云南省昆明市官渡區(qū)藝卓中學(xué)2023年高三生物第一學(xué)期期末學(xué)業(yè)水平測(cè)試模擬試題注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書(shū)寫(xiě)，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效；在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于藍(lán)藻和黑藻的敘述，正確的是（）A．都是生產(chǎn)者，都有細(xì)胞壁B．光合色素都分布在類囊體膜中C．都以DNA為主要的遺傳物質(zhì)D．在細(xì)胞分裂時(shí)，都會(huì)發(fā)生染色質(zhì)和染色體的轉(zhuǎn)化2．從自然界中的生物體內(nèi)分離得到的天然酶，在工業(yè)生產(chǎn)環(huán)境中催化效率往往較低?？蒲腥藛T通過(guò)下圖所示的流程改造天然酶，已改進(jìn)酶的功能。對(duì)這一改造過(guò)程的分析，不合理的是（）A．①過(guò)程產(chǎn)生的基因突變是隨機(jī)的B．②過(guò)程中受體菌應(yīng)處理為感受態(tài)C．③過(guò)程篩選突變酶依賴于抗生素D．多次重復(fù)循環(huán)導(dǎo)致酶的定向進(jìn)化3．白化病與鐮刀型細(xì)胞貧血癥是兩種常見(jiàn)的人類單基因遺傳病，發(fā)病機(jī)理如下圖所示。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．①②分別表示轉(zhuǎn)錄、翻譯，主要發(fā)生在細(xì)胞核中B．由于基因的選擇性表達(dá)，導(dǎo)致M1與M2在結(jié)構(gòu)上有差異C．圖中兩基因?qū)ι镄誀畹目刂品绞较嗤珼．調(diào)查白化病的發(fā)病率和遺傳方式，選擇調(diào)查對(duì)象的要求不完全相同4．下列關(guān)于乳酸菌和酵母菌的敘述，正確的是（）A．遺傳物質(zhì)都是DNA，都與蛋白質(zhì)結(jié)合組成染色體B．在無(wú)氧條件下，兩者的有氧呼吸過(guò)程都會(huì)受到抑制C．在有氧條件下，兩者都能將葡萄糖分解產(chǎn)生C02并釋放能量D．在基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成時(shí)，兩種微生物共用一套遺傳密碼5．下列關(guān)于人體骨骼肌細(xì)胞呼吸的敘述，敘述正確的是（）A．若需氧呼吸和厭氧呼吸消耗的葡萄糖比為1：3，則該組織消耗的氧氣量與產(chǎn)生的二氧化碳之比為1：2B．在缺氧條件下，細(xì)胞主要進(jìn)行厭氧呼吸可以快速地利用葡萄糖產(chǎn)生ATPC．糖酵解產(chǎn)生的丙酮酸，缺氧條件下可被乳酸脫氫酶還原為乳酸D．呼吸過(guò)程中釋放的大部分能量用來(lái)維持體溫6．在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，調(diào)控赤霉素（GA）生物合成和代謝途徑的關(guān)鍵酶的基因表達(dá)可以控制植物體內(nèi)GA的含量，GA3氧化酶（GA3ox）促進(jìn)活性GA的生成，GA2氧化酶（GA2ox）能夠使GA失活，兩者在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．上述事例說(shuō)明，基因通過(guò)控制酶的合成間接控制生物性狀B．利用赤霉素和生長(zhǎng)素類似物都能夠培育無(wú)子果實(shí)C．GA3ox和GA2ox之間相互協(xié)調(diào)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA含量的精準(zhǔn)控制D．GA3ox的過(guò)量合成對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育是有利的，GA2ox則相反二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來(lái)的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問(wèn)題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無(wú)毒的丙氧鳥(niǎo)苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過(guò)__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會(huì)發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過(guò)__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對(duì)受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長(zhǎng)大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過(guò)的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過(guò)了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過(guò)的小鼠。8．（10分）轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過(guò)程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這在基因治療、疫苗研發(fā)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景?；卮鹣铝袉?wèn)題。（l）腺病毒營(yíng)____活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識(shí)別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可獲得相同的____，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的___。