血栓與止血檢驗臨床血液學和血液檢驗編輯ppt【學習目的和要求】1．掌握血栓止血的篩選試驗、血小板檢驗、凝血因子檢驗和纖溶活性檢驗。2．了解血液流變學檢驗。.了解纖維蛋白溶解系統(tǒng)及血液流變學。

編輯ppt第一節(jié)血栓與止血篩選檢驗一期止血篩選檢驗二期止血缺陷的篩選檢驗共同途徑篩選檢驗纖溶活性增強篩選檢驗編輯ppt

一期止血出血時間（BT）血小板計數(shù)（PLT）檢驗一期止血篩選檢驗—出血時間編輯ppt

【原理】是指刺傷毛細血管后自然出血到自然止血所需的時間。

主要用于檢測毛細血管結構和功能、血小板數(shù)量和質量以及兩者之間相互作用的影響。出血時間（Bleedingtime,BT）一期止血篩選檢驗—出血時間編輯ppt【方法】血壓40mmHg，刀片長6mm，刺入皮膚深度1mm，肘前窩下5cm尺側皮膚。一期止血篩選檢驗—出血時間【參考值】6.88±2.08min編輯ppt【臨床意義】

BT延長見于①血管性血友??；②血管壁結構異常；③血小板明顯減少或增多癥；④血小板功能異常；⑤嚴重缺乏血漿某些凝血因子、DIC等；⑥纖溶亢進癥；⑦藥物干擾，如乙酰水楊酸、潘生丁等。

BT縮短見于①血栓前狀態(tài)和血栓性疾??；②藥物如促紅細胞增多癥等。一期止血篩選檢驗—出血時間編輯ppt

【原理】計數(shù)單位容積內血小板的含量【方法】普通光鏡直接計數(shù)法相差顯微鏡直接計數(shù)法–參考方法血分析儀法血小板計數(shù)（plateletcount,PLT

或bloodplateletcount,BPC）一期止血篩選檢驗—血小板計數(shù)編輯ppt【參考值】100~300G/L

【臨床意義】

減低見于①血小板生成減少；②血小板破壞過多；③血小板消耗過多。

增多見于慢性粒細胞性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、急性出血后及脾切除手術后等。一期止血篩選檢驗—血小板計數(shù)編輯ppt

一期止血的篩檢試驗臨床意義

BTPLT原因延長減少血小板減少延長增多血小板增多延長正常血小板功能缺陷延長正常血管異常正常正常血管脆性增加一期止血篩選檢驗—臨床意義編輯ppt

二期止血一期止血二期止血篩選檢驗編輯pptⅫTF↓↓Ⅺ+Ca2+Ⅶ+TF↓Ⅸ+Ⅷ+Ca2++PF3

↓

Ⅹ+Ⅴ+Ca2++PF3

ⅡⅠAPTT內源性凝血途徑外源性凝血途徑共同途徑二期止血篩選檢驗編輯ppt

二期止血缺陷的篩選檢驗全血凝固時間活化部分凝血活酶時間凝血酶原時間編輯ppt離體靜脈血發(fā)生凝固所需要的時間反映內源凝血途徑功能?；罨獣r間（activatedclottingtime,ACT）（最敏感）硅管法（較敏感）普通試管法二期止血篩選檢驗—全血凝固時間全血凝固時間（coagulationtime,CT)編輯ppt【原理】向血漿中加入足量激活劑（白陶土）和部分凝血活酶（腦磷脂）和Ca2+，從加入到血漿凝固所需的時間。二期止血篩選檢驗—活化部分凝血活酶時間活化部分凝血活酶時間（activatedpartialthromboplastintime,APTT）編輯ppt【方法】①手工法—參考方法②儀器法：光學法（比濁法）、電流法、磁珠法二期止血篩選檢驗—活化部分凝血活酶時間編輯ppt【質量控制】

①標本采集和處理患者準備——停藥1周以上;抗凝劑：0.109M枸椽酸鈉，1:9;采血：止血帶、容器、一針見血;立即分離血漿、室溫FⅧ

易失活，2h內完成。②激活劑：白陶土（此時APTT又稱kaolinpartialthromboplastintime,KPTT）,硅藻土、鞣花酸。③部分凝血活酶（腦磷脂）二期止血篩選檢驗—活化部分凝血活酶時間編輯ppt【參考值】25~35s【臨床意義】APTT結果超過正常對照10s以上的即為延長。是目前推薦應用的內源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗。是監(jiān)測肝素的首選指標。治療時APTT維持在正常對照1.5~3。0延長：內源性凝血途徑和共同途徑因子減少或缺乏；血中含有抗凝物質；纖溶亢進等?？s短：見于高凝狀態(tài)，如DIC的高凝血期等；血栓性疾病。二期止血篩選檢驗—活化部分凝血活酶時間編輯ppt【原理】

