1、Q/LB.XXXXX-XXXX目次 TOC o 1-1 h t 標準文件_一級條標題,2,標準文件_附錄一級條標題,2, HYPERLINK l _Toc103017343 前言 PAGEREF _Toc103017343 h II HYPERLINK l _Toc103017344 1 范圍 PAGEREF _Toc103017344 h 1 HYPERLINK l _Toc103017345 2 規(guī)范性引用文件 PAGEREF _Toc103017345 h 1 HYPERLINK l _Toc103017346 3 術(shù)語和定義 PAGEREF _Toc103017346 h 1 HYPE

2、RLINK l _Toc103017347 3.1 大豆炭疽病 soybean anthracnose PAGEREF _Toc103017347 h 1 HYPERLINK l _Toc103017348 3.2 病情指數(shù) disease index PAGEREF _Toc103017348 h 1 HYPERLINK l _Toc103017349 4 鑒定試驗條件 PAGEREF _Toc103017349 h 1 HYPERLINK l _Toc103017350 4.1 接種體制備所需儀器設(shè)備及工具 PAGEREF _Toc103017350 h 1 HYPERLINK l _To

3、c103017351 4.2 鑒定圃 PAGEREF _Toc103017351 h 1 HYPERLINK l _Toc103017352 5 接種體制備 PAGEREF _Toc103017352 h 2 HYPERLINK l _Toc103017353 5.1 病原菌選擇與培養(yǎng) PAGEREF _Toc103017353 h 2 HYPERLINK l _Toc103017354 5.2 接種體制備 PAGEREF _Toc103017354 h 2 HYPERLINK l _Toc103017355 6 鑒定程序 PAGEREF _Toc103017355 h 2 HYPERLINK

4、 l _Toc103017356 6.1 供試品種種植 PAGEREF _Toc103017356 h 2 HYPERLINK l _Toc103017357 6.2 接種方法 PAGEREF _Toc103017357 h 2 HYPERLINK l _Toc103017358 6.3 鑒定圃田間管理 PAGEREF _Toc103017358 h 3 HYPERLINK l _Toc103017359 6.4 病情調(diào)查記載 PAGEREF _Toc103017359 h 3 HYPERLINK l _Toc103017360 6.5 結(jié)果計算 PAGEREF _Toc103017360 h

5、 3 HYPERLINK l _Toc103017361 6.6 抗性評價標準 PAGEREF _Toc103017361 h 3 HYPERLINK l _Toc103017362 附錄A（規(guī)范性） 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）制備 PAGEREF _Toc103017362 h 5 HYPERLINK l _Toc103017363 附錄B（資料性） 大豆炭疽病基本信息 PAGEREF _Toc103017363 h 6 HYPERLINK l _Toc103017364 附錄C（規(guī)范性） 大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表 PAGEREF _Toc103017364 h 7 HYP

6、ERLINK l _Toc103017365 附錄D（規(guī)范性） 大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報告表 PAGEREF _Toc103017365 h 8前言本文件按照GB/T 1.12020標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。本文件由四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物育種栽培研究所、四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳植物保護站。本文件主要起草人：何煉、曾華蘭、葉鵬盛、尹勇、劉勇、蔣秋平、張梅、華麗霞、孫小芳、韋樹谷、代順冬、賴佳、黃玲、盛玉珍、張騫方。大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了大豆炭疽病接種體制備、接種方法及抗性評價標準。本文件適用于

7、大豆品種炭疽病抗性評價。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 5084 農(nóng)田灌溉水質(zhì)標準GB/T 8321.3 農(nóng)藥合理使用準則（三）GB/T 8321.4 農(nóng)藥合理使用準則（四）GB/T 8321.6 農(nóng)藥合理使用準則（六）NY/T 1276 農(nóng)藥安全使用規(guī)范 總則術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。大豆炭疽病 soybean anthracnose大豆炭疽病是由炭疽菌引起的病害，主要發(fā)生在大豆結(jié)莢以后，尤其是鼓粒期的大豆。發(fā)

