高三生物二輪專題訓(xùn)練專題生物技術(shù)與工程發(fā)酵工程一、單項(xiàng)選擇題1.(2022·泰州四模)發(fā)酵食品在我國傳統(tǒng)飲食文化中占有重要的地位。某同學(xué)選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋。下列相關(guān)敘述正確的是()A.果酒制作時(shí)，應(yīng)選擇新鮮葡萄除去枝梗后再?zèng)_洗、榨汁B.果酒發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量呈現(xiàn)越來越多的現(xiàn)象C.果醋制作時(shí)，可取米酒敞口靜置后表面長出的菌膜做菌種D.果醋發(fā)酵時(shí)，為防止雜菌污染不能擰松發(fā)酵瓶蓋2.(2022·南通四模)參與黃豆醬發(fā)酵的主要微生物有霉菌、酵母菌等。下面是傳統(tǒng)黃豆醬的制作過程。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()①黃豆蒸煮瀝干，裹上面粉→②均勻鋪攤，用茅草等覆蓋后置于不通風(fēng)、陰涼處，7d后長滿醬黃→③將醬黃暴曬后加鹽水浸透→④曬醬，后發(fā)酵成熟A.過程①中黃豆表面包裹的面粉，可為微生物生長提供碳源和能源B.過程②中將黃豆置于不通風(fēng)環(huán)境中，目的是獲得菌種并利于其生長C.過程③中加入的鹽水具有滅菌作用，因此加入的鹽水不必煮開D.過程④中耐鹽酵母產(chǎn)生酒精等物質(zhì)，有利于形成特定風(fēng)味和香氣3.(2022·連云港一模)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)可用于制作多種食品。下列說法正確的是()A.在果酒發(fā)酵時(shí)，被醋酸菌等污染后，可直接進(jìn)行果醋發(fā)酵B.酸奶和果醋的制作過程需要持續(xù)的排出氣體，防止發(fā)酵瓶中氣壓過大C.泡菜、果酒、果醋制作過程中，菌種產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)D.為使發(fā)酵后達(dá)到所需酒精的含量，可以適當(dāng)提高果汁糖度4.(2022·常州期末)下圖為利用玉米秸稈制備綠色能源——酒精的工藝流程圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.對(duì)玉米秸稈進(jìn)行預(yù)處理的酶也可從腐木上的霉菌中提取B.圖中培養(yǎng)產(chǎn)酶微生物的培養(yǎng)基中的碳源一般為葡萄糖C.在糖液發(fā)酵過程中，發(fā)酵裝置一般應(yīng)嚴(yán)格密封處理D.發(fā)酵產(chǎn)生的酒精可與酸性重鉻酸鉀溶液反應(yīng)變成灰綠色5.(2022·泰州四模)下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，正確的是()A.接種環(huán)在接種前后都要用酒精燈火焰進(jìn)行灼燒B.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.倒平板后需晃動(dòng)數(shù)次，以保證培養(yǎng)基的表面平整D.倒好的平板應(yīng)立即使用，以防止培養(yǎng)基的表面干燥6.(2022·南京三模)培養(yǎng)基是人們按照培養(yǎng)對(duì)象對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求配制的營養(yǎng)基質(zhì)。下列有關(guān)培養(yǎng)基的配制和使用的敘述，正確的是()A.微生物培養(yǎng)基的組成成分必須含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽B.用動(dòng)、植物的體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，均可用固體培養(yǎng)基C.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染可接種蒸餾水來培養(yǎng)檢測(cè)D.使用過的微生物培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄7.(2022·南通海安學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè))牙刷在使用后殘留大量的細(xì)菌，科研人員比較了2.5%的碳酸氫鈉和沸水消毒牙刷的效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。相關(guān)敘述正確的是()A.培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌液濃度應(yīng)控制在30～300個(gè)·mL－1C.將接種后的培養(yǎng)基倒置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24hD.建議定期使用2.5%碳酸氫鈉溶液對(duì)牙刷進(jìn)行消毒8.(2022·南京、鹽城一模)野生型傷寒沙門氏菌(his＋)可合成組氨酸，某種突變體喪失了這種能力，必須在添加組氨酸的培養(yǎng)基上才能生長，稱為組氨酸營養(yǎng)缺陷型(his)，下圖甲、乙為培養(yǎng)傷寒沙門氏菌時(shí)兩種不同的接種方法。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()甲乙A.圖中所用培養(yǎng)基均為固體培養(yǎng)基B.圖甲所示接種方法可用于對(duì)微生物的分離純化C.圖乙所示接種方法可用于對(duì)微生物的分離和計(jì)數(shù)D.將接觸過某藥物的his菌株接種在含有組氨酸的培養(yǎng)基上能長出菌落，說明該藥物有致突變作用9.(2022·鹽城時(shí)楊中學(xué)學(xué)情檢測(cè))利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是獲取高性能的纖維素酶，某科學(xué)研究小組將產(chǎn)生纖維素酶的菌株，通過誘變處理獲得能產(chǎn)生高性能纖維素酶的新菌株。下列敘述不正確的是()A.操作前用70%左右的酒精對(duì)雙手進(jìn)行消毒處理B.圖中1號(hào)培養(yǎng)基中所顯示的接種和計(jì)數(shù)的方法是平板劃線法C.用1號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)是為了獲得單個(gè)菌落D.由于誘變后的菌株突變方向是不定向的，因此需要用2號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行篩選二、多項(xiàng)選擇題10.(2022·南通如皋一模)紅酸湯是苗族的傳統(tǒng)食品，它顏色鮮紅、氣味清香、味道酸爽，其制作過程類似于泡菜的制作。下列是以番茄和辣椒為原料的紅酸湯制作流程圖。相關(guān)敘述中正確的是()A.紅酸湯制作過程中用到的微生物主要是乳酸菌B.裝壇時(shí)加入成品紅酸湯是為了增加發(fā)酵菌種的數(shù)量C.裝壇時(shí)不裝滿的原因是為了促進(jìn)微生物繁殖D.紅酸湯的制作中隨著發(fā)酵時(shí)間延長，亞硝酸鹽的含量一直增加11.(2022·連云港一模)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，正確的是()A.以尿素為唯一氮源且含剛果紅的培養(yǎng)基可鑒別尿素分解菌B.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染，可用完全培養(yǎng)基接種菌液培育檢測(cè)C.鑒別培養(yǎng)基作用的原理是顯現(xiàn)某微生物的特征，以區(qū)別于其他微生物D.應(yīng)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的估計(jì)值比實(shí)際值偏小12.(2022·南通四模)釀造酒生產(chǎn)中會(huì)產(chǎn)生一種潛在致癌物——氨基甲酸乙酯(EC)，EC可被酸性脲酶分解。研究人員開展篩選高產(chǎn)酸性脲酶菌的實(shí)驗(yàn)，下表是該實(shí)驗(yàn)使用的兩種選擇培養(yǎng)基配方，其中尿素在高溫下易分解，溴甲酚紫變色范圍pH：5.2(淺黃)～6.8(紫紅)，酚紅變色范圍pH：6.8(黃)～8.4(紅)。相關(guān)敘述正確的是()成分牛肉膏蛋白胨瓊脂指示劑pH其他成分酸性培養(yǎng)基0.50.52.5溴甲酚紫5.3尿素2g葡萄糖2g酵母膏0.3gNaAc0.2gKH2PO40.2gNaCl0.5g中性培養(yǎng)基10.22酚紅6.8A.培養(yǎng)基在121℃下濕熱滅菌20min，過濾除菌的尿素溶液要在滅菌后加入B.培養(yǎng)基加少量牛肉膏、蛋白胨、酵母膏和葡萄糖的目的是補(bǔ)充碳源和氮源C.分離菌種的主要步驟：接種污泥→富集培養(yǎng)→稀釋涂布法初篩→劃線法純化→鑒定D.目的菌落周圍在酸性培養(yǎng)基上應(yīng)呈紫紅色，且在中性培養(yǎng)基上呈紅色三、非選擇題13.(2022·蘇錫常鎮(zhèn)四市二模)泡菜傳統(tǒng)自然發(fā)酵方式的發(fā)酵周期相對(duì)較長，生產(chǎn)效率低。研究人員欲從泡菜中分離篩選出高產(chǎn)酸乳酸菌，為泡菜工廠化生產(chǎn)提供依據(jù)。請(qǐng)分析并回答下列問題。(1)配制CaCO3-MRS培養(yǎng)基。成分：蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、瓊脂粉、碳酸鈣等。①根據(jù)物理性質(zhì)分類，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，為乳酸菌種提供氮源的成分是____________________。②培養(yǎng)過程中，乳酸菌產(chǎn)生乳酸溶解碳酸鈣，形成溶鈣圈，便于_______________。(2)高產(chǎn)乳酸菌的培養(yǎng)與分離。其部分實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c具體操作如下所示，請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮喴僮鬟^程梯度稀釋在無菌條件下取樣品中泡菜汁1mL，加入①________進(jìn)行10倍梯度稀釋，依次得到10－5、10－6、10－7的稀釋液接種培養(yǎng)取上述稀釋液1mL分別加入無菌培養(yǎng)皿中，然后將CaCO3-MRS培養(yǎng)基澆注混勻冷凝后，將培養(yǎng)皿②________，并連續(xù)培養(yǎng)48h分離純化挑取③______________進(jìn)行平板劃線培養(yǎng)長期保存將菌種加入30%的甘油中在－20℃保存(3)高產(chǎn)酸乳酸菌的鑒定。提取篩選乳酸菌的DNA，通常采用16SrDNA(編碼rRNA對(duì)應(yīng)的DNA序列)的通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測(cè)序鑒定。以16SrDNA作為細(xì)菌分類依據(jù)的原因是不同菌屬的16SrDNA具有________。(4)高產(chǎn)酸乳酸菌發(fā)酵效果檢測(cè)。研究人員研究了兩種高產(chǎn)酸乳酸菌(乳酸菌A50f7和A50b9)在發(fā)酵泡菜過程中pH的變化，結(jié)果如下圖所示。據(jù)圖分析，該研究實(shí)驗(yàn)的自變量是________________，可以看出，接種兩種乳酸菌效果相近，其相近之處表現(xiàn)為________________。

