文檔可自由編輯打印10/10文檔可自由編輯打印文檔可自由編輯打印中藥雞血藤的鎮(zhèn)痛實驗研究作者：許蓬娟，辛?xí)粤?，艾洪濱【摘要】采用小鼠熱板法、小鼠醋酸扭體法和小鼠熱水縮尾法觀察25%、50%和100%三種濃度的雞血藤水煎液的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)三種濃度的雞血藤水煎液均可使熱板所致小鼠舔足的痛閾值明顯提高（P＜0.05），痛閾提高率最高達112.17%；可使醋酸所致小鼠扭體潛伏期明顯延長（P＜0.01），扭體次數(shù)明顯減少（P＜0.01），抑制率最高達64.74%；可使熱水所致小鼠縮尾潛伏期明顯延長（P＜0.01），痛閾提高率最高達81.79%。從而證實雞血藤水煎液具有鎮(zhèn)痛作用?！娟P(guān)鍵詞】雞血藤；中藥；水煎液；鎮(zhèn)痛作用；小鼠Abstract：TheanalgesiceffectofwaterdecoctionofCaulisspatholobiwasobservedbymicewrithingtest,micetail-immersiontestandhot-platetest,withthreeconcentrations(25%,50%and100%).ItwasfoundthatgivenwaterdecoctionofCaulisspatholobi,mice′spainthresholdwasobviouslyenhanced(P＜0.05),themaximumofanalgesicratiowas112.17%;mice′swrithinglatencywasremarkablyprolonged(P＜0.01),writhingresponsesdecreasedmarkedly(P＜0.01),themaximumofinhibitoryratiowas67.74%;tail-curllatencyinmicetail-immersiontestwasobservablyprolonged(P＜0.01)andthemaximumofanalgesicratiowas81.79%.ItprovethatwaterdecoctionofCaulisspatholobihasanalgesiceffect.Keywords：Caulisspatholobi;Chinesetraditionalmedicine;Waterdecoction;Analgesiceffect;Mouse1引言雞血藤(Caulisspatholobi)為豆科密花豆屬植物密花豆的干燥藤莖，其性溫，味苦、甘，具有補血、活血、通絡(luò)之功效，用于治療月經(jīng)不調(diào)、血虛萎黃、舒筋活血、麻木癱瘓等癥［1］?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，雞血藤具有消炎，優(yōu)化血液系統(tǒng)［2-3］，提高免疫力［4］，降血壓，抗心律失常［5］，抗病毒活性［6］等作用。但關(guān)于其鎮(zhèn)痛作用的研究尚未見報道。本實驗采用3種動物疼痛模型對雞血藤水煎液的鎮(zhèn)痛作用進行了初步研究，為其進一步開發(fā)和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。2材料與方法2.1材料2.1.1雞血藤水煎液的制備將9g雞血藤用600ml蒸餾水浸泡12h，武火煮至沸騰，后用文火煮25min，倒出藥液并過濾；向藥渣中加200ml蒸餾水進行第二煎：武火煮至沸騰，后用文火煮25min，倒出藥液并過濾；向第二煎的藥渣中再加200ml蒸餾水進行第三煎：武火煮至沸騰，后用文火煮25min，將藥液倒出并過濾；合并三次所得的濾液濃縮至9ml，設(shè)此時濃度為100%，實驗時用生理鹽水稀釋。2.1.20.6%醋酸溶液由乙酸（冰醋酸）稀釋而成。本實驗所用試劑均為國產(chǎn)分析純。2.1.3實驗動物昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄兼用。