1、核酸生成(一)名詞解釋1半保留復制(semiconservative replication2不對稱轉錄(asymmetric trancription )3逆轉錄(reverse transcription )4岡崎片段(Okazaki fragment )5復制叉(replication fork )6領頭鏈(leading strand )7隨后鏈(lagging strand )8有意義鏈(sense strand ) TOC o 1-5 h z 9光復活(photoreactivation)10重組修復(recombination repair)11內含子(intron)12外顯子(

2、exon)13基因載體(genonic vector )14質粒(plasmid ) (二)填空題DNA復制是定點雙向進行的，股的合成是，并且合成方向和復制叉移動方向相同；股的合成是的，合成方向與復制叉移動的方向相反。 每個岡崎片段是借助于連在它的末端上的一小段而合成的；所有岡崎片段鏈的增長都是按方向進行。DNA連接酶催化的連接反應需要能量，大腸桿菌由供能，動物細胞由供能。大腸桿菌RNA聚合酶全酶由組成；核心酶的組成是。參與識別起始信號的是因子。基因有兩條鏈，作為模板指導轉錄的那條鏈稱鏈。以RNA為模板合成DNA稱，由酶催化。6 DNA或 UpGpCpA分別經(jīng)0.3NKOHR、 NaseT1和

3、牛胰RNaseI處理所得結果： TOC o 1-5 h z DNA: 0.3NKOH：； RNaseT1：； RNase I：;UpGpCp：A0.3NKOH：； RNaseT1：； RNase I ：。7基因突變形式分為：， 和 四類。8 亞硝酸是一個非常有效的誘變劑，因為它可直接作用于DNA， 使堿基中基氧化成基，造成堿基對的。9所有岡崎片段的延伸都是按方向進行的。10 前導鏈的合成是的， 其合成方向與復制叉移動方向； 隨后鏈的合成是的，其合成方向與復制叉移動方向。11引物酶與轉錄中的RNA聚合酶之間的差別在于它對不敏感，并可以作為底物。DNA聚合酶I 的催化功能有、 和 。DNA回旋酶又

4、叫，它的功能是。細菌的環(huán)狀DNA通常在一個開始復制，而真核生物染色體中的線形DNA可以在起始復制。大腸桿菌DNA聚合酶的活性使之具有功能，極大地提高了DNA復制的保真度。大腸桿菌中已發(fā)現(xiàn)種 DNA聚合酶，其中負責DNA復制，負責 DNA損傷修復。17 DNA切除修復需要的酶有、 和 。18在DNA復制中，可防止單鏈模板重新締合和核酸酶的攻擊。19 DNA合成時，先由引物酶合成，再由在其3 端合成DNA鏈，然后由切除引物并填補空隙，最后由連接成完整的鏈。20原核細胞中各種RNA是催化生成的，而真核細胞核基因的轉錄分別由種 RNA聚合酶催化，其中rRNA基因由轉錄，hnRNA基因由轉錄，各類小分子

5、量RAN則是的產(chǎn)物。21一個轉錄單位一般應包括序列、序列和順序。22真核細胞中編碼蛋白質的基因多為。編碼的序列還保留在成熟mRNA中的是，編碼的序列在前體分子轉錄后加工中被切除的是。在基因中被分隔，而在成熟的mRNA序列被拼接起來。23染色質中的蛋白和蛋白對轉錄均有調節(jié)作用，其中的調節(jié)作用具有組織特異性。1 DNA按半保留方式復制。如果一個完全放射標記的雙鏈DNA分子，放在不含有放射標記物的溶液中，進行兩輪復制，所產(chǎn)生的四個DNA分子的放射活性將會怎樣：A半數(shù)分子沒有放射性B 所有分子均有放射性C半數(shù)分子的兩條鏈均有放射性D 一個分子的兩條鏈均有放射性E四個分子均無放射性2參加DNA復制的酶類

6、包括：（ 1） DNA聚合酶；（ 2）解鏈酶；（ 3） DNA聚合酶； （ 4）RNA聚合酶（引物酶）； （5）DNA連接酶。其作用順序是： TOC o 1-5 h z A （4）、（3）、 （1）、 （2）、 （5）B（2） 、 （3） 、（4） 、（1） 、（5）C （4）、（2）、 （1）、 （5）、 （3）D（4） 、 （2） 、（1） 、（3） 、（5）E （2）、（4）、 （1）、 （3）、 （5）3如果 15N標記的大腸桿菌轉入14N培養(yǎng)基中生長了三代，其各種狀況的DNA分子比例應是下列哪一項：純15純15N1514NNDNA雜種DNAA1/81/86/8B1/807/8C01/

