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文檔簡介
1、支原體 Mycoplasma1編輯版ppt支原體 概述定義缺乏細胞壁形態(tài)上呈高度多形性能通過除菌濾器在無生命培養(yǎng)基中能生長繁殖最小的原核細胞型微生物能形成有分支的長絲,故稱支原體 2編輯版ppt概述定義2編輯版ppt柔膜體綱支原體目肺炎支原體,人型支原體,生殖支原體,穿透支原體,發(fā)酵支原體,梨支原體脲脲原體支原體分類支原體科無膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬3編輯版ppt柔膜體綱支原體目肺炎支原體,人型支原體,生殖支原體,穿透支原一、生物學性狀(一)形態(tài) 0.30.5 m 無細胞壁 高度多形性:球、桿、絲狀和分枝狀等 一般Giemsa染色較好,染為淡紫色 4編輯版ppt一、生物學性狀(一)形
2、態(tài)4編輯版ppt支原體集落5編輯版ppt支原體集落5編輯版ppt(二)結構 內外兩層為蛋白質及糖類,中層為脂類(磷脂為主),凡作用于膽固醇的物質,如皂素、二性霉素B等均能破壞細胞膜致其死亡。 特殊的頂端結構: 粘附宿主上皮 細胞表面,與支原 體的致病有關。6編輯版ppt(二)結構6編輯版ppt(三)培養(yǎng)特性 營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基: 10%20%人或動物血清以提供膽固醇與其 它長鏈脂肪酸,多數(shù)還需添加酵母浸液、組 織浸液、核酸提取物和輔酶。 pH:適宜7.68.0(7.0易死亡),但解脲脲 原體最適pH5.56.5 兼性厭氧: 大多寄生性支原體在37時在微氧環(huán)境(含 5%CO2和90%N2)中生長最
3、佳。 繁殖方式多樣:二分裂繁殖外,還有分節(jié)、斷裂、 出芽或分枝等方式7編輯版ppt(三)培養(yǎng)特性7編輯版ppt固體培養(yǎng)基: 27天長出直徑約10600 m的典型的“荷包蛋樣”菌落:低倍鏡下見菌落呈圓形,心致密隆起,深入瓊脂,外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基: 清亮,用顏色變化單位(CCU)表示。需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察8編輯版ppt固體培養(yǎng)基:需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察8編輯版ppt支原體典型菌落9編輯版ppt支原體典型菌落9編輯版ppt支原體與細菌L型的異同點 不同點 相同點 鑒別點 支原體 細菌L型細胞壁缺失原因 在遺傳上與細菌無關 與原菌相關,可以回復細胞膜 含高濃度固醇 細胞膜不含固醇 培
4、養(yǎng)特性 需要膽固醇 大多需要高滲培養(yǎng) 菌落大小 生長慢,菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液體培養(yǎng) 液體培養(yǎng)混濁度極低 有一定混濁度,可附壁缺乏細胞壁,形態(tài)多樣,能通過濾菌器。固體培養(yǎng)菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似間質性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等 相同點10編輯版ppt支原體與細菌L型的異同點 不同點 相同點 鑒別點 支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附細胞 致病性 肺炎支原體 + 紅細胞 肺炎、支氣管炎人型支原體 + 泌尿生殖道感染生殖器支原體 + 泌尿生殖道感染穿透支原體 + + 紅細胞 條件感染 CD4+T細胞 多見于艾滋病 巨噬細胞 溶脲脲原體 + 泌尿生殖道感染 流產及不孕
5、不育 生化反應11編輯版ppt 支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 (四)抗原結構 補體結合試驗可檢測糖脂類抗原 ELISA試驗可檢測蛋白質類抗原 血清抗體可用生長抑制試驗(growth inhibition test, GIT)和代謝抑制試驗 (metabolic inhibition test, MIT)以 鑒定12編輯版ppt(四)抗原結構12編輯版ppt GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種有支原體的固體培養(yǎng)基上, 經孵育出現(xiàn)同型血清抑制該型支原體生長現(xiàn) 象 MIT是將支原體接種在含有抗血清培養(yǎng) 基中,若抗體與支原體型一致,則抑制該支原體不能分解葡萄糖產酸。此兩種方法可將支原體分成若