第2練細(xì)胞工程一、單項(xiàng)選擇題1.(2022·揚(yáng)州三模)寒蘭為名貴的蘭花品種，一般生長在深山幽谷的山腰谷壁。由于人類的過度采摘，現(xiàn)在很難找到寒蘭，偶爾能發(fā)現(xiàn)的也是較小的植株。為了增加野生寒蘭數(shù)量，科研人員希望對(duì)其進(jìn)行人工大量繁殖，再移栽至原有生境。在人工繁殖時(shí)可以應(yīng)用的最適合的生物工程技術(shù)手段是()A.將寒蘭體細(xì)胞與繁殖力強(qiáng)的其他植物細(xì)胞進(jìn)行融合B.將寒蘭的組織放置在培養(yǎng)基中進(jìn)行植物組織培養(yǎng)C.將寒蘭的體細(xì)胞核移植到其他植物去核卵細(xì)胞中D.將生長素基因轉(zhuǎn)入野生寒蘭獲得生長速度快的寒蘭2.(2022·鹽城三模)病毒感染果蔬后，會(huì)借助胞間連絲等結(jié)構(gòu)擴(kuò)散，導(dǎo)致果蔬產(chǎn)量和品質(zhì)退化。通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，利用莖尖可以快速培育出脫毒苗。下列有關(guān)敘述正確的是()A.配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后再調(diào)pHB.植株莖尖細(xì)胞中不含病毒的原因可能是該組織胞間連絲不發(fā)達(dá)C.切取的植株莖尖用70%的酒精消毒后，需放在清水中反復(fù)清洗D.脫毒苗培育是否成功，最終還需要通過接種病毒進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)3.(2022·連云港三模)我省研究人員利用體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育出蘇淮豬“龍鳳胎”，主要步驟如下。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()步驟①：分離培養(yǎng)一對(duì)蘇淮豬的耳組織體細(xì)胞，低溫保存。步驟②：從其他品種母豬卵巢中獲取卵母細(xì)胞并培養(yǎng)。步驟③：細(xì)胞核移植獲得重構(gòu)胚胎。步驟④：將不同性別的多個(gè)胚胎移植到代孕母豬體內(nèi)。步驟⑤：孕育出蘇淮小豬“龍鳳胎”。A.步驟①分離獲取蘇淮豬耳組織體細(xì)胞時(shí)需要使用胰蛋白酶、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液等B.步驟②培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí)，應(yīng)該一直培養(yǎng)到卵母細(xì)胞外出現(xiàn)1個(gè)極體C.步驟③可將步驟①獲得的體細(xì)胞直接顯微注射到培養(yǎng)成熟的卵母細(xì)胞中D.步驟④移植胚胎的性別可依據(jù)步驟①提供體細(xì)胞個(gè)體的性別確定4.(2022·連云港三模)某學(xué)校生物學(xué)研究小組以蝴蝶蘭為材料開展了植物組織培養(yǎng)試驗(yàn)，過程如下圖所示。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()abc蝴蝶蘭植株帶腋芽的花梗花梗插入培養(yǎng)基def誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽生根的試管苗煉苗移栽A.取帶芽花梗作外植體，是因?yàn)檠靠僧a(chǎn)生生長素而更易成活B.花梗插入培養(yǎng)基前要用無水酒精和次氯酸鈉進(jìn)行消毒處理C.過程c、d和e使用的培養(yǎng)基中所含的物質(zhì)種類及比例存在差異D.過程f“煉苗”是由于試管苗長得弱小，光合能力弱，適應(yīng)性差5.(2022·蘇州、張家港開學(xué)考試)下圖為產(chǎn)業(yè)化繁育良種牛的部分過程。下列相關(guān)敘述正確的是()A.E和F的繁育過程中，A、B、C、D牛都必須是遺傳性能優(yōu)良的個(gè)體B.過程①是體外受精，需提供發(fā)育至MⅡ中期的卵母細(xì)胞和已獲能的精子C.過程③可用物理或化學(xué)方法進(jìn)行處理，目的是激活重組細(xì)胞D.E的遺傳物質(zhì)來自供體A和C，F(xiàn)的遺傳物質(zhì)全部來自供體B6.(2022·連云港一模)植物組織培養(yǎng)主要應(yīng)用在種子資源保存、無病毒苗木培育和植物離體快繁等領(lǐng)域。下圖是植物組織培養(yǎng)過程。下列說法正確的是()A.利用培養(yǎng)的愈傷組織進(jìn)行誘變育種，可以定向突變?yōu)橄胍男缕贩NB.培養(yǎng)愈傷組織時(shí)，可以用秋水仙素處理直接獲取純合子植株C.取材部位、植物生長調(diào)節(jié)劑等可能對(duì)愈傷組織生根產(chǎn)生影響D.為了彌補(bǔ)人工合成培養(yǎng)基的不足，常在培養(yǎng)基中添加適量動(dòng)物血清7.(2022·連云港高一模)現(xiàn)代生物工程的操作常常涉及下面的流程。下列說法正確的是()A.若圖為核移植過程，則②卵母細(xì)胞直接作為受體細(xì)胞和①供體細(xì)胞融合B.若圖為單克隆抗體的制備過程，需要篩出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.若圖為試管動(dòng)物的培育過程，需培育到原腸胚才能進(jìn)行胚胎分割與胚胎移植D.若圖為植物體細(xì)胞雜交過程，則形成③常用滅活的病毒直接處理兩種植物細(xì)胞8.(2022·鹽城三模)我國科研人員利用大鼠、小鼠兩個(gè)遠(yuǎn)親物種創(chuàng)造出世界首例異源二倍體胚胎干細(xì)胞(AdESCs)，具體流程如下圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.該項(xiàng)技術(shù)能突破生殖隔離獲得哺乳動(dòng)物遠(yuǎn)親物種的雜種細(xì)胞B.AdESCs中獲得涉及動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)等C.AdESCs的染色體數(shù)目與大鼠—小鼠體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞的相同D.圖中囊胚中的所有細(xì)胞都不存在同源染色體9.(2022·揚(yáng)州三模)治療性克隆對(duì)解決人類供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。流程圖如下，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.個(gè)體A一般需通過注射促性腺激素實(shí)現(xiàn)超數(shù)排卵B.個(gè)體B體細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要提供95%空氣和5%CO2C.囊胚期胚胎需植入代孕母親子宮獲取胚胎干細(xì)胞D.獲得的組織器官移植給個(gè)體B一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)10.(2022·南通市通州區(qū)期末)2019年12月，杭州一家生命科技公司宣布，他們通過基因工程技術(shù)改造了豬的基因組，讓豬的器官變得更適合給人類移植。下列說法錯(cuò)誤的是()A.利用顯微注射技術(shù)，可將降低免疫排斥反應(yīng)的人類基因直接導(dǎo)入豬的受精卵B.胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段時(shí)可將其移植到代孕動(dòng)物的子宮內(nèi)C.進(jìn)行胚胎移植前可取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析、性別鑒定等D.理論上，通過體外誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化的方法可以培育出人造器官11.(2022·連云港二模)培育甘蔗脫毒苗有兩條途徑，經(jīng)②過程獲得的脫毒苗效果更好。下列說法錯(cuò)誤的是()A.不經(jīng)過流程②能明顯縮短育種年限且獲得的脫毒苗都是純合子B.②過程能使組織中的病毒減少或減弱其侵染增殖能力C.圖中脫毒苗的培育過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性D.從過程③到④需要調(diào)整所用培養(yǎng)基中某些成分的含量和比例二、多項(xiàng)選擇題12.(2022·無錫期末)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中試管嬰兒卵漿置換技術(shù)已經(jīng)有了多種突破。該技術(shù)首先取得女性的卵細(xì)胞核，并將其移植入優(yōu)質(zhì)的去核卵細(xì)胞內(nèi)，使兩者重組成活力較強(qiáng)的卵細(xì)胞，經(jīng)體外受精形成胚胎后移植入母體子宮。下列相關(guān)敘述正確的是()A.該技術(shù)主要適用于卵子質(zhì)量不佳的女性B.該技術(shù)可以解決男性精子質(zhì)量不佳的問題C.該技術(shù)能顯著提高大齡女性的受孕機(jī)率D.該技術(shù)會(huì)引起倫理道德方面的質(zhì)疑和爭議13.(2022·蘇州期末)紫羅蘭(2n＝14)花色豐富、抗蟲性強(qiáng)、種子富含亞麻酸。