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細(xì)胞計(jì)數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù)意義細(xì)胞計(jì)數(shù)原理細(xì)胞計(jì)數(shù)方法血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)在細(xì)胞培養(yǎng)工作中,常需要了解細(xì)胞生活狀態(tài)和鑒別細(xì)胞死活,確定細(xì)胞接種濃度和數(shù)量以及了解細(xì)胞存活率和增殖度,如用酶消化制備的細(xì)胞懸液中細(xì)胞活力的鑒別,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后的活力檢測(cè)等。細(xì)胞計(jì)數(shù)意義血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)基于圖像的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀1.明場(chǎng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀利用明場(chǎng)成像和模式識(shí)別,能夠快速準(zhǔn)確的計(jì)數(shù),并通過臺(tái)盼藍(lán)排除法進(jìn)行活死細(xì)胞計(jì)數(shù)。2.雙熒光細(xì)胞活力分析儀通過多種熒光檢測(cè)。其中雙熒光檢測(cè)方法通過檢測(cè)AO(所有有核細(xì)胞染綠色熒光)/PI(所有死的有核細(xì)胞染紅色熒光)的熒光染色情況,從而可以完全排除細(xì)胞碎片的污染,精確計(jì)數(shù)有核細(xì)胞和進(jìn)行細(xì)胞活力分析。缺點(diǎn):圖像的計(jì)數(shù)系統(tǒng)缺乏重復(fù)性。細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)Countess?自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀-LifeTech(Invitrogen)Countess?IIFL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀基于庫爾特電阻抗原理的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

懸浮在電解液中的顆粒隨電解液通過小孔管時(shí),取代相同體積的電解液,在恒電流設(shè)計(jì)的電路中導(dǎo)致小孔管內(nèi)外兩電極間電阻發(fā)生瞬時(shí)變化,產(chǎn)生電位脈沖。脈沖信號(hào)的大小和次數(shù)與顆粒的大小和數(shù)目成正比基于庫爾特原理的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性、結(jié)果可重復(fù)性、計(jì)數(shù)速度上均領(lǐng)先于基于圖像的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。實(shí)驗(yàn)步驟(一)制備細(xì)胞懸液(105~106/ml)(二)細(xì)胞計(jì)數(shù)1.計(jì)數(shù)板處理2.染色3.計(jì)數(shù)方法4.計(jì)數(shù)的換算血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)池畫有長(zhǎng)、寬各3.0mm的方格,分為9個(gè)大方格,每個(gè)大格面積為1.0mmX1.0mm=1.0mm2;容積為1.0mm2X0.1mm2=0.1mm3。1ml=1000mm3,所以每一大方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)×10000=細(xì)胞數(shù)/ml細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml=4個(gè)大格細(xì)胞總數(shù)/4×10000×稀釋倍數(shù)

計(jì)數(shù)時(shí),只計(jì)數(shù)完整的細(xì)胞,若聚成一團(tuán)的細(xì)胞則按一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。在一個(gè)大方格中,如果有細(xì)胞位于線上,一般計(jì)下線細(xì)胞不計(jì)上線細(xì)胞,計(jì)左線細(xì)胞不計(jì)右線細(xì)胞。二次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不應(yīng)超過±5%;向計(jì)數(shù)板中滴細(xì)胞懸液時(shí)要干凈利落,加量要適當(dāng),過多易使蓋片漂移,或淹過蓋片則失敗,需重做,過少易出現(xiàn)氣泡;不理想時(shí),應(yīng)重做;鏡下計(jì)

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