第三節(jié)酶催化反應(yīng)的動力學(xué)復(fù)習(xí)題問：略新授：Ⅰ酶反應(yīng)動力學(xué)的概念：研究酶促反應(yīng)速度及其影響因素（哪些因素影響、如何影響）稱酶促反應(yīng)動力學(xué)。Ⅱ酶反應(yīng)動力學(xué)的影響因素：酶濃度、底物濃度、pH、溫度、抑制劑及激活劑等。一、底物濃度對反應(yīng)速度的影響

當(dāng)其它條件在最適、不變情況下（課本P33圖3－5）

①[S]較低時,v與S呈正比,即呈直線關(guān)系。

②當(dāng)[S]增加至一定程度時,v隨[S]增加而提高，不呈直線關(guān)系。

③[S]再增加，v達(dá)到最大Vmax。

（一）米－曼氏方程式：⒈概念：酶促反應(yīng)速度與底物濃度關(guān)系的數(shù)學(xué)方程式。⒉方程式：說明：⑴Vmax為最大反應(yīng)速度，［S］為底物濃度，KM為米氏常數(shù)⑵v是在不同［S］時的反應(yīng)速度⑶當(dāng)?shù)孜餄舛群艿蜁r，V＝Vmax*［S］／KM，反應(yīng)速度與底物成正比；反之，v≌Vmax，反應(yīng)速度達(dá)最大；再增加底物濃度，反應(yīng)速度不受影響。⒊KM概念：反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時的作用物濃度。述：KM是酶的特征性常數(shù)，表示酶與作用物的親和力大小。KM越大，酶與作用物的親和力越小。

同工酶的KM不同。

⒋米氏方程應(yīng)用

⑴酶的鑒定——根據(jù)KM相同與否判定是否同一個酶⑵酶的純化——根據(jù)KM穩(wěn)定與否判定酶是否被純化

⑶計算欲使反應(yīng)速度達(dá)到某一特定反應(yīng)速度時的合理[S]（二）Km的意義⒈KM值等于酶促反應(yīng)速度達(dá)到Vmax一半時的作用物濃度⒉KM值可反映酶對底物的親和力，兩者呈反比⒊KM值是酶的特征性常數(shù)之一，只與酶的結(jié)構(gòu)、底物和反應(yīng)環(huán)境（如溫度、pH、離子強(qiáng)度）有關(guān)，與酶濃度無關(guān)。

二、酶濃度對反應(yīng)速度的影響（課本P33圖3－6）述：在酶促反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)[S]足夠大時，v∝[E]。三、溫度對反應(yīng)速度的影響

⒈兩者聯(lián)系：溫度對酶促反應(yīng)的具有雙重影響。升高溫度可加快酶促反應(yīng)速度，同時也增加酶變性的機(jī)會。述：溫度升高到60℃以上時，大多數(shù)酶開始變性；80⒉最適溫度⑴概念：酶催化活性最大時的環(huán)境溫度述：人體組織中酶的最適溫度一般在37－40⑵影響因素：反應(yīng)時間⑶相互關(guān)系①酶可以在較短的時間內(nèi)耐受較高的溫度；相反，延長反應(yīng)時間，最適溫度變降低。②環(huán)境溫度高于最適溫度時，反應(yīng)速度則因酶的變性而降低。③低溫能降低酶活性，但一般不破壞酶；溫度回升后，酶又可以恢復(fù)活性。⒊臨床應(yīng)用：低溫麻醉；低溫保存菌種；酶制劑的保存四、pH對反應(yīng)速度的影響⒈原因：在不同的pH值條件下，酶分子的許多極性基團(tuán)呈不同的解離狀態(tài)，而酶活性中心的必需基團(tuán)往往僅在某一解離狀態(tài)時才最易同底物結(jié)合或具有最大的催化作用。所以，pH值的改變對酶的催化作用影響很大。⒉最適pH⑴概念：酶催化活性最大時的環(huán)境pH述：胃蛋白酶的最適pH1.5，精氨酸酶則為9.0。⑵影響因素：底物濃度、緩沖液的種類與濃度、酶的純度等⑶相互關(guān)系①溶液的pH值高于或低于最適pH時，酶活性降低；②遠(yuǎn)離最適pH時，會導(dǎo)致酶的變性失活。述：在測定酶的活性時，應(yīng)選用適宜的緩沖液以保持酶活性的相對恒定。

五、抑制劑（I）對反應(yīng)速度的影響Ⅰ概念：凡能降低酶的活性而本身不引起酶蛋白變性的物質(zhì)Ⅱ種類：見下表

（一）

不可逆性抑制

⒈概念：其抑制劑通常與酶活性中心上的必需基團(tuán)以共價鍵相結(jié)合而使酶失活的抑制作用。⒉此抑制劑不可用透析法去除⒊舉例：有機(jī)磷農(nóng)藥中毒如605、敵百蟲、DDV等。述：這類抑制劑與酶活性中心的內(nèi)、外的必需基團(tuán)形成牢固不可逆的共價結(jié)合。重金屬和砷制劑與巰基酶結(jié)合，故可用BAL（二巰基丙醇）急救。（二）可逆性抑制Ⅰ概念：其抑制劑通過非共價鍵與酶和（或）酶－底物復(fù)合物可逆性結(jié)合而使酶活性降低或消失的抑制作用。Ⅱ抑制劑去除方法：透析法或超濾法

Ⅲ種類⒈競爭性抑制⑴概念：有些抑制劑與酶的底物結(jié)構(gòu)相似，可與底物競爭酶活性中心，從而阻礙酶與底物結(jié)合成中間產(chǎn)物的抑制作用。⑵特點：①I與S結(jié)構(gòu)相似，與S競爭結(jié)合E的同一部位。

②抑制程度取決于[I]/[S]值及I與E的的親和力。⑶動力學(xué)特點：Vmax不變，Km增加⑷舉例：丙二酸（P35）⑸應(yīng)用：用以闡明某些藥物的作用機(jī)制（P35）如磺胺類藥物⒉非競爭性抑制⑴概念：底物與抑制劑之間無競爭關(guān)系，但酶－底物－抑制劑復(fù)合物不能進(jìn)一步釋放出產(chǎn)物的抑制作用。

⑵特點：①I與S結(jié)構(gòu)不相似，結(jié)合酶部位與S不同，與酶活性中心外必需基團(tuán)結(jié)合，引起酶構(gòu)象改變。②抑制程度只與[I]有關(guān)。⑶動力學(xué)特點：Vmax減小，Km不變⑷舉例：哇巴因

六、激活劑對酶反應(yīng)速度的影響

⒈概念：使酶從無活性變?yōu)橛谢钚缘幕蚴姑富钚栽黾拥奈镔|(zhì)述：如金屬離子、氯離子等，它們都能使酶活性增強(qiáng)。⒉種類⑴必需激活劑①概念：對酶促反應(yīng)不可缺少的大多數(shù)金屬離子激活劑②舉例：Mg2+⑵非必需激活劑

①概念：不存在時，酶仍有一定催化活性的某些激活劑②舉例：Cl-課外作業(yè)：一、名解：酶的最適溫度；酶的最適pH；不可逆性抑制；可逆性抑制；競爭性抑制二、簡