真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第1頁(yè)真菌及深部真菌感染真菌在自然界中分布很廣,其細(xì)胞壁主要成份為(1-3)-?-D-Glucan(葡聚糖).深部真菌感染:是指侵犯機(jī)體皮下組織,內(nèi)臟器官及中樞神經(jīng)系統(tǒng)真菌性疾病.當(dāng)前,深部真菌感染已成為免疫功效低下患者發(fā)病和死亡最常見原因。常見有念珠菌病、孢子絲菌病、隱珠菌病、曲霉病、毛霉菌病、馬爾尼菲青霉菌病、組織孢漿菌病以及球孢子、副球孢子菌病等臨床病癥.真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第2頁(yè)深部真菌感染發(fā)展趨勢(shì)伴隨廣譜抗生素、激素和免疫抑制劑以及各種導(dǎo)管插管等治療伎倆廣泛應(yīng)用,患者由真菌引發(fā)感染增多，尤其是深部真菌感染發(fā)病率增高（8%-25%）,另外對(duì)于免疫功效低下患者,如HIV感染者,糖尿病患者,移植患者等,易發(fā)生深部機(jī)會(huì)性真菌感染.所以,深部真菌感染對(duì)患者健康與生命組成嚴(yán)重威脅.發(fā)病率逐年增加.真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第3頁(yè)真菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)示意圖真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第4頁(yè)深部真菌檢測(cè)臨床意義

經(jīng)過對(duì)真菌細(xì)胞壁成份1-3-β-D-Glucan動(dòng)態(tài)快速檢測(cè),對(duì)深部真菌感染作到快速診療及對(duì)癥治療,而且不受血中抗生素、酶類等成份影響。判別輔助診療。療效動(dòng)態(tài)觀察。真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第5頁(yè)(1-3)-β-D-Glucan檢測(cè)傳統(tǒng)檢測(cè)真菌方法:包含直接鏡檢和培養(yǎng)檢驗(yàn),當(dāng)前因?yàn)榭股貜V泛應(yīng)用,其真菌檢測(cè)陽(yáng)性率很低.不能滿足臨床檢驗(yàn)需求.當(dāng)前臨床深部真菌發(fā)病率越來越高.國(guó)外:90年代以后相繼出現(xiàn)(1-3)-β-D-Glucan快檢試劑盒:如FUNGITELL(AmericanFDA認(rèn)可)FUNGITECGTESTMK/β-Glucantest(Japan厚生省)我國(guó):GKT-5MSET其它(無)真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第6頁(yè)GKT-5MSET檢測(cè)原理與(1-3)-β-D-Glucan檢測(cè)機(jī)理1相同,為動(dòng)態(tài)檢測(cè)反應(yīng)原理.不受反應(yīng)液本身顏色干擾影響,同時(shí)不受抗生素類藥品等干擾影響.該檢測(cè)試劑盒當(dāng)前在我國(guó)屬于第一家真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第7頁(yè)GKT-5MSET主要技術(shù)指標(biāo)1.靈敏度:最低檢測(cè)限5pg/ml.2.精密度:批間CV<10%3.準(zhǔn)確性:回收率75-125%4.曲線范圍:5-9000pg/ml5.相關(guān)系數(shù)r0.980真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第8頁(yè)GKT-5MSET臨床驗(yàn)證7家醫(yī)院試驗(yàn)匯總結(jié)果組別正常組試驗(yàn)組疾病對(duì)照組類別健康人群真菌感染G-菌感染G+菌感染病毒感染總?cè)藬?shù)307251299284284XSD4.150.68533.29119.378.080.708.470.947.780.64Cutoff值<10pg/ml真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第9頁(yè)深部真菌感染患者血漿1-3-β-D葡聚糖檢測(cè)

病例選擇深部真菌感染患者35例，年齡12－88歲，來自我院年1月到5月住院患者，均經(jīng)培養(yǎng)證實(shí)存在深部真菌感染，感染部位包含呼吸道、泌尿道、血液及靜脈插管引發(fā)系統(tǒng)性感染。正常健康對(duì)照組30人，來自我院健康查體者。

真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第10頁(yè)檢測(cè)結(jié)果正常對(duì)照組血漿1-3-β-D葡聚糖含量最高為7.29pg/ml，最低為0.45pg/ml，平均值為2.83±2.57pg/ml；深部真菌感染組血漿1-3-β-D葡聚糖含量最高為168.9pg/ml，最低為14.93pg/ml，平均值為54.06±36.13pg/ml。經(jīng)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件T-檢驗(yàn)分析，對(duì)照組與深部真菌感染組1-3-β-D葡聚糖平均值差異非常顯著（t=7.741,P＜0.001）。真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第11頁(yè)討論--1葡聚糖廣泛存在于真菌細(xì)胞壁中，占其干燥重量80%～90%。其中1-3--β-D糖苷鍵連接葡萄糖殘基骨架作為主鏈，分支狀1-6--β-D葡糖糖殘基作為側(cè)鏈。

真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第12頁(yè)討論--2對(duì)于1-3--β-D葡聚糖在深部真菌感染中作用，YoshidaM[2]等認(rèn)為可能與內(nèi)毒素在革蘭陰性桿菌感染中作用類似，但當(dāng)前暫未明了。

真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第13頁(yè)討論--3當(dāng)真菌進(jìn)入人體血液或深部組織后，經(jīng)吞噬細(xì)胞吞噬、消化等處理，1-3--β-D葡聚糖可從胞壁中釋放出來，從而使血液及其它體液（如尿、腦脊液，腹水，胸水等）中1-3--β-D葡聚糖含量增高。當(dāng)真菌在體內(nèi)含量降低時(shí)，機(jī)體免疫可快速去除1-3--β-D葡聚糖。而在淺部真菌感染中，1-3--β-D葡聚糖未被釋放出來，故其在體液中量不增高。有研究報(bào)道葡聚糖在念珠菌血癥時(shí)顯著升高，將其用于念珠菌血癥早期診療顯著優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)法和血清學(xué)診療試驗(yàn)[3-4]。咱們?cè)囼?yàn)得到了相同結(jié)果。真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第14頁(yè)討論--4另?yè)?jù)文件報(bào)道，檢測(cè)葡聚糖含量不能用于隱球菌感染診療[1]，可能因?yàn)殡[球菌在免疫缺點(diǎn)患者體內(nèi)生長(zhǎng)遲緩，并形成厚莢膜。有體外試驗(yàn)表明，新生隱球菌產(chǎn)生1-3--β-D葡聚糖量比念珠菌和曲霉菌少。但也有文件報(bào)道新生隱球菌感染后血清葡聚糖升高也十分顯著[5]。所以，相關(guān)隱球菌感染后葡聚糖改變還有待深入試驗(yàn)驗(yàn)證。真菌動(dòng)態(tài)測(cè)定第15頁(yè)討論--5咱們檢測(cè)深部真菌感染患者均經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)證實(shí)為念珠菌感染，包含白色念珠菌23株、熱帶念珠菌8株、季也蒙念珠菌1株、克柔念珠菌1株和光滑球擬假絲酵母菌2株，無隱球菌感染。如以10pg/ml