7、87/8D02/86/8E04/84/8純 14NDNA4下列關于DNA復制特點的敘述哪一項錯誤的：A RNA與 DNA鏈共價相連B 新生DNA鏈沿5 3 方向合成C DNA鏈的合成是不連續(xù)的D 復制總是定點雙向進行的E DNA在一條母鏈上沿5 3 方向合成，而在另一條母鏈上則沿3 5 方向合成5 DNA復制時，5 TpApGpAp 3 序列產(chǎn)生的互補結構是下列哪一種：A 5 TpCpTpAp 3 B 5 ApTpCpTp 3C 5 UpCpUpA p 3D 5 GpCpGpA p3E 3 TpCpTpAp 56下列關于DNA聚合酶I 的敘述哪一項是正確的：A它起DNA修復酶的作用但不參加DN

8、A復制過程B它催化dNTP聚合時需要模板和引物C在DNA復制時把岡崎片段連接成完整的隨從鏈D它催化產(chǎn)生的岡崎片段與RNA引物鏈相連E有些細菌突變體其正常生長不需要它7下列關于真核細胞DNA聚合酶活性的敘述哪一項是正確的：A它僅有一種B它不具有核酸酶活性C它的底物是二磷酸脫氧核苷D 它不需要引物E它按3 -5 方向合成新生鏈8從正在進行DNA復制的細胞分離出的短鏈核酸岡崎片段，具有下列哪項特性：A它們是雙鏈的B 它們是一組短的單鏈DNA片段C它們是DNA RNA雜化雙鏈D 它們被核酸酶活性切除E它們產(chǎn)生于親代DNA鏈的糖-磷酸骨架的缺口處9切除修復可以糾正下列哪一項引起的DNA損傷：A堿基缺失B

9、 堿基插入C 堿基甲基化D胸腺嘧啶二聚體形成E 堿基烷基化10大腸桿菌DNA連接酶需要下列哪一種輔助因子？A FAD作為電子受體B NADP+作為磷酸供體C NAD+形成活性腺苷酰酶D NAD+作為電子受體E以上都不是11下列關于RNA和 DNA聚合酶的敘述哪一項是正確的：A RNA聚合酶用二磷酸核苷合成多核苷酸鏈B RNA聚合酶需要引物，并在延長鏈的5 端加接堿基C DNA聚合酶可在鏈的兩端加接核苷酸D DNA僅能以RNA為模板合成DNAE 所有RNA聚合酶和DNA聚合酶只能在生長中的多核苷酸鏈的3 端加接核苷 酸12 紫外線照射引起DNA最常見的損傷形式是生成胸腺嘧啶二聚體。在下列關于DN

10、A分子結構這種變化的敘述中，哪項是正確的：A不會終止DNA復制B可由包括連接酶在內的有關酶系統(tǒng)進行修復C可看作是一種移碼突變D是由胸腺嘧啶二聚體酶催化生成的E引起相對的核苷酸鏈上胸腺嘧啶間的共價聯(lián)結13下列哪種突變最可能是致死的：A腺嘌呤取代胞嘧啶B 胞嘧啶取代鳥嘌呤C甲基胞嘧啶取代胞嘧啶D 缺失三個核苷酸E插入一個核苷酸14鐮刀形紅細胞貧血病是異常血紅蛋白純合子基因的臨床表現(xiàn)。 - 鏈變異是由下列哪種突變造成的：A交換B 插入C 缺失D 染色體不分離E 點突變15在培養(yǎng)大腸桿菌時，自發(fā)點突變的引起多半是由于：A氫原子的互變異構移位B DNA糖 -磷酸骨架的斷裂C插入一個堿基對D 鏈間交聯(lián)E

11、脫氧核糖的變旋16插入或缺失堿基對會引起移碼突變，下列哪種化合物最容易造成這種突變：A口 丫啶衍生物B 5- 溴尿嘧啶C氮雜絲氨酸D 乙基乙磺酸E 咪唑硫嘌呤17在對細菌DNA復制機制的研究中，常常用到胸腺嘧啶的類似物5-溴尿嘧啶，其目的在于：A引起特異性移碼突變以作為順序研究用B在胸腺嘧啶參入部位中止DNA合成C在DNA親和載體中提供一個反應基D合成一種密度較高的DNA以便用離心分離法予以鑒別E在DNA中造成一個能被溫和化學方法裂解的特異部位18關于DNA指導的RNA合成，下列敘述哪一項是錯誤的：A只有在DNA存在時，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的生成B轉錄過程中，RNA聚合酶需要引物C

