ASTME2149-01在動態(tài)接觸條件下測定穩(wěn)態(tài)抗菌劑的抗菌行為1范圍（1）該測試法用于評價非溶出型抗菌試樣在動態(tài)接觸細菌的條件下對細菌生長的抑制行為。該法克服了采用經(jīng)典抗菌測試法時所存在的困難，如AATCC100中要確保樣品與培養(yǎng)液表面緊密接觸、AATCC147中不合理靜態(tài)條件的應用以及靈敏性、重現(xiàn)性問題等。該法可用于測定多種污染物。（2）通過從測試樣到同步運行控制的結果對比來測定表面的抗菌活性；（3）通過抑菌區(qū)出現(xiàn)的前后來測定溶出抗菌劑的存在。2參考文獻（1）ASTM標準E1054評價了抗菌劑在消毒劑、食品加工用消毒殺菌劑、產(chǎn)品的防腐或保存中的抑菌行為；（2）其他文獻AATCC147-1998，織物抗菌活性的評價：平行條紋法；AATCC100-1999，織物抗菌性的整理。3原理穩(wěn)態(tài)抗菌劑（如表面粘結材料）在常規(guī)使用條件下并不容易擴散到周圍環(huán)境中，如AATCC147測試法直接依賴于抗菌劑從處理樣品中的迅速溶出性，而其中這些處理樣品并不適合用于評價穩(wěn)態(tài)抗菌劑的抗菌活性。該法通過在測試過程中不斷攪拌放在細菌懸浮液中的測試樣以保證細菌與處理纖維、織物或其他基底的良好接觸。該測試法適用于評價在充分條件控制下的受壓或修飾的樣品。注：上述的受壓可包括洗燙、穿、摩擦、輻射、蒸汽滅菌、紫外曝光、溶劑處理、熱傳感或類似的物理或化學處理。4強調(diào)及使用基底束縛的抗菌劑的抗菌活性取決于細菌和活性化學劑間的直接接觸。該測試法通過振蕩在一定濃度細菌懸浮液中的表面束縛材料樣品（樣品與細菌接觸時間為1h或由調(diào)查者指定時間）。懸浮液連續(xù)稀釋2次，可以測定懸浮液中活的有機物的數(shù)目，細菌的減少率可基于起始的數(shù)目或未經(jīng)處理的空白樣上的細菌數(shù)目進行計算。注：該測試法用于在指定接觸時間下具有50％-100％還原活性的表面。5儀器（1）滅菌器（2）培養(yǎng)皿（3）分光光度計（4）振蕩瓶－可采用WristAction振蕩瓶，但帶有其他攪拌方式的振蕩瓶對于常規(guī)的測試也可使用。振蕩瓶必須保證充分的攪拌，不宜用旋轉型振蕩瓶。（5）水盆（6）漩渦混合器（7）玻璃器具：接觸瓶－250ml厄倫美厄瓶，帶塞，能經(jīng)受住壓熱器的作用稀釋管；吸液管（8）瓊脂：孔徑為8mm6試劑6.1緩沖溶液－對于需要改變體系PH值的測試樣，可用PH＝6.8的索楞遜磷酸鹽作為緩沖液。采用其他適宜的緩沖液必須保證測試前在指定使用的濃度下不會引起細菌數(shù)目的增加或減少。0.25MKH2PO4儲存緩沖液：至少每6個月制備一次新溶液如下：稱取34±0.1g的KH2PO4固體于100ml燒杯中，加入500ml蒸餾水，用稀釋的NaOH溶液溶液調(diào)節(jié)PH=7.2±0.1，稀釋至1000ml，轉移到容量瓶中，4℃保存；對于工作用緩沖液（0.3mMKH2PO4）：至少每2個月制備一次新溶液如下：用無菌吸液管轉移1ml±0.1ml儲存緩沖液于含有800ml蒸餾水的容量瓶中，加蓋，滅菌。6.2媒介：營養(yǎng)肉湯或其他有機體可選用的適宜媒介；蛋白胨葡萄糖膏瓊脂或其他有機體可選用的適宜媒介；6.3潤濕表面活性劑－測試前在指定的濃度下不會引起細菌數(shù)目的增加或減少。注：0.01%的MIQ2-5211最終稀釋液或其他等價物。7測試有機體Klebsiella肺炎菌或其他由調(diào)查者決定的有機體：測試有機體的培養(yǎng)液應根據(jù)良好的微生物實踐、純凈度檢查以及基于常規(guī)基礎之上來保持。測試的一致性及準確性要求測試用培養(yǎng)液要純凈、無污染。在制板、轉移等過程中采用良好的無菌技術來避免污染。通過嚴格執(zhí)行每一個月轉移一次儲存液來避免基因突變或逆轉。通過定期制備條紋平板和觀察具有單一種群特征的細菌群來檢查培養(yǎng)液的純凈度。注：Klebsiella肺炎菌肉湯培養(yǎng)液中出現(xiàn)光澤表明出現(xiàn)逆轉，此時培養(yǎng)液不能再用。8參數(shù)值（D）不得超過15％，此時，有機物的減少率直接用經(jīng)處理樣（A）/未處理的檢查檢查標準用試樣（D），將B換成D重復上述公式并記錄。C：CFU/ml或平均log10細菌密度（對于在指定接觸時間之后僅含有檢查標準用接種體的瓶子）；D：CFU/ml或平均log10細菌密度（對于在指定接觸時間之后含有未經(jīng)處理培養(yǎng)基底的瓶子）；注：若未經(jīng)處理的織物檢查標準用試樣不可用，并且在接觸時間之后僅含有檢查標準用試樣接種體瓶子中計算數(shù)值與原始測量數(shù)值相差超過15％，則需重新測試。11.9若死亡率常數(shù)達到預期效果，記錄并報道最接近的百分數(shù)的一半或十分之一的平均log10細菌密度。12溶出型抗菌劑行為測定程序12.1樣品分析采用AATCC147-1998測抑菌區(qū)是否出現(xiàn)；12.2表面分析（1）采用匯合的菌苔（即均勻生長于固體培養(yǎng)基上的）接種蛋白胨葡萄糖膏瓊脂平板或適宜的瓊脂作為測試有機體，并允許干燥；（2）中心孔徑為8mm的接種瓊脂平板，并除去塞子；（3）按10節(jié)中準備測試樣，要求每塊樣品都要有一塊未經(jīng)處理的空白樣；（4）準備2個含有50ml無菌緩沖液的250ml的無菌接觸瓶；（5）把測試樣與檢查標準用試樣均放在它們各自的瓶子中，蓋緊瓶子，放進振蕩瓶，按11.4中規(guī)定時間進行振蕩；（6）