2.1.4儀器電子天平；HS-4(B)型恒溫浴槽；RB-200智能熱板儀；君斯達運動秒表；KDM型調(diào)溫電熱套2.2實驗方法2.2.1熱板法疼痛模型的制備及給藥方案［7-8］選用雌性小鼠，將小鼠放在50℃的熱板上，測定每鼠的痛閾（即痛反應(yīng)潛伏期，指小鼠從足接觸熱板到舔足所用時間）。選擇痛反應(yīng)潛伏期在5～30s的小鼠為合格鼠，剔除過敏（＜5s）或反應(yīng)遲鈍（＞30s）的個體。24h后進行實驗，取合格小鼠32只，隨機分為4組，即生理鹽水組和3個濃度（25%、50%和100%）的給藥組，每組8只小鼠。將小鼠置于50℃的熱板上，首先測定4個實驗組的基礎(chǔ)痛閾，給藥前測兩次（間隔10min），取其平均值，然后給生理鹽水組用0.2ml生理鹽水灌胃，3組給藥組分別用0.2ml的25%、50%和100%的雞血藤水煎液灌胃，測定各組30min，60min，90min，120min痛閾的變化，超過60s無反應(yīng)者，痛閾按60s計。實驗數(shù)據(jù)用x±s表示，各濃度組與生理鹽水組間的比較采用t檢驗，各濃度組間用SPSS13.0分析軟件進行數(shù)據(jù)分析，痛閾提高的百分率=（給藥后的痛閾-基礎(chǔ)痛閾）/基礎(chǔ)痛閾×100%。2.2.2醋酸扭體法疼痛模型的制備及給藥方案［7,9］取32只小鼠，雌雄兼用，隨機分為4組，即生理鹽水組和3個濃度（25%、50%和100%）的給藥組，每組8只小鼠。生理鹽水組用0.2ml生理鹽水灌胃，3組給藥組分別用0.2ml的25%、50%和100%的雞血藤水煎液灌胃，60min后進行實驗，4組小鼠均腹腔注射0.6%的醋酸0.2ml，記錄各組小鼠的扭體潛伏期（即從注射醋酸至扭體的時間）及在15min內(nèi)扭體的次數(shù)，若15min內(nèi)未扭體，潛伏期按15min記錄。實驗數(shù)據(jù)用x±s表示，各濃度組與生理鹽水組之間的比較采用t檢驗，各濃度組間用SPSS13.0分析軟件進行數(shù)據(jù)分析，抑制率=（生理鹽水組扭體均數(shù)-給藥組扭體均數(shù)）/生理鹽水組扭體均數(shù)×100%。2.2.3熱水縮尾法疼痛模型的制備及給藥方案［7］取小鼠，雌雄兼用，將小鼠尾尖端3cm浸入48℃恒溫水浴鍋中，記錄其縮尾的潛伏期為痛閾指標(biāo)，測兩次（間隔10min），求其平均值，取潛伏期是5～30s的為合格鼠，剔除過敏（＜5s）或反應(yīng)遲鈍（＞30s）的個體。24h后進行實驗，取合格小鼠32只，隨機分為4組，即生理鹽水組和3個濃度（25%、50%和100%）的給藥組，每組8只小鼠。將小鼠尾尖端3cm浸入48℃的恒溫水浴鍋中，首先測定4個實驗組的基礎(chǔ)痛閾，給藥前測兩次（間隔10min），取其平均值，然后給生理鹽水組0.2ml的生理鹽水灌胃，3組給藥組分別用0.2ml的25%、50%和100%的雞血藤水煎液灌胃，測定各組30min，60min，90min，120min小鼠的縮尾潛伏期的變化，超過60s無反應(yīng)者，痛閾按60s計。數(shù)據(jù)用x±s表示，各濃度組與生理鹽水組之間的比較用t檢驗，各濃度組間用SPSS13.0分析軟件進行數(shù)據(jù)分析，痛閾提高率=（給藥后痛閾-基礎(chǔ)痛閾）/基礎(chǔ)痛閾×100%3實驗結(jié)果3.1對熱板所致的小鼠舔足的鎮(zhèn)痛作用由表1和表2可見，雞血藤水煎液可提高熱板實驗中小鼠舔足的痛閾且存在一定的劑量效應(yīng)（P＜0.05）。與生理鹽水相比，三個濃度組給藥后的痛閾明顯增長（P＜0.05）；與給藥前相比，各濃度組的痛閾提高率明顯。表1雞血藤水煎液在小鼠熱板實驗中的作用3.2對醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用由表3可見，雞血藤水煎液可使醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的潛伏期延長，15min內(nèi)扭體次數(shù)減少。與生理鹽水組相比，三濃度組的潛伏期顯著增長，15min內(nèi)扭體次數(shù)顯著減少，且P＜0.01；同時三濃度組的抑制率明顯。