16/16高中生物實(shí)驗(yàn)中的“重難點(diǎn)”詮釋技巧歸納！考高分不是夢~作者：一氣貫長空高中生物實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詮釋01生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定1、實(shí)驗(yàn)材料的選擇：（1）可溶性還原糖的鑒定：生物組織中的糖類有還原糖和非還原糖兩類。常見的還原糖有葡萄糖、果糖和麥芽糖；蔗糖（甘蔗莖、甜菜的塊根等）、淀粉（馬鈴薯、番薯的塊莖等）是非還原糖。在雙子葉植物中，光合作用的主要產(chǎn)物葡萄糖形成后，合成為淀粉暫時(shí)儲(chǔ)存在葉子內(nèi)，因此最好不用雙子葉的葉子作為實(shí)驗(yàn)的材料。有些單子葉植物，如韭菜，葉子內(nèi)雖然含有大量的可溶性還原糖，但由于葉片中葉綠素顏色較深，對于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著遮蓋作用，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯，一般也不選用。本實(shí)驗(yàn)最理想的實(shí)驗(yàn)材料是還原糖含量較高的植物組織，而且要求組織的顏色較淺或近于白色，如蘋果和犁的果實(shí)，也可以用白色的甘藍(lán)葉、白蘿卜替代。經(jīng)實(shí)驗(yàn)比較，顏色反應(yīng)的明顯程度依次為：蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉和白蘿卜。（2）脂肪的鑒定：所用材料要求一脂肪含量高，二有一定大小做徒手切片，花生種子符合本實(shí)驗(yàn)的要求。實(shí)驗(yàn)前要將花生種子浸泡3~4h，有利于切成薄片，但浸泡時(shí)間也不宜過長，否則組織太軟，切下的薄片不易成形。（3）蛋白質(zhì)的鑒定：適宜材料有豆?jié){、雞蛋清。若用雞蛋清，必須按要求稀釋，否則影響實(shí)驗(yàn)效果，而且實(shí)驗(yàn)后易粘住試管壁不易洗刷2、試劑的選用及注意事項(xiàng)：（1）可溶性還原糖鑒定過程中，因斐林試劑很不穩(wěn)定，故應(yīng)將組成試劑的兩種溶液分別配制，使用是再加以混合，即現(xiàn)配現(xiàn)用。切不要將甲液和乙液分別加入組織樣液中。實(shí)際上這個(gè)反應(yīng)利用的是斐林試劑中的氫氧化銅作為弱氧化劑參與還原糖的反應(yīng)，而氫氧化銅放置過久沉淀過多則不利于反應(yīng)。在水浴加熱時(shí)，試管底部不要觸及燒杯底，以防止試管受熱不均勻而爆裂；并注意試管口也不要朝向自己或他人，防止沸騰的溶液沖出試管造成燙傷。另外，加入的斐林試劑不要太多，反而會(huì)使實(shí)驗(yàn)效果不理想。（2）脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)鍵是能否切出符合要求的薄切片，太厚光線不能通過。（3）蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，使用雙縮脲試劑時(shí)，應(yīng)先加試劑A（NaOH），造成堿性環(huán)境后再加入試劑B（CuSO4）（注意和使用斐林試劑的區(qū)別）。另外試劑B不能太多，否則硫酸銅的藍(lán)色將遮蓋顏色反應(yīng)的真實(shí)效果。3、斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別：（1）溶液濃度不同（課本）（2）使用原理不同斐林試劑是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加熱的條件下與醛基反應(yīng)，被還原成磚紅色的Cu2O沉淀，可用于鑒定還原糖的存在，實(shí)驗(yàn)中溶液顏色的變化過程為：淺藍(lán)色棕色磚紅色鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí)，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是在堿性條件下，Cu2+與雙縮脲發(fā)生的紫色反應(yīng)。而蛋白質(zhì)分子中有很多與雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2）結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲發(fā)生顏色反應(yīng)，可以使用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。（3）使用方法不同：見課本，注意NaOH和CuSO4的使用先后順序。02用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)1、顯微鏡的結(jié)構(gòu)：2、使用時(shí)的注意事項(xiàng)：（1）顯微鏡的鏡頭有兩種：目鏡和物鏡。