1、03.10.20221實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二謝 海 嘯02.10.20221實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)二謝 海 嘯03.10.20222實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)是將血液制備成涂片，瑞氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)。通常分類(lèi)100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算得出各種白細(xì)胞所占百分比。 02.10.20222實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)是將03.10.20223瑞氏染料溶于甲醇，離解為帶正電的堿性美蘭（M+）和帶負(fù)電的酸性伊紅（E-）離子。細(xì)胞的染色既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用。各種細(xì)胞成分的化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)染料的親和力也不一樣，故可呈不同的著色特點(diǎn)。瑞氏染色原理：

2、02.10.20223瑞氏染料溶于甲醇，離解為帶正電的堿性美03.10.20224血紅蛋白、嗜酸性顆粒均為堿性物質(zhì)，故與酸性染料伊紅結(jié)合而染成紅色，呈嗜酸性。細(xì)胞核的核蛋白為酸性物質(zhì)，故與堿性染料美蘭結(jié)合，染成深藍(lán)色或深紫紅色，呈嗜堿性。中性顆粒與美蘭和伊紅同時(shí)結(jié)合而染為淡紫紅色，呈嗜中性。染色原理：02.10.20224血紅蛋白、嗜酸性顆粒均為堿性物質(zhì)，故與03.10.20225器材光學(xué)顯微鏡推片，載玻片試劑Wright染液 Wright 1.0g 甲醇 600ml磷酸鹽緩沖液（PH6.46.8）香柏油標(biāo)本來(lái)源EDTA-K2抗凝全血 02.10.20225器材03.10.20226實(shí)驗(yàn)五白細(xì)

3、胞分類(lèi)計(jì)數(shù)1)推片：血膜厚薄適中，邊緣整齊，外觀呈舌形，頭、體、尾分明。2）干燥3）標(biāo)記 1.制備血涂片 02.10.20226實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)1)推片：血膜厚薄03.10.202272染色1）準(zhǔn)備：血膜干透后，用蠟筆在兩端劃線，以防止染色時(shí)染液外溢。將血涂片放染色架上。2）加染液：在涂片上滴加瑞氏染液數(shù)滴，以染液覆蓋整個(gè)血膜為度，稍靜置1min。3）加緩沖液：滴加緩沖液等量或多些，與上述染液充分混勻。4）染色：染色10min.5）沖洗：不要先倒掉染液，平持血涂片用流水緩緩沖洗干凈。6）干燥：直立血涂片，使其自然干燥。02.10.202272染色03.10.20228血涂片制作02.10.

4、20228血涂片制作03.10.20229良好血涂片外觀羽（子彈頭）狀尾部周邊有空白無(wú)劃痕羽狀尾部02.10.20229良好血涂片外觀羽03.10.202210不良血涂片02.10.20221003.10.2022112瑞氏染色操作02.10.2022112瑞氏染色操作03.10.2022123白細(xì)胞分類(lèi)： 先用低倍鏡選擇厚薄適宜，染色良好，細(xì)胞分布均勻的體尾交界處，滴加香柏油一滴，油鏡下分類(lèi)計(jì)數(shù)。分類(lèi)時(shí)要有秩序的連續(xù)進(jìn)行，避免主觀選擇視野。通常分類(lèi)計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算并報(bào)告各種白細(xì)胞所占比例。 低倍鏡下所見(jiàn)結(jié)果記錄方式：Ne 正 一 Ly 正Mo 正Eo 正Ba 正02.10.20221

5、23白細(xì)胞分類(lèi)：低倍鏡下所見(jiàn)結(jié)果記錄03.10.202213體尾交界處理想?yún)^(qū)域 細(xì)胞重疊 細(xì)胞太稀理想?yún)^(qū)域02.10.202213體尾交界處理想?yún)^(qū)域 細(xì)胞03.10.202214實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圓形，直徑1013m，胞漿染粉紅色，核形一葉（桿狀核）至五葉不等，以三葉者多見(jiàn)，染成深紫紅色，胞漿中有許多細(xì)小均勻紫紅色顆粒。02.10.202214實(shí)驗(yàn)五白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞（Ne03.10.202215嗜酸性粒細(xì)胞（Eo）：較中性粒細(xì)胞稍大，胞核多為兩葉，呈眼鏡、八字形，核染色質(zhì)粗糙染深紫紅色，胞漿內(nèi)充滿粗大均勻的嗜酸性顆粒，瑞氏染色時(shí)呈桔紅色，有折光

6、性。 02.10.202215嗜酸性粒細(xì)胞（Eo）：較中性粒細(xì)胞稍03.10.202216嗜堿性粒細(xì)胞（Ba）：胞漿中含有大小不等的嗜堿性顆粒，瑞氏染色時(shí)呈蘭黑色。于光學(xué)顯微鏡下常見(jiàn)胞漿中有小空泡，乃因嗜堿性顆粒易溶于水或因功能活動(dòng)而脫顆粒所致；核呈淡紫紅色?？床磺?，呈桿狀或分葉狀。 02.10.202216嗜堿性粒細(xì)胞（Ba）：胞漿中含有大小03.10.202217淋巴細(xì)胞（Ly）：胞體呈圓形，直徑介于615m之間，在成人血涂片中以小淋巴細(xì)胞為多見(jiàn)，直徑69m，核大呈深紫色致密而濃染，胞漿量極少；大淋巴細(xì)胞胞漿量較多，呈清澈的淡藍(lán)色，可見(jiàn)少量嗜苯胺藍(lán)顆粒，胞核圓或橢圓，常偏向細(xì)胞一側(cè)，染色較

7、深。 02.10.202217淋巴細(xì)胞（Ly）：胞體呈圓形，直徑介03.10.202218單核細(xì)胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上為1220m，胞體圓形、橢圓形或不規(guī)則形；核形多種多樣，最重要的特點(diǎn)是染色質(zhì)較細(xì)致疏松，呈絲網(wǎng)狀或條縷狀，著色較淡胞漿較多，淡蘭色，含大量細(xì)小塵土樣顆粒。02.10.202218單核細(xì)胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上為03.10.202219正常成人外周血白細(xì)胞分類(lèi)參考值：Ne 50%70%Ly 20%40%Mo 3%8%Eo 0.5%5%Ba 0%1%參考值02.10.202219正常成人外周血白細(xì)胞分類(lèi)參考值：參03.10.202220 1.血涂片制備要厚薄適宜、均勻、頭體尾分明，無(wú)溶血、無(wú)空洞。 2.很多因素影響涂片時(shí)血膜的厚度。血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快則血膜厚，反之則血膜薄。 3.按一定順序，有秩序地連續(xù)進(jìn)行，避免選擇視野。 4.分類(lèi)計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)同時(shí)報(bào)告RBC和WBC的形態(tài)是否有異常。退化細(xì)胞不計(jì)數(shù)。注意事項(xiàng)02.10.202220 1.血涂片制備要厚薄適宜、均勻、03.10.20