常見自身免疫性疾病的自身抗體檢測(cè)

自身抗體（autoantibody）是指抗自身細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞表面和細(xì)胞外抗原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗體(譜)

分類:

臟器特異性自身抗體

臟器非特異性自身抗體

常見自身免疫性疾病的自身抗體檢測(cè)

自身抗體（autoa1自身免疫性疾病的重要標(biāo)志高滴度存在于自身免疫性疾病患者與疾病的活動(dòng)性相關(guān)參與免疫病理性損傷一、自身抗體的特性自身免疫性疾病的重要標(biāo)志一、自身抗體的特性2自身抗體免疫球蛋白補(bǔ)體淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子自身免疫性疾病的主要實(shí)驗(yàn)檢測(cè)自身抗體自身免疫性疾病的主要實(shí)驗(yàn)檢測(cè)3

1948年Haragraves等發(fā)現(xiàn)LE細(xì)胞現(xiàn)象

1957年Holborow等應(yīng)用IIF檢測(cè)ANA1961年Beck等發(fā)現(xiàn)ANA不同熒光染色模型

60–70年代IIF、ID、CIE應(yīng)用新的自身抗體

1979年Towbin等應(yīng)用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)自身抗體

80年代IB、RIP應(yīng)用蛋白多肽水平認(rèn)識(shí)自身抗原

1987年DNA基因重組技術(shù)開始應(yīng)用自身抗體研究近十年應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)自身抗體研究發(fā)展簡(jiǎn)史1948年Haragraves等發(fā)現(xiàn)LE細(xì)胞4抗核抗體（ANA）抗可提取性核抗原抗體（ENA）抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）類風(fēng)濕因子（RF）抗角蛋白抗體（AKA）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）抗心磷脂抗體（ACLA）常檢測(cè)的自身抗體抗核抗體（ANA）常檢測(cè)的自身抗體5標(biāo)志抗體相關(guān)疾病dsDNASLESmSLESSBSS著絲點(diǎn)抗體PSS（局限型）Scl-70抗體PSS（彌漫型）AKA、抗CCP抗體RAJo-1抗體PM/DM（進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病）高滴度RNP抗體MCTD肝腎微粒體抗體（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝炎平滑肌抗體（SMA）Ⅰ型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常見自身免疫性疾病的標(biāo)志抗體標(biāo)志抗體相關(guān)疾病dsDNASLESmSLESSBSS著絲點(diǎn)抗6間接免疫熒光法（IIF）ELISA免疫印跡法（Western-blot）酶免疫斑點(diǎn)法檢測(cè)自身抗體常用的方法間接免疫熒光法（IIF）檢測(cè)自身抗體常用的方法7

抗核抗體::以真核細(xì)胞（如HEp-2細(xì)胞、肝細(xì)胞）的各種細(xì)胞核成分為靶抗原所檢測(cè)的自身抗體的總稱。二、抗核抗體的檢測(cè)與應(yīng)用抗核抗體::以真核細(xì)胞（如HEp-2細(xì)胞、肝細(xì)胞）的各種8抗核抗體譜抗核抗體譜9以首先檢出該抗體的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗體等；以相關(guān)疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗體等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗體、抗線粒體抗體、抗核膜抗體、抗細(xì)胞漿抗體等；以抗原的化學(xué)名稱分類命名，如抗DNA、抗RNP、抗組蛋白抗體,抗核小體抗體等?？购丝贵w譜的分類和命名以首先檢出該抗體的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗體等；10間接免疫熒光法（indirectimmunofluorescence,IIF）酶免疫斑點(diǎn)法ELISA免疫印跡法

（Western-blot）

抗核抗體檢測(cè)方法間接免疫熒光法抗核抗體檢測(cè)方法11間接免疫熒光法示意圖HEp-2細(xì)胞肝組織切片熒光標(biāo)記抗體病人血清（待檢抗體）間接免疫熒光法示意圖HEp-2細(xì)胞熒光標(biāo)記抗體病人血清（待檢12

細(xì)胞核細(xì)胞漿細(xì)胞骨架細(xì)胞周期

均質(zhì)型核糖體型肌蛋白型中心體型斑點(diǎn)型線粒體型波形纖維蛋白型紡綞體型核仁型高爾基體型細(xì)胞角蛋白型紡綞絲型著絲點(diǎn)型溶酶體型原肌球蛋白型中間體型周邊型顆粒型紐帶蛋白型PCNA型核點(diǎn)型(dots)IIF檢測(cè)ANA熒光染色模型細(xì)胞核細(xì)胞漿細(xì)胞骨13斑點(diǎn)型（nRNP/Sm）

高滴度的抗U1-nRNP為MCTD的特征?？筍m抗體對(duì)SLE具有高度特異性。斑點(diǎn)型（SSA/SSB）抗SSA最常出現(xiàn)于SS及新生兒紅斑狼瘡（100%）。抗SSB抗體幾乎僅見于女性，可出現(xiàn)于SS和SLE。斑點(diǎn)型（nRNP/Sm）高滴度的抗U1-nRNP為MCTD14均質(zhì)型

