腫瘤的轉移和浸潤腫瘤的轉移和浸潤1（優(yōu)選）腫瘤的轉移和浸潤（優(yōu)選）腫瘤的轉移和浸潤2腫瘤轉移的基本過程原發(fā)瘤的增殖腫瘤新生血管的生長瘤細胞侵襲基底膜

在循環(huán)系統(tǒng)中存活侵入血管或淋巴管

形成瘤栓并轉運到遠隔靶器官滯留于靶器官微小血管中穿出血管并形成微小轉移灶腫瘤血管形成，轉移癌灶增殖腫瘤轉移的基本過程形成瘤栓并轉運到遠隔靶器官滯留于靶器官微小3腫瘤的轉移和浸潤培訓課件4

（一）原發(fā)瘤增殖和擴展

增殖導致腫瘤內部壓力增加增殖只是腫瘤細胞轉移的基礎接觸抑制喪失（一）原發(fā)瘤增殖和擴展增殖導致腫瘤內部壓力增加5

（二）腫瘤血管的形成腫瘤超過1～2mm3時，新生血管形成是維持其生長所必需。宿主毛細血管網(wǎng)進入腫瘤組織。是血管生成刺激因子和抑制因子共同調控的結果。（二）腫瘤血管的形成腫瘤超過1～2mm3時，新生血管形6腫瘤的轉移和浸潤培訓課件7

（三）腫瘤細胞脫落并進入基質惡性腫瘤細胞E-鈣粘連素(E-cadherin)表達降低。腫瘤細胞分離傾向與細胞膜結構的變化和粘附力的下降有密切關系。癌細胞表面電荷發(fā)生改變、與鈣離子結合能力減弱以及橋粒發(fā)育不全也與之有關。（三）腫瘤細胞脫落并進入基質惡性腫瘤細胞E-鈣粘連素(8癌細胞可以產(chǎn)生多種水解基質(ECM)的酶類。定向移動（migration）：在癌細胞侵襲過程中起重要作用。癌細胞可以產(chǎn)生多種水解基質(ECM)的酶類。9

（四）進入脈管系統(tǒng)腫瘤組織的血管與正常血管差異顯著。腫瘤血管為侵入基質的游離腫瘤細胞進入循環(huán)系統(tǒng)提供條件。（四）進入脈管系統(tǒng)腫瘤組織的血管與正常血管差異顯著。10（一）基因調控下的腫瘤轉移③流式細胞術N型:分布于神經(jīng)組織和肌肉組織。免疫球蛋白類粘附分子：（一）基因調控下的腫瘤轉移腫瘤血管為侵入基質的游離腫瘤細胞進入循環(huán)系統(tǒng)提供條件。P型：分布于上皮組織和胎盤的基底層。這兩組Caspase在細胞凋亡中缺一不可。腫瘤細胞-血小板簇與靶器官內皮細胞的粘附并錨定在內皮細胞表面。2005Dec8;438(7069):820.ECM主要包括膠原蛋白、非膠原性糖蛋白，蛋白多糖和糖胺多糖幾種成分，它們對組成和穩(wěn)定細胞外基質蛋白與蛋白之間、多糖與蛋白之間的結合起著重要作用（三）腫瘤細胞脫落并進入基質血管新生是血管生長因子和血管生長抑制因子均衡作用的結果②在腫瘤細胞進入循環(huán)后，整合素表達的增多有利于腫瘤細胞粘附于脈管內皮，繼而發(fā)生侵襲、轉移E型：分布于上皮細胞，負性調控腫瘤侵襲。侵入門靜脈系統(tǒng)的腫瘤細胞，首先在肝內形成轉移瘤

（五）癌栓形成侵襲進入循環(huán)的癌細胞大部分死亡(脫巢凋亡)。轉移能力高的細胞在循環(huán)中相互聚集形成小的癌栓才能抵抗易損因素。（一）基因調控下的腫瘤轉移（五）癌栓形成侵襲進入循環(huán)的11腫瘤的轉移和浸潤培訓課件12

