病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷（一）●考點(diǎn)

病毒的生物學(xué)性狀

病毒的實(shí)驗(yàn)室檢查方法

常見(jiàn)病毒的感染[講義編號(hào)NODE70103300270100000101：針對(duì)本講義提問(wèn)]【內(nèi)容講解】第一節(jié)概述

一類非細(xì)胞型微生物，個(gè)體極小，可通過(guò)細(xì)菌濾器，需用電子顯微鏡觀察。

僅含一種核酸作為遺傳物質(zhì)，外被蛋白質(zhì)衣殼或還有包膜。

病毒只能在活細(xì)胞內(nèi)寄生，以復(fù)制的方式進(jìn)行增殖。

在臨床微生物感染中，近75%的傳染病是由病毒引起的。[講義編號(hào)NODE70103300270100000102：針對(duì)本講義提問(wèn)]一、病毒的基本性狀

（一）形態(tài)結(jié)構(gòu)

1.大小和形狀：

大小：測(cè)量單位用納米表示，一般在20-300nm之間。

形態(tài)大致可分為：球形或近似球形、桿狀、彈形、磚形、蝌蚪形等。[講義編號(hào)NODE70103300270100000103：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.結(jié)構(gòu)

[講義編號(hào)NODE70103300270100000104：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）病毒的增殖

病毒必須依賴宿主細(xì)胞，

以特殊的自我復(fù)制方式進(jìn)行增殖。

病毒的復(fù)制周期：

吸附、穿入、脫殼、生物合成、

組裝與成熟、釋放6個(gè)階段。

[講義編號(hào)NODE70103300270100000105：針對(duì)本講義提問(wèn)]異常增殖：

頓挫感染：病毒進(jìn)入細(xì)胞后的環(huán)境不利于它的復(fù)制，不能合成本身的成分或不能組裝和釋放有感染性的病毒顆粒。

缺陷病毒：由于病毒基因組不完整或基因位點(diǎn)改變而不能進(jìn)行正常增殖的病毒。

干擾現(xiàn)象：當(dāng)兩種不同的病毒或兩株性質(zhì)不同的同種病毒，同時(shí)或先后感染同一細(xì)胞或機(jī)體時(shí)，可發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。[講義編號(hào)NODE70103300270100000106：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）噬菌體

以細(xì)菌、真菌等為宿主，能引起細(xì)菌等裂解的病毒。

噬菌體特異性識(shí)別細(xì)菌表面受體，可用于進(jìn)行細(xì)菌的鑒定與分型。

噬菌體感染細(xì)菌后產(chǎn)生兩種后果：

溶菌周期和溶源性周期。

[講義編號(hào)NODE70103300270100000107：針對(duì)本講義提問(wèn)]（四）非尋常病毒

比病毒更小更簡(jiǎn)單的致病因子，又稱為亞病毒因子，包括類病毒、衛(wèi)星病毒和朊粒等。

朊粒個(gè)體微小，不含核酸，其主要成分是一種蛋白酶抗性蛋白，對(duì)各種理化作用的抵抗力強(qiáng)，具有傳染性，是引起傳染性海綿狀腦病的病原體。

朊粒致中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性病變，引起牛海綿狀腦?。ǒ偱２。??？搜挪。–JD）和Kuru病被認(rèn)為與朊粒感染有關(guān)。[講義編號(hào)NODE70103300270100000108：針對(duì)本講義提問(wèn)]二、病毒的分類與命名

科、屬、種3級(jí)或科、亞科、屬、種4級(jí)。

DNA病毒、RNA病毒、DNA和RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒三大類。

按傳播途徑可分為呼吸道病毒、胃腸炎病毒、經(jīng)性傳播感染的病毒等。

按感染部位與癥狀特征可分為肝炎病毒、出血性熱病毒、皰疹病毒等。[講義編號(hào)NODE70103300270100000109：針對(duì)本講義提問(wèn)]第二節(jié)病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷

病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷有三個(gè)方面：

①直接檢測(cè)和分離鑒定；

②檢測(cè)病毒蛋白抗原成分和核酸；

③檢測(cè)抗體。[講義編號(hào)NODE70103300270100000110：針對(duì)本講義提問(wèn)]一、標(biāo)本采集、運(yùn)送及處理

（一）標(biāo)本采集

1.采樣時(shí)機(jī)：應(yīng)在病人急性期或發(fā)病初期采集標(biāo)本。

2.標(biāo)本種類：

根據(jù)不同病毒感染采集不同標(biāo)本，如鼻咽分泌物、腦脊液、血液、糞便等。

（二）標(biāo)本的運(yùn)送及保存

快速傳遞，立即處理和接種。

采集和運(yùn)送過(guò)程注意冷藏。如不能立即處理和接種，可在4℃保存數(shù)小時(shí)，長(zhǎng)時(shí)間保存需置-70℃。[講義編號(hào)NODE70103300270100000111：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）標(biāo)本處理

凝固的血液需先離心，得到的血清可以用于病毒分離。

肝素抗凝全血、腦脊液、胸腔液、水痘液以及尿液均可直接用于病毒分離培養(yǎng)。

有些標(biāo)本如糞便等,常需粗提、提純和濃縮等復(fù)雜處理過(guò)程。[講義編號(hào)NODE70103300270100000112：針對(duì)本講義提問(wèn)]二、分離培養(yǎng)與鑒定

（一）分離培養(yǎng)

1.組織培養(yǎng)包括器官培養(yǎng)、組織塊培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。

目前常用的方法是細(xì)胞培養(yǎng)；

常用細(xì)胞：

①原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)；②二倍體細(xì)胞株；③傳代細(xì)胞系。[講義編號(hào)NODE70103300270100000113：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.雞胚接種一般選用9-12日齡雞胚。雞胚中的部位適宜病毒卵黃囊嗜神經(jīng)病毒，如乙型腦炎病毒羊膜腔流感病毒尿囊腔流感病毒、腮腺炎病毒，還可制備疫苗和大量病毒抗原絨毛尿囊膜天花病毒、單純皰疹病毒腦內(nèi)狂犬病病毒

3.動(dòng)物接種

實(shí)驗(yàn)室常用新生小鼠或乳鼠進(jìn)行病毒分離。[講義編號(hào)NODE70103300270100000114：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）病毒鑒定

1.初步鑒定根據(jù)臨床癥狀、流行病學(xué)特點(diǎn)、標(biāo)本來(lái)源、易感動(dòng)物范圍、細(xì)胞病變特征及生物學(xué)特征、理化性質(zhì)可初步判斷病毒的科及屬。

2.最終鑒定在初步鑒定的基礎(chǔ)上，選擇適當(dāng)?shù)难鍖W(xué)方法對(duì)病毒分離株進(jìn)行最后鑒定，常用中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)、酶免疫試驗(yàn)等。分子生物學(xué)方法也在病毒鑒定方面得到應(yīng)用。[講義編號(hào)NODE70103300270100000115：針對(duì)本講義提問(wèn)]初步鑒定（舉例）：

細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）：細(xì)胞形態(tài)變化病毒細(xì)胞圓縮，分散，不聚集，全部細(xì)胞被破壞腸道病毒細(xì)胞腫大，顆粒增多，病變細(xì)胞聚集呈葡萄狀腺病毒細(xì)胞融合成多核細(xì)胞副粘病毒，皰疹病毒空泡狀，多核巨細(xì)胞麻疹病毒