（3）通過(guò)腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞，利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為_(kāi)_______。這時(shí)，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入___等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。9．（10分）下圖為一種單基因遺傳病的系譜圖，相關(guān)基因用A?a表示?(圖示過(guò)程無(wú)變異發(fā)生)請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）若該遺傳病是伴X染色體遺傳病，則Ⅲ2的基因型是____________，圖譜中一定為雜合子的個(gè)體是____________，Ⅰ1的致病基因的傳遞過(guò)程體現(xiàn)了_____________的遺傳特點(diǎn)?（2）如果該遺傳病的致病基因位于常染色體上，則第Ⅲ代中__________的一個(gè)致病基因一定來(lái)源于Ⅰ1，判斷理由是________________________。（3）圖中三代全部個(gè)體中的_______與正常人婚配，最容易驗(yàn)證基因A?a是否位于X染色體上，若A?a位于X染色體上，則其后代表現(xiàn)型特點(diǎn)為_(kāi)__________________。10．（10分）科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上，獲得了雙雜交瘤細(xì)胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可以同時(shí)結(jié)合兩種抗原。（1）科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)，引起機(jī)體的__________免疫，__________分泌相應(yīng)抗體。（2）科研人員獲得上述小鼠的脾臟細(xì)胞，制備兩種雜交瘤細(xì)胞。每種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體結(jié)構(gòu)、與抗原結(jié)合的情況如圖1所示。①制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需將上述小鼠的脾臟組織，用__________處理獲得單細(xì)胞后，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞。將兩種雜交瘤細(xì)胞用__________試劑處理促進(jìn)其融合，在培養(yǎng)基中加入__________（天然成分）培養(yǎng)。如果兩種細(xì)胞成功融合，則會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細(xì)胞稱作雙雜交瘤細(xì)胞。②抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進(jìn)行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同）。因此，雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時(shí)與抗原α、β結(jié)合稱為雙特異性抗體，如圖2。請(qǐng)將A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中__________。123456A2α③為使雙雜交瘤細(xì)胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員對(duì)重鏈、輕鏈的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過(guò)改變__________，進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)“榫卯”式互補(bǔ)組裝的唯一性，這種改造屬于現(xiàn)代生物技術(shù)中的__________工程。（3）結(jié)合雙特異性抗體特點(diǎn)，請(qǐng)分析其在腫瘤治療方面的應(yīng)用前景：________。11．（15分）下圖是甲狀腺激素分泌調(diào)控模式圖，主要包括①至⑤五個(gè)過(guò)程，其中，TRH及TSH分別表示促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）寒冷刺激后，圖中過(guò)程__________的活動(dòng)較其它過(guò)程更早增強(qiáng)，過(guò)程③產(chǎn)生的激素可作用于肝細(xì)胞，提高其__________________的速率，使機(jī)體產(chǎn)熱增多。（2）圖中過(guò)程④和⑤表示_________________調(diào)節(jié)。甲狀腺激素能進(jìn)入垂體TSH分泌細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，表明該細(xì)胞能通過(guò)_________________接受信息。（3）人體長(zhǎng)期缺碘會(huì)導(dǎo)致甲狀腺增生(俗稱大脖子病)，此時(shí)圖中過(guò)程__________在增強(qiáng)。（4）臨床上可通過(guò)抽取血樣來(lái)檢測(cè)內(nèi)分泌系統(tǒng)的疾病，原因是激素_______________。某甲狀腺功能異常患者，檢測(cè)到其體內(nèi)產(chǎn)生了大量TSH受體的抗體，該抗體可以結(jié)合TSH受體而充當(dāng)TSH的作用，則該患者血液中TSH含量比正常值___________。另一甲狀腺功能異?；颊撸虑鹉X功能正常，血液中TSH和甲狀腺激素含量明顯低于正常值，此時(shí)醫(yī)生可通過(guò)靜脈注射_____________________，然后檢測(cè)血液中甲狀腺激素含量是否明顯升高來(lái)診斷該患者甲狀腺是否發(fā)生了病變。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