目鏡可從鏡筒上端開口處插入，目鏡長度與放大倍數(shù)成“反比“，即目鏡越長，放大倍數(shù)越?。荒跨R越短，放大倍數(shù)越大。而物鏡的上端有螺絲，可旋轉(zhuǎn)固定在鏡筒下端連接的轉(zhuǎn)換器的3個(gè)開口上，且物鏡長度與放大倍數(shù)成“正比”，即越長，放大倍數(shù)越大。焦距調(diào)好后鏡頭與蓋玻片的距離越遠(yuǎn)，物鏡越短，放大倍數(shù)越??；反之，放大倍數(shù)越大。顯微鏡的放大倍數(shù)為目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。在顯微鏡下所成物象為倒立放大的虛象。此外，由于低倍物鏡的通光量比高倍物鏡的通光量大，所以低倍鏡的視野較明亮；而高倍物鏡，雖然放大倍數(shù)大，實(shí)際觀察到的標(biāo)本區(qū)域小，視野教暗（2）視野中出現(xiàn)異物有三種情況：在物鏡上、目鏡上和裝片上。如移動(dòng)裝片異物不動(dòng)，說明不在裝片上；轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換上高倍鏡，仍可觀察到，說明不在物鏡上，可判斷異物在目鏡上。（3）低倍鏡觀察：將裝片放到載物臺上，使標(biāo)本正對通光中心，用壓片夾壓住裝片；雙眼注視物鏡，轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，下降鏡筒至距玻片2mm~3mm處（不要讓物鏡觸及玻片），左眼注視目鏡轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，上升鏡筒，當(dāng)看到物像時(shí)，調(diào)節(jié)洗準(zhǔn)焦螺旋，直到看清物象為止。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，當(dāng)由低倍鏡轉(zhuǎn)換成高倍鏡時(shí)，物象變大，視野范圍變小、變暗，因此，換高倍鏡之前，一定要把觀察的物象移到視野的中央，并且將反光鏡的平面鏡換成凹面鏡，同時(shí)擴(kuò)大光圈。（4）使用顯微鏡的程序：取鏡安放對光壓片觀察（5）下降鏡筒時(shí)，一定要側(cè)目注視物鏡，防止鏡頭觸及玻片而壓碎玻片或損壞透鏡（6）有必要使用高倍鏡時(shí)，必須先在低倍鏡下將目標(biāo)移到視野中心，然后轉(zhuǎn)換成高倍鏡。因?yàn)榈捅剁R下看到的物像放大倍數(shù)小，但看襖的標(biāo)本范圍大，容易找到目標(biāo)，而高倍鏡看到的只是低倍鏡視野的中心部分（7）使用高倍鏡后必須使用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦，而不能用粗準(zhǔn)焦螺旋。3細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的觀察：由于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)是透明的，顯微鏡下不容易觀察到細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的現(xiàn)象，所以要找到大型細(xì)胞器作為參照物來觀察。葉肉細(xì)胞中的葉綠體可作為參照物，通過觀察葉綠體位置的變化，可證明細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，同時(shí)還可以進(jìn)一步觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速度和流動(dòng)方向。細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的速度跟細(xì)胞新陳代謝的旺盛程度成正比。03觀察植物細(xì)胞的有絲分裂1、選材：應(yīng)選取有絲分裂旺盛的細(xì)胞，如植物根尖分生區(qū)的細(xì)胞2、解離就是用要藥液使組織的細(xì)胞相互分離開來，便于最后制片時(shí)能被壓成一薄層進(jìn)行顯微觀察。解離液中酒精的作用是迅速殺死細(xì)胞，固定細(xì)胞的分裂相；而鹽酸的作用是使洋蔥細(xì)胞的細(xì)胞壁軟化，并使細(xì)胞間的中膠層物質(zhì)溶解，從而達(dá)到分離細(xì)胞的目的。另外解離時(shí)間不宜過短，否則根尖未充分解離，壓片時(shí)細(xì)胞分不開；但又不能太長，否則使根尖過分酥軟，無法進(jìn)行漂洗和染色，且染色體成分被破壞。這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵3、漂洗的目的是去除根中多余的解離液，特別是鹽酸，因?yàn)槿旧珪r(shí)用的是堿性染料龍膽紫，酸與堿發(fā)生反應(yīng)會(huì)影響染色效果4、染色時(shí)間亦不能過長，否則會(huì)使染色體與周圍的其他結(jié)構(gòu)均被著色，這樣就無法形成顏色上的反差，不便于觀察。