脂溶劑敏感實(shí)驗(yàn)：有包膜（+），無(wú)包膜（-）；

耐酸實(shí)驗(yàn)：腸道病毒（R），鼻病毒（S）。[講義編號(hào)NODE70103300270100000116：針對(duì)本講義提問(wèn)]三、病毒感染的診斷

（一）顯微鏡檢查

1.用光學(xué)顯微鏡直接檢查病毒包涵體?？勺鳛椴《靖腥镜妮o助診斷，不是特異性試驗(yàn)。

核內(nèi)包涵體：常見(jiàn)DNA病毒。如巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒、水痘-帶狀皰疹病毒和腺病毒等。

胞漿內(nèi)包涵體：常見(jiàn)RNA病毒。如呼吸道合胞病毒、狂犬病病毒和痘類病毒等。

胞質(zhì)內(nèi)和胞核內(nèi)包涵體：麻疹病毒等。

2.用電子顯微鏡直接檢查病毒顆粒。

數(shù)小時(shí)即可從病毒形態(tài)上作出明確的鑒別診斷。

應(yīng)用免疫電鏡靈敏度更高。[講義編號(hào)NODE70103300270100000117：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）病毒抗原檢查

利用特異性免疫血清檢測(cè)標(biāo)本中的病毒抗原。

常用方法有：免疫熒光技術(shù)、酶免疫技術(shù)、放射免疫法、反相間接血凝和對(duì)流免疫電泳等方法。

對(duì)于一些血清型別不多或在一般細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中尚不能成功增殖的病毒，直接檢測(cè)病毒抗原是快速而實(shí)用的方法。[講義編號(hào)NODE70103300270100000118：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）病毒抗體檢查

利用特異性抗原檢測(cè)病毒感染者血清中的IgM和IgG抗體。

常用的方法有中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)及免疫擴(kuò)散等，還可以利用放射免疫法及酶聯(lián)免疫吸附法。

IgM抗體出現(xiàn)在病毒感染的早期，所以標(biāo)本采集時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響很大。

IgG抗體檢測(cè)需采集感染急性期與恢復(fù)期雙份血清，恢復(fù)期IgG效價(jià)必須比急性期增高4倍或4倍以上時(shí)，才有診斷意義。

（四）病毒核酸檢測(cè)

利用核酸雜交和PCR技術(shù)檢測(cè)病毒特異基因片段。

檢出病毒核酸并不等于檢出具有傳染性的病毒顆粒。[講義編號(hào)NODE70103300270100000119：針對(duì)本講義提問(wèn)]病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷（二）第三節(jié)各類病毒感染的簡(jiǎn)介

一、呼吸道病毒六、皰疹病毒

二、腸道病毒七、肝炎病毒

三、急性胃腸炎病毒八、反轉(zhuǎn)錄病毒

四、黃病毒九、狂犬病病毒

五、出血熱病毒十、人乳頭瘤病毒[講義編號(hào)NODE70103300270200000101：針對(duì)本講義提問(wèn)]一、呼吸道病毒

（一）流行性感冒病毒

（二）呼吸道合胞病毒

（三）麻疹病毒

（四）風(fēng)疹病毒[講義編號(hào)NODE70103300270200000102：針對(duì)本講義提問(wèn)]（一）流行性感冒病毒

1.生物學(xué)性狀

（1）形態(tài)：具有多形性，一般為球形或絲狀，絲狀多見(jiàn)于新分離株，感染性較強(qiáng)。

（2）結(jié)構(gòu)：

[講義編號(hào)NODE70103300270200000103：針對(duì)本講義提問(wèn)]（2）分型與變異

1）分型：根據(jù)核蛋白抗原和M蛋白的不同，將流感病毒分為甲（A）、乙（B）、丙（C）型；

甲型流感病毒根據(jù)NA和HA的抗原性不同又分為若干亞型。

2）變異：變異的物質(zhì)基礎(chǔ)是HA和NA。

抗原變異幅度小時(shí)稱為抗原漂移；

變異幅度大形成新的亞型，引起大規(guī)模流行，為抗原轉(zhuǎn)變。

（3）培養(yǎng)特性：

常用雞胚接種培養(yǎng)，初次分離接種羊膜腔為最佳，傳代適應(yīng)后可移種尿囊腔。

細(xì)胞培養(yǎng)一般用原代猴腎細(xì)胞（PMK）或犬腎傳代細(xì)胞（MDCK）。

利用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)確定病毒的存在。

（4）抵抗力：

不耐熱，對(duì)干燥、日光、紫外線以及甲醛、乙醇等均敏感。[講義編號(hào)NODE70103300270200000104：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物檢驗(yàn)

（1）標(biāo)本采集和處理：

在發(fā)病急性期，以前3天為最好。

采集鼻腔洗液、咽拭子、鼻拭子等，置于Hanks液中。

放入冰壺中，速送實(shí)驗(yàn)室。若48小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行接種，標(biāo)本應(yīng)放于低溫中保存。

（2）分離培養(yǎng)與鑒定：

標(biāo)本接種于雞胚羊膜腔，35℃3天后，收集羊水和尿囊液進(jìn)行血凝試驗(yàn)并測(cè)定滴度。

血凝陽(yáng)性者，用已知抗體作血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。

若血凝陰性時(shí)，需用雞胚盲傳1～2次，仍不出現(xiàn)血凝陽(yáng)性者，方可判斷病毒分離陰性。

也可接種原代猴腎細(xì)胞（PMK）或犬腎傳代細(xì)胞（MDCK）。[講義編號(hào)NODE70103300270200000105：針對(duì)本講義提問(wèn)]（3）快速診斷

1）免疫熒光技術(shù)和酶免疫技術(shù)。

2）分子雜交技術(shù)。

3）PCR技術(shù)。

4）免疫電鏡技術(shù)。

（4）血清學(xué)診斷：

需同時(shí)檢測(cè)急性期（5天以內(nèi)）和恢復(fù)期（2～4周）血清，在相同條件下進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，如恢復(fù)期抗體效價(jià)比急性期高4倍或4倍以上即有診斷意義。[講義編號(hào)NODE70103300270200000106：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

病毒隨飛沫傳播進(jìn)入易感者呼吸道，依靠血凝素與黏膜柱狀上皮細(xì)胞相應(yīng)受體結(jié)合，感染細(xì)胞。

主要在呼吸道柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，很少入血，但代謝毒素樣物質(zhì)可進(jìn)入血流引起發(fā)熱、頭痛和全身酸痛。

甲型流感可以是散發(fā)，也可以是全球性大流行。乙型流感的播散速度及范圍不如甲型。[講義編號(hào)NODE70103300270200000107：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）呼吸道合胞病毒

1.生物學(xué)性狀：

屬副粘病毒科、肺病毒亞科、肺病毒屬。

球形，具有多形性。

核酸為單負(fù)股RNA，不分節(jié)段。

包膜上有兩種刺突：

G蛋白作用于類似于流感病毒的血凝素蛋白HA；

F蛋白是融合蛋白，介導(dǎo)病毒穿入和細(xì)胞融合。[講義編號(hào)NODE70103300270200000108：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物學(xué)檢查

（1）標(biāo)本采集和處理：可采用鼻腔洗液或鼻咽拭子，置轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中冷藏（4℃）運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，盡可能立即接種。

（2）分離培養(yǎng)與鑒定：

不能在雞胚中增殖，可在人類上皮細(xì)胞傳代細(xì)胞系內(nèi)增殖。

培養(yǎng)后3～7天，細(xì)胞病變?yōu)楹习w形成即細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞，胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體。

（3）直接檢測(cè)病毒抗原：可利用免疫熒光技術(shù)和酶免疫技術(shù)。

（4）血清學(xué)診斷：

常用中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)和酶免疫試驗(yàn)檢查血清中IgG、IgM及IgA。

