1、2023學(xué)年高二年級(jí)下學(xué)期生物模擬測(cè)試卷注意事項(xiàng):1答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫(xiě)清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。3請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效；在草稿紙、試卷上答題無(wú)效。4作圖可先使用鉛筆畫(huà)出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1下列各組生物或細(xì)胞按照特征進(jìn)行歸納正確的一組是（）A無(wú)核膜：念珠藻、支原體、酵母菌、放線菌B無(wú)DNA：蛙的成熟紅細(xì)胞、植物導(dǎo)管細(xì)胞、煙草花葉病毒、HIVC有葉

2、綠體：胡蘿卜、水綿、顫藻、馬尾藻D能有氧呼吸：酵母菌、硝化細(xì)菌、螨蟲(chóng)、菠菜2免疫是機(jī)體的一種特殊的保護(hù)性生理功能。下列有關(guān)的敘述中，正確的有幾項(xiàng)：（ ） 受抗原刺激后的淋巴細(xì)胞，細(xì)胞周期會(huì)變長(zhǎng)，核糖體活動(dòng)增強(qiáng) 突破皮膚、黏膜等第一道防線后，機(jī)體免疫的第二道防線吞噬細(xì)胞、殺菌物質(zhì)會(huì)對(duì)侵入人體的抗原起作用 能特異性識(shí)別抗原的細(xì)胞有：吞噬細(xì)胞、T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、漿細(xì)胞、記憶細(xì)胞 T 淋巴細(xì)胞與細(xì)胞免疫和體液免疫都有關(guān)，B 淋巴細(xì)胞與體液免疫有關(guān)，而與細(xì)胞免疫無(wú)關(guān) 盡管特異性免疫針對(duì)性強(qiáng)，對(duì)抗原的殺傷效果好，但機(jī)體最終將抗原清除大多數(shù)還是要依賴 非特異性免疫 過(guò)敏反應(yīng)是指已產(chǎn)生免疫的機(jī)體，在再次接受

3、相同的抗原時(shí)所發(fā)生的組織損傷或功能紊亂， 如系統(tǒng)性紅斑狼瘡，就是由于免疫系統(tǒng)異常敏感引起的A二項(xiàng)B三項(xiàng)C四項(xiàng)D五項(xiàng)3下列是關(guān)于“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是A利用稀釋涂布平板法準(zhǔn)確估計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是恰當(dāng)?shù)南♂尪菳若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需設(shè)置未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照C將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，25恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)D選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)4下列關(guān)于酶制劑在生活中應(yīng)用的相關(guān)敘述不合理的有A生物酶牙膏中含有酶，可以分解細(xì)菌預(yù)防齲齒B加酶洗衣粉含固定化酶，去污能力比普通洗衣粉要強(qiáng)C溶菌酶能夠溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁，具有

4、抗菌消炎的作用D多酶片含有多種消化酶，在人體消化不良時(shí)可以口服5下列有關(guān)胚胎工程理論及應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是A從卵巢中采集的卵母細(xì)胞應(yīng)立即與精子完成受精過(guò)程B胚胎移植較適宜的時(shí)期是桑椹胚或囊胚時(shí)期C對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，需將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割D理論上，胚胎干細(xì)胞能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體內(nèi)的多種細(xì)胞6下列關(guān)于“中心法則”含義的敘述中錯(cuò)誤的是（ ）A中心法則總結(jié)了遺傳信息在細(xì)胞內(nèi)的傳遞規(guī)律B過(guò)程可發(fā)生在 RNA 病毒侵染的細(xì)胞中C過(guò)程所需的原料分別是脫氧核苷酸、核糖核苷酸、氨基酸D所有細(xì)胞均能進(jìn)行過(guò)程7下圖為某細(xì)胞的部分結(jié)構(gòu)示意圖，相關(guān)說(shuō)法正確的是A圖中2與某種RNA的合成有關(guān)B1與6直接相連且基本支架

5、相同C人和哺乳動(dòng)物各種細(xì)胞都具有1結(jié)構(gòu)D圖中3在細(xì)胞分裂結(jié)束時(shí)可縮短變粗8（10分）下列有關(guān)酶的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路正確的是A利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和碘液驗(yàn)證酶的專一性B可利用過(guò)氧化氫和過(guò)氧化氫酶反應(yīng)探究pH對(duì)酶活性的影響C在驗(yàn)證溫度對(duì)淀粉酶活性的影響實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選斐林試劑檢測(cè)還原糖的生成D利用胃蛋白酶、蛋清和pH分別為3、7、11的緩沖液驗(yàn)證pH對(duì)酶活性的影響二、非選擇題9（10分）甲狀腺激素是人體中的重要激素。回答下列相關(guān)問(wèn)題：（1）通常，新生兒出生后，由于所處環(huán)境溫度比母體內(nèi)低，甲狀腺激素水平會(huì)升高。在這個(gè)過(guò)程中，甲狀腺激素分泌的調(diào)節(jié)是分級(jí)的，其中由_分泌促甲狀腺激素釋放激素，由_分泌促甲狀腺激素