（六）腫瘤細胞錨定黏附腫瘤細胞-血小板簇與靶器官內皮細胞的粘附并錨定在內皮細胞表面。微小脈管對癌栓的截獲也是錨定粘附的方式。影響粘附的因素：碳氫類配子與選擇素透明質酸裂解酶受體CD44v與整合素（六）腫瘤細胞錨定黏附腫瘤細胞-血小板簇與靶器官內皮細13

（七）逸出循環(huán)系統(tǒng)腫瘤細胞誘導脈管基底膜的降解和穿透。腫瘤細胞穿透脈管后細胞外基質中的移行。（七）逸出循環(huán)系統(tǒng)腫瘤細胞誘導脈管基底膜的降解和穿透。14腫瘤的轉移和浸潤培訓課件15

（八）轉移后結局侵入靶器官的腫瘤細胞形成轉移瘤并進行性長大才真正完成了轉移。轉移后生長轉移的休眠（黑色素瘤、乳腺癌切除后多年后的復發(fā)）

處于G0期，逃避機體殺傷作用；分裂和死亡處于動態(tài)平衡；腫瘤血管形成緩慢。（八）轉移后結局侵入靶器官的腫瘤細胞形成轉移瘤并進行性16腫瘤轉移的常規(guī)診斷方法VCAM-1（血管細胞粘附分子-1）：參與協(xié)助腫瘤逸出循環(huán)系統(tǒng)，進入繼發(fā)臟器。CD44V1-10，分子量約85-160KD，目前研究較多的是CD44v6。然而并非所有腫瘤的轉移都與E-Cad表達呈負相關。還具有抑制血管增生的作用。影像學手段普通X線攝片血管生成刺激因子：VEGF、FGF、EGF、陰莖癌腹股溝淋巴結N型:分布于神經(jīng)組織和肌肉組織。（八）轉移后結局各種MMP之間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。④組織器官的微環(huán)境差異也對腫瘤的器官選擇傾向有著重要的影響，繼發(fā)臟器的微環(huán)境對轉移腫瘤細胞具有特殊親和力是腫瘤轉移的重要基礎，鈣連接素（cadherin）CD44是廣泛分布跨膜糖蛋白分子，能與細胞外基質中透明質酸結合、參與血管內皮細胞的粘附。一組細胞表面糖蛋白受體，配體為細胞外基質（ECM）成分，由和兩個亞基組成腫瘤轉移的分子生物學基礎以攜帶E-CadmRNA的質粒轉染高侵襲性的癌細胞，可使其侵襲性消失。反之就成為腫瘤侵襲和轉移等病理過程發(fā)生的原因。該類粘附分子主要通過碳氫鍵連接二、腫瘤轉移的途徑腫瘤轉移的常規(guī)診斷方法二、17淋巴道轉移乳腺癌淋巴道轉移主要至腋窩各組淋巴結卵巢癌常發(fā)生髂區(qū)及腹主動脈旁淋巴結轉移肺癌首先侵犯肺門淋巴結“跳躍性”轉移“逆行”或“交叉”轉移淋巴道轉移18血道轉移

侵入體循環(huán)靜脈的瘤細胞經(jīng)右心到達肺，在肺內形成轉移灶侵入門靜脈系統(tǒng)的腫瘤細胞，首先在肝內形成轉移瘤侵入肺靜脈的腫瘤細胞或肺內轉移瘤通過肺毛細血管進入肺靜脈，經(jīng)左心隨主動脈血流播散至全身各器官（腦、骨、腎、腎上腺）血道轉移侵入體循環(huán)靜脈的瘤細胞經(jīng)右心到達肺，在肺內形成轉移19血液循環(huán)分為體循環(huán)和肺循環(huán)：體循環(huán)：左心室--主動脈--各級動脈--身體各處的毛細血管網(wǎng)---各級靜脈--上下腔靜脈（體靜脈）--右心房肺循環(huán)：右心室--肺動脈--肺中的毛細血管網(wǎng)--肺靜脈--左心房血液循環(huán)分為體循環(huán)和肺循環(huán)：20種植性轉移