為了讓油菜(2n＝38)具有紫羅蘭的諸多優(yōu)良性狀，科研人員進(jìn)行了下圖所示實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.制備原生質(zhì)體時(shí)，可使植物細(xì)胞處于高滲溶液中發(fā)生明顯的質(zhì)壁分離后再用酶解法處理B.原生質(zhì)體融合依賴膜的流動(dòng)性，融合的原生質(zhì)體形成細(xì)胞壁后再進(jìn)行有絲分裂C.制備人工種子時(shí)，需將愈傷組織和養(yǎng)分、生長調(diào)節(jié)劑等物質(zhì)一起用人工種皮包裹D.融合原生質(zhì)體后，可以利用選擇培養(yǎng)基從混合細(xì)胞群體中篩選出所需雜種植株14.(2022·海安學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè))為制備人甲胎蛋白(AFP)的單克隆抗體，首先將基因工程生產(chǎn)的AFP多次注射小鼠，經(jīng)檢測(cè)合格后，從小鼠脾臟中提取相應(yīng)細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)的AFP和人體內(nèi)的AFP的結(jié)構(gòu)可能有差別B.用AFP多次免疫小鼠的目的是使其體內(nèi)能產(chǎn)生抗AFP抗體的B淋巴細(xì)胞的數(shù)量增加C.融合獲得的雜交瘤細(xì)胞直接注射到小鼠的腔中生產(chǎn)抗AF單克隆抗體D.獲得的單克隆抗體可以用來檢測(cè)人體內(nèi)的甲胎蛋白的含量以便判斷某些疾病的發(fā)生15.(2022·揚(yáng)州中學(xué)月考)抗PD-L1單克隆抗體能與腫瘤細(xì)胞膜表面的PD-L1特異性結(jié)合，因而具有治療某些癌癥的作用。下圖表示制備抗PD-L1單克隆抗體的流程。下列敘述正確的是()A.分離B淋巴細(xì)胞前，需要對(duì)小鼠注射PD-L1B.經(jīng)PEG誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞C.圖中細(xì)胞群a～d既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗體D.圖中細(xì)胞群a可用于大規(guī)模培養(yǎng)，生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體

第3練基因工程(一)一、單項(xiàng)選擇題1.(2022·南京三模)下圖是一種靶向基因敲除技術(shù)即TALEN技術(shù)。該技術(shù)的敲除工具是由DNA識(shí)別域TALE和非特異性內(nèi)切核酸酶FoKI兩個(gè)部分組成的蛋白質(zhì)。TALE的二連氨基酸(字母N、I、G、H、D分別代表一種氨基酸)與四種堿基(A、G、C、T)有恒定的對(duì)應(yīng)關(guān)系。FoKI是一種形成二聚體后具有內(nèi)切核酸酶活性的蛋白單體。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.單獨(dú)使用FoKI對(duì)基因的切割敲除具有隨機(jī)性B.TALE蛋白的合成通常涉及PCR技術(shù)和蛋白質(zhì)工程C.二連氨基酸能與四種含氮堿基發(fā)生恒定的堿基互補(bǔ)配對(duì)D.TALE蛋白左右臂的二連氨基酸序列的設(shè)計(jì)依據(jù)靶基因堿基序列2.(2022·海安學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè))RT-PCR是將RNA的逆轉(zhuǎn)錄和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增相結(jié)合的技術(shù)。目前國際均以RT-PCR檢測(cè)呈陽性作為感染新型冠狀病毒肺炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.RT-PCR反應(yīng)體系中需要添加逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶B.RT-PCR也需要經(jīng)過高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸C.RT-PCR模擬了新冠病毒在人體細(xì)胞內(nèi)增殖的主要過程D.標(biāo)本保存與運(yùn)輸不當(dāng)可能導(dǎo)致RT-PCR檢測(cè)呈假陰性3.(2022·無錫期末)我國科研人員在實(shí)驗(yàn)室中通過構(gòu)建多種酶催化體系的方法，首次實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.可采用PCR技術(shù)從不同物種的基因組中擴(kuò)增得到多酶催化體系中的目標(biāo)酶基因B.在多酶催化體系中，可能會(huì)因?yàn)槊傅淖钸m反應(yīng)條件不同而使反應(yīng)中斷C.該方法可在分子水平上直接改變氨基酸的序列，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化D.若該科研成果成熟后推廣應(yīng)用有助于擺脫耕地和自然環(huán)境限制，解決糧食危機(jī)4.(2022·揚(yáng)州調(diào)研)端粒是真核生物線性染色體末端的一段復(fù)合結(jié)構(gòu)，端粒DNA會(huì)隨細(xì)胞分裂而縮短(如下圖所示)，直到細(xì)胞不能再分裂。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.組成端粒的主要成分是DNA和蛋白質(zhì)B.子鏈5′端引物水解后不能補(bǔ)齊，導(dǎo)致端粒DNA縮短C.染色體復(fù)制后，每條染色體的4個(gè)端粒都縮短D.可通過修復(fù)縮短的端粒DNA，延長細(xì)胞壽命二、多項(xiàng)選擇題5.(2022·連云港三模)細(xì)胞癌變與原癌基因啟動(dòng)子中胞嘧啶甲基化程度高密切相關(guān)。甲基化特異性PCR(MSP)技術(shù)是基因甲基化程度測(cè)定的常用方法，其主要原理及過程如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是()A.原癌基因啟動(dòng)子高甲基化可能抑制該基因的翻譯過程B.MSP過程中應(yīng)設(shè)計(jì)甲基化引物和非甲基化引物C.可用特定的限制酶處理MSP產(chǎn)物，區(qū)分甲基化和非甲基化基因D.甲基化程度低的基因MSP產(chǎn)物的熱穩(wěn)定性會(huì)升高6.(2022·南通海門中學(xué)期末)亨廷頓舞蹈病是一種由于亨廷頓蛋白(HTT)基因突變所導(dǎo)致的疾病。我國科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)(CRISPR/Cas9)，成功培育出世界首例亨廷頓舞蹈病的基因“敲入”豬模型，操作過程如下圖所示。下列說法正確的是()A.上述操作過程的原理有基因重組、動(dòng)物細(xì)胞核全能性等B.過程②為動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，通常采用滅活病毒誘導(dǎo)C.過程④為胚胎分割，該技術(shù)的關(guān)鍵是將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割D.基因“敲入”豬模型所攜帶的人突變HTT基因可遺傳給后代三、非選擇題7.(2022·南通如皋適應(yīng)性考試)新冠病毒(一種RNA病毒)的S蛋白和N蛋白都是誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要抗原。病毒載體疫苗是研制新冠病毒疫苗的技術(shù)路線之一，下圖是生產(chǎn)重組腺病毒疫苗的流程。請(qǐng)回答下列問題。(1)制備新冠病毒疫苗時(shí)，應(yīng)選用編碼____________的基因，先在________酶的作用下，合成________，再通過________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2)已知pAdEasy質(zhì)?？稍谒拗骷?xì)胞內(nèi)表達(dá)出腺病毒，除了啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)外，其相關(guān)基因序列還應(yīng)該包含______________________(答兩種)，過程①需要的酶是________________________________________________________________________。(3)若PacⅠ酶在過程②中使用，該酶所作用的化學(xué)鍵是________。線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細(xì)胞才能產(chǎn)生重組腺病毒，原因是_______________________________________。(4)據(jù)圖分析，重組腺病毒對(duì)人體相對(duì)安全，理由是______________________________。將重組腺病毒接種到人體中的方式是________。與新冠滅活疫苗相比，重組腺病毒疫苗能引起的特有的免疫方式是_______________________________________。8.(2022·鹽城三模)三氯生是一種廣譜抑菌物質(zhì)，可用于基因工程中篩選含目的基因的受體菌。某科研團(tuán)隊(duì)通過先篩選出一種對(duì)三氯生抗性較強(qiáng)的重組質(zhì)粒(如圖1)，再將可以受溫度調(diào)控的基因插入該質(zhì)粒上，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒。請(qǐng)回答下列問題。圖1(1)利用從細(xì)菌中提取的DNA通過PCR技術(shù)獲取fabV-A基因(或fabV-B基因)時(shí)，至少需經(jīng)過______次擴(kuò)增可獲得8個(gè)雙鏈等長的目的基因。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，微量離心管中需加入的物質(zhì)有：模板、引物、原料、______________。下圖2為PCR產(chǎn)物的電泳結(jié)果，操作較理想的泳道有______條。圖2(2)圖1中，步驟Ⅰ需要的工具酶是________________；步驟Ⅱ常用的方法是用Ca2＋處理使細(xì)菌成為________；為達(dá)到步驟Ⅲ預(yù)期的篩選目的，所用物質(zhì)X最可能為________。