抗dsDNA抗體抗組蛋白抗體(histone)抗ssDNA抗體抗核小體抗體(nucleosome)均質(zhì)型抗dsDNA抗體抗組蛋白抗體15周邊型

可見于膠原病、PBC、CAH等患者

周邊型16核點(diǎn)型（DOTS）

見于SLE、SS、PBC、風(fēng)濕病

抗著絲點(diǎn)型

PSS局限型標(biāo)志抗體核點(diǎn)型（DOTS）見于SLE、SS、PBC、風(fēng)17抗原纖維蛋白型

僅見于5%～10%的PSS，男性高于女性

抗RNA多聚酶Ⅰ型抗體

僅見于硬皮病患者，陽性率為4%抗原纖維蛋白型僅見于5%～10%的PSS，男性高于女性抗18抗PM-Scl（PM-1）抗體

見于重疊綜合征（多發(fā)性肌炎PM/皮肌炎DM/彌漫性PSS）

抗PM-Scl（PM-1）抗體見于重疊綜合征（多發(fā)性肌炎P19抗Scl-70型

PSS彌漫型的標(biāo)志抗體抗Scl-70型PSS彌漫型的標(biāo)志抗體20增殖細(xì)胞核抗原Ⅰ型（PCNA）

SLE特異性抗體，與發(fā)生彌漫性增殖性腎小球腎炎相關(guān)增殖細(xì)胞核抗原Ⅰ型21抗核糖體P蛋白（rib-P）抗體抗線粒體抗體（AMA）SLE標(biāo)志抗體原發(fā)性膽汁性肝硬化標(biāo)志抗體抗核糖體P蛋白（rib-P）抗體抗線粒體抗體（AMA）SLE22抗Jo-1抗體抗高爾基體抗體多發(fā)性肌炎（PM）標(biāo)志抗體偶見于SLE和SS抗Jo-1抗體抗高爾基體抗體多發(fā)性肌炎（PM）標(biāo)志抗體偶見于23抗肌動(dòng)蛋白抗體見于自身免疫性慢性活動(dòng)型肝炎

抗肌動(dòng)蛋白抗體見于自身免疫性慢性活動(dòng)型肝炎24抗雙鏈DNA抗體

抗dsDNA抗體與細(xì)胞核DNA（外圍區(qū)）脫氧核糖磷酸框架結(jié)合。

抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體。其抗體滴度與疾病的活動(dòng)程度有相關(guān)性，抗體滴度的動(dòng)態(tài)測(cè)定為監(jiān)控治療提供了有效的實(shí)驗(yàn)室手段?？闺p鏈DNA抗體抗雙鏈DNA抗體抗dsDNA抗體與細(xì)胞核DNA（外圍區(qū)）脫25檢測(cè)方法及應(yīng)用間接免疫熒光檢測(cè)，是目前國內(nèi)外臨床常規(guī)檢測(cè)抗dsDNA抗體最常用的方法。抗dsDNA抗體診斷SLE的特異性可達(dá)95%～100%，但其敏感性僅為30%～50%，因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷。檢測(cè)方法及應(yīng)用檢測(cè)方法及應(yīng)用間接免疫熒光檢測(cè)，是目前國內(nèi)外臨床常規(guī)檢測(cè)抗d26

抗dsDNA抗體SLE特異性抗體，與病情活動(dòng)度相關(guān)。

抗dsDNA抗體SLE特異性抗體，與病情活動(dòng)度相關(guān)。27抗核小體抗體

核小體（nucleosome）是真核生物細(xì)胞核染色質(zhì)的基本單位。凋亡細(xì)胞是核小體的重要來源，當(dāng)SLE患者的吞噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的清除能力受損或降低，導(dǎo)致核小體在患者體內(nèi)大量存積，激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗核小體抗體（Antinucleosomeantibody,AnuA）。

抗核小體抗體核小體（nucleosome）是真核28檢測(cè)及應(yīng)用AnuA的檢測(cè)通常采用ELISA檢測(cè)法。AnuA具有同抗ds-DNA抗體相同的診斷特異性，可達(dá)到95%，在系統(tǒng)性硬化（SSc）病中可有20%～50%低濃度陽性率，其他自身免疫性疾病中該抗體均為陰性。AnuA的表達(dá)與SLE病情活動(dòng)分?jǐn)?shù)相關(guān)。檢測(cè)及應(yīng)用檢測(cè)及應(yīng)用AnuA的檢測(cè)通常采用ELISA檢測(cè)法。檢測(cè)及應(yīng)29

抗ENA抗體譜:可提取核抗原抗體的總稱

臨床常檢測(cè)的抗ENA抗體譜主要包括：

抗Sm抗U1-RNP抗SSA抗SSB抗Jo-1抗Scl-70抗rib-P蛋白三、抗ENA抗體譜的檢測(cè)與應(yīng)用抗ENA抗體譜:可提取30抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗可提取性核抗原（ENA）抗體31

雙向免疫擴(kuò)散（ID）對(duì)流免疫電泳（CIE）免疫印跡法（Western-blot）

ELISA酶免疫斑點(diǎn)法ENA檢測(cè)方法雙向免疫擴(kuò)散（ID）ENA檢測(cè)方法32免疫印跡法

SDS電泳轉(zhuǎn)移電泳酶免疫檢測(cè)免疫印跡法免疫印跡法SDS電泳轉(zhuǎn)移33自身免疫性疾病及其免疫檢測(cè)課件34抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性抗體（20%~30%）抗nRNP抗體：MCTD95%~100%（高滴度）抗SSA抗體：PSS60%~75%，其它CTD抗SSB抗體：