向血漿中加入足量的組織凝血活酶（TF）和Ca2+，從加入到血漿凝固所需的時間。二期止血篩選檢驗—凝血酶原時間凝血酶原時間（prothrombintime,PT）PTR=病人PT值（秒）平均正常PT值（秒）ISIINR=PTR編輯ppt【方法】①手工法—參考方法②儀器法：光學法（比濁法）、電流法、磁珠法二期止血篩選檢驗—凝血酶原時間編輯ppt【質量控制】1、標本采集和處理患者準備：停藥1周以上;抗凝劑：0.109M枸椽酸鈉，1:9;采血：止血帶、容器、一針見血;立即分離血漿、室溫FⅧ

易失活，2h內完成。二期止血篩選檢驗—凝血酶原時間編輯ppt【質量控制】2、組織凝血活酶試劑質量3、國際敏感指數(shù)（ISI）：表示標準品組織凝血活酶與每批組織凝血活酶PT校正曲線的斜率。4、報告方式病人PT（s）及正常對照PT（s）PTR；INR二期止血篩選檢驗—凝血酶原時間編輯ppt【參考值】

PT：11~15s；PTR：0.85~1.15，超過正常對照3s以上的即為延長?！九R床意義】是外源性凝血因子缺陷的篩選試驗。

PT延長或PTR增大：外源性凝血途徑和共同途徑因子減少或缺乏；血中含有抗凝物質；纖溶亢進等。

PT縮短或PTR降低：見于先天性因子Ⅴ增多癥、口服避孕藥和血栓前狀態(tài)或血栓性疾病、DIC早期。

INR是監(jiān)測口服抗凝劑的首選指標，國人以2~3為宜。二期止血篩選檢驗—凝血酶原時間編輯ppt

二期止血缺陷的篩檢試驗

原因PTAPTT

外源途徑缺陷AN內源途徑缺陷NA

共同途徑缺陷AA血中有抗凝物質AA二期止血篩選檢驗—臨床意義編輯pptFgFMFbX、Y、D、E,Bβ1-42，A、B、C、HX,、Y,、D、E,,Bβ15-42，A、B、C、HX、Y、D、E,DDPLPLPLFⅡaFPA/BFⅩⅢa纖溶活性增強篩選檢驗纖維蛋白溶解機制及產物編輯ppt【原理】膠乳凝集試驗：纖溶活性增強篩選檢驗—FDP纖維蛋白（原）降解產物F（g）DP檢測

FDP抗FDP編輯ppt【參考值】血清FDP<5mg/L；尿FDP28±17μg/L【臨床意義】血液中FDP增高：原、繼發(fā)纖溶亢進，溶栓治療等。尿中FDP增高：見于急性腎炎、慢性腎炎、尿毒癥、腎移植術后排斥反應、妊娠毒血癥以及DIC等。纖溶活性增強篩選檢驗—FDP編輯ppt【原理】膠乳凝集試驗：纖溶活性增強篩選檢驗—DD2、D-二聚體（D-dimer,DD）DD抗DD編輯ppt【參考值】

陰性或<0.5mg/L【臨床意義】

DD在繼發(fā)性纖溶癥時升高，而在原發(fā)性纖溶癥時正常，這是鑒別兩者的重要依據(jù)。高凝狀態(tài)、血栓性疾病和DIC時、血漿DD體明顯升高，是診斷DIC的重要依據(jù)。

纖溶活性增強篩選檢驗—DD編輯ppt

原發(fā)性纖溶與繼發(fā)性纖溶的鑒別

原因FDPD-dimer原發(fā)性纖溶增高陰性繼發(fā)性纖溶增高陽性溶栓治療

增高陽性纖溶活性增強篩選檢驗編輯ppt第二節(jié)血管壁（內皮）檢驗血管性血友病因子抗原檢測血漿內皮素-1檢測血漿血栓調節(jié)蛋白抗原檢測編輯ppt【原理】