8、病初期，病斑呈水漬狀細小斑點，在高溫高濕環(huán)境下，迅速擴大為黃褐色或紅銹色不規(guī)則形病斑，嚴重影響豆莢的商品性。發(fā)病重時，鼓粒初期的豆莢即迅速枯死。病情指數(shù) disease index衡量發(fā)病率與嚴重度的綜合指標。用各病級數(shù)值與對應(yīng)病級的病莢數(shù)乘積的總和與全部調(diào)查豆莢的理論最高總病級數(shù)總和的比較相對數(shù)表示，記作DI。供試品種的病情指數(shù)均值為各重復(fù)病情指數(shù)的平均數(shù)，記作ADI。鑒定試驗條件接種體制備所需儀器設(shè)備及工具光學(xué)顯微鏡、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、移液器、血球計數(shù)板、培養(yǎng)皿、量筒、挑針、涂布棒、酒精燈、鑷子、廣口瓶、紗布等。鑒定圃立地條件鑒定圃應(yīng)地勢平整、形狀規(guī)正、肥力均勻、排

9、灌方便、不受蔭蔽，并具備人工保濕條件。面積根據(jù)供試品種數(shù)量確定鑒定圃面積。每個供試品種不少于5m2。接種體制備病原菌選擇與培養(yǎng)病原菌選擇采集四川省生產(chǎn)上大豆炭疽病的典型病樣，在馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）平板上分離純化后作為鑒定用病原菌。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）見附錄A。病原菌培養(yǎng)將保存的病原菌轉(zhuǎn)接到PDA平板上，置于2528下恒溫培養(yǎng)6d，在超凈工作臺上用涂布棒將菌絲涂斷以促進產(chǎn)孢，用封口膜封口，置于26下恒溫培養(yǎng)3d。接種體制備在培養(yǎng)好的大豆炭疽菌平板中加入適量0.05%吐溫-80溶液，用涂布棒刮下大豆炭疽病菌分生孢子，菌懸液經(jīng)四層脫脂紗布濾除菌絲，收集濾液，用血球計數(shù)板檢測濾液中孢

10、子濃度，添加適量0.05%吐溫-80溶液，配制成1106個mL-1的孢子懸浮液，按20g/L添加酵母粉并充分攪拌使其溶解，作為抗性鑒定接種體。接種體應(yīng)即配即用。鑒定程序供試品種種植根據(jù)供試品種生育期調(diào)整播期，使各品種同一時期進入始莢期。根據(jù)供試品種株型，按照行距6080cm、穴距3035cm播種，每穴播種34粒、定苗2株，每品種每重復(fù)至少保苗20株。各品種隨機排列，重復(fù)3次。設(shè)置感病品種臺灣75為感病對照。接種方法接種時間大豆始莢期進行第一次接種，7d后進行第二次接種。接種部位大豆莢。接種量及接種方法每次按每株20mL接種體對豆莢表面均勻噴霧進行接種，接種后保濕48h。鑒定圃田間管理肥水管理按

11、常規(guī)施肥水平施用化肥和腐熟有機肥。如遇干旱，應(yīng)及時灌溉。灌溉水應(yīng)符合GB 5084的規(guī)定。病蟲草害管理及時中耕、除草、防治蟲害，供試品種全生育期不使用殺菌劑和除草劑。使用農(nóng)藥防治蟲害時，應(yīng)符合GB/T 8321.3、GB/T 8321.4、GB/T 8321.6和NY/T 1276的規(guī)定。病情調(diào)查記載第二次接種后，逐日監(jiān)測感病對照發(fā)病情況，當(dāng)感病對照的病情指數(shù)達到50時，每小區(qū)摘取不少于10株的全部結(jié)實豆莢，豆莢總數(shù)不少于300個，逐莢調(diào)查發(fā)病情況。病情分級標準見表1，病情調(diào)查記載表見附錄C。大豆炭疽病病情分級標準病情級別癥狀0豆莢無病斑1病斑面積占整個豆莢面積的5%以下3病斑面積占整個豆莢面