中和試驗(yàn)需雙份血清，檢測(cè)IgG滴度變化。檢測(cè)患者IgM、IgA可進(jìn)行早期診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270200000109：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義：

最常見(jiàn)的傳播途徑是經(jīng)飛沫傳染。

引起嬰幼兒下呼吸道疾病的最常見(jiàn)的病毒。

最易引起嬰幼兒細(xì)支氣管炎和細(xì)支氣管肺炎，若不及時(shí)處理，死亡率較高；

較大兒童和成人主要引起上呼吸道感染。[講義編號(hào)NODE70103300270200000110：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）麻疹病毒

1.生物學(xué)性狀：

屬副粘病毒科、麻疹病毒屬。

球形，核心為單負(fù)鏈RNA，三種衣殼蛋白（L、P、N），外被包膜，包膜內(nèi)面為M蛋白，包膜表面有血凝素（H蛋白）和融合蛋白（F）。

H蛋白與細(xì)胞表面病毒受體CD46結(jié)合，感染宿主。

病毒抵抗力不強(qiáng)，對(duì)陽(yáng)光和一般消毒劑敏感。[講義編號(hào)NODE70103300270200000111：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物學(xué)檢查

（1）標(biāo)本采集：在病人急性期內(nèi)采集標(biāo)本，如鼻咽拭子、鼻咽吸取物、痰等。

（2）直接檢測(cè)病毒：

感染細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞融合和多核巨細(xì)胞，胞質(zhì)和胞核內(nèi)有嗜酸性包涵體。

電鏡或免疫電鏡檢查病毒顆粒。

免疫熒光技術(shù)及酶免疫技術(shù)，如EIA進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。

PCR技術(shù)或核酸探針進(jìn)行鑒定。

（3）病毒分離：

接種傳代細(xì)胞系HeLa、Vero以及原代人胚腎細(xì)胞等。

鏡下觀察是否有細(xì)胞病變出現(xiàn)。

（4）血清學(xué)診斷：

雙份血清作補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，酶免疫測(cè)定及血凝抑制試驗(yàn)等。

用ELISA法檢測(cè)血清特異性IgM可協(xié)助診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270200000112：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義：

麻疹是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的急性呼吸道傳染病。

通過(guò)飛沫直接傳播，冬春季易發(fā)。

侵入上呼吸道和眼結(jié)膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，通過(guò)局部淋巴組織入血，出現(xiàn)第一次病毒血癥，病毒隨血流侵入全身淋巴組織和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)增殖，再次入血形成第二次病毒血癥，并感染眼結(jié)膜、皮膚、口腔黏膜、呼吸道、消化道、血管。

遠(yuǎn)期并發(fā)癥是亞急性硬化性全腦炎（SSPE）。[講義編號(hào)NODE70103300270200000113：針對(duì)本講義提問(wèn)]（四）風(fēng)疹病毒

1.生物學(xué)性狀：

球形，核心為單正鏈RNA，外被包膜，包膜表面有血凝素。

能在綠猴腎、兔腎和人胚腎細(xì)胞內(nèi)增殖。

抵抗力不強(qiáng)，不耐熱，對(duì)脂溶劑敏感，紫外線能滅活病毒。[講義編號(hào)NODE70103300270200000114：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物學(xué)檢查

（1）標(biāo)本采集：在早期采集標(biāo)本，如咽拭子、皮疹液、尿液以及死亡嬰兒的各種臟器等。

（2）直接檢測(cè)病毒：利用PCR技術(shù)或核酸探針進(jìn)行鑒定。

（3）病毒分離與鑒定：接種非洲綠猴腎Vero以及原代人胚腎細(xì)胞等。鏡下觀察是否有細(xì)胞病變出現(xiàn)。用酶標(biāo)或熒光素標(biāo)記的單克隆抗體進(jìn)行病毒鑒定。

（4）血清學(xué)診斷：

雙份血清作血凝抑制試驗(yàn)等。用ELISA法檢測(cè)血清特異性IgM可協(xié)助診斷。

患兒出生時(shí)血清中有抗風(fēng)疹病毒IgM抗體和從母體獲得的IgG抗體，或?qū)m內(nèi)羊水中有IgM抗體可判定為先天性風(fēng)疹綜合征。[講義編號(hào)NODE70103300270200000115：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義：

風(fēng)疹是兒童時(shí)期常見(jiàn)的傳染病。風(fēng)疹是全身麻疹樣出疹伴耳后及枕下淋巴結(jié)腫大為特征的急性呼吸道傳染病。

病毒在局部淋巴結(jié)增殖后，通過(guò)病毒血癥播撒全身。大多數(shù)情況下，屬于一過(guò)性和無(wú)明顯臨床癥狀的感染。

孕婦在妊娠早期感染病毒，經(jīng)胎盤(pán)垂直傳播感染胎兒，可引起先天性風(fēng)疹綜合征。胎兒出生后患先天性心臟病、耳聾、失明、智力障礙等。[講義編號(hào)NODE70103300270200000116：針對(duì)本講義提問(wèn)]二、腸道病毒

腸道病毒屬小RNA病毒科腸道病毒屬。

由糞-口途徑傳播。

主要包括脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒、?？刹《竞鸵恍┬履c道病毒。

（一）生物學(xué)性狀

無(wú)包膜，由簡(jiǎn)單的病毒衣殼和單股正鏈RNA組成。

能在猴腎、人胚腎、人羊膜細(xì)胞、HEP-2、HeLa細(xì)胞中增殖。

對(duì)外界抵抗力較強(qiáng)，在污水及糞便中可生存數(shù)月。對(duì)酸及乙醚穩(wěn)定，對(duì)紫外線、干燥及熱敏感，56℃30分鐘可滅活。[講義編號(hào)NODE70103300270200000117：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）微生物學(xué)檢查

1.標(biāo)本的采集與處理：

合理采集相應(yīng)標(biāo)本，如腦脊液、血液、尿液、直腸拭子、咽喉拭子、鼻腔洗液等，將液體標(biāo)本置無(wú)菌試管內(nèi)立即送檢。

2.直接檢測(cè)病毒：

電鏡檢查及酶免疫法均可直接檢測(cè)腸道病毒。

PCR在腸道病毒檢測(cè)方面更具優(yōu)勢(shì)。

3.病毒分離：

猴細(xì)胞系對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒，B組柯薩奇病毒和ECH0病毒具有良好的敏感性。

人類二倍體成纖維細(xì)胞適合于A組柯薩奇病毒的分離。[講義編號(hào)NODE70103300270200000118：針對(duì)本講義提問(wèn)]4.病毒鑒定：

中和試驗(yàn)進(jìn)行病毒鑒定，此為鑒定的標(biāo)準(zhǔn)方法。

PCR及免疫熒光法進(jìn)行快速鑒定。

5.血清學(xué)診斷：

常用方法有中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、及血凝抑制試驗(yàn)。

三種試驗(yàn)只有中和試驗(yàn)較特異，但操作繁瑣。[講義編號(hào)NODE70103300270200000119：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）臨床意義