藍(lán)藻是原核生物，沒(méi)有被核膜包圍的細(xì)胞核，沒(méi)有復(fù)雜的細(xì)胞器，只有核糖體一種細(xì)胞器，含有葉綠素和藻類素，能進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，屬于生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者；黑藻是真核生物，有成形的細(xì)胞核，有復(fù)雜的細(xì)胞器，能進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，也屬于生產(chǎn)者?！驹斀狻緼、藍(lán)藻是原核生物，黑藻是真核生物，都能進(jìn)行光合作用，都具有細(xì)胞壁，都是生產(chǎn)者，A正確；B、藍(lán)藻的光合色素分布在質(zhì)膜上，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)就是DNA，無(wú)主次之分，C錯(cuò)誤；D、藍(lán)藻無(wú)染色體，D錯(cuò)誤。故選A。【點(diǎn)睛】本題考查原核細(xì)胞和真核的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，首先明確藍(lán)藻是原核生物，黑藻是真核生物；其次要求識(shí)記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。2、C【解析】

題圖分析：圖示表示改造天然酶的流程，其中①②③④分別表示對(duì)天然酶基因進(jìn)行易錯(cuò)PCR、分別導(dǎo)入不同的受體菌、篩選催化效率高的突變酶、提取相關(guān)的酶基因?！驹斀狻緼、①過(guò)程產(chǎn)生的基因突變是隨機(jī)的，A正確；B、②過(guò)程中導(dǎo)入受體菌時(shí)，應(yīng)用鈣離子處理為感受態(tài)狀態(tài)，B正確；C、③過(guò)程篩選突變酶依賴于抗原-抗體雜交，C錯(cuò)誤；D、多次重復(fù)循環(huán)導(dǎo)致酶的定向進(jìn)化，使酶的活性越來(lái)越高，D正確。故選C。3、D【解析】

1、分析題圖可知，基因1經(jīng)①轉(zhuǎn)錄形成M1（mRNA），經(jīng)②翻譯形成血紅蛋白，構(gòu)成正常紅細(xì)胞或鐮刀型紅細(xì)胞；基因2經(jīng)①轉(zhuǎn)錄形成M2（mRNA），經(jīng)②翻譯形成酪氨酸酶，酪氨酸酶作用于酪氨酸形成黑色素。2、基因?qū)π誀畹目刂疲夯?通過(guò)控制蛋白質(zhì)的合成直接控制生物的性狀，基因2通過(guò)控制酶的合成，控制代謝過(guò)程，進(jìn)而控制生物的性狀?！驹斀狻緼、由分析可知，過(guò)程①②分別表示轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程，轉(zhuǎn)錄主要發(fā)生在細(xì)胞核中，翻譯主要發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)的核糖體上，A錯(cuò)誤；B、由于M1和M2是由不同的基因轉(zhuǎn)錄形成的，所以M1和M2在堿基排列順序上有差異，mRNA的結(jié)構(gòu)均為單鏈結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、由圖示可知，基因1控制生物的性狀屬于直接控制，基因2控制生物的性狀屬于間接控制，兩者控制方式不同，C錯(cuò)誤；D、調(diào)查白化病的發(fā)病率應(yīng)該從人群中調(diào)查，調(diào)查白化病的遺傳方式應(yīng)該從患者家系中調(diào)查，故調(diào)查對(duì)象的要求不完全相同，D正確。故選D。4、D【解析】

本題考查原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同、細(xì)胞呼吸等知識(shí)，要求學(xué)生識(shí)記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，明確原核細(xì)胞只有DNA，無(wú)染色體；明確乳酸菌只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。【詳解】A、乳酸菌屬于原核生物，只有DNA，無(wú)染色體，A錯(cuò)誤；B、乳酸菌只能進(jìn)行有氧呼吸，B錯(cuò)誤；C、乳酸菌不能進(jìn)行有氧呼吸，只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸，有氧條件會(huì)抑制乳酸菌的無(wú)氧呼吸，且其分解產(chǎn)物為乳酸，C錯(cuò)誤；D、原、真核生物的遺傳密碼是通用的，因此在基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成時(shí)，兩種微生物共用一套遺傳密碼，D正確。故選D。5、D【解析】