12、RNA鏈的合成是從5 3 端D大多數(shù)情況下只有一股DNA鏈作為模板E合成的RNA鏈從來沒有環(huán)狀的19下列關于 因子的敘述哪一項是正確的：A是RNA聚合酶的亞基，起辨認轉錄起始點的作用B是DNA聚合酶的亞基，容許按 5 3 和 3 5 雙向合成C是50S核蛋白體亞基，催化肽鏈生成D是30S核蛋白體亞基，促進mRNA與之結合E在30S亞基和 50S亞基之間起搭橋作用，構成70S核蛋白體20真核生物RNA聚合酶I 催化轉錄的產(chǎn)物是：A mRNA B 45S-rRNAC 5S-rRNA D tRNA E SnRNA21下列關于真核細胞DNA復制的敘述哪一項是錯誤的：A是半保留式復制B 有多個復制叉C有

13、幾種不同的DNA聚合酶D 復制前組蛋白從雙鏈DNA脫出E真核DNA聚合酶不表現(xiàn)核酸酶活性22下列關于原核細胞轉錄終止的敘述哪一項是正確的：A是隨機進行的B 需要全酶的 亞基參加C如果基因的末端含G C豐富的回文結構則不需要 亞基參加D如果基因的末端含 A T 豐富的片段則對轉錄終止最為有效E需要 因子以外的ATP酶23下列關于大腸桿菌DNA連接酶的敘述哪些是正確的：A催化DNA雙螺旋結構之斷開的DNA鏈間形成磷酸二酯鍵B催化兩條游離的單鏈DNA分子間形成磷酸二酯鍵C產(chǎn)物中不含AMPD需要ATP作能源24下列關于真核細胞mRNA的敘述不正確的是：A它是從細胞核的RNA前體核不均RNA生成的B在其

14、鏈的3 端有 7-甲基鳥苷，在其5 端連有多聚腺苷酸的PolyA尾巴C它是從前RNA通過剪接酶切除內含子連接外顯子而形成的D是單順反子的（四）是非判斷題（ ） 1 中心法則概括了DNA在信息代謝中的主導作用。（ ） 2 原核細胞DNA復制是在特定部位起始的，真核細胞則在多個位點同時起始進行復制。（ ） 3逆轉錄酶催化RNA指導的DNA合成不需要RNA引物。（ ） 4原核細胞和真核細胞中許多mRNA都是多順反子轉錄產(chǎn)物。（ ） 5因為DNA兩條鏈是反向平行的，在雙向復制中一條鏈按5 3 的方向合成，另一條鏈按3 5 的方向合成。（ ） 6限制性內切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。（ ） 7已發(fā)

15、現(xiàn)一些RNA前體分子具有催化活性，可以準確地自我剪接，被稱為核糖酶（ribozyme ） ，或稱核酶。（ ） 8重組修復可把DNA損傷部位徹底修復。（ ） 9原核生物中mRNA一般不需要轉錄后加工。（ ） 10 RNA聚合酶對弱終止子的識別需要專一的終止因子（如 蛋白 ）。（ ） 11 原核細胞啟動子中RNA聚合酶牢固結合并打開DNA雙鏈的部分稱為Pribnow box ，真核細胞啟動子中相應的順序稱為Hogness box，因為富含A-T，又稱TATA box。（ ） 12增強子（endancer）是真核細胞DNA上一類重要的轉錄調節(jié)元件，它們自己并沒有啟動子活性，卻具有增強啟動子活性轉錄起

16、始的效能。（五）問答題簡述中心法則。DNA復制的基本規(guī)律？簡述DNA復制的過程？簡述DNA復制時酶系。簡述原核細胞和真核細胞的RNA聚合酶有何不同？簡述RNA轉錄的過程？簡述基因工程過程。參考答案（一）名詞解釋1半保留復制：雙鏈DNA 的復制方式，其中親代鏈分離，每一子代DNA 分子由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。2不對稱轉錄：轉錄通常只在DNA 的任一條鏈上進行，這稱為不對稱轉錄。3逆轉錄：Temin 和 Baltimore 各自發(fā)現(xiàn)在RNA 腫瘤病毒中含有RNA 指導的DNA 聚合酶，才證明發(fā)生逆向轉錄，即以RNA 為模板合成DNA。4岡崎片段：一組短的DNA 片段，是在DNA 復制的起