腸道病毒雖然以感染胃腸道作為開(kāi)始，但卻很少引起胃腸道疾病。

病毒的靶器官以神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉和其他系統(tǒng)為主。

在糞便中有腸道病毒排出時(shí)，多數(shù)病人往往無(wú)任何癥狀。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液、眼結(jié)膜分泌物和泌尿生殖道等部位的標(biāo)本中檢出腸道病毒，就意味著真正的病毒侵入。[講義編號(hào)NODE70103300270200000120：針對(duì)本講義提問(wèn)]腸道病毒疾病脊髓灰質(zhì)炎病毒損害脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞，導(dǎo)致脊髓灰質(zhì)炎即小兒麻痹癥柯薩奇病毒以幼年兒童最常見(jiàn)，極少數(shù)患者出現(xiàn)無(wú)菌性腦膜炎和輕癱等癥狀。可引起心肌炎和心包炎、急性結(jié)膜炎等。ECH0病毒以幼年兒童最常見(jiàn)，極少數(shù)患者出現(xiàn)無(wú)菌性腦膜炎和輕癱等癥狀。腸道病毒71型導(dǎo)致手足口病、無(wú)菌性腦膜炎等，目前尚無(wú)有效的疫苗。[講義編號(hào)NODE70103300270200000121：針對(duì)本講義提問(wèn)]三、急性胃腸炎病毒—輪狀病毒

1.生物學(xué)性狀：

球形，核心含雙鏈RNA，外被雙層衣殼，內(nèi)層核衣殼的殼粒呈放射狀排列，電鏡下猶如車(chē)輪狀外形。

常用的細(xì)胞為原代猴腎細(xì)胞和傳代猴腎細(xì)胞。

病毒抵抗力強(qiáng)，耐酸堿，耐乙醚。56℃30分鐘可滅活?？杀幌緞缁?。

2.微生物檢驗(yàn)

（1）標(biāo)本采集與處理：發(fā)病早期采集腹瀉糞便，密封送檢。

（2）標(biāo)本直接檢查：

1）電鏡和免疫電鏡檢查

2）抗原檢測(cè)常用ELISA法、膠乳凝集試驗(yàn)

3）病毒RNA聚丙烯酰胺凝膠電泳分析用于病毒分型

4）檢測(cè)核酸

（3）分離培養(yǎng)[講義編號(hào)NODE70103300270200000122：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義：

輪狀病毒是引起嬰幼兒急性腹瀉的主要病因。在發(fā)展中國(guó)家發(fā)病率高。

其發(fā)病和嬰幼兒病死率僅次于呼吸道感染。

A組感染引起嬰幼兒急性胃腸炎，感染以溫帶地區(qū)的秋冬季為主。

B組引起成人腹瀉，無(wú)明顯季節(jié)性。[講義編號(hào)NODE70103300270200000123：針對(duì)本講義提問(wèn)]四、黃病毒

一大群通過(guò)吸血的節(jié)肢動(dòng)物而傳播疾病的病毒。

（一）流行性乙型腦炎病毒

1.生物學(xué)性狀：

基因組為單正鏈RNA。

結(jié)構(gòu)蛋白有三種：M、C和E。M位于包膜內(nèi)面，C在衣殼中，E是鑲嵌在包膜上的糖蛋白，組成血凝素。

最易感染的動(dòng)物為出生2～3天的乳鼠，經(jīng)腦內(nèi)接種后3～5天即可發(fā)病。在地鼠腎，幼豬腎等原代培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)增殖，并引起明顯的細(xì)胞病變。

抗原性穩(wěn)定，很少變異。[講義編號(hào)NODE70103300270200000124：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物學(xué)檢查

（1）標(biāo)本直接檢查：

免疫熒光技術(shù)及酶免疫技術(shù)進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。

PCR技術(shù)或核酸探針檢測(cè)核酸。

（2）分離培養(yǎng)與鑒定：

接種乳鼠腦內(nèi)，或原代金色地鼠腎細(xì)胞等培養(yǎng)細(xì)胞。

根據(jù)細(xì)胞病變、紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)證實(shí)病毒的增殖，陽(yáng)性即可傳代或鑒定。

（3）血清學(xué)診斷：可以利用血凝抑制、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等進(jìn)行血清學(xué)診斷。

3.臨床意義：

豬為最重要的宿主和傳染源。通過(guò)三帶喙庫(kù)蚊叮咬傳播，引起流行性乙型腦炎。夏秋季節(jié)流行。

人感染后，絕大多數(shù)表現(xiàn)為隱性或輕型感染。只有少數(shù)發(fā)生腦炎。

病毒侵入腦組織內(nèi)增殖，造成腦實(shí)質(zhì)病變，表現(xiàn)為高熱、驚厥或昏迷癥狀。[講義編號(hào)NODE70103300270200000125：針對(duì)本講義提問(wèn)]五、出血熱病毒

（一）漢坦病毒

1.生物學(xué)性狀：

圓形、橢圓形或多形性。單負(fù)股RNA，有長(zhǎng)、中、短三片段。

在人肺傳代細(xì)胞（A549），非洲綠猴腎細(xì)胞（Vero-E6），人胚肺二倍體細(xì)胞（2BS）及地鼠腎細(xì)胞中增殖，不引起明顯的細(xì)胞病變。

中和試驗(yàn)可將世界各地分離的漢坦病毒分成6個(gè)血清型。

對(duì)脂溶劑敏感，對(duì)酸抵抗力弱，60℃1小時(shí)可被滅活。[講義編號(hào)NODE70103300270200000126：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物學(xué)檢查

（1）病毒分離與抗原檢測(cè)：

常用Vero-E6細(xì)胞、A549細(xì)胞分離病毒。

免疫熒光抗體染色檢查細(xì)胞胞漿內(nèi)的病毒抗原。

（2）血清學(xué)診斷：

免疫熒光染色，檢查病人血清中的特異性IgM或IgG抗體。

ELISA檢測(cè)特異性IgM適用于早期診斷。

3.臨床意義：

引起腎綜合征出血熱（HFRS）。

侵入人體后約有2周的潛伏期，可引起流行性出血熱，起病急，典型臨床表現(xiàn)為高熱、出血和腎損害。伴有三痛（頭痛、眼眶痛、腰痛）及紅（面、頸、上胸部潮紅）。眼結(jié)膜、咽部及軟腭充血。軟腭、液下、前胸等處有出血點(diǎn)。[講義編號(hào)NODE70103300270200000127：針對(duì)本講義提問(wèn)]六、皰疹病毒

（一）單純皰疹病毒（HSV）

（二）水痘-帶狀皰疹病毒

（三）巨細(xì)胞病毒

（四）EB病毒[講義編號(hào)NODE70103300270200000128：針對(duì)本講義提問(wèn)]（一）單純皰疹病毒（HSV）

1.生物學(xué)性狀：

有包膜的DNA病毒，基因組由兩個(gè)互相連接的長(zhǎng)片段（L）和短片段（S）組成，為雙股線狀DNA。

在多種細(xì)胞內(nèi)增殖，如原代兔腎、人胚肺、人胚腎細(xì)胞或地鼠腎細(xì)胞等。

細(xì)胞被感染后很快發(fā)生病變。如細(xì)胞腫脹、變圓、出現(xiàn)嗜酸性核內(nèi)包涵體。

有兩種血清型，HSV-1和HSV-2。[講義編號(hào)NODE70103300270200000129：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物學(xué)檢查

（1）標(biāo)本采集和處理；

采集水皰液、唾液、尿液、血液、腦脊液、陰道或?qū)m頸拭子

標(biāo)本應(yīng)立即接種敏感細(xì)胞培養(yǎng)液，如果不能則將標(biāo)本置于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，快速送檢。

