1、納洛酮對(duì)催產(chǎn)素所致小鼠記憶減退的影響【摘要】目的觀察側(cè)腦室分別給予納洛酮、催產(chǎn)素(xytin,T)對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及阿片受體在T影響小鼠學(xué)習(xí)記憶中的作用。方法按分層隨即區(qū)組設(shè)計(jì)將小鼠分成4組(n=7)：生理鹽水組(NS組)、納洛酮組(Nal組)、T組、Nal+T組。采用避暗實(shí)驗(yàn)分別測(cè)定給藥后第1天、第2天小鼠的埋伏期及錯(cuò)誤次數(shù)。結(jié)果用藥后第2天，與NS組相比，T組錯(cuò)誤次數(shù)增加(P0.01)，埋伏期縮短(P0.05);與T組相比：Nal+T組的錯(cuò)誤次數(shù)減少(P0.05)，埋伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論在本實(shí)驗(yàn)條件下，側(cè)腦室微量注射T能損傷小鼠的記憶功能，而側(cè)腦室給予阿片受體拮抗劑

2、納洛酮后，逆轉(zhuǎn)T所致的記憶損傷，提示T損害記憶的作用與阿片受體有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】催產(chǎn)素;納洛酮;避暗實(shí)驗(yàn);記憶Abstrat：bjetiveTinvestigatetheeffetfnalxnerxytin(T)irinjetinintlateralerebralventrilentheeryinie,andtexplretherlefpiidreeptrintheeffetfTneryinie.ethdsTheieererandlydividedint4grups(n=7eah):nralsalinegrup(NSgrup),nalxneNalgrup,Tgrup,Nal+Tgrup.Thet

3、iesftheerrrsandtheduratinflatenyererespetivelyrerdednthefirstdayandthesenddayafterthedrugadinistratininstep-thrughtask.Resultsnthesendday,asparedttheNSgrup,thetiesferrrsinreased(P0.01)andtheduratinflatenydereased(P0.05)inthestep-thrughtaskintheTgrup;parediththeTgrup,thetiesferrrsdereased(P0.05)hilet

4、hereerensignifiantdifferenesintheduratinflateny(P0.05)inthestep-thrughtaskintheNal+Tgrup.nlusinUnderthisexperientnditins,irinjetinfTlateralerebralventrileuldipairtheeryinie.eanhile,nalxne,thepiidreeptrantagnist,uldreversetheeffetfT.therefre,thepiidreeptrediatedtheeffetsfTntheery.Keyrds:xytin;nalxne;

5、step-thrughtask;ery催產(chǎn)素(xytin，T)是一種九肽構(gòu)成的激素，由下丘腦室旁核和視上核大細(xì)胞分泌后，經(jīng)下丘腦-垂體束運(yùn)送到神經(jīng)垂體儲(chǔ)存，當(dāng)機(jī)體需要時(shí)由神經(jīng)垂體釋放到血液中。腦內(nèi)許多部位有T受體，如：大腦皮質(zhì)局部區(qū)域、基底神經(jīng)核、邊緣系統(tǒng)、背側(cè)丘腦、下丘腦、腦干和脊髓。大量研究說明T除了參與與生育有關(guān)的一些行為外，還在復(fù)雜的社會(huì)行為和應(yīng)激中發(fā)揮作用1。此外，T與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系親密，側(cè)腦室、海馬、基底神經(jīng)核或中縫背核微量注射T后，可通過影響記憶的穩(wěn)固和讀取過程而導(dǎo)致遺忘，因此被稱為遺忘肽1-2。中樞內(nèi)給予T可調(diào)節(jié)腦內(nèi)阿片肽、多巴胺、五羥色胺和谷氨酸的釋放。但是，T對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶

6、的影響是否與阿片受體有關(guān)尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究利用避暗實(shí)驗(yàn)，并通過預(yù)先側(cè)腦室注射阿片受體的特異性拮抗藥納絡(luò)酮(nalxne)，觀察阿片受體是否參與T對(duì)小鼠記憶的影響。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌性，體重2025g，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)前2天使小鼠熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，自由攝食飲水，每日固定時(shí)間進(jìn)展實(shí)驗(yàn)。1.2主要試劑和儀器ZH-500型小鼠避暗儀(安徽淮北正華生物儀器設(shè)備)，實(shí)驗(yàn)裝置清楚暗兩室，兩室之間有一直徑為3大小的圓洞，兩室底部均鋪以銅柵，暗室接電。鹽酸納洛酮注射液(北京四環(huán)藥業(yè),批號(hào)20221207);T(上海禾豐制藥,批號(hào)091204);2種藥物均以生理鹽水(NS

7、)稀釋至所需濃度。1.3側(cè)腦室微量注射將小鼠的頭部固定，在小鼠兩耳連線與雙眼連線之間，在顱骨中線旁2處，用微量注射器垂直刺入2(預(yù)先將塑料套管在針尖固定)，給藥容積為2.5l，在30s內(nèi)完成注射，留針2in。1.4動(dòng)物分組及處理按分層隨即區(qū)組設(shè)計(jì)分組，使各組平均體重根本一樣。小鼠分成4組(n=7)：NS組、納洛酮(1g)組(Nal組)、T(5ng)組、Nal(1g)+T(5ng)組(Nal+T組)。各組小鼠均于訓(xùn)練前30in側(cè)腦室給藥，其中Nal+T組于訓(xùn)練前30in側(cè)腦室給予納洛酮后，再于訓(xùn)練前15in側(cè)腦室微量注射T。每次側(cè)腦室均注射2.5l。1.5避暗實(shí)驗(yàn)法訓(xùn)練時(shí)先將小鼠放入反響箱中適應(yīng)

