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第二節(jié)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖與變異第一頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日思考:1、簡(jiǎn)述革蘭陽(yáng)性菌與革蘭陰性菌的主要區(qū)別。2、細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官?3、芽孢的意義?第二頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日學(xué)習(xí)目標(biāo)1、掌握熱原質(zhì)的概念;2、掌握細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件;3、掌握細(xì)菌的繁殖方式:二分裂方式;4、掌握細(xì)菌合成代謝產(chǎn)物及意義;5、熟悉細(xì)菌的人工培養(yǎng).第三頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日一、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖(一)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件1、充足的營(yíng)養(yǎng):
水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、必要的生長(zhǎng)因子。第四頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日⑴水生物所必需的,占細(xì)菌總量的80-90%
,細(xì)菌的吸收和代謝均需有水才能進(jìn)行。⑵碳源合成菌體成分,作為獲得能量的主要來源。第五頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日⑶氮源有機(jī)氮化物如氨基酸、蛋白胨等;菌體的原料。⑷無機(jī)鹽構(gòu)成菌體的成分;作為酶的組成部分,維持酶的活性;調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外的滲透壓。⑸生長(zhǎng)因子細(xì)菌生長(zhǎng)需要但自身不能合成的有機(jī)化合物。如:維生素B、嘌呤、嘧啶、氨基酸等。第六頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日2、適宜的溫度:
寄生菌以人體溫度(37℃)適宜,個(gè)別嗜冷(鼠疫桿菌28~
30℃
)或嗜熱(嗜熱菌50~
60℃
)
3、合適的酸堿度:
大多數(shù)是中性(PH7.2~7.6),個(gè)別強(qiáng)堿性(霍亂桿菌PH8.4~9.2)或弱酸性(結(jié)核桿菌PH5.6~6.8)。第七頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日4、必要的氣體環(huán)境:
氧氣和二氧化碳(1)專性需氧菌:結(jié)核分枝桿菌(2)專性厭氧菌:破傷風(fēng)芽胞梭菌(3)兼性厭氧菌:葡萄球菌(大多數(shù))(4)微需氧菌:幽門螺桿菌、空腸彎曲菌
第八頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日(二)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖方式和速度1、繁殖方式:
以二分裂方式進(jìn)行無性繁殖。2、繁殖速度(代時(shí)):
20~30分鐘分裂一次;但結(jié)核桿菌18~20小時(shí)才分裂一次。
第九頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日
第十頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日(三)細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)基
人工配制的適合細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。1.按物理性狀分:
⑴液體培養(yǎng)基:
不加凝固劑,主要用于增菌培養(yǎng)和鑒定細(xì)菌。⑵半固體培養(yǎng)基:
液體培養(yǎng)基中加入0.2%-0.5%的瓊脂,用于觀察細(xì)菌動(dòng)力、鑒定菌種和保存菌種。⑶固體培養(yǎng)基:
液體培養(yǎng)基中加入2%-5%的瓊脂,用于微生物分離、鑒定及保存菌種等。第十一頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日液體培養(yǎng)基+2-5%瓊脂固體培養(yǎng)基:細(xì)菌的分離培養(yǎng)0.2-0.5%瓊脂半固體培養(yǎng)基:用于大量繁殖細(xì)菌+動(dòng)力檢查第十二頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日2.按用途分:⑴基礎(chǔ)培養(yǎng)基:如肉湯培養(yǎng)基和普通瓊脂培養(yǎng)基。
⑵營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基:加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如血平板
⑶選擇培養(yǎng)基:加入某些化學(xué)物質(zhì),抑制雜菌生長(zhǎng),如SS瓊脂培養(yǎng)基。⑷鑒別培養(yǎng)基:用于培養(yǎng)和鑒別細(xì)菌。如糖發(fā)酵管等。
⑸厭氧培養(yǎng)基:用于厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別,如皰肉培養(yǎng)基。第十三頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象P91、液體培養(yǎng)基:
混濁生長(zhǎng)、沉淀生長(zhǎng)、菌膜生長(zhǎng)
第十四頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況
多數(shù)呈均勻混濁狀態(tài)少數(shù)鏈狀菌呈沉淀生長(zhǎng)專性需氧菌則在表面生長(zhǎng),常形成菌膜菌膜第十五頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日2、半固體培養(yǎng)基:檢查細(xì)菌動(dòng)力有鞭毛的細(xì)菌:可擴(kuò)散,呈放射狀或云霧狀無鞭毛的細(xì)菌:沿穿刺線生長(zhǎng)第十六頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況:常用于觀察細(xì)菌動(dòng)力