（2）直接檢查病毒：

免疫電鏡檢查病毒顆?；虿∽兗?xì)胞。

姬姆薩染色，在光學(xué)顯微鏡下檢查多核巨細(xì)胞和胞核內(nèi)嗜酸性包涵體。

直接免疫熒光法或酶免疫法進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。[講義編號(hào)NODE70103300270200000130：針對(duì)本講義提問(wèn)]（3）分離及鑒定：

病毒分離培養(yǎng)是HSV感染實(shí)驗(yàn)室診斷的最敏感的方法，HSV-1和HSV-2在細(xì)胞培養(yǎng)中均可出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變。

利用單克隆抗體進(jìn)行確定HSV分離株的型別。

（4）分子生物學(xué)診斷；核酸雜交技術(shù)或PCR技術(shù)可檢測(cè)出HSV。

（5）血清學(xué)診斷：

ELISA或膠乳凝集試驗(yàn)可檢測(cè)HSV抗體，但難以區(qū)分兩型的感染。無(wú)助于早期診斷及指導(dǎo)抗病毒治療。[講義編號(hào)NODE70103300270200000131：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義：

通過(guò)直接密切接觸和性接觸傳播，也可經(jīng)飛沫及垂直傳播。

HSV-1感染常局限在口咽部，通過(guò)唾液或呼吸道分泌物傳播，引起口咽部皰疹、皰疹性角結(jié)膜炎、腦炎等。多見(jiàn)于半歲以后的嬰幼兒，大多數(shù)呈隱性感染。

HSV-2的原發(fā)感染多見(jiàn)于青春期以后的患者，主要通過(guò)生殖道途徑傳播，主要表現(xiàn)為生殖器皰疹。[講義編號(hào)NODE70103300270200000132：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）

1.生物學(xué)性狀：

與HSV相似，為線狀雙股DNA病毒。

只有一個(gè)血清型。

一般實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及雞胚對(duì)VZV均不敏感。能在人胚二倍體腎細(xì)胞（HFDK）或人胚二倍體肺細(xì)胞（HFDL）培養(yǎng)中增殖。

受感染的細(xì)胞出現(xiàn)嗜酸性核內(nèi)包涵體和多核巨細(xì)胞。

2.微生物學(xué)檢查

（1）直接檢測(cè)病毒或抗原：

直接或間接免疫熒光法檢測(cè)病變細(xì)胞內(nèi)的VZV抗原，有助于快速診斷。

免疫電鏡檢查，可對(duì)VZV感染進(jìn)行特異性診斷。

核酸雜交或PCR技術(shù)亦可檢出皰疹液中的VZV。[講義編號(hào)NODE70103300270200000133：針對(duì)本講義提問(wèn)]（2）病毒分離：

取水痘內(nèi)容物（要求4天以內(nèi)的內(nèi)容物）接種人胚腎或人胚肺細(xì)胞。多數(shù)情況下3～7天可出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)。

（3）鑒定：

根據(jù)典型細(xì)胞病變效應(yīng)進(jìn)行初步鑒定；

利用標(biāo)記的抗VZV的單克隆抗體進(jìn)行直接熒光抗體染色，進(jìn)行特異性鑒定。

（4）血清學(xué)診斷：

EIA已成為VZV血清學(xué)診斷的主要方法。[講義編號(hào)NODE70103300270200000134：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義：

VZV可引起水痘和帶狀皰疹。

水痘為原發(fā)感染引起，主要發(fā)生于兒童，兒童初次感染VZV大約有兩周的潛伏期，然后皮膚出現(xiàn)斑疹、水皰疹，可進(jìn)一步發(fā)展為膿皰疹并伴有發(fā)熱。

帶狀皰疹為復(fù)發(fā)感染所致，多發(fā)生于成人和老人。[講義編號(hào)NODE70103300270200000135：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）巨細(xì)胞病毒

1.生物學(xué)性狀：

形態(tài)與基因組結(jié)構(gòu)與HSV極為相似。

種屬特異性高，即人CMV（HCMV）只能感染人。

只能在人成纖維細(xì)胞中才能增殖，增殖緩慢。

細(xì)胞病變特點(diǎn)為腫脹、核變大形成巨大細(xì)胞，核內(nèi)有致密的嗜堿性包涵體，形似貓頭鷹眼特征。

加熱56℃30分鐘，低pH、乙醚、紫外線、反復(fù)凍融均能使CMV滅活。[講義編號(hào)NODE70103300270200000136：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物檢驗(yàn)

（1）標(biāo)本采集：病毒分離可采取患者尿液、口腔拭子、外周血白細(xì)胞等。血清學(xué)診斷可采取患者血清。

（2）直接檢查病毒：

HE等染色觀察巨大細(xì)胞和細(xì)胞核內(nèi)的包涵體。

免疫熒光技術(shù)和酶免疫技術(shù)檢查標(biāo)本中的HCMV抗原。

核酸雜交或PCR技術(shù)檢測(cè)HCMV的核酸。[講義編號(hào)NODE70103300270200000137：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

通過(guò)多種途徑傳播。

有先天性或獲得性細(xì)胞免疫缺陷的兒童或成人，如艾滋病及器官移植患者，CMV感染很常見(jiàn)。

（1）正常人感染：常呈隱性感染，少數(shù)出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥。

（2）免疫功能缺損的個(gè)體的感染：致的間質(zhì)性肺炎是骨髓移植受者的首位死因。AIDS患者HCMV感染以肺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道感染最為常見(jiàn)。

（3）先天性和圍生期感染

1）先天感染：母體發(fā)生CMV感染，經(jīng)胎盤(pán)傳至胎兒引起宮內(nèi)感染。

2）產(chǎn)時(shí)感染：與產(chǎn)道中的病毒相接觸被感染。

3）產(chǎn)后感染：與排病毒的個(gè)體密切接觸而獲得。[講義編號(hào)NODE70103300270200000138：針對(duì)本講義提問(wèn)]（四）EB病毒

1.生物學(xué)性狀

病毒顆粒為球形。

不能用常規(guī)的皰疹病毒培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。

一般用人臍血淋巴細(xì)胞或從外周血分離的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)。

根據(jù)病毒抗原表達(dá)時(shí)所處的病毒增殖周期的不同階段，將EBV抗原分為3類：

1）潛伏期表達(dá)的抗原：EBV核抗原（EBNA）和潛伏期膜蛋白。

2）EBV增殖早期抗原（EA）。

3）病毒增殖晚期抗原：EBV衣殼抗原（VCA）及EBV包膜抗原（MA）。[講義編號(hào)NODE70103300270200000139：針對(duì)本講義提問(wèn)]（1）直接檢查病毒：

抗補(bǔ)體免疫熒光法檢查淋巴細(xì)胞或上皮細(xì)胞EB病毒核抗原。

核酸雜交和PCR或RT-PCR技術(shù)檢測(cè)病毒。

（2）病毒分離培養(yǎng)及鑒定：

接種人臍帶血淋巴細(xì)胞對(duì)EB病毒進(jìn)行分離培養(yǎng)，孵育4周，病毒陽(yáng)性培養(yǎng)物，通過(guò)抗補(bǔ)體免疫熒光法進(jìn)行EB鑒定。

（3）血清學(xué)診斷：

嗜異性抗體檢測(cè)可用于輔助診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥。

進(jìn)行針對(duì)病毒VCA、EA和EBNA的抗體測(cè)定，不同疾病患者的體內(nèi)針對(duì)EBV不同的抗原成分所產(chǎn)生的抗體的組成及水平均有一定的特征性。[講義編號(hào)NODE70103300270200000140：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