PSS10%~40%，其它CTD抗Scl-70抗體：SSc25%~75%,標(biāo)記性抗體抗Jo-1抗體：PM/DM25%，標(biāo)記性抗體抗rRNP抗體：

SLE特異性抗體（10%~30%）抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性35抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（anti-neutrophilcytoplasmicautoantibodies,ANCA）是一組以人中性粒細(xì)胞胞漿成分為靶抗原，與臨床多種小血管炎性疾病密切相關(guān)的自身抗體，對(duì)系統(tǒng)性血管炎、炎癥性腸病等疾病的診斷與鑒別診斷具有重要意義。

四、與小血管炎相關(guān)的自身抗體檢測(cè)與應(yīng)用抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（anti-neutrophilcyt36

熒光染色型

靶抗原

胞漿型(cANCA)

蛋白酶3（PR3）殺菌/通透性增高蛋白（BPI）

核周型(pANCA)髓過氧化物酶（MPO）組織蛋白酶G（Cath-G）乳鐵蛋白（LF）白細(xì)胞彈性蛋白酶（HLE）

非典型型(aANCA)兼有兩種特性ANCA熒光染色型與靶抗原熒光染色型靶抗原

胞漿型(c37周邊型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（pANCA）主要見于炎癥性腸病（潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩?。┲苓呅涂怪行粤＜?xì)胞胞漿抗體主要見于炎癥性腸?。冃越Y(jié)腸炎和38胞漿型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)主要見于Wegener’s肉芽腫及微小多動(dòng)脈炎胞漿型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體主要見于Wegener’s肉芽腫及39

ANCA臨床應(yīng)用

髓過氧化物酶（MPO）與顯微鏡下多血管炎、壞死性新月體型腎小球腎炎、過敏性肉芽腫性血管炎相關(guān)殺菌/通透性增高蛋白（BPI）主要見于肺部炎癥性疾病并與長(zhǎng)期慢性綠膿桿菌感染有一定關(guān)系

蛋白酶3（PR3）與Wegener’s肉芽腫（WG）密切相關(guān)。僅cANCA診斷WG的特異性大于90%，聯(lián)合PR3可超過95%，活動(dòng)期幾乎100%陽性。

組織蛋白酶G(Cath-G)白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)乳鐵蛋白(LF)可見于SLE、IBD、PBC、PSC等

ANCA臨床應(yīng)用髓過氧化物酶（MPO）與顯微鏡下多血管40RA早期診斷相關(guān)自身抗體

抗角質(zhì)層蛋白抗體（AKA）：1979年Young等報(bào)告靶抗原：filaggrin（40KD）抗核周因子（APF):1964年Nienhuis等報(bào)告靶抗原：profilaggrin（37-41KD）及其降解產(chǎn)物抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（AFA）：1993年Simon等報(bào)告靶抗原：filaggrin（40KD）抗Sa抗體：1994年Despres等報(bào)告靶抗原:50/55KD非酰基多肽，半抗原-瓜氨酸抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）：1998Schellekens五、與RA相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用RA早期診斷相關(guān)自身抗體五、與RA相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用41

類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor,RF）為抗變性IgGFc的自身抗體，主要是IgM型

致病機(jī)理：RF與體內(nèi)變性IgG結(jié)合形成免疫復(fù)合物，激活補(bǔ)體或被吞噬細(xì)胞吞噬，產(chǎn)生炎性介質(zhì)導(dǎo)致組織炎性損傷，使患者發(fā)生骨關(guān)節(jié)炎及血管炎。類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor,RF）為421.膠乳顆粒凝集實(shí)驗(yàn)定性、半定量，敏感性和特異性不高，測(cè)定IgM-RF

2.速率散射比濁法（ARRAY、IMAGE）定量、準(zhǔn)確、快速，測(cè)定IgM-RF

3.ELISA定量、準(zhǔn)確，可測(cè)定不同類型的RF檢測(cè)方法1.膠乳顆粒凝集實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法43

（1）RF在RA、SLE、PSS等多種自身免疫性疾病患者中均可被檢出。疾病陽性率（%）RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25臨床應(yīng)用（1）RF在RA、SLE、PSS等多種自身免疫性疾病患者中44（2）RF滴度與RA患者臨床表現(xiàn)呈正相關(guān)，

IgM-RF效價(jià)>80IU/ml并伴有嚴(yán)重關(guān)節(jié)功能障礙時(shí)通常提示患者預(yù)后不良。

（3）IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)

癥狀密切相關(guān)，常伴隨IgM-RF同時(shí)出現(xiàn)，在正常人及非RA患者中很難檢出。

（4）IgA-RF與RA患者關(guān)節(jié)癥狀的嚴(yán)重程度及骨質(zhì)破壞有顯著相關(guān)性。（2）RF滴度與RA患者臨床表現(xiàn)呈正相關(guān)，