有鞭毛的細(xì)菌可沿穿刺線呈羽毛狀或云霧狀混濁生長(zhǎng)無鞭毛細(xì)菌則只能沿穿刺線呈明顯的線狀生長(zhǎng)第十七頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日3、固體培養(yǎng)基:
形成菌落。菌落:?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌分裂繁殖后形成的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。菌苔:多個(gè)菌落融合成片。純培養(yǎng):挑取一個(gè)菌落轉(zhuǎn)種到另一個(gè)培養(yǎng)基中。第十八頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況:
劃線接種18-24小時(shí)培養(yǎng)后,可見菌落第十九頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日第二十頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日細(xì)菌在各種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)現(xiàn)象第二十一頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的意義1.細(xì)菌的鑒別與研究2.細(xì)菌性疾病的診斷和治療3.生物制品的制備4.細(xì)菌毒力分析及細(xì)菌學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)第二十二頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物及意義P10(一)★細(xì)菌合成的代謝產(chǎn)物:毒素和侵襲性的酶熱原質(zhì)(引起發(fā)熱反應(yīng))致病抗生素維生素治療色素細(xì)菌素鑒別第二十三頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日
1、
熱原質(zhì):又稱致熱原。
概念:是細(xì)菌合成的一種注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱的物質(zhì)。熱源質(zhì)體溫上升第二十四頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日
特點(diǎn):耐高溫。消除方法:250℃高溫干烤;用吸附劑和特殊石棉濾板吸附液體中的熱原質(zhì);蒸餾法除之。蒸餾最好!無菌操作!第二十五頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日
2、毒素:包括內(nèi)毒素和外毒素,是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。內(nèi)毒素:G-菌細(xì)胞壁的脂多糖,菌體死亡崩解后游離出來;外毒素:多數(shù)G+菌和少數(shù)G-菌在生長(zhǎng)繁殖過程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì),毒性強(qiáng)于內(nèi)毒素。第二十六頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日侵襲性酶:
亦為細(xì)菌重要的致病物質(zhì),能損傷機(jī)體組織,促使細(xì)菌的侵襲和擴(kuò)散。第二十七頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日3、色素
一般在營(yíng)養(yǎng)豐富、氧氣充足、溫度適宜的條件下產(chǎn)生,功能尚不清楚,有助于鑒別細(xì)菌。有兩類:水溶性色素和脂溶性色素金黃色紅色第二十八頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日白色檸檬色第二十九頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日
二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物及意義(二)細(xì)菌的分解代謝產(chǎn)物1.糖分解代謝產(chǎn)物糖被細(xì)菌利用后可產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步分解后產(chǎn)生各類酸、酮、醇及氣體,不同的細(xì)菌產(chǎn)生的產(chǎn)物不同可用于鑒別細(xì)菌。如糖發(fā)酵試驗(yàn)。2.蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物細(xì)菌分解蛋白質(zhì)和氨基酸的能力不同,產(chǎn)物不同,基于這特點(diǎn)來鑒別細(xì)菌。如靛基質(zhì)試驗(yàn);硫化氫試驗(yàn)。
第三十頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日三、細(xì)菌的遺傳與變異1.細(xì)菌的遺傳
概念:細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下,親代將其生物學(xué)性狀傳給子代,而且代代相傳,稱為遺傳。意義:保持種屬的相對(duì)穩(wěn)定。2.細(xì)菌的變異
概念:子代與親代或子代與子代之間出現(xiàn)差異,稱為變異。意義:不斷形成新的變種或新種。
第三十一頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日(一)細(xì)菌變異的現(xiàn)象P11
1.形態(tài)結(jié)構(gòu)的變異2.毒力變異3.耐藥性變異4.菌落免疫第三十二頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日特殊結(jié)構(gòu)的變異
42℃~43℃
炭疽桿菌失去形成芽胞能力,毒性降低
10~20天
基本結(jié)構(gòu)的變異
青霉素、溶菌酶
正常形態(tài)細(xì)菌
L型變異
(失去細(xì)胞壁)第三十三頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日形態(tài)變異
3%~6%食鹽
鼠疫耶爾森菌多形性
第三十四頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日毒力變異增強(qiáng)
β棒狀噬菌體
白喉棒狀桿菌
獲得白喉毒素
減弱
膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基
結(jié)核分枝桿菌卡介苗
13年230代第三十五頁(yè),共三十七頁(yè),2022年,8月28日耐藥性變異細(xì)菌對(duì)某種抗菌藥物由敏感變成耐藥的變異稱為耐藥性變異。(抗生素濫用)有些細(xì)菌還同時(shí)耐受多種抗菌藥物,即多重耐藥性,甚至產(chǎn)生藥物依賴性。
含鏈霉素培基
痢疾桿菌依鏈
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