流行廣泛。主要通過(guò)唾液傳播，也可因輸血傳染。

幼兒感染后多數(shù)無(wú)明顯癥狀，但終生攜帶病毒，或引起輕度咽炎和上呼吸道感染。

青春期發(fā)生原發(fā)感染，約50%出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥。

EBV主要侵犯B細(xì)胞，與EB病毒感染有關(guān)的疾病主要有：傳染性單核細(xì)胞增多癥、非洲兒童惡性淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金病和其他某些淋巴瘤。[講義編號(hào)NODE70103300270200000141：針對(duì)本講義提問(wèn)]病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷（三）七、肝炎病毒病毒HAVHBVHCVHDVHEV致病甲型乙型丙型丁型戊型基因組ssRNAdsDNAssRNAssRNAssRNA傳播糞-口血/垂血/垂血/垂糞-口流行流行/暴發(fā)流行/暴發(fā)好發(fā)兒/青青/成慢性攜帶－＋＋＋－肝硬化／肝癌－＋＋自動(dòng)免疫＋＋被動(dòng)免疫丙球HBIg[講義編號(hào)NODE70103300270300000101：針對(duì)本講義提問(wèn)]（一）甲型肝炎病毒

1.生物學(xué)性狀

小RNA病毒科，無(wú)包膜，核心為單正股RNA。

只有一個(gè)血清型。

抵抗力較其他小RNA病毒強(qiáng)，60℃加熱10～12小時(shí)后仍具有感染性，85℃加熱立即滅活，對(duì)乙醚、氯仿及pH為3的酸性環(huán)境有抵抗力。

2.微生物檢驗(yàn)

甲型肝炎患者病期不長(zhǎng)，預(yù)后良好，一般不需進(jìn)行病原學(xué)檢查。

微生物檢驗(yàn)以測(cè)定病毒抗原或抗體為主。

感染早期一般可用RIA或ELISA檢測(cè)患者血清中抗-HAVIgM，是HAV新近感染的重要指標(biāo)。了解既往感染史或進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，需檢測(cè)抗-HAVIgG。

RT-PCR、核酸雜交技術(shù)直接檢測(cè)抗原。[講義編號(hào)NODE70103300270300000102：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

主要通過(guò)糞一口傳播，傳染源多為人類，潛伏期15～50天，平均28天。

病毒常在患者ALT升高前5～6天就存在于患者的血清和糞便中，2～3周后，隨血清特異性抗體的產(chǎn)生，血清和糞便的傳染性逐漸消失。

甲型肝炎患者的糞便污染水源、食物以及某些海產(chǎn)品，可造成散發(fā)式大流行。[講義編號(hào)NODE70103300270300000103：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）乙型肝炎病毒

1.生物學(xué)性狀

（1）形態(tài)與結(jié)構(gòu)：

電鏡下可見(jiàn)3種特有顆粒：

①大球形顆粒：為具有感染性的HBV完整顆粒，呈球形，又稱Dane顆粒。

②小球形顆粒：成分為HBsAg，無(wú)傳染性；

③管形顆粒：成分亦是HBsAg，由多個(gè)小球型顆粒“串聯(lián)而成”。

[講義編號(hào)NODE70103300270300000104：針對(duì)本講義提問(wèn)]完整病毒結(jié)構(gòu)：

外衣殼：相當(dāng)于病毒的包膜，HBsAg鑲嵌于包膜的脂質(zhì)雙層中。

內(nèi)衣殼：是HBcAg，用酶或去垢劑作用后，可暴露出HBeAg。

核心：基因組---環(huán)狀dsDNA---S，L，DNAP。

[講義編號(hào)NODE70103300270300000105：針對(duì)本講義提問(wèn)]（2）抗原成分：

1）HBsAg是HBV感染的主要標(biāo)志，由病毒DNA的S區(qū)編碼。

2）HBcAg被HBsAg所覆蓋，血中不易檢出。由DNA的C區(qū)編碼。HBcAg免疫原性強(qiáng)，抗-HBcIgG在血清中持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，抗-HBcIgM提示HBV處于復(fù)制狀態(tài)。

3）HBeAg為可溶性蛋白質(zhì)，游離在血中，其消長(zhǎng)與病毒體及DNA多聚酶的消長(zhǎng)基本一致，故HBeAg已作為HBV復(fù)制及具有強(qiáng)感染性的一個(gè)指標(biāo)。由病毒DNA的C區(qū)編碼。

（3）抵抗力：

對(duì)理化因素有較強(qiáng)抵抗力。

60℃加熱10小時(shí)，98℃加熱1分鐘，以及乙醚、pH為2.4的酸性環(huán)境處理6小時(shí)均不能有效滅活病毒。[講義編號(hào)NODE70103300270300000106：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物檢驗(yàn)

（1）標(biāo)本的采集與處理：

臨床上常采集血液標(biāo)本，HBV的血清標(biāo)志物較穩(wěn)定。

（2）檢查方法：

主要靠RIA和ELISA等血清學(xué)方法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBC.抗-HBe。其中HBsAg的檢測(cè)最為重要，可發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀攜帶者，是獻(xiàn)血者篩選的必檢指標(biāo)。

PCR檢測(cè)HBVDNA也用于乙型肝炎的臨床診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270300000107：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

傳染源是HBV攜帶者和患者的血液、唾液、精液和陰道分泌物。

傳播途徑大致可分為血液、血制品傳播、性傳播、母嬰傳播。通過(guò)破損的皮膚和黏膜侵入機(jī)體。

乙型肝炎臨床表現(xiàn)呈多樣性。

肝炎的癥狀可以是輕度而短暫的，也可以是重度和遷延性的?；颊呖梢酝耆謴?fù)健康。也可因暴發(fā)性肝炎而致死或成為慢性肝炎。部分HBV持續(xù)感染者可發(fā)生原發(fā)性肝癌。[講義編號(hào)NODE70103300270300000108：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）丙型肝炎病毒

1.生物學(xué)性狀

小的有包膜的單正股RNA病毒。

可在黑猩猩體內(nèi)傳代。

尚不能用體外細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行分離。

抗原成分主要包括核衣殼蛋白，包膜蛋白及非結(jié)構(gòu)蛋白。

對(duì)各種理化因素的抵抗力較弱。

2.微生物檢驗(yàn)

目前臨床上常用的HCV檢測(cè)方法主要有兩類：

血清學(xué)方法：測(cè)定抗-HCV。

ELISA法作為篩選試驗(yàn)

條帶免疫法作確認(rèn)試驗(yàn)

PCR方法：檢測(cè)HCVRNA。[講義編號(hào)NODE70103300270300000109：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

主要經(jīng)輸血或其他非腸道途徑（如共用針頭、血透析等）進(jìn)行傳播。

HCV的亞臨床感染者是丙型肝炎的主要傳染源。

根據(jù)臨床病程可劃分為急性和慢性，以6個(gè)月為區(qū)分界限。

HCV感染的一個(gè)主要特點(diǎn)就是慢性化的幾率很高，感染過(guò)程很長(zhǎng)，存在不同程度的肝組織病變,并呈慢性進(jìn)行性?？砂l(fā)展為肝硬化，與原發(fā)性肝癌關(guān)系十分密切。[講義編號(hào)NODE70103300270300000110：針對(duì)本講義提問(wèn)]（四）丁型肝炎病毒

1.生物學(xué)特性

球形，外被HBsAg包繞，核心含HDV抗原（HDAg）和HDV-RNA基因組，基因組為一單負(fù)鏈環(huán)狀RNA。

HDV不能獨(dú)立復(fù)制，需要HBV輔助才能增殖。

對(duì)HDV敏感的動(dòng)物有黑猩猩、東方土撥鼠等。[講義編號(hào)NODE70103300270300000111：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物檢驗(yàn)