體腔內器官的腫瘤侵襲器官被膜，蔓延至器官表面時，瘤細胞可以脫落并象播種一樣，種植在體腔和體腔內器官的表面，形成多個轉移瘤灶如胃癌破壞胃壁侵及漿膜層癌細胞脫落，可種植于大網(wǎng)膜、腹膜、腹腔內器官表面。種植性轉移體腔內器官的腫瘤侵襲器官被膜，蔓延至器官表面時，21三、腫瘤轉移的分子生物學基礎三、22

（一）基因調控下的腫瘤轉移

腫瘤轉移與促進基因和抑制基因之間表達失衡相關。不是所有的腫瘤都有轉移表型，同種腫瘤細胞不同個體轉移能力也不一樣。（一）基因調控下的腫瘤轉移腫瘤轉移與促進23促進腫瘤轉移的基因

與腫瘤轉移相關的基因有很多種，但還沒有嚴格意義上的轉移基因

ras基因效應蛋白：IV型膠原酶、組織蛋白酶和與細胞運動相關的細胞因子

促進腫瘤轉移的基因24腫瘤新生毛細血管是在周邊組織原有的血管基礎上延伸擴展形成的侵入體循環(huán)靜脈的瘤細胞經(jīng)右心到達肺，在肺內形成轉移灶④聚合酶鏈反應（PCR）逆轉錄PCR（RTPCR）技術特別是針對轉移中的一些關鍵環(huán)節(jié)如基因突變、血管生成、粘附等設計調節(jié)阻斷方法，以達到遏止腫瘤轉移的目的是一組鋅離子依賴性內肽酶（①間質膠原酶②明膠酶③間充質溶解素），大小各異底物不盡相同，但至少都含有信號肽，前肽，催化區(qū)3個結構區(qū)。②免疫組織化學技術其正常功能是作為受體識別透明質酸（HA）和膠原蛋白Ⅰ、Ⅳ等，主要參與細胞-細胞，細胞-基質之間的特異性粘連過程。腫瘤細胞-血小板簇與靶器官內皮細胞的粘附并錨定在內皮細胞表面。（一）腫瘤轉移器官選擇性規(guī)律特別是針對轉移中的一些關鍵環(huán)節(jié)如基因突變、血管生成、粘附等設計調節(jié)阻斷方法，以達到遏止腫瘤轉移的目的阻止腫瘤轉移的發(fā)展方向④聚合酶鏈反應（PCR）逆轉錄PCR（RTPCR）技術絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，As）分裂和死亡處于動態(tài)平衡；因此認為E-Cad是一種抑制侵襲轉移的因子。3、由Caspase-1，-4，-5組成，與細胞凋亡的關系不是很密切，可能與多種炎癥因子的成熟有關。E型：分布于上皮細胞，負性調控腫瘤侵襲。原發(fā)腫瘤常見繼發(fā)轉移器官天門冬氨酸蛋白酶包括CathepsinB、D、H等，CathepsinD能降解基底膜、間質Ⅰ、Ⅲ型膠原、蛋白聚糖、肌動蛋白、肌球蛋白、FN，從而促進許多腫瘤細胞的侵襲和轉移。（三）腫瘤細胞脫落并進入基質抗生素、維生素D3衍生物、維甲酸類、多磺基化合物、肝素類似物及細胞外基質成分等。CD44v：腫瘤轉移促進基因CD44是廣泛分布跨膜糖蛋白分子，能與細胞外基質中透明質酸結合、參與血管內皮細胞的粘附。CD44V1-10，分子量約85-160KD，目前研究較多的是CD44v6。其正常功能是作為受體識別透明質酸（HA）和膠原蛋白Ⅰ、Ⅳ等，主要參與細胞-細胞，細胞-基質之間的特異性粘連過程。CD44V6高表達的癌細胞可能獲得淋巴細胞“偽裝”，逃避人體免疫系統(tǒng)的識別和殺傷，更易進入淋巴結，形成轉移?？纱龠Mras基因表達

