數(shù)，s-1；R-氣體常數(shù)，8.314J/molK；T-絕對溫度，K；E-微生物死亡活化能，J/mol。 K滅菌速度常數(shù)（s-1），也稱反應速度常數(shù)或比死亡速度常數(shù).從上式可知，K值的大小與微生物的種類與加熱溫度有關第二十六張，PPT共六

12、十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 滅菌時，培養(yǎng)基成分分解速率常數(shù)K與溫度之間的關系也可用阿累尼烏斯公式表示：K-培養(yǎng)基內易被破壞成分的分解速率常數(shù)；A-頻率常數(shù)，也稱阿累尼烏斯常數(shù)，s-1；R-氣體常數(shù)，8.314J/molK；T-絕對溫度，K；E-培養(yǎng)基成分分解所需活化能，J/mol。 當培養(yǎng)基成分從T1上升到T2時，微生物的死亡速率與培養(yǎng)基的分解有如下關系：第二十七張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月通過實驗測定可知： 滅菌時殺死微生物的活化能大于培養(yǎng)基成分的破壞活化能值，因此： 即隨著溫度的上升，微生物的死亡速率常數(shù)增加倍數(shù)要大于培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加倍數(shù)。也就是說，結論1：當滅菌

13、溫度上升時，微生物死亡速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。第二十八張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月分析:在熱滅菌過程中，同時會發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過程，且這兩種過程的進行速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫度的升高更為顯著。據(jù)測定：每升高10時一般化學反應的反應速率的增加倍數(shù)是1.5-2.0，而殺死芽孢為5-10，殺死微生物細胞為35左右。第二十九張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月滅菌溫度滅菌時間（分）營養(yǎng)成分破壞%10040099.31103667.01151550.0120427.01300.58.01450.082.01500.011.0

14、同樣的滅菌效果第三十張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 由此可見，若要減少營養(yǎng)成分的破壞，可升高溫度滅菌。結論2：在滅菌時選擇較高的溫度、較短的時間，這樣便既可達到需要的滅菌程度， 同時又可減少營養(yǎng)物質的損失。 第三十一張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月問題滅菌要達到殺死99.99%的細菌芽孢，有兩種方法可以采用，一種是118滅菌15min，另一種是128滅菌5min。哪一種方法好，為什么？ 答：從理論研究和生產(chǎn)實踐都可證明，在滅菌過程中，同時會發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過程，且這兩種過程的進行速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫度的升高更為顯著。 因此，對于

15、同一滅菌效果，選擇較高的溫度、較短的時間，這樣便既可達到需要的滅菌程度，同時又可減少營養(yǎng)物質的損失。 第三十二張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、培養(yǎng)基的濕熱滅菌方式1、間歇滅菌（分批滅菌、實消）2、連續(xù)滅菌（連消）第三十三張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、間歇滅菌（分批滅菌、實消）定義：將配制好的培養(yǎng)基同時放在發(fā)酵罐或其他裝置中，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用設備一起進行加熱滅菌的過程，通常也稱為實罐滅菌。（常用）發(fā)酵罐1）基本概念 第三十四張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月24016012080時間（min)050100150溫度升溫冷卻保溫過程包括：升溫、保溫和冷卻

16、等三個階段。各階段對滅菌的貢獻：20%、75%、5%第三十五張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 從以上分析可知，滅菌過程中加熱和保溫階段的滅菌作用是主要的，而冷卻階段的滅菌作用是次要的，一般很小，可以忽略不計。 此外，還應指出的是，應當避免長時間的加熱階段，因為加熱時間過長，不僅破壞營養(yǎng)物質，而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質的生成，從而影響培養(yǎng)過程的順利進行。 各階段對滅菌的貢獻：20%、75%、5%第三十六張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月在實際生產(chǎn)中，也可能遇到所供蒸汽不足、溫度不夠高的情況，這時可以適當延長滅菌時間。 生產(chǎn)上甚至有用100蒸煮而達到徹底滅菌的實例。 如