表3雞血藤水煎液在小鼠扭體反應(yīng)實驗中的作用(n=8,x±s)Table3EffectsofCaulisspatholobionturningbodyinducedbyaceticacidinmice(n=8,x±s)實驗組潛伏期/s扭體次數(shù)/15min抑制率（%）生理鹽水組185.50±31.0843.25±1.5325%雞血藤水煎液361.82±81.75*18.75±3.38**56.6550%雞血藤水煎液347.14±41.31**19.62±4.60**54.64100%雞血藤水煎液411.03±44.75**15.25±3.13**64.74*P＜0.05、**P＜0.01與生理鹽水組相比3.3對熱水所致的小鼠縮尾的鎮(zhèn)痛作用由表4和表5可見，雞血藤水煎液可提高熱水縮尾實驗中小鼠縮尾的痛閾，至120min痛閾提高率增加，即鎮(zhèn)痛持續(xù)時間長。與生理鹽水組相比，三濃度組給藥后的痛閾明顯延長（P＜0.05），其中，表4雞血藤水煎液在小鼠熱水縮尾實驗中的作用表5雞血藤水煎液在小鼠熱水縮尾實驗中的痛閾提高率25%和50%濃度組P＜0.01，即差異具有極顯著性意義；與給藥前相比，三濃度組的痛閾提高率明顯。4討論疼痛是由于痛覺感受器受到刺激而產(chǎn)生興奮，沖動經(jīng)傳入神經(jīng)纖維到達大腦某些神經(jīng)細(xì)胞，或中樞通路的某一水平受損時所產(chǎn)生的一種不舒適的感覺［10］。在生活中疼痛常給患者帶來生理和心理的折磨，它能改變?nèi)说木?心理狀態(tài)，使情緒極不穩(wěn)定。同時會打亂機體內(nèi)分泌系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的正常運行，使胃腸功能紊亂，降低人們的生活質(zhì)量［11］。因此緩解和減輕疼痛成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究者廣泛關(guān)注的問題。本研究采用了熱板法，醋酸扭體法和熱水縮尾法三種疼痛模型來研究雞血藤的鎮(zhèn)痛作用。雞血藤化學(xué)成分復(fù)雜，現(xiàn)已確定含有芒柄花苷、櫻黃素、兒茶素、胡蘿卜苷等近20種成分［12］，大量實驗證明雞血藤能擴張血管、抗病毒活性、降血脂［13］，臨床上用以治療再生障礙性貧血［14］、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎［15］等，但在鎮(zhèn)痛方面尚未見相關(guān)報道。本研究采用三種小鼠疼痛模型對雞血藤鎮(zhèn)痛作用進行初步研究，結(jié)果表明雞血藤有很好的鎮(zhèn)痛作用，且其發(fā)揮藥效時間短，作用持續(xù)時間長，存在一定的劑量效應(yīng)。藥理學(xué)的有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，雞血藤含有白芷內(nèi)酯和某些黃酮類（具體含量未知），其中白芷內(nèi)酯有中樞抑制、解痙作用及毒性［16］，黃酮類有鎮(zhèn)痛作用，分析雞血藤鎮(zhèn)痛作用可能與此兩種物質(zhì)有關(guān)，作用位置可能在中樞，但不排除還有其它物質(zhì)參與作用。本實驗只對雞血藤水煎液的鎮(zhèn)痛作用進行了初步的研究，采用水煎液形式是由于水煎液成分與臨床用藥相似，但成分復(fù)雜，較難掌握劑量，在以后的工作中應(yīng)對雞血藤各化學(xué)成分進行進一步的鑒定、分離和純化，確定雞血藤鎮(zhèn)痛的有效成分，進一步探討其鎮(zhèn)痛機制及其在體內(nèi)的代謝規(guī)律，為雞血藤的進一步開發(fā)和臨床應(yīng)用提供更多的理論依據(jù)。【參考文獻】［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:151.［2］羅霞,陳冬輝,余夢瑤，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