腫瘤新生毛細血管是在周邊組織原有的血管基礎上延伸擴展形成的C25抑制腫瘤轉移基因

抑制腫瘤轉移基因是近年來倍受關注的研究領域。

nm23基因：腫瘤轉移抑制基因影響細胞內微管系統(tǒng)的狀態(tài)而抑制癌的轉移：提供GTP而調節(jié)微管的聚合與解聚。能與G蛋白結合，本身也具有G蛋白的某些特性，可能通過細胞跨膜信號傳遞調節(jié)腫瘤細胞轉移。近年來大量的有關nm23基因與腫瘤轉移的報道，在一些腫瘤中，如乳腺癌、肝癌、黑色素瘤、胃癌等，其nm23的mRNA蛋白表達與腫瘤的轉移及臨床預后不良呈反相關。

抑制腫瘤轉移基因2692例結直腸癌的nm23表達陽性率42.4%。nm23陰性病例預示更差的預后。因而nm23基因具有抗腫瘤轉移的潛能，認為nm23表達減少預示結直腸癌更強的侵襲性和易于轉移擴散。92例結直腸癌的nm23表達陽性率42.4%。nm23陰性病27TIMP:金屬蛋白酶組織抑制劑參與基質膠原酶的代謝，使其失活。對腫瘤轉移的抑制作用主要在侵襲階段。還具有抑制血管增生的作用。Kiss-1基因：編碼產(chǎn)物為G蛋白偶聯(lián)受體的內源性配體，能使胞內Ca2＋濃度增加，同時能明顯抑制腫瘤細胞的遷移和侵襲。TIMP:金屬蛋白酶組織抑制劑28

（二）粘附分子與腫瘤轉移

粘附因子是一類介導細胞與細胞、細胞與細胞外基質間粘附作用的膜表面糖蛋白。在腫瘤轉移的每個環(huán)節(jié)均包含粘附與分離（粘附解聚）兩個方面。（二）粘附分子與腫瘤轉移粘附因子29

細胞與細胞間的粘附同源細胞間的粘附：E-鈣粘連素；在腫瘤轉移的某些環(huán)節(jié)上發(fā)揮重要作用。異源細胞間的粘附：選擇素；腫瘤細胞與血小板、內皮細胞和基質細胞的結合。細胞與細胞間的粘附30

細胞與細胞外基質的粘附腫瘤細胞主要通過整合素（integrin）受體與細胞外基質結合細胞與細胞外基質的粘附31細胞外基質（ECM）細胞外基質(extracellularmatrixc,ECM),是由動物細胞合成并分泌到胞外、分布在細胞表面或細胞之間的大分子,主要是一些多糖和蛋白,或蛋白聚糖。這些物質構成復雜的網(wǎng)架結構，支持并連接組織結構、調節(jié)組織的發(fā)生和細胞的生理活動。細胞外基質是動物組織的一部分,不屬于任何細胞。它決定結締組織的特性，對于一些動物組織的細胞具有重要作用。細胞外基質（ECM）細胞外基質(extracellular32ECM主要包括膠原蛋白、非膠原性糖蛋白，蛋白多糖和糖胺多糖幾種成分，它們對組成和穩(wěn)定細胞外基質蛋白與蛋白之間、多糖與蛋白之間的結合起著重要作用各種ECM成分的酶解有利于腫瘤細胞的侵襲與轉移。而每種ECM成分的降解都需要特定的水解酶腫瘤細胞本身可以產(chǎn)生多種可降解基質的蛋白酶。主要包括絲氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶三大類ECM主要包括膠原蛋白、非膠原性糖蛋白，蛋白多糖和糖胺多糖幾33