(3)為了獲得一種增強(qiáng)大腸桿菌對(duì)三氯生的抵抗作用效果較好的重組質(zhì)粒，將含有不同質(zhì)粒的大腸桿菌分別接種到相應(yīng)培養(yǎng)基中。培養(yǎng)一段時(shí)間后，結(jié)果下如圖3，則適宜選作構(gòu)建溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒的是________。圖3圖4(4)科研工作者對(duì)上述選出的質(zhì)粒進(jìn)行改造，獲得了圖4所示質(zhì)粒。其中S1和S2是啟動(dòng)子，P1和P2是終止子。H基因在高溫下會(huì)抑制S1，L基因在低溫下會(huì)抑制S2。①如果將lacZ基因和GFP(綠色熒光蛋白)基因插入圖4質(zhì)粒中，且使得低溫下只表達(dá)GFP基因，高溫下只表達(dá)lacZ基因，則lacZ基因插在____________之間，而GFP基因的插入位置及注意點(diǎn)是____________________________________________。②若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述①中插入GFP基因成功的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含________的培養(yǎng)基中生長，且________________________________________________________________________。9.(2022·南通海安學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè))科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因(SLA-2基因)，構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如下，SLA-2基因長度為1100bp，質(zhì)粒B的總長度為4445bp，其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)回答下列問題。限制酶BclⅠNotⅠXbaⅠSau3AⅠ識(shí)別序列及切割位點(diǎn)T↓GATCAGC↓GGCCGCT↓CTAGA↓GATC(1)過程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是________，下列4種引物中應(yīng)選擇的是________。a.5′－GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTCb.5′－GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACACc.5′－GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTCd.5′－GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC(2)過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是______________，該過程需要用______處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有____________(抗生素)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。(3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請(qǐng)?jiān)诳瞻滋幃嫵隹赡艿玫降碾娪緱l帶。(4)科研中常用嘌呤霉素對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因：既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓____________________。(5)過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測(cè)腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是______________，單克隆抗體能檢測(cè)其是否具有正確的________，從而是否具有生物活性。

第4練基因工程(二)一、非選擇題1.(2022·蘇錫常鎮(zhèn)四市二模)目的基因在酵母菌細(xì)胞中表達(dá)出的蛋白可能被細(xì)胞內(nèi)的蛋白酶降解，某科研團(tuán)隊(duì)構(gòu)建重組表達(dá)載體解決了此問題。下圖為該重組表達(dá)載體構(gòu)建示意圖，圖中改造了的目的基因序列融合了信號(hào)肽的核酸序列S和2個(gè)合成的核酸序列Z，信號(hào)肽能引導(dǎo)融合蛋白出胞，折疊后的Z肽段能與抗體IgG結(jié)合。請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題。(1)Ori是基因組的復(fù)制起始序列，是________酶的作用位點(diǎn)，該序列富含________堿基對(duì)。(2)Plac是啟動(dòng)子序列，是________酶的作用位點(diǎn)，轉(zhuǎn)錄沿DNA模板鏈的________方向進(jìn)行。(3)雙酶切是構(gòu)建表達(dá)載體的重要環(huán)節(jié)。下列關(guān)于雙酶切的敘述，正確的是________。A.目的基因內(nèi)不能含有所選的酶切位點(diǎn)B.2個(gè)酶切位點(diǎn)距離越近酶切效果越佳C.若2種限制酶最適溫度相差較大，應(yīng)實(shí)行2次單酶切D.確保酶切位點(diǎn)一個(gè)產(chǎn)生黏性末端另一個(gè)產(chǎn)生平末端，方可避免載體自連(4)為使目的基因能定向插入載體，需對(duì)目的基因進(jìn)行改造，通常的做法是____________________________。檢驗(yàn)表達(dá)載體是否已經(jīng)準(zhǔn)確連接了目的基因，需對(duì)擴(kuò)增的表達(dá)載體再次雙酶切處理，完全酶切后經(jīng)電泳處理，理想的結(jié)果有______條條帶。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，可能存在的復(fù)制形式有__________________________。(5)菌種選育成功后，生產(chǎn)實(shí)踐中可用含有________的瓊脂糖層析柱純化融合蛋白。2.(2022·揚(yáng)州中學(xué)月考)膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的腫瘤，傳統(tǒng)的檢測(cè)方法存在諸多不足。研究者嘗試使用噬菌體展示技術(shù)(將外源基因插入到噬菌體DNA上并將表達(dá)的蛋白呈現(xiàn)至噬菌體表面的一種技術(shù))獲取能與膀胱癌細(xì)胞特異性結(jié)合的小分子多肽。(1)與大腸桿菌相比，噬菌體在結(jié)構(gòu)上最主要的特點(diǎn)是______________。建立噬菌體展示庫需要用到的工具酶有__________________，該過程中________(填“需要”或“不需要”)用CaCl2溶液處理大腸桿菌。(2)研究者以膀胱癌細(xì)胞特異性表達(dá)的UBC蛋白作為靶蛋白，設(shè)計(jì)出多種基因片段，將其分別轉(zhuǎn)入不同噬菌體DNA上，并在子代噬菌體表面表達(dá)出可與UBC特異性結(jié)合的多肽，再根據(jù)圖1、2的操作進(jìn)行篩選。根據(jù)題意將正確的選項(xiàng)填在下表①②橫線處。圖1第一次洗脫前圖2第二次洗脫后特異性結(jié)合將UBC固定，加入①________混合溫育洗脫第一次：非特異性洗脫液；第二次：含UBC單抗的洗脫液收集收集②________，提取DNA進(jìn)行測(cè)序A.噬菌體B.大腸桿菌C.UBC單抗D.第一次洗脫完的液體E.第二次洗脫完的液體(3)從篩選出的噬菌體中獲得了1種相應(yīng)的多肽S，對(duì)多肽S和UBC的結(jié)合力做了進(jìn)一步檢測(cè)，結(jié)果如圖3所示。據(jù)圖分析，①和②處應(yīng)添加的物質(zhì)分別為________、________(填“無關(guān)抗體”或“UBC”單抗)，由此可知，多肽S的結(jié)合力____________________________________________________________________。圖3相對(duì)結(jié)合力檢測(cè)結(jié)果(4)研究者分別將人的肺癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞、膀胱上皮細(xì)胞置于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中，放在____________中37℃恒溫培養(yǎng)。將篩選的多肽S進(jìn)行熒光標(biāo)記，分別與上述細(xì)胞混合溫育處理1.5h，使用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞，預(yù)期結(jié)果是________________，依據(jù)是________________________________________________________________________。(5)關(guān)于噬菌體展示技術(shù)的敘述，正確的是________。A.噬菌體簡單的結(jié)構(gòu)組成將內(nèi)部基因與表達(dá)在外部的蛋白質(zhì)建立聯(lián)系B.篩選的高效性和特異性，使挑選到高親和力的抗體成為可能C.所挑選到的微量存在的噬菌體可通過感染大腸桿菌得到富集擴(kuò)大D.與單克隆抗體技術(shù)相比，其產(chǎn)量較低，無法大量制備3.(2022·南通四模)β-地中海貧血是一種常染色體隱性遺傳病，我國南方這種遺傳病的常見病因是血紅蛋白β珠蛋白基因(HBB)編碼區(qū)4個(gè)堿基(3′－CTTT－5′)缺失。下圖1是一種基因治療β-地中海貧血的技術(shù)路線，圖2是圖1過程③外源DNA導(dǎo)入iPS細(xì)胞(誘導(dǎo)多能干細(xì)胞)后，在細(xì)胞內(nèi)利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)和外源單鏈DNA及DNA自我修復(fù)系統(tǒng)進(jìn)行基因治療的主要過程。請(qǐng)據(jù)圖回答問題。