（1）HDAg檢測(cè)：去除表面的HBsAg，然后用RIA或ELISA檢測(cè)HDAg。

（2）HDVRNA檢測(cè)：核酸雜交或RT-PCR技術(shù)對(duì)HDVRNA進(jìn)行檢測(cè)。

（3）抗-HDV抗體檢測(cè)：HDV感染后2周左右產(chǎn)生抗-HDIgM，一個(gè)月達(dá)高峰，隨后迅速下降，抗-HDIgG出現(xiàn)較遲，在恢復(fù)期出現(xiàn)。

丁型肝炎抗體不能清除病毒，如持續(xù)高效價(jià)，可作為慢性丁肝的指標(biāo)。

利用ELISA等方法檢測(cè)患者血清中抗-HDVIgM或抗-HDVIgG，通過(guò)檢測(cè)抗-HBsIgM或IgG以及HBeAg和抗-HBe，作出同步感染和重疊感染的診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270300000112：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

HDV可引起與HBV相關(guān)聯(lián)的急性和慢性肝病。

HDV感染通常引起嚴(yán)重和進(jìn)行性的肝病。

HDV傳播方式主要是經(jīng)血傳播，也可通過(guò)密切接觸與母嬰間垂直傳播。HDV感染只有在感染了HBV的人群或是與HBV同時(shí)侵入才能發(fā)生。重疊感染極易導(dǎo)致慢性化。[講義編號(hào)NODE70103300270300000113：針對(duì)本講義提問(wèn)]（五）戊型肝炎病毒

1.生物學(xué)特性

球型，無(wú)包膜，基因組為正單股RNA。

體外培養(yǎng)不易獲得成功，敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為靈長(zhǎng)目。特別是獼猴和黑猩猩。

對(duì)高鹽、氯化銫、氯仿和反復(fù)凍融敏感。

2.微生物檢驗(yàn)

可用電鏡或免疫電鏡技術(shù)檢測(cè)患者糞便中的HEV顆粒。

PCR方法檢測(cè)標(biāo)本中HEVRNA。

臨床常用的診斷方法是檢測(cè)血清中的抗HEVIgM或IgG。[講義編號(hào)NODE70103300270300000114：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

主要經(jīng)糞-口途徑傳播，患者多見(jiàn)于成人，未成年者大多為隱性感染。

戊型肝炎的潛伏期約為10～60天，潛伏期末和急性期初的患者糞便中病毒量較大，傳染性最強(qiáng)，是戊型肝炎的主要傳染源。

臨床表現(xiàn)以黃疸為主多數(shù)患者發(fā)病6周即可好轉(zhuǎn)并痊愈，不發(fā)展為慢性肝炎。[講義編號(hào)NODE70103300270300000115：針對(duì)本講義提問(wèn)]八、反轉(zhuǎn)錄病毒

帶有以RNA為模板合成DNA的反轉(zhuǎn)錄酶。

人類免疫缺陷病毒

人類免疫缺陷病毒（HIV）在病毒分類學(xué)上屬反轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒亞科慢病毒屬。

已發(fā)現(xiàn)有HIV-1和HIV-2兩型：

HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原體；

HIV-2主要局限于西部非洲。[講義編號(hào)NODE70103300270300000116：針對(duì)本講義提問(wèn)]1.生物學(xué)特性

（1）形態(tài)結(jié)構(gòu)：

RNA病毒，呈球形。

核心含有RNA.逆轉(zhuǎn)錄酶和核衣殼蛋白。

包膜，其中鑲嵌有g(shù)p120和gp41兩種特異的糖蛋白。

gp120與CD4受體蛋白結(jié)合。

gp41為跨膜蛋白。

[講義編號(hào)NODE70103300270300000117：針對(duì)本講義提問(wèn)]（2）基因組結(jié)構(gòu)：

由兩條拷貝的單股正鏈RNA在5’端通過(guò)氫鍵結(jié)合而形成二聚體。

基因組從5’至3’端依次排列為L(zhǎng)TR、gag、pol、env、LTR：

gag基因編碼病毒核心蛋白，其中衣殼蛋白p24特異性最強(qiáng)。

pol基因編碼病毒復(fù)制所需的酶類。

env基因編碼合成兩種包膜糖蛋白gp120和gp41。[講義編號(hào)NODE70103300270300000118：針對(duì)本講義提問(wèn)][講義編號(hào)NODE70103300270300000119：針對(duì)本講義提問(wèn)]（4）病毒受體與細(xì)胞親嗜性：

HIV的主要靶細(xì)胞是CD4T淋巴細(xì)胞和單核-巨噬細(xì)胞亞群。皮膚的Langerhans細(xì)胞、淋巴結(jié)濾泡的樹(shù)突狀細(xì)胞、腦小膠質(zhì)細(xì)胞等也是感染的對(duì)象。

CD4分子是HIV的主要受體，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)兩種輔助受體CXCR4和CCR5。CXCR4是HIV的親T細(xì)胞病毒株的輔助受體，CCR5是HIV的親巨噬細(xì)胞病毒株的輔助受體。

（5）培養(yǎng)特性：

體外僅感染表面有CD4受體的T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)室常用新鮮分離的正常人T細(xì)胞或病人自身分離的T細(xì)胞培養(yǎng)病毒。

（6）抵抗力：

病毒抵抗力較弱，56℃30分鐘可滅活?？杀幌緞缁?。但在室溫病毒活性可保持7天。[講義編號(hào)NODE70103300270300000120：針對(duì)本講義提問(wèn)]2.微生物檢查

（1）病毒標(biāo)志：

病毒培養(yǎng)：分離HIV。

分子生物學(xué)方法：檢測(cè)HIVRNA。

（2）免疫標(biāo)志：HIV抗原及抗體等免疫復(fù)合物。

1）抗原檢測(cè)：常用間接ELISA法檢測(cè)p24抗原。

2）抗體檢測(cè)：抗p24及其前體p55的抗體在血清中出現(xiàn)最早，隨后出現(xiàn)抗gp120／160的抗體，是初期感染的最穩(wěn)定的指標(biāo)?？筽41的抗體常在p24抗體出現(xiàn)后數(shù)周才出現(xiàn)。

①初篩試驗(yàn)：EIA.IFA.凝集試驗(yàn)等。

②確證試驗(yàn)：免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Westernbolt，WB）、放射免疫沉淀試驗(yàn)。

3）相關(guān)標(biāo)志：

與艾滋病病情發(fā)展或HIV感染密切相關(guān)而存在于體內(nèi)的某些生化或化學(xué)物質(zhì)。如CD4細(xì)胞、新蝶呤、白細(xì)胞介素等。[講義編號(hào)NODE70103300270300000121：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.臨床意義

HIV是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS，艾滋?。┑牟≡w。

AIDS是以侵犯CD4細(xì)胞為主，造成細(xì)胞免疫功能缺陷，并繼發(fā)體液免疫功能缺損為基本特征的傳染病。

傳染源是HIV無(wú)癥狀攜帶者和艾滋病患者。

傳播途徑主要有：性接觸傳播、血液傳播、母嬰傳播。[講義編號(hào)NODE70103300270300000122：針對(duì)本講義提問(wèn)]臨床病程分為4個(gè)時(shí)期，即急性感染期、無(wú)癥狀感染期、艾滋病相關(guān)綜合征、艾滋病（艾滋病完全型）。