IgM-RF效價(jià)45AKA主要見于RA，陽性率36%~59%，特異性95%~99%，其出現(xiàn)可以先于臨床表現(xiàn)；高滴度可預(yù)示較嚴(yán)重的RA類型?？菇堑鞍卓贵w（AKA）AKA主要見于RA，陽性率36%~59%，特異性95%~9946常用方法：ELISA臨床意義：RA特異性自身抗體，敏感性65%~85%，特異性為94%~98%；高濃度抗CCP抗體是RA發(fā)生關(guān)節(jié)侵蝕的危險(xiǎn)因子之一，定量檢測(cè)有助于判斷預(yù)后?？弓h(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）常用方法：ELISA抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）47自身免疫性肝病是與自身免疫密切相關(guān)的特殊類型的肝病，其診斷和治療完全不同于一般的慢性病毒性肝炎

自身免疫性肝炎(AIH)

原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)

原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)

重疊綜合征六、與自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用自身免疫性肝病是與自身免疫密切相關(guān)的特殊類型的肝病，其診斷和48

在多種累及肝膽疾患的自身免疫疾病中，自身抗體在發(fā)病機(jī)制中起重要作用自身免疫性肝病具有相對(duì)特異性自身抗體譜自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷及鑒別診斷具有重要意義自身免疫性肝病與自身抗體在多種累及肝膽疾患的自身免疫疾病中，自身抗體在發(fā)病機(jī)制49自身免疫性肝病及其自身抗體譜疾病類型相關(guān)自身抗體

自身免疫性肝炎（AIH）

Ⅰ型AIHANA/ASMAⅡ型AIHanti-LKM-1anti-LC-1Ⅲ型AIHanti-SLA(可溶性肝抗原)

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）

AMA(M2/M4/M8/M9)anti-gp210，sp100ACA

原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）pANCA

自身免疫性肝病及其自身抗體譜自身免疫性肝病及其自身抗體譜疾病類型50

抗甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）抗促甲狀腺素受體抗體（TSH-RAb）七、與橋本甲狀腺炎相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用七、與橋本甲狀腺炎相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用51重癥肌無力（MG）自身抗體譜：

抗骨胳肌抗體（ASA）、抗乙酰膽堿受體(AchR)抗體多發(fā)性硬化（MS）自身抗體譜：

抗髓鞘堿性蛋白（MBP）抗體、抗腦苷脂抗體、抗神經(jīng)結(jié)苷脂抗體急性炎癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病（格林―巴利綜合征）自身抗體譜：抗髓鞘糖脂抗體、抗髓鞘硫脂抗體

八、與神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用重癥肌無力（MG）自身抗體譜：八、與神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性相關(guān)自52

大多數(shù)自身免疫患者血清中可測(cè)到高效價(jià)的自身抗體，特別是有些自身抗體的檢測(cè)已納入某些自身免疫性疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)中，自身抗體檢測(cè)已是臨床免疫檢測(cè)的一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。第五節(jié)自身抗體檢測(cè)的臨床應(yīng)用大多數(shù)自身免疫患者血清中可測(cè)到高效價(jià)的自身抗體，特別是有53

篩查性試驗(yàn)與確診性試驗(yàn)項(xiàng)目的合理組合選擇相關(guān)的自身抗體檢測(cè)項(xiàng)目切忌盲目的全面檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)同步設(shè)置陽性和陰性對(duì)照一、自身抗體檢測(cè)的一般原則篩查性試驗(yàn)與確診性試驗(yàn)項(xiàng)目的合理組合一、自身抗體檢測(cè)的一54

95%～99%可排除SLE

（－）SLE治療緩解病情特重（大量IC沉積消耗抗體）（＋）低滴度常見于RA等其它自身免疫性疾病高滴度可作為診斷SLE的依據(jù)ENA抗體譜檢測(cè)（－）不能排除抗dsDNA、Sm、rib抗體（＋）可幫助診斷ANA初篩二、實(shí)驗(yàn)室方法的選擇及結(jié)果的確認(rèn)95%～99%可排除SLEANA55自身免疫性疾病ANA陽性率（%）SLE80~100MCTD95~100RA20~40PSS85~95PM/DM30~50SS70~80潰瘍性結(jié)腸炎26慢性活動(dòng)性肝炎30~40其它風(fēng)濕病20~50ANA在自身免疫性疾病中的檢出率

自身免疫性疾病ANA陽性率（%）SLE80~100MCTD956第六節(jié)自身免疫性疾病的相關(guān)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)在自身免疫病患者體內(nèi)，因有多種自身抗原的存在，自身抗體的種類也可有交叉重疊現(xiàn)象，故實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)出多種自身抗體陽性時(shí)還必須結(jié)合臨床癥狀進(jìn)行綜合分析。第六節(jié)自身免疫性在自身免疫病患者體內(nèi)，因有多種自身57自身抗體↑→免疫球蛋白↑II型及III型自身免疫病消耗補(bǔ)體↑→補(bǔ)體↓→監(jiān)測(cè)病情一、免疫球蛋白及