12、積的6%10%5病斑面積占整個豆莢面積的11%25%7病斑面積占整個豆莢面積的26%50%9病斑面積占整個豆莢面積的50%以上結(jié)果計算病情指數(shù)病情指數(shù)按公式（1）計算。DI=(dc式中：DI病情指數(shù)dc病情級別數(shù)值nc各病級豆莢數(shù)nt調(diào)查總豆莢數(shù)抗性評價標準根據(jù)供試品種的病情指數(shù)均值評價各品種的抗性級別，抗性級別劃分標準見表2，大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報告表見附錄D。大豆品種炭疽病抗性級別劃分標準病情指數(shù)均值（ADI）抗性類型ADI5.00高抗（HR）5.00ADI10.00抗?。≧）10.00ADI20.00中抗（MR）20.00ADI40.00中感（MS）40.00ADI60.00感病（

13、S）ADI60.00高感（HS）（規(guī)范性）馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）制備將200g去皮馬鈴薯切成小塊，加水1L煮沸并維持20min,用四層紗布過濾，濾液中趁熱加入20g葡萄糖、20g瓊脂，玻棒攪拌并加水定容至1L，121下蒸汽滅菌30min。冷卻至60左右，每100mL培養(yǎng)基加入100g/mL的硫酸鏈霉素100L，混勻后倒平板。（資料性）大豆炭疽病基本信息大豆炭疽病是由炭疽菌引起的病害，主要發(fā)生在大豆結(jié)莢以后，尤其是鼓粒期的大豆。發(fā)病初期，病斑呈水漬狀細小斑點，在高溫高濕環(huán)境下，迅速擴大為黃褐色或紅銹色不規(guī)則形病斑，嚴重影響豆莢的商品性。發(fā)病重時，鼓粒初期的豆莢即迅速枯死。品種抗性、病原

14、物致病力、溫濕度和降雨均能影響大豆炭疽病的發(fā)生流行。2530有利于病原菌菌絲生長和產(chǎn)孢。風(fēng)雨有利于分生孢子的傳播蔓延，同時，雨滴也有利于分生孢子的萌發(fā)和附著胞的形成。夏秋季節(jié)大豆鼓粒期如遇陰雨連綿或晴雨相間天氣，種植感病品種的田塊易出現(xiàn)大豆炭疽病的爆發(fā)流行，嚴重時豆莢染病率超過50%。（規(guī)范性）大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表編號品種名稱重復(fù)各病級莢數(shù)（個）病情指數(shù)0級1級3級5級7級9級123調(diào)查人：記載人：調(diào)查時間：（規(guī)范性）大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報告表大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報告表編號品種名稱病情指數(shù)均值抗性類型123感病對照大豆品種抗炭疽病

15、性鑒定技術(shù)規(guī)程編制說明一、工作簡況1.任務(wù)來源根據(jù)四川省市場監(jiān)督管理局關(guān)于下達2020年度地方標準制修訂項目立項計劃（第四批）的通知（川市監(jiān)函2020560號），由四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物育種栽培研究所與四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳植保站共同負責(zé)立項計劃匯總表中第36項大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)規(guī)程的起草。本項目起草人： 何煉、曾華蘭、葉鵬盛、尹勇、劉勇、蔣秋平、張梅、華麗霞、孫小芳、韋樹谷、代順冬、賴佳、黃玲、盛玉珍、張騫方，聯(lián)系電話大豆是四川的主要作物，由平頭炭疽菌引起的大豆豆莢炭疽病是造成大豆減產(chǎn)、品質(zhì)下降的主要病害，選育推廣抗病品種是防治該病最經(jīng)濟有效的方法。而品種的抗病

16、性評價，是篩選抗源和對育成品種的抗病性進行把關(guān)的不可缺少的手段。盡管國內(nèi)已有一些科研單位開展了大豆抗炭疽病性鑒定方面的研究，但尚無相應(yīng)的國家標準，且各單位采用的抗性鑒定方法也不相同。不同地區(qū)的大豆品種抗性存在顯著差異，且由于菌株、氣候等因素的差異，同一品種在不同地區(qū)的抗性表現(xiàn)也有所不同。因此，有必要制定大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)規(guī)程，規(guī)范我省大豆品種抗炭疽病性鑒定工作，推動我省大豆抗病品種選育和大豆生產(chǎn)發(fā)展。2.編制單位四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物育種栽培研究所、四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳植保站。3.主要工作過程3.1調(diào)查研究從2015年起，團隊在金堂、仁壽、西充、自貢等大豆主產(chǎn)區(qū)對大豆炭疽病發(fā)生情況開展調(diào)