17、要做固體曲而沒有高溫蒸汽時，可將原料用100蒸汽蒸30min， 殺死其中的營養(yǎng)細胞， 但孢子與細菌的芽孢沒有被殺死。 將蒸過的原料置于室溫下過夜， 未被殺死的孢子便發(fā)芽生長，芽孢發(fā)育成營養(yǎng)細胞，再30min便可殺死。如此連續(xù)反復進行2-3次，亦可達到徹底滅菌的目的。 第三十七張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十八張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3）間歇滅菌的操作 間歇滅歇是在所用的發(fā)酵罐或其他培養(yǎng)裝置中進行的，它是在配制罐中配好培養(yǎng)基后，通過專用管道輸入發(fā)酵罐等培養(yǎng)設備中，然后開始滅菌。在進行培養(yǎng)基的間歇滅菌之前，通常先將發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置的分空氣過濾器進行滅菌，并且用空氣

18、將分過濾器吹干。開始滅菌時，應先放去夾套或蛇管中的冷水，開啟排氣管閥，通過空氣管向發(fā)酵罐內的培養(yǎng)基通入蒸汽進行加熱，同時，也可在夾套內通蒸汽進行間接加熱。當培養(yǎng)基溫度升到70左右時，從取樣管和放料管向罐內通入蒸汽進一步加熱，當溫度升至120，罐壓為1*105Pa（表壓）時，打開接種、補料、消泡劑、酸、堿等管道閥門進行排汽，當然在保溫過程中，應注意凡在培養(yǎng)基液面下的各種進口管道都應通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道則應排放蒸汽，這樣才能不留死角，從而保證滅菌徹底。保溫結束后，依次關閉各排汽、進汽閥門，待罐內壓力低于空氣壓力后，向罐內通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷水降溫，使培養(yǎng)基的溫度降到所需的

19、溫度，進行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。 由于培養(yǎng)基的間歇滅菌不需要專門的滅菌設備，投資少，對設備要求簡單，對蒸汽的要求也比較低，且滅菌效果可靠，因此，間歇滅菌是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基滅菌方法。 第三十九張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、連續(xù)滅菌（連消）1）定義： 將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置輸送的同時進行加熱、 保溫和冷卻而進行滅菌。 第四十張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月連續(xù)滅菌時，培養(yǎng)基可在短時間內加熱到保溫溫度，并且能很快地被冷卻因此可在比間歇滅菌更高的溫度下進行滅菌而由于滅菌溫度很高，保溫時間就相應地可以很短極有利于減少培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質的破壞。 第四

20、十一張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 連續(xù)滅菌的基本設備有哪些 ？問題第四十二張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月發(fā)酵罐蒸汽蒸汽冷卻水無菌培養(yǎng)基配料罐泵加熱塔維持罐冷卻管 連續(xù)滅菌的基本設備一般包括（1）配料預熱罐，將配制好的料液預熱到60-70，以避免連續(xù)滅菌時由于料液與蒸汽溫度相差過大而產(chǎn)生水汽撞擊聲；（2）連消塔，連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和，并使料液的溫度很快升高到滅菌溫度（126-132）；（3）維持罐，連消塔加熱的時間很短，光靠這段時間的滅菌是不夠的，維持罐的作用是使料液在滅菌溫度下保持5-7min，以達到滅菌的目的；（4）冷卻管，從維持罐出來的料

21、液要經(jīng)過冷卻排管進行冷卻，生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻，冷卻到40-50后，輸送到預先已經(jīng)滅菌過的罐內。 第四十三張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月噴射加熱連續(xù)滅菌流程滅菌介質原料介質蒸汽T=140度保溫段真空 流程中采用了蒸汽噴射器，它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸，從而在短時間內可將培養(yǎng)液急速升溫至預定的滅菌溫度然后在該溫度下維持一段時間滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基通過一膨脹閥進入真空冷卻器急速冷卻，從圖中可以看出，由于該流程中培養(yǎng)基受熱時間短，營養(yǎng)物質的損失也就不很嚴重，同時該流程保證了培養(yǎng)基物料先進先出，避免了過熱或滅菌不徹底等現(xiàn)象。 第四十四張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月薄板換