補(bǔ)體檢測(cè)及臨床意義自身抗體↑→免疫球蛋白↑一、免疫球蛋白及

補(bǔ)體檢測(cè)及臨床58淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能→反應(yīng)患者體內(nèi)免疫細(xì)胞狀態(tài)二、淋巴細(xì)胞檢測(cè)及臨床意義淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能→反應(yīng)患者體內(nèi)免疫細(xì)胞狀態(tài)二、淋巴細(xì)胞檢測(cè)59細(xì)胞因子介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)或應(yīng)用治療→監(jiān)測(cè)病情或指導(dǎo)治療三、細(xì)胞因子檢測(cè)及臨床意義細(xì)胞因子介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)或應(yīng)用治療→監(jiān)測(cè)60CIC與多種自身免疫病相關(guān)↑輔助診斷疾病四、循環(huán)免役復(fù)合物

檢測(cè)及臨床意義CIC與多種自身免疫病相關(guān)↑四、循環(huán)免役復(fù)合物

檢測(cè)及臨611.區(qū)分自身免疫和自身免疫性疾??？2.自身免疫性疾病分為幾類？其代表性疾病有哪些？3.ANA有哪些種類？它們?cè)贏ID及SLE診斷中的價(jià)值如何？4.自身免疫病的發(fā)病機(jī)制是什么？5.自身免疫性疾病根據(jù)超敏反應(yīng)類型可分為幾類，代表性疾病有哪些？6.常見的免疫熒光法檢測(cè)ANA的核型有哪些？有何臨床意義？7.抗ENA抗體譜的可檢測(cè)自身抗體項(xiàng)目包括哪些？有何臨床意義？8.SLE和RA診斷的篩查試驗(yàn)和確診試驗(yàn)分別是什么？9.小血管炎相關(guān)的自身抗體和自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體檢測(cè)項(xiàng)目分別有哪些？10.自身免疫性疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)有哪些？思考題1.區(qū)分自身免疫和自身免疫性疾?。克伎碱}62

自身免疫性疾病是自身免疫應(yīng)答引起的疾病，其體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)自身成份的自身抗體或自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞。自身抗體是自身免疫性疾病診斷的重要標(biāo)志。IIF檢測(cè)的ANA結(jié)果及其熒光模型在自身免疫性疾病的臨床診斷與鑒別診斷中是重要的篩選試驗(yàn)，抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體。抗Sm抗體是SLE的血清標(biāo)志抗體；高滴度的抗RNP抗體是診斷MCTD的重要血清學(xué)依據(jù)；抗SSA/Ro抗體和抗SSB/La抗體與干燥綜合癥密切相關(guān)；抗Jo-1抗體常見于多發(fā)性肌炎；抗Scl-70抗體幾乎僅見于進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病。其他疾病相關(guān)的自身抗體還有：與小血管炎相關(guān)的抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體、抗磷脂抗體；與RA相關(guān)的RF、抗角蛋白抗體、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體；與自身免疫性肝病相關(guān)的抗平滑肌抗體、抗線粒體抗體等。小結(jié)自身免疫性疾病是自身免疫應(yīng)答引起的疾病，其體內(nèi)產(chǎn)63

常見自身免疫性疾病的自身抗體檢測(cè)

自身抗體（autoantibody）是指抗自身細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞表面和細(xì)胞外抗原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗體(譜)

分類:

臟器特異性自身抗體

臟器非特異性自身抗體

常見自身免疫性疾病的自身抗體檢測(cè)

自身抗體（autoa64自身免疫性疾病的重要標(biāo)志高滴度存在于自身免疫性疾病患者與疾病的活動(dòng)性相關(guān)參與免疫病理性損傷一、自身抗體的特性自身免疫性疾病的重要標(biāo)志一、自身抗體的特性65自身抗體免疫球蛋白補(bǔ)體淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子自身免疫性疾病的主要實(shí)驗(yàn)檢測(cè)自身抗體自身免疫性疾病的主要實(shí)驗(yàn)檢測(cè)66

1948年Haragraves等發(fā)現(xiàn)LE細(xì)胞現(xiàn)象

1957年Holborow等應(yīng)用IIF檢測(cè)ANA1961年Beck等發(fā)現(xiàn)ANA不同熒光染色模型

60–70年代IIF、ID、CIE應(yīng)用新的自身抗體

1979年Towbin等應(yīng)用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)自身抗體

80年代IB、RIP應(yīng)用蛋白多肽水平認(rèn)識(shí)自身抗原

1987年DNA基因重組技術(shù)開始應(yīng)用自身抗體研究近十年應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)自身抗體研究發(fā)展簡(jiǎn)史1948年Haragraves等發(fā)現(xiàn)LE細(xì)胞67抗核抗體（ANA）抗可提取性核抗原抗體（ENA）抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）類風(fēng)濕因子（RF）抗角蛋白抗體（AKA）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）抗心磷脂抗體（ACLA）常檢測(cè)的自身抗體抗核抗體（ANA）常檢測(cè)的自身抗體68標(biāo)志抗體相關(guān)疾病dsDNASLESmSLESSBSS著絲點(diǎn)抗體PSS（局限型）Scl-70抗體PSS（彌漫型）AKA、抗CCP抗體RAJo-1抗體PM/DM（進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病）高滴度RNP抗體MCTD肝腎微粒體抗體（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝炎平滑肌抗體（SMA）Ⅰ型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常見自身免疫性疾病的標(biāo)志抗體標(biāo)志抗體相關(guān)疾病dsDNASLESmSLESSBSS著絲點(diǎn)抗69間接免疫熒光法（IIF）ELISA免疫印跡法（Western-blot）酶免疫斑點(diǎn)法檢測(cè)自身抗體常用的方法間接免疫熒光法（IIF）檢測(cè)自身抗體常用的方法70