1.有氧呼吸是指細(xì)胞在氧氣的參與下，通過(guò)多種酶的催化作用，把葡萄糖等有機(jī)物徹底的氧化分解，產(chǎn)生二氧化碳和水，生成大量ATP的過(guò)程，場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體。

2.無(wú)氧呼吸的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，產(chǎn)物是乳酸或酒精和二氧化碳?！驹斀狻緼、設(shè)有氧呼吸與無(wú)氧呼吸消耗的葡萄糖為a和3a，則有氧呼吸消耗的氧氣和釋放的二氧化碳都是6a，而人體無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸，不產(chǎn)生二氧化碳，因此氧氣的吸收總量和二氧化碳的產(chǎn)生總量之比是6a：（6a+0）=1：1，A錯(cuò)誤；B、在缺氧條件下，厭氧呼吸將葡萄糖不徹底的分解，釋放少量能量，所以能快速地利用葡萄糖產(chǎn)生ATP，在短時(shí)間內(nèi)維持生命，但無(wú)氧呼吸產(chǎn)物乳酸等有毒，會(huì)導(dǎo)致乳酸中毒，所以細(xì)胞仍然是有氧呼吸產(chǎn)生ATP的量多，細(xì)胞仍主要進(jìn)行有氧呼吸，B錯(cuò)誤；C、在缺氧條件下，糖酵解產(chǎn)物丙酮酸在乳酸脫氫酶的催化下被NADH還原為乳酸，C錯(cuò)誤；D、呼吸作用過(guò)程中釋放的大部分能量轉(zhuǎn)化成熱能，用來(lái)維持體溫，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】易錯(cuò)點(diǎn)：在進(jìn)行呼吸作用的過(guò)程中釋放出能量有二個(gè)用途：一部分是用于細(xì)胞進(jìn)行各種生命活動(dòng)需要；另一部分是釋放的熱能，為后續(xù)生命體的代謝提供一個(gè)溫度恰當(dāng)?shù)沫h(huán)境。6、D【解析】

本題以基因調(diào)控赤霉素的生物合成和代謝為情境，考查基因與生物性狀的關(guān)系和育種的相關(guān)知識(shí)，重點(diǎn)考查科學(xué)思維能力。赤霉素能促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)，引起植株增高，促進(jìn)種子和果實(shí)發(fā)育，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育和作物育種方面具有重要作用?！驹斀狻緼、根據(jù)題意可知，植物體內(nèi)GA的含量受基因控制合成的GA3ox和GA2ox控制，即基因通過(guò)控制酶的合成間接控制生物性狀，A正確；B、赤霉素能夠培育無(wú)子葡萄，生長(zhǎng)素類似物可以培育無(wú)子番茄，B正確；C、根據(jù)題意可知，基因通過(guò)控制合成GA3ox和GA2ox，GA3ox和GA2ox之間相互作用，進(jìn)而精準(zhǔn)控制赤霉素的含量，C正確；D、GA3ox和GA2ox的過(guò)量合成對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育均是不利的，D錯(cuò)誤；故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥(niǎo)苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過(guò)顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無(wú)毒的丙氧鳥(niǎo)苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥(niǎo)苷。最后還需要通過(guò)DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對(duì)受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長(zhǎng)大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過(guò)的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過(guò)了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過(guò)的小鼠。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識(shí)，重點(diǎn)考查基因工程的操作步驟，要求考生識(shí)記基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，識(shí)記胚胎工程的操作過(guò)程，屬于考綱識(shí)記層次的考查。8、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細(xì)胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】