6、。（2）甲狀腺激素的作用包括提高_(dá)的速率，使機(jī)體產(chǎn)熱增多；影響神經(jīng)系統(tǒng)的_。甲狀腺激素作用的靶細(xì)胞是_。（3）除了作用于靶細(xì)胞外，激素作用方式的特點(diǎn)還有_。（答出一點(diǎn)即可）10（14分）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?；卮饐?wèn)題：（1）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基土，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。（2）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈說(shuō)明該菌株的降解能力_。（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程

7、中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無(wú)菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。11（14分）金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白。某研究小組計(jì)劃通過(guò)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于重金屬?gòu)U水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖圖像，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）從高表達(dá)MT 蛋白的生物組織中提取mRNA，通過(guò)_獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。 （2）設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物（引物1和引物2），為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，在引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成_，而造成引物自連。 （3）圖中

8、步驟1代表_，步驟2代表退火，步驟3代表延伸，這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。 （4）PCR擴(kuò)增時(shí)，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過(guò)高會(huì)破_的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān)，長(zhǎng)度相同但_的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。 （5）如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采取的改進(jìn)措施有_（填序號(hào)：升高退火溫度 降低退火溫度 重新設(shè)計(jì)引物）。12下圖1是將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)胂憬吨瞥芍参镆呙绲倪^(guò)程，下表1是三種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：限制酶EcoRPstSma切割位點(diǎn)GAATTCCTTAAGCTGCAGGACGTCCCCGGGGGGCCC（1）將圖1中的含抗原基

9、因的DNA片段用如圖所示的EcoR、Pst和Sma完全酶切后，可以得到_種DNA片段。（2）用圖1中的質(zhì)粒和抗原基因構(gòu)成重組質(zhì)粒，不能使用Sma切割，原因是_；與只使用EcoR相比較，使用EcoR和Pst兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒和含抗原基因的DNA的優(yōu)點(diǎn)是_。（3）步驟所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？_。（4）選用農(nóng)桿菌是由于農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的T一DNA具有什么特點(diǎn)？_。（5）步驟是_過(guò)程，培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中需要添加蔗糖的目的是_。（6）為了促進(jìn)胚狀體的生長(zhǎng)發(fā)育，可以向人工種子內(nèi)添加_。參考答案（含答案詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42

10、分。)1、D【答案解析】本題考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，要求考生識(shí)記一些常見(jiàn)生物的類別，能準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)涉及到的生物的類別；識(shí)記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)?！绢}目詳解】酵母菌屬于真核生物，含有核膜，A錯(cuò)誤；蛙的成熟紅細(xì)胞有細(xì)胞核，含有DNA，B錯(cuò)誤；顫藻屬于原核生物，不含葉綠體，C錯(cuò)誤；酵母菌、螨蟲(chóng)、菠菜都含有線粒體，能進(jìn)行有氧呼吸，硝化細(xì)菌雖然不含線粒體，但含有與有氧呼吸有關(guān)的酶，也能進(jìn)行有氧呼吸，D正確?！敬鸢更c(diǎn)睛】（1）?？嫉恼婧松铮壕G藻、水綿、衣藻、真菌（如酵母菌、霉菌、蘑菇）、原生動(dòng)物（如草履蟲(chóng)、變形蟲(chóng)）及動(dòng)、植物；（2）?？嫉脑松铮核{(lán)藻（如顫

11、藻、發(fā)菜、念珠藻）、細(xì)菌（如乳酸菌、硝化細(xì)菌、大腸桿菌、肺炎雙球菌等）、支原體、衣原體、放線菌；（3）病毒既不是真核生物，也不是原核生物。2、B【答案解析】免疫系統(tǒng)包括免疫細(xì)胞、免疫器官和免疫活性物質(zhì)。人體的三道防線包括第一道防線皮膚、黏膜等；第二道防線吞噬細(xì)胞和體液中的殺菌物質(zhì)等；第三道防線特異性免疫，包括體液免疫和細(xì)胞免疫?！绢}目詳解】受抗原刺激后的淋巴細(xì)胞，細(xì)胞周期會(huì)變短，發(fā)生增殖分化，錯(cuò)誤； 突破皮膚、黏膜等第一道防線后，機(jī)體免疫的第二道防線吞噬細(xì)胞、殺菌物質(zhì)會(huì)對(duì)侵入人體的抗原起作用，正確；漿細(xì)胞不能識(shí)別抗原，吞噬細(xì)胞不能特異性識(shí)別抗原，錯(cuò)誤；T 淋巴細(xì)胞可以參與細(xì)胞免疫和體液免疫，B