6、干血清型。13編輯版ppt GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種(五)抵抗力 對化學消毒劑敏感,對結晶紫、 醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力; 對影響細胞壁合成的抗生素如青 霉素類天然耐受,但對干擾蛋白 質合成的抗生素如強力霉素、交 沙霉素等敏感。14編輯版ppt(五)抵抗力14編輯版ppt二、致病性與免疫性(一)致病機制莢膜或微莢膜:抗吞噬作用毒性代謝產物:神經毒素、磷脂酶C、核酸酶、過氧化氫和超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細胞或紅細胞的病理損傷超抗原:免疫調節(jié)其它:如穿透支原體粘附侵入CD4 T細胞引起損傷粘附素:粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細胞15編輯版ppt二、致病性與免疫性(一)致病機
7、制15編輯版ppt(二)所致疾病存在廣泛,多不致病肺炎支原體引起原發(fā)性非典型性肺炎溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原體可引起泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥穿透支原體和發(fā)酵支原體為艾滋病的輔助致病因素二、致病性與免疫性16編輯版ppt(二)所致疾病二、致病性與免疫性16編輯版ppt(三)免疫性 體液免疫:抗膜蛋白的抗體包括 IgM、IgG和SIgA 細胞免疫:主要是特異性CD4Th1 細胞分泌細胞因子 二、致病性與免疫性17編輯版ppt(三)免疫性二、致病性與免疫性17編輯版ppt肺炎支原體溶脲脲原體主要病原性支原體18編輯版ppt肺炎支原體溶脲脲原體主要病原性支原體18編輯版ppt0.20.3m,高度
8、多形性,如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀;初次分離應在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中,一般10天左右長出菌落;多次傳代后生長加快,菌落呈“油煎蛋”狀;能發(fā)酵葡萄糖,不能利用精氨酸與尿素;對美藍、醋酸鉈、青霉素不敏感。肺炎支原體一、生物學性狀19編輯版ppt0.20.3m,高度多形性,如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀20編輯版ppt20編輯版ppt(一)致病性 1.主要經飛沫傳播,但大多數(shù)發(fā)生于夏 末秋初,515歲青少年發(fā)病率最高。 2.含特殊的頂端結構:P1表面蛋白(170 kDa)和P30(32 kDa)為主要的粘附蛋白,使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原體具有超抗原作用,能刺激炎
9、癥細胞在感染部位釋放大量的淋巴因子(如TNF-、IL-1、IL-6)引起組織損傷。二、致病性與免疫性21編輯版ppt(一)致病性二、致病性與免疫性21編輯版ppt(二)所致疾病 原發(fā)性非典型性肺炎(primary atypical pneumonia),臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主,有時并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經系統(tǒng)癥狀。二、致病性與免疫性22編輯版ppt(二)所致疾病二、致病性與免疫性22編輯版ppt(三)免疫性 血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細胞; 呼吸道局部黏膜產生的SIgA對防止再感染有較強保護作用; 出現(xiàn)IgE介導的I型超敏反應,促使哮喘病急性發(fā)作