1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要用同種限制酶切割目的基因和載體，以產(chǎn)生相同的末端，然后用DNA連接酶連接，恢復(fù)被切開(kāi)的核苷酸之間的磷酸二酯鍵，RNA聚合酶能夠與啟動(dòng)子識(shí)別并結(jié)合催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行，這是是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?！驹斀狻浚?）腺病毒屬于動(dòng)物病毒，其無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，營(yíng)寄生生活，必須寄生于宿主的活細(xì)胞中才能繁殖；用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上應(yīng)具有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位啟動(dòng)子，這樣才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA，最終合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可以獲得相同的黏性末端或平末端，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）對(duì)山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，便于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸；培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制；這時(shí)重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于人們對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚，因此培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入血漿、血清等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面要求?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程以及啟動(dòng)子的作用，把握操作工具限制酶和DNA連接酶的應(yīng)用及其作用結(jié)果，理解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和特點(diǎn)，把握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的概念，識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，這是解決問(wèn)題的關(guān)鍵。9、XAXA或XAXaⅠ2、Ⅱ2和Ⅱ4交叉遺傳Ⅲ1Ⅲ1患病，則其基因型為aa，其中一個(gè)基因a遺傳自母親，其外祖父I1患病，基因型為aa，而其母親正常，故其母親的基因a必然遺傳自其外祖父（或Ⅲ1的外祖父患病，為隱性純合子，母親正常，基因型為Aa，所以Ⅲ1母親的基因a遺傳自其外祖父。Ⅲ1患病，則其基因型為aa，故其母親的基因a遺傳給了Ⅲ1）Ⅲ3女孩均正常，男孩均患病【解析】

1、判斷患病遺傳方式的“口訣”：無(wú)中生有為隱性，隱性遺傳看女病，父子正常非伴性；有中生無(wú)為顯性，顯性遺傳看男病，母女正常非伴性。2、Ⅱ1和Ⅱ2正常，出生患?、?，故該病屬于隱性遺傳病?！驹斀狻浚?）若該遺傳病是伴X染色體遺傳病，則是X染色體隱性遺傳病，Ⅱ1和Ⅱ2表現(xiàn)正常，Ⅲ1基因型是XaY，Ⅱ1和Ⅱ2的基因型是XAY和XAXa，所以Ⅲ2的基因型是XAXA、XAXa；由于Ⅲ3、Ⅱ3、Ⅰ1是該病的患者，所以Ⅰ2、Ⅱ2和Ⅱ4是雜合子；Ⅰ1將其患病基因傳遞至Ⅱ2，Ⅱ2將致病基因傳遞至Ⅲ1，體現(xiàn)了X染色體隱性遺傳病的交叉遺傳的特點(diǎn)。（2）如果該遺傳病的致病基因位于常染色體上，Ⅲ1患病，則其基因型為aa，其中一個(gè)基因a遺傳自母親，其外祖父I1患病，基因型為aa，而其母親正常，故其母親的基因a必然遺傳自其外祖父（或Ⅲ1的外祖父患病，為隱性純合子aa，母親正常，基因型為Aa，所以Ⅲ1母親的基因a遺傳自其外祖父I1），所以第Ⅲ代中Ⅲ1的一個(gè)致病基因一定來(lái)源于Ⅰ1。（3）基因A?a如果位于X染色體上，則選擇患病女孩Ⅲ3（XaXa）和正常人XAY婚配，所生孩子女孩（XAXa）均正常，男孩（XaY）均患病?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合系譜圖，考查人類遺傳病及伴性遺傳，要求考生識(shí)記人類遺傳病的特點(diǎn)，能利用口訣，根據(jù)系譜圖判斷遺傳病的遺傳方式，進(jìn)而判斷相應(yīng)個(gè)體的基因型。10、體液漿細(xì)胞①胰蛋白酶PEG（或“聚乙二醇”）動(dòng)物血清123456A2B2abαβ③氨基酸種類（或“序列”）蛋白質(zhì)研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細(xì)胞【解析】

1、單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過(guò)兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。2、蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。【詳解】（1）抗原進(jìn)入小鼠體內(nèi)能夠引起機(jī)體的體液免疫，使?jié){細(xì)胞分泌抗體。（2）①制備雜交瘤細(xì)胞，將小鼠的脾