17、始階段產(chǎn)生的，隨后又被連接酶連接形成較長的片段。在大腸桿菌生長期間，將細胞短時間地暴露在氚標記的胸腺嘧啶中，就可證明岡崎片段的存在。岡崎片段的發(fā)現(xiàn)為DNA復制的科恩伯格機理提供了依據(jù)。5 復制叉：復制 DNA 分子的 Y 形區(qū)域。 在此區(qū)域發(fā)生鏈的分離及新鏈的合成。6領頭鏈：DNA 的雙股鏈是反向平行的，一條鏈是5/ 3/方向，另一條是3/5/方向，上述的起點處合成的領頭鏈，沿著親代DNA 單鏈的3/ 5/方向（亦即新合成的DNA 沿 5/ 3/方向）不斷延長。所以領頭鏈是連續(xù)的。7隨后鏈：已知的DNA 聚合酶不能催化DNA 鏈朝3/ 5/方向延長，在兩條親代鏈起點的3/ 端一側的DNA 鏈復

18、制是不連續(xù)的，而分為多個片段，每段是朝 5/ 3/方向進行，所以隨后鏈是不連續(xù)的。8 有意義鏈：即華森鏈，華森克里格型 DNA 中， 在體內被轉錄的那股DNA鏈。簡寫為W strand。9光復活：將受紫外線照射而引起損傷的細菌用可見光照射，大部分損傷細胞可以恢復，這種可見光引起的修復過程就是光復活作用。10重組修復：這個過程是先進行復制，再進行修復，復制時，子代DNA 鏈損傷的對應部位出現(xiàn)缺口，這可通過分子重組從完整的母鏈上，將一段相應的多核苷酸片段移至子鏈的缺口處，然后再合成一段多核昔酸鍵來填補母鏈的缺口，這個過程稱為重組修復。11 內含子：真核生物的mRNA 前體中，除了貯存遺傳序列外，還

19、存在非編碼序列，稱為內含子。12外顯子：真核生物的mRNA 前體中，編碼序列稱為外顯子。13基因載體：外源DNA 片段（目的基因）要進入受體細胞，必須有一個適當?shù)倪\載工具將帶入細胞內，并載著外源DNA 一起進行復制與表達，這種運載工具稱為載體。14質粒：是一種在細菌染色體以外的遺傳單元，一般由環(huán)形雙鏈DNA 構成，其大小從1 200Kb。（二） 、填空題答案1領頭鏈；連續(xù)的；隨從鏈；不連續(xù)的；5 ； RNA； 5 3 。NAD+； ATP。2 ；2 ；4有意義鏈。5反向轉錄；逆轉錄酶。6不作用；不作用；不作用；Up+Gp+Cp+A； UpGp+CpA； GpCp+Up+A；7轉換；顛換；插入；

20、缺失。8氨基；酮基；轉換。9 5 310連續(xù)相同 不連續(xù) 相反利福平dNTP 5 3聚合3 5外切5 3 外切 焦磷酸解作用，焦磷酸交換作用13拓樸異構酶使超螺旋DNA 變?yōu)樗神Y狀14復制位點多位點3 5核酸外切酶校對3 DNA 聚合酶DNA 聚合酶17專一的核酸內切酶解鏈酶DNA 聚合酶DNA 連接酶SSB（單鏈結合蛋白）RNA 引物 DNA 聚合酶DNA 聚合酶DNA 連接酶20同一RNA 聚合酶 3 RNA 聚合酶RNA 聚合酶RNA 聚合酶21啟動子編碼 終止子22隔裂基因外顯子 內含子 外顯子 內含子23組非組 非組 （三）選擇題（ A） DNA 半保留復制需要來自親代的每一條標記鏈

21、作模板合成互補鏈，以保持與親代相同的完整結構。因此， 在無記溶液中進行第一輪復制將產(chǎn)生兩個半標記分子。第二輪復制將產(chǎn)生兩個半標記分子和兩個不帶標記的雙鏈DNA 分子。（ E）在DNA 真正能夠開始復制之前，必須由解鏈酶使DNA 雙鏈結構局部解鏈。在每股單鏈DNA 模板上，由RNA 聚合酶（引物酶）催化合成一小段（大約10 50 個核苷酸）互補 RNA 引物。 然后由 DNA 聚合酶向引物3端加入脫氧核苷5三磷酸，從 5 3方向合成DNA 片段（岡崎片段） ， 直至另一RNA 引物的 5末端。 接著在 DNA 聚合酶的作用下將RNA引物從5端逐步降解除去與之相鄰的DNA 片段由 3端延長， 以填