10、 23編輯版ppt(三)免疫性23編輯版ppt(一)分離培養(yǎng) 痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基(四碘化鉑),挑選可疑菌落,經形態(tài)學、糖發(fā)酵、溶血性、血細胞吸附試驗進行初步鑒定,進一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實驗。三、微生物學檢查法24編輯版ppt(一)分離培養(yǎng)三、微生物學檢查法24編輯版ppt(二)血清學檢查 冷凝集試驗: 即用病人血清與人O型血紅細胞或自身紅細胞混合,4過夜時可發(fā)生凝集,而在37時這種凝集又分散解離開,但僅50左右的患者才出現(xiàn)陽性。此反應為非特異性。 快速診斷 ELISA:檢測P1和P30蛋白mAbs PCR:從痰標本中檢測16S rRNA或 P1蛋白基因三、微生物
11、學檢查法25編輯版ppt(二)血清學檢查三、微生物學檢查法25編輯版ppt防治原則 大環(huán)內酯類藥物 喹諾酮類藥物四、防治原則26編輯版ppt防治原則四、防治原則26編輯版ppt解(溶)脲脲原體形態(tài):0.50.3 m,單個或成雙排列固體培養(yǎng):48 h后長出直徑1530 m “油煎蛋”狀菌落。 最適pH為5.56.5。生化反應:分解尿素,不分解糖類和精氨酸抵抗力:對1:2000醋酸鉈不敏感抗原:MB抗原是其主要膜抗原,將解脲脲原 體分為A、B兩大群,14個血清型一、生物學性狀27編輯版ppt解(溶)脲脲原體形態(tài):0.50.3 m,單個或成雙排列一28編輯版ppt28編輯版ppt(一)致病機制 -粘
12、附于宿主細胞表面,引起細胞膜損傷; -產生毒性代謝產物如NH3,對宿主細胞有 急性毒性作用; -磷脂酶損傷宿主的細胞膜。二、致病性與免疫性29編輯版ppt(一)致病機制二、致病性與免疫性29編輯版ppt (二)所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病,還與自然流產、早產、死胎和男性不孕有關。二、致病性與免疫性30編輯版ppt (二)所致疾病二、致病性與免疫性30編輯版ppt 病原體檢測 接種液體培養(yǎng)基,分解尿素產堿,酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色;再取0.2 ml培養(yǎng)物轉種于固體培養(yǎng)基,在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經37培養(yǎng)2448 h,用低倍鏡觀察菌落,進一步鑒定需用特異抗
13、血清做GIT與MIT。三、微生物學檢查法31編輯版ppt 病原體檢測 三、微生物學檢查法31編輯版ppt核酸檢測 PCR檢測: 檢測尿素酶基因、多帶抗原(MB-Ag)基因和16S rRNA基因。此法快速、特異,適宜于大批量標本檢測。三、微生物學檢查法32編輯版ppt核酸檢測 三、微生物學檢查法32編輯版ppt加強宣傳教育,注意性衛(wèi)生,切斷傳播途徑。四環(huán)素類、喹諾酮類藥物治療,但有耐藥株產生。四、防治原則33編輯版ppt加強宣傳教育,注意性衛(wèi)生,切斷傳播途徑。四、防治原則33編輯人型支原體-分解精氨酸,不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.27.4。固體培養(yǎng)基上形成200300 m的較大菌落,呈典型的
14、“油煎蛋”狀。-寄居于泌尿生殖道,通過性接觸傳播,可引起附睪炎、盆腔炎、產褥熱等。-微生物學檢測和防治原則同解脲脲原體。34編輯版ppt人型支原體-分解精氨酸,不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.2塞麥爾維斯 產褥熱35編輯版ppt塞麥爾維斯 產褥熱35編輯版ppt細胞膜由蛋白質和脂質(固醇)組成三層結構36編輯版ppt細胞膜由蛋白質和脂質(固醇)組成三層結構36編輯版ppt37編輯版ppt37編輯版ppt生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀,能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基變酸,不分解尿素和精氨酸。-培養(yǎng)基上不生長,須在無醋酸鉈SP-4培養(yǎng)基生長但緩慢,菌落呈典型的“油煎蛋”狀。-能粘附在人泌尿生殖道上皮,主要引起尿道炎。-較難培養(yǎng),生長慢,不適宜于常規(guī)實驗室分離培養(yǎng)。38編輯版ppt生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀,能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基穿透支原體 1991年Lo首次從1例艾滋病患者尿中分離出一種新支原體
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