ELISA或其它免疫學方法【參考值】94.1%±32.5%【臨床意義】減低血管性血友病，是診斷vWD及其分型的重要指標。增高：見于血栓性疾病如心肌梗死、腦血栓等。血管壁檢驗—血管性血友病因子血管性血友病因子抗原（vWF:Ag)檢測編輯ppt【原理】

在瑞斯托霉素存在的條件下，vWF通過與血小板GPⅠb/Ⅸ相互作用，使血小板發(fā)生凝集。凝集強度與受檢血漿中的vWF量和（或）質有關?！緟⒖贾怠?/p>

50%～150%【臨床意義】血小板對瑞斯托霉素的誘導不產生聚集，是vWD的特異性診斷試驗之一，是診斷vWD及其分型的重要指標。血管壁檢驗—血管性血友病因子瑞斯托霉素因子(vWF:Rcof)活性檢測

編輯ppt【原理】

ELISA或其它免疫學方法【參考值】<5ng/L【臨床意義】可了解血管內皮損傷程度，進行血栓性疾病流行病學研究的指標。增高：見于心肌梗死、心絞痛、缺血性腦卒中、腎功能衰竭、醛固酮增多癥、支氣管哮喘、妊高征等。血管壁檢驗—內皮素-1血漿內皮素-1（ET-1）檢測編輯ppt【原理】

ELISA或其它免疫學方法【參考值】TM:Ag25~52μg/L【臨床意義】是了解血管內皮損傷的最好指標。增高：見于糖尿病、DIC、血栓性血小板減少性紫癜、SLE、血栓性疾病如心肌梗死、腦血栓等。血管壁檢驗—TM血漿血栓調節(jié)蛋白抗原(TM:Ag)檢測編輯ppt第三節(jié)血小板檢驗血小板相關抗體檢測血小板粘附試驗血小板聚集試驗血小板膜糖蛋白檢測β-血小板球蛋白和血小板第4因子檢測血小板P選擇素檢測編輯ppt【原理】ELISA【參考值】PAIgG0~78.8ng/107血小板，PAIgM0~7.0ng/107血小板，PAIgA0~2ng/107血小板【臨床意義】急性和慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜，顯著增高。血小板檢驗—血小板抗體血小板相關抗體檢測編輯ppt【原理】血小板檢驗—粘附試驗血小板粘附試驗(plateletadhensiontest,PAdT）編輯ppt【參考值】玻璃柱法53.9%~70.1%【臨床意義】增高：見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低：見于vDW、巨大血小板綜合征、血小板無力癥、肝硬化、尿毒癥、MDS、抗血小板藥物等。血小板檢驗—粘附試驗編輯ppt【原理】在富血小板血漿中加入致敏劑，血小板發(fā)生聚集，濁度減低，透光度增加。記錄變化曲線，了解血小板聚集程度和速度。血小板檢驗—聚集試驗血小板聚集試驗（plateletaggrregationtest,PAgT）編輯ppt【參考值】因方法和致聚劑而異?！九R床意義】

增高：血小板聚集功能增強，見于高凝狀態(tài)和（或）血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低：見于巨大血小板綜合征、血小板無力癥、肝硬化、尿毒癥、MDS、抗血小板藥物等。血小板檢驗—聚集試驗編輯ppt【參考值】GPIa:（1.54±0.49）×104分子數(shù)/血小板;GPIIb/Ⅲa:（5.45±1.19）×104分子數(shù)/血小板【臨床意義】增高：反應血小板被活化，見于血栓前狀態(tài)和/或血栓性疾病。GPI缺乏見于巨大血小板綜合征;GPIIb/Ⅲa缺乏見于血小板無力癥。血小板檢驗—膜糖蛋白血小板膜糖蛋白（GP）檢測編輯ppt【參考值】β-TG：6.6~26.2μg/LPF4：0.9~5.5μg/L【臨床意義】兩者臨床意義相同。增高：反應血小板被激活及其釋放反應亢進，見于血栓前狀態(tài)和（或）血栓性疾病。減低：見于先天性或獲得性貯存池?。é令w粒缺陷癥）。

血小板檢驗—β-TG、PF4

β-血小板球蛋白（β-TG）和血小板第4因子（PF4）檢測編輯ppt【參考值】（9000±1100）分子數(shù)/血小板【臨床意義】增高：反應血小板被激活及其釋放反應亢進，見于血栓前狀態(tài)和（或）血栓性疾病。血小板檢驗—P選擇素血小板P選擇素檢測編輯ppt第四節(jié)凝血因子檢驗纖維蛋白原含量檢測血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定血漿因子ⅩⅢ定性試驗編輯ppt【原理】