22、補 RNA除去后留下的空隙。最后由DNA 連接酶將DNA 片段連接成完整連續(xù)的DNA 鏈。（ D） DNA 復制三代后，每八個完整DNA 雙鏈中將有兩個雙鏈分子含有一股親代鏈。（ E） DNA 是由 DNA 聚合酶復合體復制的。該酶催化脫氧三磷酸核苷以核苷酸的形式加到RNA 引物鏈上，選擇只能與親鏈DNA 堿基互補配對的核苷酸參入。參入的第一個脫氧核苷酸以共價的磷酸二酯鍵與引物核苷酸相連。鏈的生長總是從5向3延伸的。DNA 復制開始于特異起始點，定點雙向進行。（ A） DNA 復制必需胸腺嘧啶（T）與腺嘌呤（A）配對，鳥嘌呤（G）與胞嘧啶（C）配對，從而使雙螺旋兩鏈之間部分地靠氨基與酮基間形成

23、的氫鍵維系起來。鏈本身是反向平行方向合成的，即題中所述之磷酸二酯鍵的5 3順序決定其沿3 5方向互補。（ B） DNA 聚合酶在起聚合酶作用時必需要有模板和引物。這個一條肽鏈的蛋白質除聚合酶活性外還具有3和5外切核酸酶活性。在正常DNA 復制時，它的作用是水解RNA 引物鏈（5 3外切核酸酶活性）并用模板指導的脫氧核苷酸取代它們（聚合功能）。 DNA 聚合酶也參與DNA 修復。例如在切除胸腺嘧啶二聚體中起5 3外切核酸酶的作用。在正常DNA復制時， DNA 聚合酶表現(xiàn)3外切核酸酶活性，切除錯誤參入的脫氧核苷酸殘基。岡崎片段是由DNA 聚合酶復合體產(chǎn)生的，而不是DNA 聚合酶。在除去RNA 引物

24、鏈后，DNA 片段通過DNA 連接酶連接。DNA 聚合酶，其功能目前還不清楚，一些細菌突變體，雖無DNA 聚合酶，但卻能正常生長。DNA 聚合酶則是正常生長所必需的。（ B）真核生物中有三種DNA 聚合酶， 及 。 DNApol 在細胞核DNA復制中起作用；DNApol 在細胞核DNA 修復中起作用；而DNApol 則在線粒體 DNA 復制中起作用。它們都需要引物，都用脫氧三磷酸核苷作底物，都按5 3方向合成新生DNA 鏈。真核生物DNA 聚合酶任何一種均不表現(xiàn)核酸酶活性。（ B） DNA 復制時，如果兩股鏈按5 3方向先合成短的DNA 片段，然后再連接成連續(xù)的鏈，這就能使DNA 的兩條反向互

25、補鏈能夠同時按5 3方向的聚合機制進行復制。岡崎首先從大腸桿菌中分離出正在復制的新生DNA，并發(fā)現(xiàn)這新生DNA 是由一些不連續(xù)片段（岡崎片段）所組成。在大腸桿菌生長期間，將細胞短時間地暴露在氚標記的胸腺嘧啶中，在將細胞DNA 變性處理（也就是解鏈）之后， 岡崎分離得到了標記的DNA 片段。它們是單鏈的，并且由于DNA 聚合酶復合體用RNA 作引物，因此新生岡崎片段以共價鍵連著小段RNA 鏈，但它們既不是堿基互補的RNA DNA雙鏈雜合體，也不是來自親鏈的片段。新生岡崎片段決不會被核酸酶切除。（ D） DNA 鏈內胸腺嘧啶二聚體可因紫外線（UV）照射而形成。專一的修復系統(tǒng)依賴UV 特異的內切核酸