17、查，研究了病害發(fā)生流行規(guī)律；并采集病樣進行了病原菌分離純化鑒定、培養(yǎng)擴繁、接種鑒定、評價大豆品種抗性等研究。經(jīng)過反復(fù)試驗，研究明確了菌種制備、接種方法、接菌量、鑒定條件、調(diào)查分級方法和抗性等級劃分標準等，形成了一套大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)。3.2標準起草自2020年接受四川省市場監(jiān)督管理局下達的“大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)規(guī)程”制定任務(wù)后，標準編制組通過網(wǎng)絡(luò)、文獻檢索等手段廣泛收集信息、資料，開展調(diào)查研究，結(jié)合大豆品種抗炭疽病性鑒定技術(shù)的研究成果和生產(chǎn)實踐，經(jīng)過多次內(nèi)部討論后，初步明確了標準制訂的框架，并按照GB/T 1.12020標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定編

18、寫了本地方標準的工作組討論稿。二、標準編制原則和確定標準主要技術(shù)內(nèi)容的論據(jù)1.主要參考資料GB 5084 農(nóng)田灌溉水質(zhì)標準GB/T 8321 農(nóng)藥合理使用準則NY/T 1276 農(nóng)藥安全使用規(guī)范 總則2.標準的主要內(nèi)容2.1范圍本標準規(guī)定了大豆炭疽病接種體制備、接種方法及抗性評價標準。本標準適用于大豆品種抗炭疽病性評價。2.2規(guī)范性引用文件本規(guī)范所引用的國家、行業(yè)有關(guān)規(guī)范、規(guī)程均為現(xiàn)行且有效的，條文中給出編號，以便于使用時查找。2.3術(shù)語和定義該部分的術(shù)語和定義，“3.1 大豆炭疽病”主要參考孫志峰等1研究，并根據(jù)本團隊的調(diào)查研究結(jié)果進行定義，“3.2 病情指數(shù)”主要參考2016年1月科學(xué)出版

19、社出版的植物病理學(xué)中關(guān)于病情指數(shù)的定義，即病情指數(shù)用各病級數(shù)值與對應(yīng)病級的病莢數(shù)乘積的總和與全部調(diào)查豆莢的理論最高總病級數(shù)總和的比較相對數(shù)表示。2.4鑒定試驗條件2.4.1接種體制備所需儀器設(shè)備及工具依據(jù)病原真菌分離培養(yǎng)檢測需求和標準編制組工作實踐，明確了接種體制備所需儀器設(shè)備及工具為光學(xué)顯微鏡、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、移液器、血球計數(shù)板、培養(yǎng)皿、量筒、挑針、涂布棒、酒精燈、鑷子、廣口瓶、紗布等。2.4.2鑒定圃根據(jù)農(nóng)作物田間試驗設(shè)計基本原則和病害發(fā)生流行規(guī)律，規(guī)定了鑒定圃的立地條件和面積。2.5接種體制備2.5.1病原菌選擇與培養(yǎng)根據(jù)標準編制組研究成果，結(jié)合病原真菌生物學(xué)特

20、性和四川大豆產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)實際，確定了病原菌選擇和病原菌培養(yǎng)方法，并在附錄中給出了PDA培養(yǎng)基制備方法。2.5.2 接種體制備根據(jù)標準編制組研究成果，結(jié)合四川大豆炭疽病病害發(fā)生流行規(guī)律及病原菌生物學(xué)特性，確定了接種體制備方法。2.6鑒定程序2.6.1供試品種種植根據(jù)標準編制工作組試驗研究及承擔(dān)四川省和重慶市區(qū)試大豆抗病性鑒定工作實踐，確定了供試品種種植的行距、穴距、每穴播種量和感病對照品種。2.6.2接種方法根據(jù)大豆炭疽病病害發(fā)生流行規(guī)律和標準編制工作組對大豆品種抗炭疽病性鑒定方法研究的結(jié)果，確定了接種時間、接種部位、接種量及接種方法。2.6.3鑒定圃田間管理根據(jù)GB 5084、GB/T 8321和