圖1圖2(1)利用患者的成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞，不僅可以避免在進(jìn)行細(xì)胞移植時(shí)發(fā)生______，還因?yàn)閕PS細(xì)胞能____________________________________，可獲得足夠多的回輸細(xì)胞。(2)根據(jù)圖2分析，在利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)進(jìn)行基因修復(fù)時(shí)，需要根據(jù)________設(shè)計(jì)2種gRNA；導(dǎo)入單鏈DNA作為修復(fù)模板的目的是___________________。(3)圖1的過程③中，研究人員將gRNA基因與Cas9基因分別整合到不同的載體中，這是因?yàn)檎系酵惠d體中會(huì)________________，不容易導(dǎo)入細(xì)胞。研究人員將gRNA載體、Cas9載體和單鏈DNA按一定比例與iPS細(xì)胞混合后，對(duì)混合液進(jìn)行瞬時(shí)高壓電激處理，其目的是____________________________。(4)導(dǎo)入iPS細(xì)胞的gRNA基因和Cas9基因需要利用細(xì)胞中的________催化合成gRNA和Cas9mRNA，后者指導(dǎo)合成Cas9蛋白，并組裝成CRISPR/Cas9系統(tǒng)。圖2中酶B的功能是_______________________________________。(5)為檢測(cè)iPS細(xì)胞中HBB基因是否正確修復(fù)，研究人員設(shè)計(jì)特異引物時(shí)，最好將插入片段(CTTT)或互補(bǔ)序列設(shè)計(jì)在引物的______端。在PCR時(shí)可______________，以提高引物結(jié)合的特異性。4.(2022·連云港三模)研究人員利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和花粉管通道法培育出轉(zhuǎn)抗寒基因PgLCBF1的月季石榴，主要過程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題。(1)質(zhì)粒pBI121的復(fù)制原點(diǎn)中A－T比例高，有利于________。過程①用限制酶XbaⅠ分別切割質(zhì)粒和抗寒基因，原因是______________________________________。(2)過程②篩選時(shí)，應(yīng)將菌液用____________法接種培養(yǎng)，使用的培養(yǎng)基除水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和生長因子外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有____________。實(shí)驗(yàn)中過程③擴(kuò)大培養(yǎng)的主要目的是________________________________________________________________________。(3)轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌借助萌發(fā)的花粉管運(yùn)輸，將PgLCBF1導(dǎo)入________中，最終獲得轉(zhuǎn)基因種子，經(jīng)播種、篩選出抗寒月季石榴新品種。與農(nóng)桿菌直接轉(zhuǎn)化月季石榴葉肉細(xì)胞相比，花粉管通道轉(zhuǎn)化法具有的優(yōu)點(diǎn)有___________________________________________________。(4)為探究上述農(nóng)桿菌菌液浸染的合適介質(zhì)和時(shí)期，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡要操作過程采集花粉摘取花粉成熟的月季石榴花，自然陰干，收集花粉配制不同介質(zhì)配制植物組織培養(yǎng)液(MS)、質(zhì)量濃度為5%蔗糖溶液、MS＋5%蔗糖混合溶液配制農(nóng)桿菌浸染液取5mL轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌菌液，分別與①______________________混勻②__________蘸取收集好的花粉，輕輕點(diǎn)涂在花柱的柱頭上浸染轉(zhuǎn)化分別在授粉時(shí)和授粉后24h，選擇柱頭未開裂的花，③________________________________________，并作標(biāo)記，每個(gè)處理浸染10朵花結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析分組獲得月季石榴種子，催芽播種、培植植株，統(tǒng)計(jì)坐果率、種子出芽率和轉(zhuǎn)化陽性率。(坐果率＝坐果數(shù)/浸染花數(shù)×100%；出芽率＝出芽數(shù)/播種數(shù)×100%；轉(zhuǎn)化陽性率＝轉(zhuǎn)化成功的株數(shù)/播種數(shù)×100%)5.(2022·南京三模)基因工程自20世紀(jì)70年代興起后，在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面，展示出廣闊的前景。下圖是通過基因工程獲得轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品的流程圖，請(qǐng)結(jié)合相關(guān)知識(shí)回答下列問題。(1)轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器是指利用基因工程技術(shù)手段將外源基因轉(zhuǎn)化到受體中進(jìn)行高效表達(dá)，從而獲得具有重要應(yīng)用價(jià)值的表達(dá)產(chǎn)物的生命系統(tǒng)，包括轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因微生物。①若利用圖示流程構(gòu)建小鼠乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)人抗利尿激素，應(yīng)先從人體________細(xì)胞中獲取總RNA，通過反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，再PCR后獲得抗利尿激素基因。一條單鏈cDNA在PCR儀中進(jìn)行n次循環(huán)，需要消耗______個(gè)引物。構(gòu)建的表達(dá)載體導(dǎo)入的受體細(xì)胞是________。膀胱反應(yīng)器有著和乳腺反應(yīng)器一樣的優(yōu)點(diǎn)：收集產(chǎn)物蛋白比較容易，不會(huì)對(duì)動(dòng)物造成傷害。此外膀胱生物反應(yīng)器還具有的顯著優(yōu)勢(shì)在于不受轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的__________(答2點(diǎn)即可)的限制，而且從尿中提取蛋白質(zhì)比在乳汁中提取更簡便、高效。②若圖中的受體細(xì)胞是大腸桿菌，通常用Ca2＋處理大腸桿菌，其目的是使大腸桿菌處于感受態(tài)，有利于____________________________。理論上制備能分泌抗利尿激素的“工程菌株”時(shí)，酵母菌比大腸桿菌更適合作為受體細(xì)胞，從細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的角度分析，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)全球新冠疫情形勢(shì)依然非常嚴(yán)峻，新冠病毒疫苗的研制和新冠病毒的快速檢測(cè)的研究均已有所突破。①目前，新冠疫苗有滅活疫苗、基因疫苗、蛋白疫苗等。利用圖示流程制備新冠病毒S蛋白疫苗。圖中質(zhì)粒A上m、n分別是啟動(dòng)子和終止子，箭頭處是限制酶的切點(diǎn)(NcoⅠ∶5′-C↓CATGG-3′；NheⅠ∶5′-G↓GATCC-3′)，根據(jù)S蛋白的RNA制備的目的基因S無法與載體A連接，需要在S基因兩側(cè)加接末端，若b鏈處加接末端5′-GATC，則在a鏈處加接末端5′-________。由圖推測(cè)，目的基因S轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莀_____(填“a鏈”或“b鏈”)。②2022年3月11日，國家衛(wèi)健委印發(fā)《新冠病毒抗原檢測(cè)應(yīng)用方案(試行)》，增加抗原檢測(cè)作為核酸檢測(cè)的補(bǔ)充手段?？乖瓩z測(cè)采用雙抗體夾心法，其原理如下圖所示。結(jié)合墊處含有足量的、可移動(dòng)的、與膠體金結(jié)合的抗體1，T處固定有抗體2，抗體1和抗體2與新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位點(diǎn)發(fā)生特異性結(jié)合，呈紅色。C處固定有抗體1的抗體，與抗體1結(jié)合也呈紅色。檢測(cè)過程中反復(fù)進(jìn)行了抗原—抗體的特異性結(jié)合，若檢測(cè)結(jié)果為陽性，則過程中此特異性結(jié)合共發(fā)生________次。若待測(cè)樣本中不含新冠病毒，顯色結(jié)果為______________，結(jié)果為陰性。③利用單克隆抗體制備技術(shù)制備試劑盒中的抗體1。先給小鼠注射純化的N抗原蛋白，一段時(shí)間后，從小鼠的________(免疫器官)中獲取已免疫的B淋巴細(xì)胞，將獲得的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選、________________，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，再經(jīng)體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，最終獲得抗N抗原蛋白的單克隆抗體。專題七生物技術(shù)與工程第1練發(fā)酵工程1.C解析：果酒制作時(shí)，應(yīng)選擇新鮮葡萄沖洗后再去枝梗，防止染菌，A錯(cuò)誤；用葡萄釀制果酒的過程中產(chǎn)生CO2，可觀察到發(fā)酵液中有大量氣泡產(chǎn)生，但隨著底物不斷被消耗，氣泡量會(huì)越來越少，B錯(cuò)誤；米酒敞口靜置后表面長出的菌膜即為醋酸菌，為好氧菌，可利用酒精產(chǎn)生醋酸，適宜做果醋制作的菌種，C正確；醋酸菌為好氧菌，發(fā)酵的過程中需要一直通入氧氣，D錯(cuò)誤。