鈣連接素（cadherin）是跨膜糖蛋白家族，主要介導同源細胞間的連接。

鈣粘蛋白參與建立和維持細胞間連接，可能是最重要的形成細胞間聯(lián)系的細胞粘附因子之一。E型：分布于上皮細胞，負性調控腫瘤侵襲。

P型：分布于上皮組織和胎盤的基底層。

N型:分布于神經(jīng)組織和肌肉組織。鈣連接素（cadherin）34腫瘤的轉移和浸潤培訓課件35目前認為與腫瘤浸潤、轉移關系最密切的是E-Cad。許多研究證實E-Cad與腫瘤浸潤、轉移呈負相關，可能由于E-Cad能促進瘤細胞的同質型粘附不易使瘤細胞從瘤體上脫落。體外試驗表明，有E-Cad表達的腫瘤細胞株無浸潤性，而浸潤型表型的腫瘤細胞株則無E-Cad表達。E-Cad表達與腫瘤細胞分化之間有密切關系，分化好的細胞E-Cad正常，分化差的細胞E-Cad不表達。編碼E-Cad的基因是腫瘤抑制基因，此基因突變或缺失導致細胞過度增生，細胞形態(tài)及分化異常。目前認為與腫瘤浸潤、轉移關系最密切的是E-Ca36Biawy報道67%舌鱗癌E-Cad表達下降。E-Cad（-）者淋巴結轉移發(fā)生率遠高于E-Cad（+）者。以攜帶E-CadmRNA的質粒轉染高侵襲性的癌細胞，可使其侵襲性消失。因此認為E-Cad是一種抑制侵襲轉移的因子。然而并非所有腫瘤的轉移都與E-Cad表達呈負相關。GunjiN等報道E-Cad表達與原發(fā)性胰腺癌肝轉移不存在顯著關系?？赡芘cE-Cad能穩(wěn)定細胞間連接，促進細胞分化，促進細胞間信息傳遞有關。Biawy報道67%舌鱗癌E-Cad表達下降37

選擇素（selectin）該類粘附分子主要通過碳氫鍵連接P型：腫瘤細胞與血小板的粘附結合

E型：腫瘤細胞與內皮細胞的結合

L型：存在于白細胞表面，白細胞與其他細胞結合

腫瘤轉移的一些關鍵步驟，如循環(huán)腫瘤細胞的聚集和癌栓的形成，以及腫瘤細胞與特定臟器脈管內皮的粘附結合都有選擇素的參與。選擇素（selectin）38

整合素（integrin）一組細胞表面糖蛋白受體，配體為細胞外基質（ECM）成分，由和兩個亞基組成主要功能是參與不同細胞間的粘附、介導細胞與ECM的結合等直接介導腫瘤細胞與基質的粘附；通過信號轉導調控細胞骨架變形和能量代謝；誘導蛋白溶解酶活化；啟動細胞逃逸機制抑制細胞凋亡。整合素（integrin）39腫瘤的轉移和浸潤培訓課件40整合素與腫瘤的關系具有兩重性①在腫瘤發(fā)生早期，整合素表達的降低可導致腫瘤細胞與基底膜或ECM成分的粘附作用減弱，這有利于腫瘤在局部的增殖擴展②在腫瘤細胞進入循環(huán)后，整合素表達的增多有利于腫瘤細胞粘附于脈管內皮，繼而發(fā)生侵襲、轉移整合素與腫瘤的關系具有兩重性41

免疫球蛋白類粘附分子：結構上具有同源性，主要參與細胞之間的粘附。ICAM-1（內皮細胞粘附分子-1

）：ICAM-1從腫瘤細胞表面脫落進入循環(huán)系統(tǒng)成為可溶性分子后，可協(xié)助腫瘤細胞逃逸細胞毒T細胞和NK細胞的免疫監(jiān)視殺傷效應，促使腫瘤發(fā)生轉移免疫球蛋白類粘附分子：42VCAM-1（血管細胞粘附分子-1）：參與協(xié)助腫瘤逸出循環(huán)系統(tǒng)，進入繼發(fā)臟器。NCAM（神經(jīng)細胞粘附分子）：它的功能為信息傳導和調控細胞生長，其缺失可能導致細胞生長失控和高度轉移傾向。VCAM-1（血管細胞粘附分子-1）：參與協(xié)助腫瘤逸出循環(huán)43