抗核抗體::以真核細(xì)胞（如HEp-2細(xì)胞、肝細(xì)胞）的各種細(xì)胞核成分為靶抗原所檢測(cè)的自身抗體的總稱。二、抗核抗體的檢測(cè)與應(yīng)用抗核抗體::以真核細(xì)胞（如HEp-2細(xì)胞、肝細(xì)胞）的各種71抗核抗體譜抗核抗體譜72以首先檢出該抗體的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗體等；以相關(guān)疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗體等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗體、抗線粒體抗體、抗核膜抗體、抗細(xì)胞漿抗體等；以抗原的化學(xué)名稱分類命名，如抗DNA、抗RNP、抗組蛋白抗體,抗核小體抗體等?？购丝贵w譜的分類和命名以首先檢出該抗體的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗體等；73間接免疫熒光法（indirectimmunofluorescence,IIF）酶免疫斑點(diǎn)法ELISA免疫印跡法

（Western-blot）

抗核抗體檢測(cè)方法間接免疫熒光法抗核抗體檢測(cè)方法74間接免疫熒光法示意圖HEp-2細(xì)胞肝組織切片熒光標(biāo)記抗體病人血清（待檢抗體）間接免疫熒光法示意圖HEp-2細(xì)胞熒光標(biāo)記抗體病人血清（待檢75

細(xì)胞核細(xì)胞漿細(xì)胞骨架細(xì)胞周期

均質(zhì)型核糖體型肌蛋白型中心體型斑點(diǎn)型線粒體型波形纖維蛋白型紡綞體型核仁型高爾基體型細(xì)胞角蛋白型紡綞絲型著絲點(diǎn)型溶酶體型原肌球蛋白型中間體型周邊型顆粒型紐帶蛋白型PCNA型核點(diǎn)型(dots)IIF檢測(cè)ANA熒光染色模型細(xì)胞核細(xì)胞漿細(xì)胞骨76斑點(diǎn)型（nRNP/Sm）

高滴度的抗U1-nRNP為MCTD的特征?？筍m抗體對(duì)SLE具有高度特異性。斑點(diǎn)型（SSA/SSB）抗SSA最常出現(xiàn)于SS及新生兒紅斑狼瘡（100%）?？筍SB抗體幾乎僅見于女性，可出現(xiàn)于SS和SLE。斑點(diǎn)型（nRNP/Sm）高滴度的抗U1-nRNP為MCTD77均質(zhì)型

抗dsDNA抗體抗組蛋白抗體(histone)抗ssDNA抗體抗核小體抗體(nucleosome)均質(zhì)型抗dsDNA抗體抗組蛋白抗體78周邊型

可見于膠原病、PBC、CAH等患者

周邊型79核點(diǎn)型（DOTS）

見于SLE、SS、PBC、風(fēng)濕病

抗著絲點(diǎn)型

PSS局限型標(biāo)志抗體核點(diǎn)型（DOTS）見于SLE、SS、PBC、風(fēng)80抗原纖維蛋白型

僅見于5%～10%的PSS，男性高于女性

抗RNA多聚酶Ⅰ型抗體

僅見于硬皮病患者，陽性率為4%抗原纖維蛋白型僅見于5%～10%的PSS，男性高于女性抗81抗PM-Scl（PM-1）抗體

見于重疊綜合征（多發(fā)性肌炎PM/皮肌炎DM/彌漫性PSS）

抗PM-Scl（PM-1）抗體見于重疊綜合征（多發(fā)性肌炎P82抗Scl-70型

PSS彌漫型的標(biāo)志抗體抗Scl-70型PSS彌漫型的標(biāo)志抗體83增殖細(xì)胞核抗原Ⅰ型（PCNA）

SLE特異性抗體，與發(fā)生彌漫性增殖性腎小球腎炎相關(guān)增殖細(xì)胞核抗原Ⅰ型84抗核糖體P蛋白（rib-P）抗體抗線粒體抗體（AMA）SLE標(biāo)志抗體原發(fā)性膽汁性肝硬化標(biāo)志抗體抗核糖體P蛋白（rib-P）抗體抗線粒體抗體（AMA）SLE85抗Jo-1抗體抗高爾基體抗體多發(fā)性肌炎（PM）標(biāo)志抗體偶見于SLE和SS抗Jo-1抗體抗高爾基體抗體多發(fā)性肌炎（PM）標(biāo)志抗體偶見于86抗肌動(dòng)蛋白抗體見于自身免疫性慢性活動(dòng)型肝炎

