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血漿凝血酶原時間教學(xué)培訓(xùn)課件目錄CONTENT01方法及操作02質(zhì)量保證報(bào)告方式03臨床意義05參考區(qū)間04凝血酶原時間(PT)是在體外模擬體內(nèi)外源性凝血的全部條件,測定血漿凝固所需的時間。PT是常用的外源性凝血途徑和共同凝血途徑的篩檢指標(biāo)之一。概述01方法及操作手工法1、原理:采用Quick一步凝固法。37℃條件下,在待檢血漿中加入足量的組織凝血活酶(含組織因子、磷脂)和適量的鈣離子,通過激活因子Ⅶ而啟動外源性凝血途徑,使乏血小板血漿凝固。從加鈣離子到血漿開始凝固所需的時間即為凝血酶原時間。2、簡要操作:采血并分離血漿→加血漿與凝血活酶試劑(1︰2)→混勻并立即計(jì)時→傾斜試管,觀察結(jié)果。01方法及操作7、抗凝劑血液標(biāo)本采集和處理、儀器和試劑、檢測溫度等各種因素都對PT的檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。因此,全面質(zhì)量控制對保證PT檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性十分重要。1.病人準(zhǔn)備停用影響止凝血功能的藥物至少1周。2.采血要求使用真空采血管、硅化玻璃管或塑料管采血,止血帶使用時間不超過1分鐘,采血要順利,加血液至抗凝管后,應(yīng)立即輕輕地顛倒混勻5~8次,避免標(biāo)本溶血和凝固。創(chuàng)傷性或留置導(dǎo)管的血標(biāo)本、溶血或凝塊形成的標(biāo)本、輸液時同側(cè)采集的標(biāo)本均不宜做PT等止凝血試驗(yàn)。ICSH推薦的抗凝劑為109mmol/L枸櫞酸鈉,其與血液的容積比為1∶9。3.標(biāo)本運(yùn)送及時送檢,因?yàn)檠弘x體后,凝血因子逐漸消耗,隨著標(biāo)本存放時間延長,消耗加快。02質(zhì)量保證7、抗凝劑4.標(biāo)本離心按規(guī)定離心力與離心時間要求,及時分離標(biāo)本,獲得乏血小板血漿。5.組織凝血活酶(thromboplastin)的質(zhì)量PT的靈敏度依賴于組織凝血活酶的質(zhì)量。組織凝血活酶來自組織抽提物(含豐富的凝血活酶、組織因子和磷脂);現(xiàn)在也用純化的重組組織因子(recombinant-tissuefactor,r-TF)加磷脂作試劑。由于組織凝血活酶的來源和制備方法不同,PT測定結(jié)果差異較大,可比性較差,特別影響對口服抗凝劑治療效果的監(jiān)測。因此,必須使用標(biāo)有國際敏感指數(shù)(internationalsensitivityindex,ISI)的PT試劑。02質(zhì)量保證7、抗凝劑6.為了盡可能地消除不同組織凝血活酶靈敏度的差異對PT測定結(jié)果的影響,1985年,ICSH等發(fā)布了在口服抗凝劑監(jiān)測中,推薦使用INR報(bào)告PT結(jié)果的文件。INR計(jì)算公式為:INR=(病人PT值/正常人平均PT值)ISI。WHO等國際權(quán)威機(jī)構(gòu)要求,每次(每批)PT測定的正常對照值,必須用至少來自20名以上男女各半的正常人混合血漿所測定的結(jié)果。目前,商品化參考血漿常用100名正常男女各半的混合血漿作為正常對照用的標(biāo)準(zhǔn)血漿。02質(zhì)量保證7、抗凝劑7.測定試劑、標(biāo)本溫浴時間應(yīng)控制在3~10分鐘內(nèi),測定溫度應(yīng)控制在(37±1)℃,準(zhǔn)確判斷血漿凝固終點(diǎn)(纖維蛋白形成)是PT測定結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。8.結(jié)果審核與復(fù)查結(jié)果審核應(yīng)該結(jié)合標(biāo)本質(zhì)量和臨床診斷等作出綜合判斷,才能發(fā)出正確的檢驗(yàn)報(bào)告。重視異常結(jié)果的復(fù)查,必要時重新采集標(biāo)本進(jìn)行復(fù)查,并加強(qiáng)與臨床溝通,及時掌握反饋信息,持續(xù)改進(jìn)檢驗(yàn)質(zhì)量。02質(zhì)量保證7、抗凝劑PT(秒)、國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(internationalnormalizationratio,INR)、凝血酶原比率(prothrombinrate,PTR)、凝血酶原活動度(prothrombinactivity,PTA。03報(bào)告方式7、抗凝劑每個實(shí)驗(yàn)室必須建立相應(yīng)的參考區(qū)間。①PT:成人11~13秒,超過正常對照值3秒為異常。②INR:依ISI不同而異。③PTR:成人0.85~1.15。④PTA:70%~130%。04參考區(qū)間7、抗凝劑1.PT延長①先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏癥和低(無)纖維蛋白原血癥。②獲得性凝血因子缺乏,如嚴(yán)重肝病、維生素K缺乏癥(影響凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ合成)、原發(fā)纖溶亢進(jìn)癥、DIC等。
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