2.C解析：面粉中含有淀粉等物質(zhì)，可為微生物生長提供碳源和能源，A正確；微生物進(jìn)行發(fā)酵需要適宜的條件，過程②中將黃豆置于不通風(fēng)環(huán)境中，目的是獲得菌種并利于其生長，B正確；為防止雜菌的污染，加入的鹽水應(yīng)先煮沸再冷卻，C錯(cuò)誤；過程④是后發(fā)酵成熟，其中耐鹽酵母產(chǎn)生酒精等物質(zhì)，有利于形成特定風(fēng)味和香氣，利于黃豆醬的風(fēng)味形成，D正確。3.D解析：參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為兼性異養(yǎng)厭氧型，最適溫度為20℃，參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，最適溫度時(shí)30～35℃，且在果酒發(fā)酵時(shí)，為缺氧條件，而醋酸菌是好氧菌，因此在果酒發(fā)酵時(shí)，被醋酸菌等污染后，不能直接進(jìn)行果醋發(fā)酵，需要通入氧氣和提高發(fā)酵溫度，A錯(cuò)誤；酸奶制作是利用乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的，不會(huì)產(chǎn)生氣體，B錯(cuò)誤；泡菜制作時(shí)的菌種是乳酸菌，乳酸菌發(fā)酵的產(chǎn)物不是CO2，C錯(cuò)誤；酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，反應(yīng)底物為糖類，為使發(fā)酵后達(dá)到所需酒精的含量，可以適當(dāng)提高果汁糖度，增加反應(yīng)物的濃度，D正確。4.B解析：生長在腐木上的霉菌能夠分解利用腐木中的纖維素，可以產(chǎn)生纖維素酶，玉米秸稈中富含纖維素，因此對(duì)玉米秸稈進(jìn)行預(yù)處理的酶也可從腐木上的霉菌中提取，A正確；圖中培養(yǎng)產(chǎn)酶微生物主要作用是處理玉米秸稈，因此應(yīng)以纖維素為碳源，B錯(cuò)誤；酒精發(fā)酵屬于無氧呼吸，因此需要在無氧環(huán)境(密封)的條件下進(jìn)行，C正確；酒精可以與酸性的重鉻酸鉀溶液發(fā)生反應(yīng)，由橙色變?yōu)榛揖G色，D正確。5.A6.D7.D解析：培養(yǎng)基應(yīng)該先滅菌，再在超凈工作臺(tái)上分裝到培養(yǎng)皿中，A錯(cuò)誤；涂布時(shí)所用菌液不超過0.1mL，平板上的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300個(gè)，涂布用的菌濃度應(yīng)在300～3000個(gè)·mL－1，B錯(cuò)誤；由圖可知，將接種后的培養(yǎng)基倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d，C錯(cuò)誤；由圖可知，與a、c組相對(duì)比，b組用2.5%碳酸氫鈉溶液對(duì)牙刷進(jìn)行消毒后，牙刷實(shí)際菌落數(shù)最少，可定期使用2.5%碳酸氫鈉溶液對(duì)牙刷進(jìn)行消毒，D正確。8.D解析：若要觀察菌落，應(yīng)選擇固體培養(yǎng)基，A正確；圖甲用到了接種環(huán)接種，為平板劃線法接種，可對(duì)微生物分離純化，B正確；圖乙用到了涂布器，為稀釋涂布平板法接種，可對(duì)微生物分離和計(jì)數(shù)，C正確；野生型傷寒沙門氏菌(his＋)可合成組氨酸，突變體喪失了這種能力，必須在添加組氨酸的培養(yǎng)基上才能生長，故應(yīng)將接觸過某藥物的his菌株接種在不含組氨酸的培養(yǎng)基上能長出菌落，說明該藥物有致突變作用，D錯(cuò)誤。9.B解析：操作前用70%左右的酒精對(duì)雙手進(jìn)行消毒處理，以避免雜菌污染，A正確；據(jù)圖可知，圖中1號(hào)培養(yǎng)皿中所顯示的接種方法是平板劃線法，但平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)，應(yīng)該用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；據(jù)圖可知，圖中1號(hào)培養(yǎng)皿中所顯示的接種方法是平板劃線法，平板劃線法分離菌株的目的是獲得單個(gè)菌落，C正確；基因突變具有不定向性，故誘變后的菌株突變方向是不定向的，所以2號(hào)培養(yǎng)基應(yīng)是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，可以篩選出能分解纖維素的菌株，D正確。10.AB解析：紅酸湯制作過程中用到的微生物主要是乳酸菌，A正確；裝壇時(shí)加入成品紅酸湯是為了增加發(fā)酵菌種的數(shù)量，B正確；裝壇時(shí)壇口留有一點(diǎn)空間而不裝滿的目的是防止番茄發(fā)酵后液體膨脹外溢，C錯(cuò)誤；亞硝酸鹽含量隨著發(fā)酵時(shí)間的延長而先增加后減少，D錯(cuò)誤。11.CD解析：尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生長，所以以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上可以選擇尿素分解菌，尿素分解菌可以將尿素分解為氨，可以使酚紅指示劑變紅，A錯(cuò)誤；檢測(cè)培養(yǎng)基被污染的方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，B錯(cuò)誤；鑒別培養(yǎng)基作用的原理是顯現(xiàn)某微生物的特征，以區(qū)別于其他微生物，C正確；應(yīng)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的估計(jì)值比實(shí)際值偏小，因?yàn)榭赡苡袃蓚€(gè)或多個(gè)微生物在一起長成一個(gè)菌落，D正確。12.ABC解析：微生物滅菌時(shí)需要在固體培養(yǎng)基加上封口膜后在121℃條件下滅菌20min，冷卻后再通過玻璃漏斗加入過濾的尿素溶液，尿素在高溫下易分解，不能在滅菌前加入，A正確；微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基中應(yīng)加入水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無機(jī)鹽，故可在培養(yǎng)基加少量牛肉膏、蛋白胨、酵母膏和葡萄糖，B正確；分離菌種的主要步驟：接種污泥(取樣)→富集培養(yǎng)→稀釋涂布法初篩→劃線法純化(篩選菌株)→鑒定，C正確；分析題意可知，目的菌可使培養(yǎng)基中EC被酸性脲酶分解，使培養(yǎng)基中pH增大，若使溴甲酚紫在酸性培養(yǎng)基中由淺黃色變?yōu)樽霞t色，則不會(huì)使培養(yǎng)基pH大于6.8，應(yīng)使酚紅在中性培養(yǎng)基中呈黃色，D錯(cuò)誤。13.(1)①固體蛋白胨、牛肉膏、酵母粉②篩選高產(chǎn)酸乳酸菌(2)①9mL無菌水②倒置③有明顯溶鈣圈(3)差(特)異性(4)乳酸菌種類和接種量(發(fā)酵時(shí)間)均能快速降低泡菜發(fā)酵過程中的pH，且接種量越大作用效果越明顯第2練細(xì)胞工程1.B解析：若將寒蘭體細(xì)胞與繁殖力強(qiáng)的其他植物細(xì)胞進(jìn)行融合，需要進(jìn)行體細(xì)胞雜交，技術(shù)要求較高，且成功率不一定高，A錯(cuò)誤；將寒蘭的組織放置在培養(yǎng)基中進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，是最快也最簡單的方式，B正確；由于植物體細(xì)胞全能性易體現(xiàn)，因此將寒蘭的體細(xì)胞核移植到其他植物去核卵細(xì)胞中，對(duì)于植物細(xì)胞來說太過繁瑣，一般核移植多用于動(dòng)物克隆，C錯(cuò)誤；將生長素基因轉(zhuǎn)入野生寒蘭獲得生長速度快的寒蘭，要求的技術(shù)較高，成功率低，D錯(cuò)誤。2.B解析：配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，先調(diào)pH再高壓蒸汽滅菌，否則容易引起雜菌污染，A錯(cuò)誤；病毒感染果蔬后，會(huì)借助胞間連絲等結(jié)構(gòu)擴(kuò)散，植株莖尖細(xì)胞中不含病毒的原因可能是該組織胞間連絲不發(fā)達(dá)，B正確；切取的植株莖尖用70%的酒精消毒后，需放在無菌水中反復(fù)清洗，C錯(cuò)誤；通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，是用莖尖等沒有被病毒感染的組織培養(yǎng)植株，可以提高產(chǎn)量，其基因并沒有改變，所以不可能有抗病毒的性狀，脫毒苗培育是否成功，不需要通過接種病毒進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，D錯(cuò)誤。3.C解析：步驟①分離獲取蘇淮豬耳組織體細(xì)胞時(shí)需要使用胰蛋白酶處理目的是獲得單細(xì)胞懸液，也需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)液等，以保持細(xì)胞的活性，A正確；步驟②培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí)，應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，因?yàn)榇藭r(shí)卵母細(xì)胞具有受精能力，且卵母細(xì)胞具有促進(jìn)核全能性表達(dá)的物質(zhì)，B正確；步驟③可將步驟①獲得的體細(xì)胞直接顯微注射到培養(yǎng)成熟的去核卵母細(xì)胞中，C錯(cuò)誤；步驟④移植胚胎的性別由步驟①中提供體細(xì)胞個(gè)體的性別確定，因此，可依據(jù)步驟①提供體細(xì)胞個(gè)體的性別來確定胚胎的性別，D正確。4.B解析：芽屬于幼嫩部位，能產(chǎn)生生長素，因此取帶芽花梗作外植體更易成活，A正確；花梗插入培養(yǎng)基前要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和體積分?jǐn)?shù)為20%的次氯酸鈉進(jìn)行消毒處理，B錯(cuò)誤；過程c、d和e屬于脫分化、再分化和幼苗的生長發(fā)育，使用的培養(yǎng)基中所含的物質(zhì)如激素種類及比例存在差異，C正確；過程f“煉苗”是由于試管苗長得弱小，光合能力弱，適應(yīng)性差，因此需要移栽到野外使其逐漸適應(yīng)室外環(huán)境，D正確。