抗肌動(dòng)蛋白抗體見于自身免疫性慢性活動(dòng)型肝炎87抗雙鏈DNA抗體

抗dsDNA抗體與細(xì)胞核DNA（外圍區(qū)）脫氧核糖磷酸框架結(jié)合。

抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體。其抗體滴度與疾病的活動(dòng)程度有相關(guān)性，抗體滴度的動(dòng)態(tài)測(cè)定為監(jiān)控治療提供了有效的實(shí)驗(yàn)室手段?？闺p鏈DNA抗體抗雙鏈DNA抗體抗dsDNA抗體與細(xì)胞核DNA（外圍區(qū)）脫88檢測(cè)方法及應(yīng)用間接免疫熒光檢測(cè)，是目前國內(nèi)外臨床常規(guī)檢測(cè)抗dsDNA抗體最常用的方法。抗dsDNA抗體診斷SLE的特異性可達(dá)95%～100%，但其敏感性僅為30%～50%，因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷。檢測(cè)方法及應(yīng)用檢測(cè)方法及應(yīng)用間接免疫熒光檢測(cè)，是目前國內(nèi)外臨床常規(guī)檢測(cè)抗d89

抗dsDNA抗體SLE特異性抗體，與病情活動(dòng)度相關(guān)。

抗dsDNA抗體SLE特異性抗體，與病情活動(dòng)度相關(guān)。90抗核小體抗體

核小體（nucleosome）是真核生物細(xì)胞核染色質(zhì)的基本單位。凋亡細(xì)胞是核小體的重要來源，當(dāng)SLE患者的吞噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的清除能力受損或降低，導(dǎo)致核小體在患者體內(nèi)大量存積，激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗核小體抗體（Antinucleosomeantibody,AnuA）。

抗核小體抗體核小體（nucleosome）是真核91檢測(cè)及應(yīng)用AnuA的檢測(cè)通常采用ELISA檢測(cè)法。AnuA具有同抗ds-DNA抗體相同的診斷特異性，可達(dá)到95%，在系統(tǒng)性硬化（SSc）病中可有20%～50%低濃度陽性率，其他自身免疫性疾病中該抗體均為陰性。AnuA的表達(dá)與SLE病情活動(dòng)分?jǐn)?shù)相關(guān)。檢測(cè)及應(yīng)用檢測(cè)及應(yīng)用AnuA的檢測(cè)通常采用ELISA檢測(cè)法。檢測(cè)及應(yīng)92

抗ENA抗體譜:可提取核抗原抗體的總稱

臨床常檢測(cè)的抗ENA抗體譜主要包括：

抗Sm抗U1-RNP抗SSA抗SSB抗Jo-1抗Scl-70抗rib-P蛋白三、抗ENA抗體譜的檢測(cè)與應(yīng)用抗ENA抗體譜:可提取93抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗可提取性核抗原（ENA）抗體94

雙向免疫擴(kuò)散（ID）對(duì)流免疫電泳（CIE）免疫印跡法（Western-blot）

ELISA酶免疫斑點(diǎn)法ENA檢測(cè)方法雙向免疫擴(kuò)散（ID）ENA檢測(cè)方法95免疫印跡法

SDS電泳轉(zhuǎn)移電泳酶免疫檢測(cè)免疫印跡法免疫印跡法SDS電泳轉(zhuǎn)移96自身免疫性疾病及其免疫檢測(cè)課件97抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性抗體（20%~30%）抗nRNP抗體：MCTD95%~100%（高滴度）抗SSA抗體：PSS60%~75%，其它CTD抗SSB抗體：

PSS10%~40%，其它CTD抗Scl-70抗體：SSc25%~75%,標(biāo)記性抗體抗Jo-1抗體：PM/DM25%，標(biāo)記性抗體抗rRNP抗體：

SLE特異性抗體（10%~30%）抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性98抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（anti-neutrophilcytoplasmicautoantibodies,ANCA）是一組以人中性粒細(xì)胞胞漿成分為靶抗原，與臨床多種小血管炎性疾病密切相關(guān)的自身抗體，對(duì)系統(tǒng)性血管炎、炎癥性腸病等疾病的診斷與鑒別診斷具有重要意義。

四、與小血管炎相關(guān)的自身抗體檢測(cè)與應(yīng)用抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（anti-neutrophilcyt99

熒光染色型

靶抗原

胞漿型(cANCA)

蛋白酶3（PR3）殺菌/通透性增高蛋白（BPI）

核周型(pANCA)髓過氧化物酶（MPO）組織蛋白酶G（Cath-G）乳鐵蛋白（LF）白細(xì)胞彈性蛋白酶（HLE）

非典型型(aANCA)兼有兩種特性ANCA熒光染色型與靶抗原熒光染色型靶抗原

胞漿型(c100周邊型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（pANCA）主要見于炎癥性腸?。冃越Y(jié)腸炎和克羅恩?。┲苓呅涂怪行粤＜?xì)胞胞漿抗體主要見于炎癥性腸?。冃越Y(jié)腸炎和101胞漿型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)主要見于Wegener’s肉芽腫及微小多動(dòng)脈炎胞漿型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體主要見于Wegener’s肉芽腫及102

ANCA臨床應(yīng)用

髓過氧化物酶（MPO）與顯微鏡下多血管炎、壞死性新月體型腎小球腎炎、過敏性肉芽腫性血管炎相關(guān)殺菌/通透性增高蛋白（BPI）主要見于肺部炎癥性疾病并與長(zhǎng)期慢性綠膿桿菌感染有一定關(guān)系

蛋白酶3（PR3）與Wegener’s肉芽腫（WG）密切相關(guān)。僅cANCA診斷WG的特異性大于90%，聯(lián)合PR3可超過95%，活動(dòng)期幾乎100%陽性。