22、熱器連續(xù)滅菌流程進料 35100 120 維持罐120 蒸汽147 120 55 出料35 水20 31 流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高，經(jīng)維持段保溫一定時間后，培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻，從而使培養(yǎng)基的預熱、加熱滅菌及冷卻過程可在同一設備內完成。該流程的加熱和冷卻時間比噴射加熱連續(xù)滅菌流程要長些，但由于在培養(yǎng)基的預熱過程同時也起到了滅菌后培養(yǎng)基的冷卻，因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。 分別說出優(yōu)點第四十五張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3）間歇滅菌與連續(xù)滅菌的比較 滅菌方式優(yōu) 點缺 點連續(xù)滅菌1.滅菌溫度高，可減少培

23、養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的損失2.操作條件恒定，滅菌質量穩(wěn)定3. 易于實現(xiàn)管道化和自控操作4. 避免了反復的加熱和冷卻，提高了熱的利用率5. 發(fā)酵設備利用率高1.對設備的要求高，需另外設置加熱、冷卻裝置2. 操作較麻煩3. 染菌的機會較多4. 不適合于含大量固體物料的滅菌5 對蒸汽的要求高間歇滅菌1.設備要求低，不需另外設置加熱、冷卻裝置2. 操作要求低，適于手動操作3. 適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模4.適合于含有大量固體物質的培養(yǎng)基的滅菌1.培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質損失較多，滅菌后培養(yǎng)基的質量下降2.需進行反復的加熱和冷卻，能耗較高3. 不適合于大規(guī)模生產(chǎn)過程的滅菌4.發(fā)酵罐的利用率較低加熱器、維持罐（管）和冷卻器以

24、及發(fā)酵罐等都應先進滅菌 第四十六張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月由表可見，無論在理論上或者在實踐上，與間歇滅菌過程相比，連續(xù)滅菌的優(yōu)點十分明顯。因此，連續(xù)滅菌越來越多地被用培養(yǎng)基的滅菌。 第四十七張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月四、滅菌時間計算與影響因素 A、分批滅菌（實罐滅菌） 一般可以不計升溫階段所殺滅的菌數(shù)，把培養(yǎng)基中所有的菌均看作是在保溫階段（滅菌溫度）被殺滅，這樣可以簡單地利用式，粗略地求得滅菌所需的時間 1）培養(yǎng)基滅菌時間的計算第四十八張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月解： N0=40 106 2 105=8 1012（個） Nt=0.001（個） K=

25、 1.8min-1例：有一發(fā)酵罐內裝40m3培養(yǎng)基，在121溫度下進行實罐滅菌。原污染程度為每1mL有2*105個耐熱細菌芽孢，121度時滅菌速度常數(shù)為1.8min-1。求滅菌失敗機率為0.001時所需要的滅菌時間。 第四十九張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月但是實際上，培養(yǎng)基在加熱升溫時（即在升溫階段）就會有部分菌被殺滅，特別是當培養(yǎng)基加熱到100度以上，這個作用較為顯著。因此，保溫滅菌時間實際上比上述計算的要短。嚴格地講，在降溫階段也有殺菌作用，但降溫時間短，在計算時一般不考慮。第五十張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月【例2】上例中，滅菌過程的升溫階段，培養(yǎng)基從100上升至

26、121，共需15min。求升溫階段結束時，培養(yǎng)基中芽孢數(shù)和保溫所需時間。解 T1373K T2394K根據(jù)公式求得373K至394K之間若干k值，k-T關系如下表表 k-T關系由此可得 圖解積分法 第五十一張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)公式，求升溫階段結束時培養(yǎng)基中殘留的芽孢數(shù)為根據(jù)滅菌公式，求得保溫所需的時間第五十二張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月B、連續(xù)滅菌（連消） 連續(xù)滅菌的滅菌時間，仍可用滅菌公式計算，但培養(yǎng)基中的含菌數(shù)，應改為每單位體積(1mL)培養(yǎng)基的含菌數(shù)，則滅菌公式變換為下式式中 c0單位體積培養(yǎng)基滅菌前的含菌數(shù)，個mL ;cs單位體積培養(yǎng)基滅菌后的含菌數(shù)，個mL。發(fā)酵罐蒸汽蒸汽冷卻水無菌培養(yǎng)基配料罐泵加熱塔維持罐冷卻管第五十三張，PPT共六十三頁，創(chuàng)作于2022年6月【例】若將上例中的培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌，滅菌溫度為131，此溫度下滅菌速率常數(shù)為