8、3in，再將暗室底銅柵通40V、50Hz交流電，最后將小鼠背對(duì)洞口放入明室，小鼠進(jìn)入暗室即受電擊。訓(xùn)練時(shí)記錄第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間(步入埋伏期，step-thrughlateny，STL)，STL大于180s者棄去不用。記錄5in內(nèi)第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間(埋伏期)和進(jìn)入次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))作為根底成績(jī)。假如5in時(shí)小鼠仍未進(jìn)入暗室，錯(cuò)誤次數(shù)記為0次，埋伏期記為300s。48h后再次將小鼠放入明室，記錄5in內(nèi)第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間(埋伏期)和進(jìn)入次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用s表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)展分析，多組間比擬采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)方差分析法(ANVA)，兩兩比擬采用q檢驗(yàn)。P0

9、.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2結(jié)果如表1所示：在用藥前各組小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)和埋伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，說明各組小鼠根底智力相似。用藥第1天，避暗實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)和埋伏期差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);用藥第2天與NS組相比，Nal組的埋伏期及錯(cuò)誤次數(shù)無明顯差異(P0.05)，而T組錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加(P0.01)，埋伏期明顯縮短(P0.05)，說明側(cè)腦室微量注射1g納洛酮對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)記憶無明顯影響，而側(cè)腦室微量注射5ngT對(duì)小鼠的記憶有損傷。與T組相比，Nal+T組的錯(cuò)誤次數(shù)明顯減少(P0.05)，埋伏期有增加趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，說明納

10、洛酮可能逆轉(zhuǎn)T所致的記憶損傷。表1納洛酮對(duì)T所致小鼠記憶減退的影響(避暗法，n=7，s)3討論在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)許多部位存在著T神經(jīng)元、T纖維及其受體。T在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)發(fā)揮多種作用，如心血管功能的調(diào)節(jié)、體溫調(diào)節(jié)、痛覺調(diào)制、對(duì)行為活動(dòng)的影響等，T能明顯消弱記憶過程，即消弱記憶的穩(wěn)固、儲(chǔ)存與回憶過程3-4。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果再次證實(shí)了這一觀點(diǎn)，我們觀察到側(cè)腦室微量注射T后，與NS組相比，小鼠避暗實(shí)驗(yàn)的錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加，埋伏期縮短，說明T對(duì)小鼠的記憶有損傷作用。那么，T對(duì)記憶的消弱作用是否與腦內(nèi)的阿片受體有關(guān)呢?目前尚未見到相關(guān)報(bào)道。已有研究說明：阿片受體與記憶親密相關(guān)5，阿片類藥物成癮之后，其記憶非常

11、強(qiáng)烈，而且可導(dǎo)致終生難忘，說明學(xué)習(xí)記憶功能參與了阿片的成癮過程;納洛酮作為阿片受體拮抗藥，對(duì)各型阿片受體都有競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用，本身不產(chǎn)生明顯藥理作用，是常用的工具藥。Gaugh等6-7認(rèn)為阿片肽抑制杏仁核中去甲腎上腺素遞質(zhì)的釋放，使記憶減弱，而納洛酮可解除這種抑制作用。此外，T可通過激活T受體，抑制海馬A1區(qū)神經(jīng)元對(duì)外周傳入電信號(hào)的反響，中樞內(nèi)阿片系統(tǒng)也參與T的這種抑制作用，當(dāng)用納洛酮阻斷阿片受體后，T的抑制作用明顯減弱8。而海馬是影響動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶過程的主要作用部位，老年癡呆患者的海馬及顳葉的T程度明顯增高3。在本實(shí)驗(yàn)中，我們觀察到側(cè)腦室單獨(dú)給予阿片受體拮抗藥納洛酮后，與生理鹽水組相比，錯(cuò)誤次數(shù)

12、和埋伏期差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明單獨(dú)應(yīng)用1g納洛酮對(duì)小鼠的記憶并無明顯影響。但在給予T之前預(yù)先給予納洛酮，與單獨(dú)應(yīng)用T組相比，小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)明顯減少，避暗埋伏期增加，說明納洛酮可以逆轉(zhuǎn)T對(duì)記憶的損害作用，提示阿片受體參與T減退記憶的作用。綜上所述，我們認(rèn)為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的阿片受體可能參與了T對(duì)記憶的減退作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1delivEiraLF,abi,DiehlF,etal.Glurtiid-ediatedeffetsfsysteixytinupneryretrievalJ.NeurbilLearne,2022,87(1):67-71.2u,YuL.Rlesfxytininspatiall

13、earninganderyinthenuleusbasalisfeynertinratsJ.RegulatryPeptides,2022,120(1-3):119-125.3鄒葉青,柳豐萍,高建群,等.催產(chǎn)素的研究進(jìn)展J.廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2022,35(6):61-64.4梅鎮(zhèn)彤.學(xué)習(xí)和記憶的神經(jīng)生物學(xué).上海:上?？萍冀逃霭嫔?1997:95-97.5raniA,GhadaiR,FathiN,etal.NalxneiprvesipairentfspatialperfraneinduedbypentylenetetrazlkindlinginratsJ.Neursiene,2022,145(3):824-831.6GaughJL,Intrini-llisnIB,ahillLF,etal.Neurdulatrysystesanderystrage:rleftheaygdalaJ.BehavBra