21、NY/T 1276的規(guī)定，結(jié)合標準編制組研究結(jié)果，對肥水管理和病蟲草害管理做了規(guī)定。2.6.4病情調(diào)查記載根據(jù)標準編制組研究結(jié)果，對病情調(diào)查記載方法做了規(guī)定，并在附錄中給出了大豆品種抗炭疽病性鑒定病情調(diào)查記載表。2.6.5結(jié)果計算根據(jù)病情指數(shù)的定義，結(jié)合標準編制組研究結(jié)果，規(guī)定了病情指數(shù)的計算方法和大豆品種抗炭疽病性評價標準，并在附錄中給出了大豆品種抗炭疽病性鑒定結(jié)果報告表。三、主要試驗分析報告、技術(shù)經(jīng)濟論證和預(yù)期經(jīng)濟效果1.試驗分析報告1.1接種體制備方法的確立本研究團隊采集了四川大豆主產(chǎn)區(qū)的大豆炭疽病典型病樣，經(jīng)分離純化鑒定及回接致病力檢測后作為抗性鑒定用病原菌。分生孢子是大豆炭疽菌無性繁

22、殖的基本單位，與使用菌絲段液接種相比，使用分生孢子懸浮液進行噴霧接種具有不易堵塞噴頭、易于計量的優(yōu)點。因此，獲得足夠多的分生孢子是開展大豆品種抗炭疽病性鑒定的基礎(chǔ)。孫志峰等1研究認為，大豆炭疽菌菌株XST01在PDA培養(yǎng)基上25培養(yǎng)7d，可產(chǎn)生1.0108cfu/皿以上孢子量。趙勝等2用分離自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所陽邏實驗基地大豆病莢的平頭炭疽菌開展研究，結(jié)果表明，在9g/L蔗糖濃度的燕麥培養(yǎng)基上，7d即可產(chǎn)生2.0109cfu/皿以上孢子量。本研究團隊采用分離自四川大豆主產(chǎn)區(qū)大豆炭疽病典型病樣的炭疽菌菌株SCCT01、SCCT02進行相關(guān)研究表明，兩個菌株在PDA和燕麥培養(yǎng)基上26培養(yǎng)

23、6d，均只能產(chǎn)生1.0105cfu/皿的孢子，培養(yǎng)至10d，孢子量僅能達到1.0106cfu/皿，無法滿足品種抗病性鑒定試驗需求。郭春秋3、黃軍凱4等研究表明，一部分真菌通過預(yù)培養(yǎng)、掃刷營養(yǎng)體造成菌絲受傷，能夠控制營養(yǎng)生長，促進產(chǎn)孢。據(jù)此，本研究團隊將炭疽菌菌株SCCT01、SCCT02接種到PDA上，26預(yù)培養(yǎng)6d，用涂布棒將菌絲涂斷后，26培養(yǎng)3d，加入適量0.05%吐溫-80溶液洗下分生孢子，用血球計數(shù)板檢測孢子含量，結(jié)果表明，孢子量可達1.0108cfu/皿以上，能夠更好地滿足品種抗病性鑒定試驗需求。接種孢子懸浮液后，創(chuàng)造有利于孢子萌發(fā)的環(huán)境條件，是開展品種抗病性鑒定的關(guān)鍵。孫志峰等1

24、研究表明，大豆炭疽菌分生孢子對相對濕度和營養(yǎng)的要求較高，在RH為97%以上時才能萌發(fā)，但在無菌水中不能萌發(fā)，在2%葡萄糖溶液中6h萌發(fā)率為60.5%62.9%，在2%酵母粉溶液中6h萌發(fā)率為100%。因此，本團隊在制備接種體時，在孢子懸浮液中添加了2%酵母粉，用以促進孢子萌發(fā)。1.2鑒定程序的確立1.2.1供試品種種植密度和感病對照品種的確立確立種植密度：團隊在開展大豆炭疽病抗性鑒定方法研究的過程中發(fā)現(xiàn)，如果按照生產(chǎn)上習(xí)慣的4050cm行距進行播種，行距過窄不利于接種和調(diào)查操作。因此，將行距設(shè)置為6080cm。確立感病對照品種：我國對于嚴重影響豆莢商品性和經(jīng)濟價值的炭疽病的重視，始于本世紀初鮮