HIV的致病機(jī)制：

HIV直接損傷或間接損傷CD4T細(xì)胞；

HIV抑制抗原遞呈細(xì)胞功能；

HIV誘發(fā)自身免疫性疾病及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；

HIV導(dǎo)致CD8T細(xì)胞喪失抗病毒活性等。

機(jī)體感染HIV后可產(chǎn)生多種抗體，病毒也可刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答，但依然無(wú)法清除病毒，這與病毒能逃逸免疫作用有關(guān)。[講義編號(hào)NODE70103300270300000123：針對(duì)本講義提問(wèn)]九、狂犬病病毒

（一）生物學(xué)性狀

外形似子彈狀，病毒體內(nèi)含單負(fù)股RNA，外面是脂蛋白包膜，其表面有許多糖蛋白刺突，與病毒的感染性和毒力有關(guān)。

一種嗜神經(jīng)性病毒。

該病毒可感染的動(dòng)物范圍較廣。

在易感動(dòng)物或人類的中樞神經(jīng)細(xì)胞中增殖時(shí)，在胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體，稱內(nèi)基小體，在診斷上很有價(jià)值。[講義編號(hào)NODE70103300270300000124：針對(duì)本講義提問(wèn)]（二）微生物檢驗(yàn)

1.隔離觀察動(dòng)物

若7～10天不發(fā)病，一般認(rèn)為該動(dòng)物沒(méi)有患狂犬病或咬人時(shí)唾液中尚無(wú)狂犬病病毒。

2.印片、切片檢查

取帶病毒動(dòng)物海馬回部組織作切片或涂片，

HE染色檢查內(nèi)基小體；

直接熒光抗體法（DFA）或ELISA法檢測(cè)病毒抗原。[講義編號(hào)NODE70103300270300000125：針對(duì)本講義提問(wèn)]3.細(xì)胞培養(yǎng)

接種敏感細(xì)胞，培養(yǎng)40～48小時(shí)后，用DFA進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)，如果陰性進(jìn)行第二代培養(yǎng)，經(jīng)3～4天，再用DFA檢查是否有病毒生長(zhǎng)，如果二次培養(yǎng)均陰性，則最終視為陰性。

4.血清學(xué)診斷

中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、ELISA試驗(yàn)等。

5.分子生物學(xué)

RT-PCR技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中狂犬病毒RNA，此方法敏感、快速、特異。[講義編號(hào)NODE70103300270300000126：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）臨床意義

人類狂犬病大多數(shù)是由病犬咬傷所致，有時(shí)也可因貓、狼以及其他帶菌動(dòng)物咬傷所致。

典型臨床表現(xiàn)是神經(jīng)興奮性增高，吞咽或飲水時(shí)喉頭肌痙攣，甚至聞水聲或其他輕微刺激包括光線均可引起全身痙攣發(fā)作，又稱恐水病。發(fā)病3～5天后患者轉(zhuǎn)入麻痹期,最后因昏迷、呼吸循環(huán)衰竭而死亡。

死亡率幾乎達(dá)100%。[講義編號(hào)NODE70103300270300000127：針對(duì)本講義提問(wèn)]十、人乳頭瘤病毒

（一）生物學(xué)性狀

由病毒衣殼和雙鏈環(huán)狀DNA組成。

具有宿主和組織特異性，只能感染人的皮膚、黏膜的上皮細(xì)胞。

易感細(xì)胞核內(nèi)增殖形成核內(nèi)嗜酸性包涵體。

目前HPV組織培養(yǎng)尚未成功。

（二）微生物檢驗(yàn)

臨床常根據(jù)病史及典型的臨床表現(xiàn)即可作出診斷。

癥狀不典型：

病理學(xué)檢查或用免疫組化技術(shù)等方法檢查病變組織中的HPV抗原。

分子生物學(xué)診斷方法有：核酸分析、原位雜交、DNA印跡、PCR。[講義編號(hào)NODE70103300270300000128：針對(duì)本講義提問(wèn)]（三）臨床意義

HPV可通過(guò)性接觸感染，引起尖銳濕疣。也可經(jīng)產(chǎn)道感染。

病毒感染僅局限于局部皮膚和黏膜中，引起該部位多種疣，不產(chǎn)生病毒血癥。

尖銳濕疣主要由HPV-6引起，也可由1、2等型引起。

HPV-16、18、31、33等型別可引起宮頸內(nèi)瘤樣變，組織學(xué)變化可由宮頸上皮的不典型增生至原位癌，嚴(yán)重者可發(fā)展為浸潤(rùn)癌。[講義編號(hào)NODE70103300270300000129：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】病毒與立克次體的主要相同點(diǎn)是

A.細(xì)胞內(nèi)寄生

B.繁殖方式

C.對(duì)抗生素敏感

D.單一核酸類型

E.可在人工培養(yǎng)基生長(zhǎng)[講義編號(hào)NODE70103300270300000130：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】病毒的干擾現(xiàn)象是指

A.兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞后產(chǎn)生的

B.一種病毒感染兩種宿主細(xì)胞后產(chǎn)生的

C.對(duì)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的干擾

D.對(duì)細(xì)菌的干擾

E.對(duì)抗生素的敏感性消失[講義編號(hào)NODE70103300270300000131：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】病毒的直接鏡檢錯(cuò)誤的是

A.包涵體分嗜酸性和嗜堿性兩種

B.可查宿主細(xì)胞內(nèi)的包涵體

C.病毒形態(tài)、大小檢查需用電子顯微鏡

D.檢查包涵體常用吉姆薩染色

E.檢查包涵體也必須用電子顯微鏡[講義編號(hào)NODE70103300270300000132：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】預(yù)防脊髓灰質(zhì)炎的疫苗為

A.基因工程疫苗

B.口服減毒活疫苗

C.注射滅活疫苗

D.多肽疫苗

E.核酸疫苗[講義編號(hào)NODE70103300270300000133：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】滅活是指使病毒失去

A.紅細(xì)胞吸附性

B.紅細(xì)胞凝集性

C.細(xì)胞融合性

D.感染性

E.自身復(fù)制繁殖的能力[講義編號(hào)NODE70103300270300000134：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】艾滋病患者的T4和T8淋巴細(xì)胞數(shù)以及T4/T8比值為

A.T4↑T8↑T4/T8↑

B.T4↓T8↑T4/T8↓

C.T4↓T8↓T4/T8↓

D.T4↑T8↓T4/T8↑

E.T4↑T8↑T4/T8正常[講義編號(hào)NODE70103300270300000135：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】SARS的病原體是

A.冠狀病毒

B.肺炎支原體

C.肺炎球菌

D.肺炎衣原體

E.痘病毒[講義編號(hào)NODE70103300270300000136：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】病毒的基本結(jié)構(gòu)是

A.核酸

B.衣殼

C.包膜

D.核衣殼

E.殼微粒[講義編號(hào)NODE70103300270300000137：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】判斷病毒有無(wú)包膜的依據(jù)為

A.是否出現(xiàn)細(xì)胞病變

B.對(duì)石碳酸是否敏感

C.對(duì)溫度的抵抗力是否強(qiáng)

D.對(duì)脂溶劑是否敏感

E.超速離心沉淀速度的不同[講義編號(hào)NODE70103300270300000138：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】具有血凝素的病毒是

A.巨細(xì)胞病毒

B.皰疹病毒

C.HIV

D.呼吸道合胞病毒

E.流感病毒[講義編號(hào)NODE70103300270300000139：針對(duì)本講義提問(wèn)]【例題】最易發(fā)生抗原變異，造成流感大流行的是

A.甲型流感病毒

B.乙型流感病毒

C.丙型流感病毒