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文檔簡介
乙病核擴熒檢12
目:DNA適范:HBV的熒光3
負人
4
原,PCR反應DNA(Taq(dNTPs)PCR體外擴增毒cDNA。56
性參<3貝ml。標要:(1)本型(2)本集(標儲和輸:室8小時72-20℃保存期6(標拒狀:細菌7
容和加類:無菌
8
所設:ABIGeneAmp5700、4℃、-20℃生物安全柜、紫外燈9
試:DNA提取液(500μ)2管;反應管;陽性定量質控標準品(8
mll/管)1(250μl/管1管。10校程(量溯性:11程步::11.1標本處:取血清標本40μl,提取液打勻提取誤差不超過1至置8~12小時心5分鐘,取上清2μ做PCR反11.2標品釋處8基因拷貝/ml)6000rpm10取4支滅新0.5ml45μl陰性質控品,依次標示為107~1010管5μ至10
7
μ至106
至10
4
-20分各40μ量DNA
擴增HBV-PCR反應管品2μl6000rpm1分鐘將各量PCR儀器按陽性并標記熒光:ABI5700的循:93℃→分鐘按93℃45秒55℃做10個按93℃55℃45秒做30個最11.4結果分析件設:的條件節(jié)baseline的start(2~4stop7~9)以及Threshold使curve窗口下的標準曲線達到佳(數于之于|r|最后到Qty12質控程:r︱≧0.97(correlation108
10
4
貝/ml的陽性±300%。13干(乳血溶、紅血和叉應
14生參區(qū):正?;?基因拷貝ml。15患檢結的報區(qū):Ct值<40,實驗樣本的數ml)=M;Ct值40,樣品HBV含<×
3
/ml。16警/
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