（三）血管生成與腫瘤轉移腫瘤的生長和轉移與血管形成密切相關。腫瘤新生毛細血管是在周邊組織原有的血管基礎上延伸擴展形成的腫瘤本身能誘導血管的形成。（三）血管生成與腫瘤轉移腫瘤的生長和轉移與血管形成密切44原發(fā)瘤的增殖腫瘤新生血管的生長瘤細胞侵襲基底膜膀胱癌腦肺循環(huán)：右心室--肺動脈--肺中的毛細血管網(wǎng)--肺靜脈--左心房（四）基質金屬蛋白酶及其抑制劑與腫瘤轉移“逆行”或“交叉”轉移反之就成為腫瘤侵襲和轉移等病理過程發(fā)生的原因。E型：分布于上皮細胞，負性調控腫瘤侵襲。CD44V1-10，分子量約85-160KD，目前研究較多的是CD44v6。轉移的休眠（黑色素瘤、乳腺癌切除后多年后的復發(fā)）穩(wěn)定，免疫原性高）細胞外基質的溶解酶系統(tǒng)由一個龐大的蛋白溶解酶家族組成，稱為MMPs同一種MMP可降解多種ECM成分，而某一種ECM成分又可以被多種MMP降解。惡性腫瘤細胞E-鈣粘連素(E-cadherin)表達降低。N型:分布于神經(jīng)組織和肌肉組織。④聚合酶鏈反應（PCR）逆轉錄PCR（RTPCR）技術增殖導致腫瘤內部壓力增加ras基因表達阻斷腫瘤轉移抑制基因nm23基因治療靶點C、臟器相關免疫狀態(tài)腫瘤超過1～2mm3時，新生血管形成是維持其生長所必需。原發(fā)瘤的增殖腫瘤新生血管的生長瘤細45腫瘤無血管生成的支持就不能進一步增長

血管前期腫瘤生長休眠期，直徑<1～2mm

血管期瘤體積增大,浸潤、轉移有誘導血管形成的能力。

腫瘤血管形成這一過程既受機體神經(jīng)內分泌因素影響，又受腫瘤細胞和腫瘤基質細胞表達的生長因子調控。腫瘤生長過程腫瘤無血管生成的支持就不能進一步增長腫瘤生長過程46

血管新生包括以下步驟：

血管內皮基質膜溶解內皮細胞向腫瘤組織遷移內皮細胞在遷移前沿增殖內皮細胞管道化、分支形成血管環(huán)形成新的基底膜血管新生包括以下步驟：47

48

血管新生是血管生長因子和血管生長抑制因子均衡作用的結果血管生成刺激因子：VEGF、FGF、EGF、

angiogenin、TNF-α等血管生成抑制因子：angiostatin、endostatin、

PEDF、γ干擾素等血管新生是血管生長因子和血管生長抑制因子均衡作用的結果49腫瘤的轉移和浸潤培訓課件50

（四）基質金屬蛋白酶及其抑制劑與腫瘤轉移ECM是腫瘤侵襲和轉移的天然屏障，腫瘤從原位增殖到浸潤轉移的演進過程中必須具備降解ECM的能力。能溶解ECM的酶主要是蛋白水解酶，它們的活性均與腫瘤的侵襲和轉移有關。

細胞外基質的溶解酶系統(tǒng)由一個龐大的蛋白溶解酶家族組成，稱為MMPsMMPs及其抑制劑（TIMP）在腫瘤侵襲和轉移過程中擔任重要角色（四）基質金屬蛋白酶及其抑制劑與腫瘤轉移51腫瘤的轉移和浸潤培訓課件52MMPs的種類和結構四類蛋白水解酶基質金屬蛋白酶（MMP）絲氨酸蛋白酶半胱氨酸蛋白酶（Caspase家族）天門冬氨酸蛋白酶它們幾乎能降解ECM中的所有成分，是近年腫瘤侵襲、轉移研究中的熱點。MMPs的種類和結構四類蛋白水解酶53基質金屬蛋白酶（MatrixmetalloprotinaseMMP）