5.C解析：生產(chǎn)上要求A、B、C都是遺傳性能優(yōu)良的個(gè)體，要求D是生產(chǎn)性能優(yōu)良的個(gè)體，A錯(cuò)誤；過程①為采集的卵子和獲能的精子體外受精的過程。其中卵子是用促性腺激素處理，經(jīng)超數(shù)排卵，然后從輸卵管中沖取，一般可以和獲能的精子直接進(jìn)行受精，B錯(cuò)誤；過程③可用物理或化學(xué)方法，激活重組細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，形成重組胚胎，C正確；通過核移植方法培育的克隆動(dòng)物F遺傳物質(zhì)大部分來自供體細(xì)胞核B，少部分來自受體的細(xì)胞質(zhì)A，D錯(cuò)誤。6.C解析：誘變育種是在人為的條件下，利用物理、化學(xué)等因素，誘發(fā)生物體產(chǎn)生突變，從中選擇，培育成動(dòng)植物和微生物的新品種，突變是不定向的，只能從中選擇符合要求的品種，A錯(cuò)誤；秋水仙素能讓細(xì)胞中的染色體加倍，但不一定能得到純合子，如對(duì)Aa的愈傷組織進(jìn)行秋水仙素處理，得到AAaa，還是雜合子，B錯(cuò)誤；生根需要適宜的激素刺激，取材部位、植物生長調(diào)節(jié)劑等可能對(duì)愈傷組織生根產(chǎn)生影響，C正確；動(dòng)物血清是用于培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞，植物組織培養(yǎng)不需要加入血清，D錯(cuò)誤。7.B解析：若圖為核移植過程，在體細(xì)胞核移植過程中，應(yīng)選擇處于MⅡ中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，因此需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ中期，不是直接作為受體，A錯(cuò)誤；若圖為單克隆抗體的制備，則①和②是經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，形成融合細(xì)胞需要經(jīng)過篩選，篩出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；若圖為試管動(dòng)物的培育過程，需培育到桑葚胚或者囊胚才能進(jìn)行胚胎分割與胚胎移植，C錯(cuò)誤；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等，化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑，滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法，D錯(cuò)誤。8.C解析：圖示是將大鼠、小鼠的單倍體胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)融合形成AdESCs，說明該項(xiàng)技術(shù)能突破生殖隔離獲得哺乳動(dòng)物遠(yuǎn)親物種的雜種細(xì)胞，A正確；圖示將生殖細(xì)胞培養(yǎng)為單倍體囊胚利用了早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，將大鼠、小鼠的單倍體胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)融合形成AdESCs，利用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，B正確；AdESCs的染色體是由大鼠、小鼠體細(xì)胞中各一半的染色體數(shù)組成的，而大鼠—小鼠體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞內(nèi)的染色體是由大鼠、小鼠的體細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)之和構(gòu)成的，因此AdESCs的染色體數(shù)目與大鼠—小鼠體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞的不相同，C錯(cuò)誤；根據(jù)題意“利用大鼠、小鼠兩個(gè)遠(yuǎn)親物種創(chuàng)造出世界首例異源二倍體胚胎干細(xì)胞(AdESCs)”，說明大鼠、小鼠的單倍體胚胎干細(xì)胞都只含一個(gè)染色體組，因此圖中囊胚中的所有細(xì)胞都不存在同源染色體，D正確。9.C解析：據(jù)圖可知，要從個(gè)體A獲得卵母細(xì)胞，為了獲得更多的卵母細(xì)胞，一般需通過注射促性腺激素實(shí)現(xiàn)超數(shù)排卵，A正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要?dú)怏w環(huán)境，95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的pH)，B正確；胚胎干細(xì)胞可以來自囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，不需要植入代孕母親子宮就可以獲得胚胎干細(xì)胞，C錯(cuò)誤；據(jù)圖可知，B是供核的一方，克隆的組織和器官的絕大多數(shù)遺傳物質(zhì)和B相同，因此獲得的組織器官移植給個(gè)體B一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D正確。10.A解析：降低免疫排斥反應(yīng)的人類基因必須與載體構(gòu)成基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受精卵，目的基因才能穩(wěn)定存在并表達(dá)，A錯(cuò)誤；胚胎移植的時(shí)期通常是桑椹胚或囊胚階段，B正確；滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育為胎盤和胎膜，進(jìn)行胚胎移植前，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析、性別鑒定，不影響胚胎未來發(fā)育，C正確；理論上，通過體外誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化的方法可以培育出人造器官，D正確。11.A解析：不經(jīng)過流程②產(chǎn)生脫毒苗的方法脫毒率高，脫毒速度快，能在較短的時(shí)間內(nèi)得到較多的原種繁殖材料，但不能明顯縮短育種年限，獲得的脫毒苗基因型和原植物體相同，不一定是純合子，A錯(cuò)誤；52℃與38℃的溫度處理使病毒失活或減弱其侵染增殖能力，故②過程能使組織中的病毒減少或減弱其侵染增殖能力，B正確；上圖中脫毒苗的培育過程采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，C正確；過程③④所用培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同，故從過程③到④需要調(diào)整所用培養(yǎng)基中某些成分的含量和比例，D正確。12.ACD解析：根據(jù)題意可知，該技術(shù)首先取得女性的卵細(xì)胞核，并將其移植入優(yōu)質(zhì)的去核卵細(xì)胞內(nèi)，使兩者重組成活力較強(qiáng)的卵細(xì)胞，主要適用于卵子質(zhì)量不佳的女性，不能解決男性精子質(zhì)量不佳的問題，A正確，B錯(cuò)誤；大齡女性容易產(chǎn)生質(zhì)量不佳的卵子，該技術(shù)能顯著提高大齡女性的受孕機(jī)率，C正確；該技術(shù)孕育的后代，卵子的遺傳物質(zhì)來源于兩個(gè)女性，會(huì)引起倫理道德方面的質(zhì)疑和爭議，D正確。13.AC解析：用酶解法制備原生質(zhì)體時(shí)，需先用略高滲溶液處理植物細(xì)胞，使細(xì)胞處于微弱的質(zhì)壁分離狀態(tài)，然后用酶消化去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；原生質(zhì)體融合依賴細(xì)胞膜的流動(dòng)性，融合的原生質(zhì)體只有重新形成細(xì)胞壁后，才可進(jìn)行有絲分裂，多次分裂形成的小細(xì)胞團(tuán)可通過胚胎發(fā)生或器官發(fā)生的途徑再生植株，B正確；制備人工種子時(shí)，需將愈傷組織培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮包裝得到人工種子，C錯(cuò)誤；融合原生質(zhì)體后，可以利用選擇培養(yǎng)基從混合細(xì)胞群體中篩選出所需雜種植株，D正確。14.BCD解析：基因工程中目的基因(AFP)與人體中AFP基因可能有所不同，所以通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)的AFP和人體內(nèi)的AFP的結(jié)構(gòu)可能有差別，A正確；用AFP多次免疫小鼠的目的是增加體內(nèi)記憶細(xì)胞和抗體的數(shù)目，B錯(cuò)誤；融合的雜交瘤細(xì)胞還需要經(jīng)過篩選才能注射到小鼠的腔中，C錯(cuò)誤；獲得的單克隆抗體可以用來檢測(cè)人體內(nèi)的甲胎蛋白的有無，但不能判斷其含量，D錯(cuò)誤。15.ACD解析：在分離B淋巴細(xì)胞前，需要對(duì)小鼠注射PD-L1進(jìn)行免疫，產(chǎn)生已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；經(jīng)PEG誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞，有同種細(xì)胞融合的細(xì)胞，不是雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；圖中細(xì)胞群a～d表示雜交瘤細(xì)胞，既能大量繁殖，又能產(chǎn)生抗體，C正確；圖中細(xì)胞群a能產(chǎn)生抗PD-L1抗體，可擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體，D正確。