26、酶，它能識別胸腺嘧啶二聚體，并且通常在二聚體5側切斷磷酸二酯鍵從而在DNA 鏈內造成一個缺口。損傷序列的切除以及用完整的互補鏈作為模板重新合成切去的片段都是由DNA 聚合酶來完成的。主鏈與新合成片段之間的裂口則由DNA 連接酶接合。堿基缺失、插入、甲基化，或烷基化均不能作為切除修復體系靶子而為UV 特異性內切核酸酶所識別。（ C） DNA 連接酶能夠連接留有缺口的DNA 鏈或閉合單股DNA 鏈以形成環(huán)狀 DNA 分子。該酶需要一股鏈末端的游離3/-OH 和另一股鏈末端的5/-磷酸，并且要求這兩股鏈是雙鏈DNA 的一部分。反應是吸能的，因此需要能源。在大腸桿菌和其它細菌中，能源是NAD +分子中

27、的焦磷酸鍵。NAD +先與酶形成酶AMP 復合物，同時釋放叮NAD 的尼克酰胺單核苷酸；酶一AMP 復合物上的AMP 再轉移到DNA 鏈的5/-磷酸基上，使其活化，然后形成磷酸二酯鍵并釋放AMP。（ E） RNA 聚合酶和DNA 聚合酶都是以三磷酸核苷（NTP 或 dNTP）為其底物，這兩種聚合酶都是在生長中的多核苷酸鏈的3端加接核苷酸單位。DNA 聚合酶合成與DNA 互補的DNA。 合成與 RNA 互補的 DNA 的酶稱作逆轉錄酶。（ B）紫外線（260nm）照射可引起DNA 分子中同一條鏈相鄰胸腺嘧啶之間形成二聚體，并從該點終止復制。該二聚體可由包括連接酶在內的酶系切除和修復，或在光復合過

28、程中，用較長（330 450nm）或較短（230nm）波長的光照射將其分解。（ E） DNA 鏈中插入一個額外核苷酸會引起移碼突變并使突變點以后轉錄的全部 mRNA 發(fā)生翻譯錯誤。題中列出的所有其它突變通常僅引起一個氨基酸的錯誤（如題中的A 或 B） ，或從氨基酸序列中刪除一個氨基酸（D） ，或在氨基酸順序中完全沒有錯誤。需要指出的是，如果A 或 B 突變導致生成“無意義”或鏈終止密碼子，則這種突變所造成的后果也會象移碼突變那樣是致死的。（ E）在Hbs 中， 鏈上一個纈氨酸殘基替換了谷氨酸，這是由于一個核苷酸堿基的點突變所造成的后果。即位于三聯(lián)體第二位的胸腺嘧啶轉換為腺嘌呤。（ A ）自發(fā)點

29、突變多半是由于嘌呤或嘧啶堿中氫原子的互變異構移位而引起的。在 DNA 復制中，這種移位會引起堿基配對的改變。某些誘變劑如5溴尿嘧啶和2氨基嘌呤可促進DNA 堿基的互變異構。（ A）吖啶衍生物可導致一個堿基對的插入或缺失，從而引起移碼突變。5溴尿嘧啶可引起轉換突變，因為溴取代了胸腺嘧啶的甲基，這樣則增加了烯醇式互變異構物與鳥嘌呤而不是腺嘌呤進行堿基配對的可能性。咪唑硫嘌呤可轉變?yōu)?巰基嘌呤，后者是嘌呤的類似物。乙基乙磺酸可通過使鳥嘌呤烷基化引起轉換突變。（ D） 5溴尿嘧啶可代替胸腺嘧啶參入到DNA 中， 從而產(chǎn)生密度較高的DNA然后可在氯化銫密度梯度中用離心法對新合成的DNA 進行定量分析。D

30、NA中的5溴尿嘧啶較正常胸嘧啶既不更活潑又不更易被斷裂，也不能象吖啶染料那樣引起移碼突變。18（ B） RNA 聚合酶必須以DNA 為模板催化合成RNA， 通常只轉錄雙螺旋DNA其中的一條鏈。RNA 鏈的合成方向是從5到3端， 產(chǎn)物從來沒有環(huán)狀分子。與 DNA 聚合酶不同，RNA 聚合酶不需要引物。（ A） 因子是 RNA 聚合酶的一個亞基， 因子本身沒有催化功能，它的作用是與核心酶結合，對轉錄的起始特異性起決定性的作用。在有 因子的情況下， RNA 聚合酶將選擇DNA 準備轉錄的那條鏈，并在適當?shù)膯踊虿课婚_始轉錄。（ B）真核生物有三種RNA 聚合酶，它們分別催化45S rRNA（ RA