25、食大豆品種臺灣75“銹斑病”的爆發(fā)。陳吳健5等報道，2004年，杭州市蕭山區(qū)種植臺灣75的一般田塊病株率約為50%，病莢率約為30%，重病田塊病株率90%以上，病莢率50%以上。本團隊采用1106個mL-1的孢子懸浮液接種臺灣75、交大133、遼鮮3號、春豐早等品種開展感病對照品種篩選，并參照DB35/T 1574-2016病情分級標準6（表1）調(diào)查大豆炭疽病發(fā)生情況，計算病情指數(shù)，參考DB35/T 1574-2016品種抗性評價標準（表2）評價品種抗性型，結(jié)果見表3。試驗結(jié)果表明，臺灣75表現(xiàn)為感病，且年度間發(fā)病較穩(wěn)定。因此，將臺灣75設(shè)置為感病對照品種。表1 大豆炭疽病病情分級標準病情級別

26、癥狀0豆莢無病斑1病斑面積占整個豆莢面積的5%以下3病斑面積占整個豆莢面積的6%10%5病斑面積占整個豆莢面積的11%25%7病斑面積占整個豆莢面積的26%50%9病斑面積占整個豆莢面積的50%以上表2 大豆品種抗炭疽病評價標準病情指數(shù)（DI）抗性評價DI=0高抗（HR）0DI10.00抗病（R）10.00DI20.00中抗（MR）20.00DI40.00中感（MS）40.00DI60.00感?。⊿）DI60.00高感（HS）表3 大豆抗炭疽病性鑒定感病對照品種篩選結(jié)果年度品種名稱病莢率/%病情指數(shù)抗性型2019年臺灣75100.0052.99感交大13374.6729.93中感遼鮮3號79.

27、3327.48中感春豐早95.4335.99中感2020年臺灣7596.0054.27感交大13371.3331.48中感遼鮮3號81.1129.90中感春豐早86.8936.12中感1.2.2接種方法確立接種部位：根據(jù)大豆炭疽病病害發(fā)生流行特點，確定了接種部位為大豆莢。確立接種濃度、接種時間和接種量：在接種預(yù)試中，本團隊發(fā)現(xiàn)，采用背負式電動噴霧器進行噴霧接種時，如果參照DB35/T 1574-2016中的規(guī)定，每株植株噴10mL孢子懸浮液，難于均勻覆蓋全部豆莢，采用手持式電動噴壺進行噴霧接種雖然能夠完全覆蓋全部豆莢，但接種所需花費的時間過多，接種效率過低。將接種量提高到每株20mL孢子懸浮液

28、后，采用背負式電動噴霧器進行噴霧接種，既能保證接種體均勻覆蓋全部豆莢，又能提高接種效率。參照DB35/T 1574-2016中的接種方法，分別采用1104個mL-1、1105個mL-1、1106個mL-1的孢子懸浮液對臺灣75、交大133、春豐早等品種進行接種，比較大豆始莢期接種一次，7d后進行第二次接種的方法與大豆始莢期接種一次的方法對參試品種炭疽病發(fā)病的影響，結(jié)果見表4。試驗結(jié)果表明，采用1106個mL-1的孢子懸浮液于大豆始莢期接種一次，7d后進行第二次接種的方法，有利于參試品種的充分發(fā)病。表4 不同接種濃度、接種次數(shù)、對大豆品種炭疽病發(fā)病的影響接種濃度接種次數(shù)品種名稱病莢率/%病情指數(shù)抗性型1104個mL-1接種1次臺灣7583.3325.06中感交大13354.228.05抗春豐早64.899.98抗接種2次臺灣7596.6739.68中感交大13369.3316.89中抗春豐早59.3316.77中抗1105個mL-1接種1次臺灣7582.4429.21中感交大13356.0013.83中抗春豐早61.1113.16中抗接種2次臺灣7595.7845.56感交大13376.4420.20中感春豐早84.6720.86中感1106個mL-1接種1次臺灣7584.4430.77中感交大13354.8915.0