5、在制片時(shí)要用拇指按壓蓋玻片，目的是使細(xì)胞分散，不至于重疊。6、顯微鏡下觀察到的細(xì)胞被固定在有絲分裂的某個(gè)階段，若在視野中找不到處于某個(gè)時(shí)期的細(xì)胞時(shí)，可以適當(dāng)移動(dòng)玻片04比較過氧化氫沒酶和Fe3+的催化效率注意事項(xiàng)：1、過氧化氫的來自肝臟，且肝臟必須是新鮮的（保持酶的活性）。2、實(shí)驗(yàn)注意比較實(shí)驗(yàn)必須嚴(yán)格遵守等量、同時(shí)等原則。05探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用注意事項(xiàng)：1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模鹤C明酶的專一性2、遵循等量性原則3、酶催化結(jié)果的檢驗(yàn)：因?yàn)榈矸鄣乃猱a(chǎn)物中有還原性糖，故可以用斐林試劑檢驗(yàn)還原糖的存在，從而說明淀粉酶催化水解了淀粉；而蔗糖則不能水解，其本身不能與斐林試劑反應(yīng)。所以此實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于蔗糖的純度和新鮮度，如果其中混有少量的葡萄糖或果糖，或蔗糖放置久了受細(xì)菌作用，部分分解成了單糖，則與斐林試劑共熱時(shí)能生成磚紅色的沉淀，使人產(chǎn)生錯(cuò)覺。06葉綠體中色素的提取和分離1、取材時(shí)要選用新鮮的顏色較深的葉片，以便使濾液中含較多的色素2、研磨時(shí)加入二氧化硅的目的是為了研磨的充分，更有效的破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)；加入少許碳酸鈣的目的是為了防止在研磨過程中，葉綠素受到破壞。因?yàn)槿~綠素分子結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)鎂原子，當(dāng)細(xì)胞破裂時(shí)，細(xì)胞液內(nèi)有機(jī)酸的氫可以取代鎂原子而成為褐色的去沒葉綠素，碳酸鈣可中和有機(jī)酸以防止去鎂反應(yīng)的發(fā)生3、研磨時(shí)要迅速、充分。一是因?yàn)楸菀讚]發(fā)；二是為了使葉綠體完全破裂，從而能提取出較多的色素；二是葉綠素極不穩(wěn)定，能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而破壞。4、制備濾紙條時(shí)，要將濾紙條的一端剪去兩角。這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻，便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5、畫濾液細(xì)線時(shí)，一定要細(xì)且直。這樣可以防止色素帶重疊，使色素分子均勻分布在一條直線上，做到擴(kuò)散起點(diǎn)一致。重復(fù)劃2~3次，是為了增加濾液細(xì)線上的色素分子數(shù)量，使實(shí)驗(yàn)效果更加明顯。6、分離色素時(shí)，一定不要讓濾紙條上的濾液細(xì)線接觸到層析液，這是因?yàn)樯匾兹芙庥趯游鲆褐?，?dǎo)致色素帶不清晰，影響實(shí)驗(yàn)效果。7、識記實(shí)驗(yàn)結(jié)果的色素帶分布及寬窄（四種四素?cái)U(kuò)散速度的先后順序?yàn)椋汉}卜素葉黃素葉綠素a葉綠素b）07觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原1、實(shí)驗(yàn)材料的選擇最常用的實(shí)驗(yàn)材料是紫色洋蔥鱗片。它的外表皮細(xì)胞的液泡較大，細(xì)胞液中有紫色的花青素，在顯微鏡下，紫色大液泡十分明顯，能方便地觀察到質(zhì)壁分裂及其復(fù)原的過程。如無紫色洋蔥，可用葫蘆蘚或其他蘚類植物的葉片代替。選擇材料必須都是活細(xì)胞，因?yàn)橹挥谢罴?xì)胞的原生質(zhì)才具有選擇透過性，否則將不會(huì)出現(xiàn)質(zhì)壁分離及其復(fù)原現(xiàn)象/2、由于細(xì)胞壁是全透性的，而細(xì)胞膜具有選擇透過性，因此，在質(zhì)壁分離后。細(xì)胞壁以內(nèi)細(xì)胞膜以外的物質(zhì)是外界溶液，即蔗糖3、質(zhì)壁分離能夠發(fā)生的外界條件是因?yàn)橥饨缛芤旱臐舛却笥诩?xì)胞液的濃度。因此通過具有一系列濃度梯度的溶液依次做質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)，觀察植物細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離的臨界濃度，即可測的細(xì)胞液的濃度。