12、 淋巴細(xì)胞只參與體液免疫，不參與細(xì)胞免疫，正確；盡管特異性免疫針對(duì)性強(qiáng)，對(duì)抗原的殺傷效果好，但機(jī)體最終將抗原清除大多數(shù)還是要依賴非特異性免疫，如吞噬細(xì)胞吞噬抗原-抗體的復(fù)合物，正確；系統(tǒng)性紅斑狼瘡屬于自身免疫病，錯(cuò)誤。綜上所述，ACD不符合題意，B符合題意。故選B。3、C【答案解析】土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計(jì)數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的稀釋倍數(shù)要合適，計(jì)數(shù)時(shí)通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)?！绢}目詳解】A. 利用稀釋涂布平板法準(zhǔn)確估計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是恰當(dāng)?shù)南♂尪?，稀釋倍?shù)太低，菌落太多會(huì)長(zhǎng)在一起，稀釋倍數(shù)太高，平板上菌落數(shù)目

13、過(guò)少，A正確；B. 若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，則應(yīng)設(shè)置接種了的選擇培養(yǎng)基做實(shí)驗(yàn)組，設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照組，B正確；C. 將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，3037恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)，C錯(cuò)誤；D. 計(jì)數(shù)時(shí)通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D正確。4、B【答案解析】據(jù)題文和選項(xiàng)的描述可知：該題考查學(xué)生對(duì)酶制劑在生活中應(yīng)用等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力?！绢}目詳解】生物酶牙膏中含有的活性酶可以分解口腔中的細(xì)菌，具有預(yù)防齲齒的功效，A正確；酶的活性受溫度和pH的影響，因此加酶洗衣粉的去污能力不一定比普通洗衣粉要強(qiáng)，B錯(cuò)誤；溶菌酶能夠溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁，具有抗菌消

14、炎的作用，C正確；多酶片含有多種消化酶，在人體消化不良時(shí)可以口服，以促進(jìn)消化，增進(jìn)食欲，D正確。【答案點(diǎn)睛】解答此題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解固定化酶的內(nèi)涵、酶制劑的種類及其應(yīng)用的實(shí)例，明確酶的活性受溫度以及pH的影響，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。5、A【答案解析】1、體外受精過(guò)程：精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)。獲能的精子和成熟卵子在培養(yǎng)液共同培養(yǎng)，完成體外受精形成受精卵，受精卵需經(jīng)早期發(fā)育培養(yǎng)形成早期胚胎。2、囊胚的結(jié)構(gòu)：胚囊腔、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，可被誘導(dǎo)分化為多種細(xì)胞、組織?！绢}目詳解】從卵巢中采集的卵母細(xì)胞還未成熟，需要培養(yǎng)成熟

15、后才能與獲能的精子結(jié)合，完成受精過(guò)程，A錯(cuò)誤；桑椹胚或囊胚時(shí)期細(xì)胞的全能性高，胚胎發(fā)育為個(gè)體的概率較高，因此在這兩個(gè)時(shí)期進(jìn)行胚胎移植較為適宜，B正確；對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，需將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，C正確。胚胎干細(xì)胞是一種未分化細(xì)胞，具有發(fā)育全能性化和二倍體核型，可被誘導(dǎo)分化為多種細(xì)胞、組織，D正確。故選A?！敬鸢更c(diǎn)睛】識(shí)記胚胎移植的基本程序、胚胎分割的注意事項(xiàng)以及胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)便可判斷各選項(xiàng)。6、D【答案解析】分析題圖：圖中表示轉(zhuǎn)錄過(guò)程，表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，表示RNA的復(fù)制過(guò)程，為翻譯過(guò)程，為DNA的復(fù)制過(guò)程?！绢}目詳解】A、中心法則總結(jié)了遺傳信息在細(xì)胞