Clouse法：在受檢血漿中加入凝血酶，血漿凝固所需的時間與Fg含量多少呈負相關?！痉椒ā?/p>

Clouse法：參考方法其它：免疫法、比濁法、化學法【質量控制】同PT凝血因子檢驗—纖維蛋白原纖維蛋白原(fibrinogen,Fg)含量檢測編輯ppt【參考值】Clouse法：2~4g/L【臨床意義】增高：組織壞死和炎癥：AMI發(fā)作期、急性感染、急性腎炎和尿毒癥、結締組織病、大手術后、妊娠晚期和妊高癥；糖尿病、惡性腫瘤等。減少：DIC和原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等。凝血因子檢驗—纖維蛋白原編輯ppt凝血因子檢驗—Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定【原理】

于缺乏因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的血漿中，加入正常血漿或病人的受檢血漿，再加入組織凝血活酶（TF）和Ca2+，分別作PT測定。從各自的標準曲線中計算出結果。編輯ppt凝血因子檢驗—Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定【參考值】FⅡ:C81.0%~114.4%；FⅤ:C71.5%~133.3%；FⅦ:C85.7%~120.3%；FⅩ:C84.0%~122.0%【臨床意義】

增高主要見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。

減低主要見于減低：主要見于先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏癥；獲得性主要見于肝病、VitK缺乏、DIC、口服抗凝藥等。

編輯ppt凝血因子檢驗—Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定【原理】于缺乏因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ或Ⅻ的血漿中，加入正常血漿或病人的受檢血漿，再加入白陶土腦磷脂懸液和Ca2+，分別作APTT測定。從各自的標準曲線中計算出結果。編輯ppt凝血因子檢驗—Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定【參考值】FⅧ:C77.3%~128.7%；FⅨ:C67.6%~128.5%；FⅪ:C81.6%~118.4%；FⅫ:C71.7%~113.1%【臨床意義】

增高主要見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。

減低：①FⅧ:C、FⅨ:C、FⅪ:C減低分別見于血友病A、血友病B和FⅪ缺乏癥。②肝病、VitK缺乏、DIC、口服抗凝藥等。編輯ppt凝血因子檢驗—ⅩⅢ定性血漿因子ⅩⅢ定性試驗【原理】于受檢血漿中加入Ca2+，將形成的纖維蛋白凝塊置于5mol/L的尿素溶液中，若24h內纖維蛋白凝塊溶解，表示ⅩⅢ缺乏?！緟⒖贾怠?4h內纖維蛋白凝塊不溶解【臨床意義】若24h內纖維蛋白凝塊溶解，表示ⅩⅢ缺乏。編輯ppt生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

生理性抗凝蛋白檢測

第五節(jié)生理性抗凝蛋白檢測

抗凝血酶活性檢測蛋白C活性檢測組織因子途徑抑制物檢測編輯ppt生理性抗凝蛋白檢測—抗凝血酶抗凝血酶活性（AT:A）檢測【原理】受檢血漿中加入過量凝血酶，使AT與凝血酶形成1:1復合物，剩余的凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238，釋出發(fā)色基團對硝基苯胺（PNA），顯色深淺與剩余的凝血酶成正相關，與AT呈負相關；根據(jù)A值從標準曲線計算出AT:A。編輯ppt生理性抗凝蛋白檢測—抗凝血酶【參考值】AT:A：103.2%~113.8%【臨床意義】

增高見于血友病、白血病和再生障礙性貧血等的急性出血期及口服抗凝藥。減低見于先天性或獲得性AT缺乏癥，后者見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病、DIC和肝臟疾病等。

抗凝血酶活性（AT:A）檢測編輯ppt生理性抗凝蛋白檢測—蛋白C活性【原理】發(fā)色底物法：受檢血漿中加入PC激活劑，PC被激活為APC，作用于發(fā)色底物PCA，釋出發(fā)色基團PNA，顯色深淺與PC成正相關，根據(jù)A值從標準曲線計算出PC:A。蛋白C活性（PC:A）檢測編輯ppt生理性抗凝蛋白檢測—蛋白C活性【參考值】發(fā)色底物法：87.02%~113.38%【臨床意義】減低：先天性或獲得性PC缺乏癥，后者見于DIC、肝病、手術后、口服抗凝劑、急性呼吸窘迫綜合征等。蛋白C活性（PC:A）檢測編輯ppt生理性抗凝蛋白檢測—TFPT【參考值】ELISA70.9~124.1μg/L【臨床意義】減低：嚴重創(chuàng)傷、廣泛手術、膿毒血癥、休克、DIC、血栓性疾病。增高：老年人、妊娠、腎衰竭等。組織因子途徑抑制物（TFPT）檢測編輯ppt第六節(jié)病理性抗凝物質檢驗復鈣交叉試驗凝血酶時間凝血酶時間糾正試驗編輯ppt病理性抗凝物質檢驗—復鈣交叉試驗