4、此實(shí)驗(yàn)若用KNO3溶液，可觀察到細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離后又發(fā)生了自動(dòng)復(fù)原，原因是細(xì)胞主動(dòng)吸收了K+和KNO3-。八、植物向性運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與觀察（單一變量和對照性原則、對照性原則）九、動(dòng)物激素飼喂小動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)（注意3個(gè)實(shí)驗(yàn)組的對比方法，得出的結(jié)論）10DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：1．制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要在去新鮮雞血的同時(shí)加入抗凝劑，使血液分層，取下層血細(xì)胞沉淀。另外，此實(shí)驗(yàn)的材料不能用哺乳動(dòng)物（如人、狗）的血替代。2．獲取較多DNA的關(guān)鍵是向雞血細(xì)胞液加入足量的蒸餾水，以便使細(xì)胞膜和核膜破裂，核內(nèi)物質(zhì)釋放出來。3．特別要注意實(shí)驗(yàn)中的3次過濾：第一次過濾的目的是為了除去血細(xì)胞破裂后殘余的膜碎片以及細(xì)胞器碎片，第二次過濾（加水稀釋NaCL）是為了初步將DNA與溶解在NaCL溶液中的蛋白質(zhì)等有機(jī)物以及其他雜質(zhì)分離，第三次過濾（用酒精）是為了進(jìn)一不除去蛋白質(zhì)等有機(jī)物，從而得到較純凈的DNA.第一、三次過濾要用濾液，使用的紗布為1~2層；第二次過濾要用濾出的粘稠物，使用的紗布是多層。4．實(shí)驗(yàn)中有6次攪拌，除最后一次攪拌外，前5次攪拌均要朝向一個(gè)方向，并且在析出DNA,DNA再溶解和提取中，各步攪拌都要輕緩，玻璃棒不要直插燒杯底部，防止DNA分子斷裂。5．特別注意實(shí)驗(yàn)中有兩次使用蒸餾水：一次在第1步，加水是為了使血細(xì)胞洗水膨脹破裂，加水后必須充分的攪拌，不應(yīng)少于5min，使血細(xì)胞充分破裂；第二次加蒸餾水是在第3步，加水是為了喜事氯化鈉溶液。6．實(shí)驗(yàn)中有三次加氯化鈉溶液。在步驟2中，當(dāng)加入氯化鈉后，必須充分晃動(dòng)燒杯，使二者混合均勻，加速染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離，使DNA充分游離并溶解在氯化鈉溶液中。在步驟5中，加氯化鈉溶液也是為了DNA的再度溶解，不過這時(shí)溶液中蛋白質(zhì)含量已很少。在步驟8中，加的氯化鈉溶液的濃度比前2次低的多，但還是為溶解DNA。7．在步驟7中，必須使用冷的酒精。11性狀分離比的模擬實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)小筒，分別相當(dāng)于動(dòng)物體內(nèi)儲(chǔ)存精子和卵細(xì)胞的器官（精巢和卵巢）。為了保證D和d配子與自然狀態(tài)下相似，即1：1，小筒內(nèi)的D和d小球的數(shù)量應(yīng)該相等。而且抽取小球時(shí)，為了保證每次抽取到D或d的概率相等，應(yīng)該進(jìn)行有放回的抽取。抽取的過程即為受精。12調(diào)查人群中的遺傳病調(diào)查某遺傳病的發(fā)病率應(yīng)該在人群中隨機(jī)抽樣，而調(diào)查該病的遺傳規(guī)律，如X染色體的隱性遺傳，則應(yīng)該調(diào)查某患病家族的遺傳病歷史。十三、用當(dāng)?shù)啬撤N生物做有性雜交的實(shí)驗(yàn)（見課文）14種群密度的取樣調(diào)查植物種群密度的調(diào)查方法：樣方法。（常見的有五點(diǎn)取樣法、等局取樣法）動(dòng)物種群密度的調(diào)查方法：標(biāo)志重補(bǔ)法。15設(shè)計(jì)并制作小生態(tài)瓶，觀察生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性1.制作的小生態(tài)瓶應(yīng)該是個(gè)完整的生態(tài)系統(tǒng)，即應(yīng)該有非生物的物質(zhì)（空氣，水等）、非生物的能量（太陽能等）、生產(chǎn)者、消費(fèi)者、分解者。各種生物之間以及生物與無機(jī)環(huán)境之間，必須能夠進(jìn)行物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)。生物之間要有合適的食物鏈結(jié)構(gòu)，生物的數(shù)量不宜過多。小生態(tài)瓶必須上一透明的，這樣可保證生態(tài)瓶中有充足的太陽能。當(dāng)然，小生態(tài)瓶一