31、N 聚合酶） mRNA 和 SnRNA（ RNA 聚合酶）， 以及 tRNA 和 5S rRNA（ RNA聚合酶）的合成。 這三種酶可以根據(jù)它們對抗生素 鵝膏蕈堿的敏感度不同加以區(qū)別：RNA 聚合酶耐受；RNA 聚合酶極敏感；RNA 聚合酶中等敏感。RNA 聚合酶催化合成的45S原始轉錄本，經(jīng)轉錄后加工而成為成熟的18S rRNA， 5.8S rRNA 和 28S rRNA。（ D）真核生物DNA 在多個復制叉上按半保留方式復制。真核生物有三種DNA 聚合酶： 、 及 。 分別參加細胞核DNA 復制， 細胞核 DNA 修復，以及線粒體DNA 復制。真核生物DNA 聚合酶一般都不具有核酸酶活性。

32、真核DNA 復制時，組蛋白不從DNA 解離下來，而是留在含有領頭子鏈的雙鏈DNA 上。新合成的組蛋白則與隨從子鏈結合。（ C）原核細胞轉錄終止不是隨機進行的，據(jù)目前所知有兩種轉錄終止方式即依賴 Rho （ ） 因子與不依賴Rho 因子的方式。不依賴Rho 因子的轉錄終止與轉錄產(chǎn)物形成二級結構有關，即在基因的末端含G C 豐富的回文結構，當 RNA 轉錄延長至該部位時，按模板轉錄出的RNA 堿基序列會立即形成發(fā)夾型的二級結構，這種二級結構是阻止轉錄繼續(xù)向下游推進的關鍵。Rho因子是 RNA 聚合酶之外的一種蛋白質，有控制轉錄終止的作用。Rho因子本身似乎就具有ATP 酶的活性。B： DNA 連接

33、酶催化DNA 鏈兩段之間形成磷酸二酯鍵，但這兩段必須是在DNA 雙螺旋結構之中，它不能將兩條游離的單鏈DNA 分子連接起來。在大腸桿菌中，成鍵所需能量來自NAD ， 產(chǎn)物是 AMP 和煙酰胺單核苷酸；而在某些動物細胞以及噬菌體中，則以ATP 作為能源。DNA 連接酶在DNA 合成、修復以及重組中都是十分重要的。B： 真核 mRNA 是從 2 至 20 千堿基長的細胞核RNA 前體核不均 RNA（ hnRNA）形成的。所有真核mRNA5 端均具有5 5 焦磷酸連接的7-甲基鳥苷（帽結構）。大多數(shù)真核mRNA 的 3 端連有 150 至 200 個核苷酸長度的聚腺苷酸尾鏈。從mRNA 前體切除內含

34、子是由具有高度專一性的酶性催化完成的。內含子是不被翻譯的。真核生物mRNA 是單順反子的。（四）是非題1對2對3錯4錯5錯6錯7對8錯9對10對11對12對（五）問答題1答：在細胞分裂過程中通過DNA 的復制把遺傳信息由親代傳遞給子代，在子代的個體發(fā)育過程中遺傳信息由DNA 傳遞到RNA， 最后翻譯成特異的蛋白質； 在 RNA 病毒中 RNA 具有自我復制的能力，并同時作為mRNA，指導病毒蛋白質的生物合成；在致癌 RNA 病毒中， RNA 還以逆轉錄的方式將遺傳信息傳遞給DNA 分子。答： （ 1）復制過程是半保留的。（ 2）細菌或病毒DNA 的復制通常是由特定的復制起始位點開始，真核細胞染

35、色體 DNA 復制則可以在多個不同部位起始。（ 3）復制可以是單向的或是雙向的，以雙向復制較為常見，兩個方向復制的速度不一定相同。（ 4）兩條DNA 鏈合成的方向均是從5向3方向進行的。（ 5）復制的大部分都是半不連續(xù)的，即其中一條領頭鏈是相對連續(xù)的，其他隨后鏈則是不連續(xù)的。（ 6）各短片段在開始復制時，先形成短片段RNA 作為 DNA 合成的引物，這一RNA 片段以后被切除，并用DNA 填補余下的空隙。答： DNA 復制從特定位點開始，可以單向或雙向進行，但是以雙向復制為主。由于 DNA 雙鏈的合成延伸均為5 3的方向，因此復制是以半不連續(xù)的方式進行，可以概括為：雙鏈的解開；RNA 引物的合