第3練基因工程(一)1.C解析：FoKI是非特異性內(nèi)切核酸酶，單獨(dú)使用FoKI對(duì)基因的切割敲除具有隨機(jī)性，A正確；TALE蛋白的合成通常涉及PCR技術(shù)(擴(kuò)增得到很多TALE基因)和蛋白質(zhì)工程(對(duì)基因進(jìn)行改造，得到很多蛋白質(zhì))，B正確；氨基酸內(nèi)沒有堿基，不能與四種含氮堿基發(fā)生恒定的堿基互補(bǔ)配對(duì)，只是存在恒定的對(duì)應(yīng)關(guān)系，C錯(cuò)誤；由于TALE的二連氨基酸(字母N、I、G、H、D分別代表一種氨基酸)與四種堿基(A、G、C、T)有恒定的對(duì)應(yīng)關(guān)系，TALE蛋白左右臂的二連氨基酸序列的設(shè)計(jì)依據(jù)靶基因堿基序列，D正確。2.C解析：逆轉(zhuǎn)錄酶在RNA的逆轉(zhuǎn)錄過程中發(fā)揮作用，耐高溫的DNA聚合酶在cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增中發(fā)揮作用，故該反應(yīng)體系中需加入逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶，A正確；該技術(shù)包括cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增過程，故需要經(jīng)過高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸，B正確；新冠病毒屬于自我復(fù)制型的RNA病毒，其在宿主細(xì)胞內(nèi)不進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄過程，C錯(cuò)誤；若在標(biāo)本運(yùn)輸、保存中出現(xiàn)了損壞和污染，導(dǎo)致新冠病毒核酸破壞而無法檢測(cè)，可能導(dǎo)致RT-PCR檢測(cè)呈假陰性，D正確。3.C解析：獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)在體外反應(yīng)體系中擴(kuò)增，A正確；酶的作用條件較溫和，不同的酶其適宜的溫度和pH不同，在多酶催化體系中，可能會(huì)因?yàn)槊傅淖钸m反應(yīng)條件不同而使反應(yīng)中斷，B正確；該方法在分子水平上，通過改變基因的堿基序列，間接改變氨基酸的序列，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化，C錯(cuò)誤；該科研實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程，若成熟后推廣應(yīng)用有助于擺脫耕地和自然環(huán)境限制，解決糧食危機(jī)，D正確。4.C解析：端粒是真核生物線性染色體末端的一段復(fù)合結(jié)構(gòu)，所以組成端粒的主要成分是DNA和蛋白質(zhì)，A正確；DNA的合成必須有引物才可以，但是DNA合成后引物需要被切除，所以子鏈5′端引物水解后不能補(bǔ)齊，導(dǎo)致端粒DNA縮短，B正確；分析圖示可知，染色體復(fù)制后，只是新合成的DNA鏈縮短了，并不是所有端粒都縮短，C錯(cuò)誤；可通過修復(fù)縮短的端粒DNA，使細(xì)胞能夠繼續(xù)分裂，延長細(xì)胞壽命，D正確。5.BC解析：啟動(dòng)子是位于基因首端的一段特定的DNA序列，是RNA聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)，因此，原癌基因啟動(dòng)子高甲基化可能抑制該基因的轉(zhuǎn)錄過程，A錯(cuò)誤；MSP過程中應(yīng)設(shè)計(jì)甲基化引物和非甲基化引物，從而分別擴(kuò)增甲基化片段和非甲基化片段，B正確；不同的引物能擴(kuò)增出不同的片段，因此，同時(shí)也可根據(jù)設(shè)計(jì)特定的限制酶來區(qū)分甲基化和非甲基化基因，C正確；甲基化程度低的基因MSP產(chǎn)物中的G－C堿基對(duì)變成了U－A堿基對(duì)，因而其中氫鍵的數(shù)目減少，熱穩(wěn)定性會(huì)下降，D錯(cuò)誤。6.ACD解析：上述操作中基因編輯技術(shù)的原理是基因重組，過程①②是細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)的生物學(xué)原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A正確；過程②是將細(xì)胞核移入去核的卵細(xì)胞中，所利用的生物技術(shù)是細(xì)胞核移植技術(shù)，B錯(cuò)誤；過程④為胚胎分割，該技術(shù)的關(guān)鍵是將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，C正確；基因“敲入”豬模型所攜帶的人突變HTT基因?qū)儆诨蛑亟M，可遺傳給后代，D正確。7.(1)S蛋白或N蛋白逆轉(zhuǎn)錄DNAPCR(2)腺病毒基因(組)、標(biāo)記基因限制酶和DNA連接酶(3)磷酸二酯鍵基因的表達(dá)需要細(xì)胞提供場(chǎng)所、原料和酶等條件(4)重組腺病毒缺失復(fù)制原點(diǎn)，不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制肌肉注射細(xì)胞免疫解析：(1)新冠病毒的S蛋白和N蛋白是誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要抗原，應(yīng)選用編碼S蛋白或N蛋白的基因；新冠病毒是RNA病毒，遺傳物質(zhì)是RNA，基因是一段RNA，因此先在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄得到DNA；再通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2)質(zhì)粒上應(yīng)該具有腺病毒基因(組)(表達(dá)出腺病毒)、標(biāo)記基因(便于篩選)；過程①是將質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行連接，需要分別對(duì)其用限制酶進(jìn)行酶切得到相同的黏性末端，再用DNA連接酶得到重組質(zhì)粒。(3)過程②是將重組質(zhì)粒變成線性pAd，需要用PacⅠ酶進(jìn)行切割，破壞磷酸二酯鍵；基因的表達(dá)需要細(xì)胞提供場(chǎng)所、原料和酶等條件，因此線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細(xì)胞才能產(chǎn)生重組腺病毒。(4)重組腺病毒缺失復(fù)制原點(diǎn)，不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，重組腺病毒對(duì)人體相對(duì)安全；常用肌肉注射將重組腺病毒接種到人體；新冠滅活疫苗作為抗原，引起體液免疫，產(chǎn)生更多的記憶細(xì)胞和抗體，而重組腺病毒疫苗能侵入宿主細(xì)胞，引起細(xì)胞免疫。8.(1)4緩沖液、Taq酶4(2)限制酶和DNA連接酶感受態(tài)三氯生(3)(重組質(zhì)粒)pEA(4)①啟動(dòng)子S2和終止子P2(S2和P2)插在啟動(dòng)子S1和終止子P1(插在S1和P1)之間，但不破壞H基因和L基因②三氯生低溫下有綠色熒光，高溫下無綠色熒光9.(1)DNA復(fù)制c(2)擴(kuò)增重組DNA分子Ca2＋氨芐青霉素(3)(4)具有抗性的細(xì)胞死亡(5)抗原—抗體雜交抗原肽解析：(1)PCR是在體外進(jìn)行DNA復(fù)制，原理是DNA復(fù)制；引物需與經(jīng)限制酶剪切過的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)，經(jīng)分析表格中相關(guān)內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)和引物序列，只有c能和Sau3AⅠ切割的黏性末端配對(duì)。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是擴(kuò)增重組DNA分子，用于下一步的抗性檢測(cè)；大腸桿菌通常在低溫條件下，用Ca＋處理，使其轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞；據(jù)圖分析，在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可達(dá)到篩選的目的。(3)由圖可知，質(zhì)粒C＝4445＋1100＝5545bp，用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后，可能產(chǎn)生以下長度的片段：5545bp，3620bp，1925bp，具體分析見下圖：所以酶切后可能得到的電泳條帶參見答案。(4)這樣選擇既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓具有抗性的細(xì)胞死亡。(5)檢測(cè)抗原肽的原理是抗原—抗體雜交；利用單克隆抗體能檢測(cè)其抗原基因是否正確表達(dá)從而產(chǎn)生正確的抗原肽。第4練基因工程(二)1.(1)解旋A－T(2)RNA聚合3′→5′端(3)AC(4)設(shè)計(jì)P1、P2引物時(shí)在其5′端接上適宜的酶切位點(diǎn)(序列)2隨載體進(jìn)行復(fù)制；(整合到染色體DNA上，)隨染色體一起復(fù)制(5)IgG解析：(1)DNA的復(fù)制需要解旋酶破壞氫鍵，復(fù)制起始序列和解旋酶結(jié)合，開始復(fù)制；該序列富含A－T堿基對(duì)，氫鍵較少，雙螺旋容易打開。(2)啟動(dòng)子是啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的地方，與RNA聚合酶結(jié)合，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；RNA聚合酶只能識(shí)別DNA模板鏈的3′端，因此轉(zhuǎn)錄沿著DNA模板鏈的3′→5′端方向進(jìn)行。(3)目的基因內(nèi)不能含有所選的酶切位點(diǎn)，否則容易被酶切而被破壞，A正確；2個(gè)酶切位點(diǎn)距離越近，酶切容易混亂，難以得到兩個(gè)不同的黏性末端，B錯(cuò)誤；若2種限制酶最適溫度相差較大，應(yīng)實(shí)行2次單酶切，否則同時(shí)用其中的一種酶容易失活，C正確；使用兩種不同的酶，使其產(chǎn)生兩個(gè)不同的黏性末端，也能避免載體自連，不需要確保酶切位點(diǎn)一個(gè)產(chǎn)生黏性末端，另一個(gè)產(chǎn)生平末端，D錯(cuò)誤。故選AC。(4)為使目的基因能定向插入載體，