組織蛋白酶G(Cath-G)白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)乳鐵蛋白(LF)可見于SLE、IBD、PBC、PSC等

ANCA臨床應(yīng)用髓過氧化物酶（MPO）與顯微鏡下多血管103RA早期診斷相關(guān)自身抗體

抗角質(zhì)層蛋白抗體（AKA）：1979年Young等報(bào)告靶抗原：filaggrin（40KD）抗核周因子（APF):1964年Nienhuis等報(bào)告靶抗原：profilaggrin（37-41KD）及其降解產(chǎn)物抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（AFA）：1993年Simon等報(bào)告靶抗原：filaggrin（40KD）抗Sa抗體：1994年Despres等報(bào)告靶抗原:50/55KD非?；嚯模肟乖?瓜氨酸抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）：1998Schellekens五、與RA相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用RA早期診斷相關(guān)自身抗體五、與RA相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用104

類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor,RF）為抗變性IgGFc的自身抗體，主要是IgM型

致病機(jī)理：RF與體內(nèi)變性IgG結(jié)合形成免疫復(fù)合物，激活補(bǔ)體或被吞噬細(xì)胞吞噬，產(chǎn)生炎性介質(zhì)導(dǎo)致組織炎性損傷，使患者發(fā)生骨關(guān)節(jié)炎及血管炎。類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor,RF）為1051.膠乳顆粒凝集實(shí)驗(yàn)定性、半定量，敏感性和特異性不高，測(cè)定IgM-RF

2.速率散射比濁法（ARRAY、IMAGE）定量、準(zhǔn)確、快速，測(cè)定IgM-RF

3.ELISA定量、準(zhǔn)確，可測(cè)定不同類型的RF檢測(cè)方法1.膠乳顆粒凝集實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法106

（1）RF在RA、SLE、PSS等多種自身免疫性疾病患者中均可被檢出。疾病陽性率（%）RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25臨床應(yīng)用（1）RF在RA、SLE、PSS等多種自身免疫性疾病患者中107（2）RF滴度與RA患者臨床表現(xiàn)呈正相關(guān)，

IgM-RF效價(jià)>80IU/ml并伴有嚴(yán)重關(guān)節(jié)功能障礙時(shí)通常提示患者預(yù)后不良。

（3）IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)

癥狀密切相關(guān)，常伴隨IgM-RF同時(shí)出現(xiàn)，在正常人及非RA患者中很難檢出。

（4）IgA-RF與RA患者關(guān)節(jié)癥狀的嚴(yán)重程度及骨質(zhì)破壞有顯著相關(guān)性。（2）RF滴度與RA患者臨床表現(xiàn)呈正相關(guān)，

IgM-RF效價(jià)108AKA主要見于RA，陽性率36%~59%，特異性95%~99%，其出現(xiàn)可以先于臨床表現(xiàn)；高滴度可預(yù)示較嚴(yán)重的RA類型?？菇堑鞍卓贵w（AKA）AKA主要見于RA，陽性率36%~59%，特異性95%~99109常用方法：ELISA臨床意義：RA特異性自身抗體，敏感性65%~85%，特異性為94%~98%；高濃度抗CCP抗體是RA發(fā)生關(guān)節(jié)侵蝕的危險(xiǎn)因子之一，定量檢測(cè)有助于判斷預(yù)后?？弓h(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）常用方法：ELISA抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）110自身免疫性肝病是與自身免疫密切相關(guān)的特殊類型的肝病，其診斷和治療完全不同于一般的慢性病毒性肝炎

自身免疫性肝炎(AIH)

原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)

原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)

重疊綜合征六、與自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用自身免疫性肝病是與自身免疫密切相關(guān)的特殊類型的肝病，其診斷和111

在多種累及肝膽疾患的自身免疫疾病中，自身抗體在發(fā)病機(jī)制中起重要作用自身免疫性肝病具有相對(duì)特異性自身抗體譜自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷及鑒別診斷具有重要意義自身免疫性肝病與自身抗體在多種累及肝膽疾患的自身免疫疾病中，自身抗體在發(fā)病機(jī)制112自身免疫性肝病及其自身抗體譜疾病類型相關(guān)自身抗體

自身免疫性肝炎（AIH）

Ⅰ型AIHANA/ASMAⅡ型AIHanti-LKM-1anti-LC-1Ⅲ型AIHanti-SLA(可溶性肝抗原)

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）

AMA(M2/M4/M8/M9)anti-gp210，sp100ACA

原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）pANCA

自身免疫性肝病及其自身抗體譜自身免疫性肝病及其自身抗體譜疾病類型113

抗甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）抗促甲狀腺素受體抗體（TSH-RAb）七、與橋本甲狀腺炎相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用七、與橋本甲狀腺炎相關(guān)自身抗體的檢測(cè)與應(yīng)用114重癥肌無力（MG）自身抗體譜：

抗骨胳肌抗體（ASA）、抗乙酰膽堿受體(AchR)抗體多發(fā)性硬化（MS）自身抗體譜：

抗髓鞘堿性蛋白（MBP）抗體、抗腦苷脂抗體、抗神經(jīng)