36、成；DNA 鏈的延長；切除RNA 引物，填補缺口，連接相鄰的DNA 片段。（ 1）雙鏈的解開在 DNA 的復制原點，雙股螺旋解開，成單鏈狀態(tài)，形成復制叉， 分別作為模板，各自合成其互補鏈。在復制叉上結合著各種各樣與復制有關的酶和輔助因子。RNA 引物的合成引發(fā)體在復制叉上移動，識別合成的起始點，引發(fā) RNA引物的合成。移動和引發(fā)均需要由ATP 提供能量。以DNA 為模板按5 3的方向， 合成一段引物RNA 鏈。 引物長度約為幾個至10個核苷酸。在引物的5端含 3 個磷酸殘基，3端為游離的羥基。DNA 鏈的延長當 RNA 引物合成之后，在DNA 聚合酶的催化下，以四種脫氧核糖核苷5 -三磷酸為底

37、物，在RNA 引物的3端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出PPi。 DNA 鏈的合成是以兩條親代DNA 鏈為模板，按堿基配對原則進行復制的。親代 DNA 的雙股鏈呈反向平行，一條鏈是5 3方向，另一條鏈是3 5方向。在一個復制叉內兩條鏈的復制方向不同，所以新合成的二條子鏈極性也正好相反。由于迄今為止還沒有發(fā)現(xiàn)一種DNA 聚合酶能按3 5方向延伸，因此子鏈中有一條鏈沿著親代DNA 單鏈的 3 5方向（亦即新合成的DNA 沿 5 3方向）不斷延長。（ 4）切除引物，填補缺口，連接修復當新形成的岡崎片段延長至一定長度，其 3 -OH 端與前面一條老片斷的5斷接近時，在DNA 聚合酶的作用下，在

38、引物 RNA 與 DNA 片段的連接處切去RNA 引物后留下的空隙，由DNA 聚合酶催化合成一段DNA 填補上； 在 DNA 連接酶的作用下，連接相鄰的DNA 鏈；修復摻入DNA 鏈的錯配堿基。這樣以兩條親代DNA 鏈為模板，就形成了兩個DNA 雙股螺旋分子。每個分子中一條鏈來自親代DNA， 另一條鏈則是新合成的。答： （ 1）原核細胞大腸桿菌的RNA 聚合酶研究的較深入。這個酶的全酶由5種亞基（ 2 ）組成，還含有2 個 Zn 原子。在RNA 合成起始之后，因子便與全酶分離。不含 因子的酶仍有催化活性，稱為核心酶。 亞基具有與啟動子結合的功能， 亞基催化效率很低，而且可以利用別的DNA 的任

39、何部位作模板合成RNA。加入 因子后，則具有了選擇起始部位的作用， 因子可能與核心酶結合，改變其構象，從而使它能特異地識別DNA 模板鏈上的起始信號。（ 2）真核細胞的細胞核內有RNA 聚合酶I、 II 和 III ，通常由4 6 種亞基組成，并含有Zn2+。 RNA 聚合酶 I 存在于核仁中，主要催化rRNA 前體的轉錄。RNA聚合酶和存在于核質中，分別催化mRNA 前體和小分子量RNA 的轉錄。 此外線粒體和葉綠體也含有RNA 聚合酶，其特性類似原核細胞的RNA 聚合酶。答： RNA 轉錄過程為起始位點的識別、起始、延伸、終止。（ 1）起始位點的識別RNA 聚合酶先與DNA 模板上的特殊啟

40、動子部位結合， 因子起著識別DNA 分子上的起始信號的作用。在 亞基作用下幫助全酶迅速找到啟動子，并與之結合生成較松弛的封閉型啟動子復合物。這時酶與DNA 外部結合，識別部位大約在啟動子的-35 位點處。接著是DNA 構象改變活化，得到開放型的啟動子復合物，此時酶與啟動子緊密結合，在-10 位點處解開DNA雙鏈，識別其中的模板鏈。由于該部位富含A-T 堿基對，故有利于DNA 解鏈。開放型復合物一旦形成，DNA 就繼續(xù)解鏈，酶移動到起始位點。（ 2）起始留在起始位點的全酶結合第一個核苷三磷酸。第一個核苷三磷酸常是GTP 或 ATP。形成的啟動子、全酶和核苷三磷酸復合物稱為三元起始復合物，第一個核苷酸摻入的位置稱為轉錄起始點。這時 亞基被釋放脫離核心酶。（ 3）延伸從起始到延伸的轉變過程