16、內(nèi)的傳遞規(guī)律，A正確；B、逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程和RNA的復(fù)制過(guò)程可發(fā)生在RNA病毒侵染的細(xì)胞中，B正確；C、為DNA的復(fù)制過(guò)程，該過(guò)程所需的原料是脫氧核苷酸；為RNA的復(fù)制過(guò)程，該過(guò)程所需的原料是核糖核苷酸；為翻譯過(guò)程，該過(guò)程所需的原料是氨基酸，C正確；D、為DNA復(fù)制過(guò)程，該過(guò)程只發(fā)生在能進(jìn)行分裂的細(xì)胞中，因此并不是所有細(xì)胞均能進(jìn)行過(guò)程，D錯(cuò)誤。故選D。7、A【答案解析】分析題圖：結(jié)構(gòu)1為核膜的內(nèi)、外膜，結(jié)構(gòu)2為核仁，3為染色質(zhì)，4為核孔，5為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，6為核糖體?！绢}目詳解】A. 圖中2核仁與某種RNA的合成以及核糖體的形成有關(guān)，A正確；B. 1為雙層膜結(jié)構(gòu)，其外膜與5內(nèi)質(zhì)網(wǎng)直接相連，且都是由磷脂雙分

17、子層構(gòu)成基本支架，B錯(cuò)誤；C.哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞、高等植物成熟的篩管細(xì)胞不具有1核膜，C錯(cuò)誤；D. 圖中3染色質(zhì)在細(xì)胞分裂前期時(shí)可縮短變粗形成染色體，D錯(cuò)誤。8、B【答案解析】酶具有高效性、專一性，需要適宜的溫度和pH。【題目詳解】A、碘液不能鑒定蔗糖是否水解，故利用淀粉、蔗糖、淀粉酶驗(yàn)證酶的專一性時(shí)，不能選擇碘液進(jìn)行鑒定，A錯(cuò)誤；B、可利用過(guò)氧化氫和過(guò)氧化氫酶反應(yīng)探究pH對(duì)酶活性的影響，自變量為不同的pH，因變量為過(guò)氧化氫的分解速率，B正確；C、由于斐林試劑需要經(jīng)過(guò)水浴加熱，故在驗(yàn)證溫度對(duì)淀粉酶活性的影響實(shí)驗(yàn)中，不能選斐林試劑檢測(cè)還原糖的生成，C錯(cuò)誤；D、胃蛋白酶的最適pH為1.5，應(yīng)該在

18、最適pH左右設(shè)置自變量，D錯(cuò)誤。故選B。二、非選擇題9、下丘腦 垂體 細(xì)胞代謝 發(fā)育和功能 幾乎全身所有的細(xì)胞 高效【答案解析】（1）下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素，垂體分泌促甲狀腺激素。（2）甲狀腺激素的作用包括提高細(xì)胞代謝的速率，使機(jī)體產(chǎn)熱增多；影響升級(jí)系統(tǒng)的發(fā)育和功能。甲狀腺激素作用的靶細(xì)胞幾乎是全身所有的細(xì)胞。（3）除了作用于靶細(xì)胞外，激素作用方式的特點(diǎn)還有微量而高效、通過(guò)體液運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn)?！究键c(diǎn)定位】脊椎動(dòng)物激素的調(diào)節(jié)10、原油 選擇 平板劃線法 稀釋涂布平板法 強(qiáng) 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰 【答案解析】（1）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基的分類

19、：按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的。按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說(shuō)明有大腸桿菌。（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、

20、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體-菌落?！绢}目詳解】（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無(wú)其它碳源，不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（2）分離純化菌種時(shí)，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細(xì)菌細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便純化菌種。（3）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。（4）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅

21、菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等無(wú)菌操作要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍微生物的污染?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題的知識(shí)點(diǎn)是微生物培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。11、逆轉(zhuǎn)錄 堿基互補(bǔ)配對(duì) 變性 引物與模板 GC含量高 【答案解析】PCR技術(shù)：1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）

22、。5、過(guò)程：高溫變性：DNA解旋過(guò)程；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；中溫延伸：合成子鏈；PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)?！绢}目詳解】（1）PCR擴(kuò)增目的基因，首先要有目的基因作為模板，所以從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，從而用于PCR擴(kuò)增。（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒，首先要用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)，設(shè)計(jì)的引物之間不能有堿基互補(bǔ)配對(duì)，否則引物自連，而不能與模板相連。（3）圖中步驟1、2、3分別代表變性、退火、延伸，這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。（4）退火表示引物與模板相連，若退火溫度過(guò)高會(huì)破壞引物與模板的堿基配對(duì)；由于G-C之間有三個(gè)氫鍵，A-T之間有兩個(gè)氫鍵，所以G-C含量越高的引物，退火溫度越高。（5）PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，可能是退火溫度過(guò)高，導(dǎo)致引物與模板不能相連或引物間相互配對(duì)，引物自連，不能與模板相連，因此，可通過(guò)降低退火溫度或重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行改進(jìn)?！敬鸢更c(diǎn)睛