復鈣時間（RT）延長的血漿能被1/10正常血漿糾正，則說明凝血因子異常，復鈣時間不在正常范圍之內（2.2~3.8min），則認為受檢血漿中存在異?？鼓镔|。后者見于反復輸血的血友病患者、嚴重肝臟病、SLE、類風濕關節(jié)炎等。復鈣交叉試驗（crossrecalcificationtest,CRT）編輯ppt【原理】在受檢血漿中加入凝血酶，從加入到血漿凝固所需的時間?！痉椒ā客琍T【質量控制】同PT病理性抗凝物質檢驗—凝血酶時間凝血酶時間(thrombintime,TT)編輯ppt【參考值】透射比濁法16~18s，超過正常對照3s以上為延長?！九R床意義】反映共同途徑是否異常。延長：低(無)纖維蛋白原血癥、纖溶亢進、抗凝物質存在等。見于DIC、FDP增多等；肝素或類肝素物質增多。病理性抗凝物質檢驗—凝血酶時間編輯ppt病理性抗凝物質檢驗—凝血酶時間糾正試驗TT延長的血漿中加入甲苯胺藍后，TT縮短5秒以上，提示受檢血漿中有肝素類或肝素類物質增多；若不縮短，表示受檢血漿中存在其它抗凝血酶類物質或纖維蛋白原缺陷。

在過敏性休克、應用氮芥、放療后、嚴重肝臟病、肝葉切除術后、肝移植后患者血漿中有肝素或類肝素增多，肝素治療的患者，其延長的TT也可被糾正。凝血酶時間糾正試驗(甲苯胺藍糾正試驗)編輯ppt第七節(jié)纖溶活性檢驗血漿魚精蛋白副凝集試驗組織型纖溶酶原激活物測定纖溶酶原活化抑制物活性測定血漿纖溶酶原活性

測定α2-抗纖溶酶活性測定編輯pptsct-PAtcu-PAscu-PAtct-PAPLGPLPKKFⅫaHMWKPAI-1PAI-2C1-抑制物2抗纖酶2巨球蛋白t-PASKUK內激活途徑（繼發(fā)）外激活途徑（原發(fā)）外源激活途徑Fb纖溶活性檢驗—纖溶機制編輯ppt纖維蛋白溶解產物FgFMFbX、Y、D、E,Bβ1-42，A、B、C、HX,、Y,、D、E,,Bβ15-42，A、B、C、HX、Y、D、E,DDPLPLPLFⅡaFPA/BFⅩⅢa纖溶活性檢驗編輯ppt纖溶活性檢驗—3P血漿魚精蛋白副凝集試驗(3P)

【原理】

FM+FDPFM

FM自行聚合呈肉眼可見的纖維網狀、膠狀或膠凍狀，此為陽性結果【參考值】陰性【臨床意義】陽性：見于繼發(fā)性纖溶，如DIC的早期或中期。魚精蛋白編輯ppt纖溶活性檢驗—t-PA組織型纖溶酶原激活物(t-PA)測定【原理】

發(fā)色底物法【參考值】0.3~0.6U/ml【臨床意義】增高見于原發(fā)性或繼發(fā)性纖溶癥。減低見于高凝狀態(tài)和血栓性疾病。編輯ppt纖溶活性檢驗—PAI:A纖溶酶原活化物抑制物活性（PAI:A）測定【參考值】發(fā)色底物法：0.1~1.0抑制單位/毫升【臨床意義】增高見于血栓前狀態(tài)、血栓栓塞時。減低見于原發(fā)性或繼發(fā)性纖溶癥。

編輯ppt纖溶活性檢驗—PLG:A血漿纖溶酶原活性(PLG:A)測定【參考值】發(fā)色底物法：75%~140%【臨床意義】增高見于血栓前狀態(tài)、血栓栓塞性疾病。