是一組鋅離子依賴性內肽酶（①間質膠原酶②明膠酶③間充質溶解素），大小各異底物不盡相同，但至少都含有信號肽，前肽，催化區(qū)3個結構區(qū)。酶催化區(qū)和前肽區(qū)具有高度保守性。

各種MMP之間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。同一種MMP可降解多種ECM成分，而某一種ECM成分又可以被多種MMP降解。但不同酶的降解效率可有不同。MMP的眾多調控因素構成微妙的調節(jié)網(wǎng)絡，正是這種精確的調控機制保證了機體內生理狀態(tài)下細胞遷移的ECM重構；反之就成為腫瘤侵襲和轉移等病理過程發(fā)生的原因。基質金屬蛋白酶（Matrixmetalloprotina54MMP與腫瘤侵襲、轉移的關系

MMP與腫瘤侵襲轉移的關系正被MMP基因轉染技術所證實，將基質溶素和MT1-MMP完整cDNA導入無轉移潛能的或轉移潛能較弱的細胞后，受染細胞的侵襲、轉移率大大提高。反之將MMP的反義核酸序列導入高侵襲轉移潛能的細胞后，可使其侵襲轉移表型減弱。通過調節(jié)MMP抑制劑的水平，也證實了MMP在腫瘤侵襲和轉移中的作用。MMP與腫瘤侵襲、轉移的關系55絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，As）

白細胞彈性蛋白酶和組織蛋白酶G，As可使纖溶酶原轉變?yōu)槔w溶酶，纖溶酶的底物較為廣泛，可降解ECM的許多成分。纖溶酶還可激活一些前金屬蛋白酶及潛伏彈性蛋白酶。已證明As在許多腫瘤，尤其是肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌中高度表達，它參與降解基質，促進腫瘤細胞的侵襲和轉移。絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，As）56半胱氨酸蛋白酶Caspase家族至今已發(fā)現(xiàn)有14種Caspase，分為3組：1、Caspase-2，-8，-9，是細胞凋亡的起始Caspase，2、Caspase-3，-6，-7，執(zhí)行細胞凋亡，是效應Caspase。這兩組Caspase在細胞凋亡中缺一不可。3、由Caspase-1，-4，-5組成，與細胞凋亡的關系不是很密切，可能與多種炎癥因子的成熟有關。半胱氨酸蛋白酶Caspase家族57③流式細胞術腫瘤血管為侵入基質的游離腫瘤細胞進入循環(huán)系統(tǒng)提供條件。②免疫組織化學技術①阻斷內皮細胞降解周圍基質的能力各種MMP之間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。整合素（integrin）半胱氨酸蛋白酶（Caspase家族）MMP與腫瘤侵襲轉移的關系正被MMP基因轉染技術所證實，將基質溶素和MT1-MMP完整cDNA導入無轉移潛能的或轉移潛能較弱的細胞后，受染細胞的侵襲、轉移率大大提高。血管內皮基質膜溶解穿出血管并形成微小轉移灶胃腸道惡性腫瘤肝臟TNP470是煙曲霉素的一種類似物，它可能通過抑制內皮細胞的生長而使腫瘤血管生成減少，從而達到抑制腫瘤轉移的作用。內皮細胞管道化、分支形成血管環(huán)以上方法只能檢測到較大的轉移瘤灶或數(shù)量較多的腫瘤細胞集團，而卻難以發(fā)現(xiàn)小的轉移灶和微轉移（micrometastasis）的存在選擇素（selectin）啟動細胞逃逸機制抑制細胞凋亡。N型:分布于神經(jīng)組織和肌肉組織。肝癌肺、骨原發(fā)瘤的增殖腫瘤新生血管的生長瘤細胞侵襲基底膜腫瘤細胞分離傾向與細胞膜結構的變化和粘附力的下降有密切關系。天門冬氨酸蛋白酶天門冬氨酸蛋白酶包括CathepsinB、D、H等，CathepsinD能降解基底膜、間質Ⅰ、Ⅲ型膠原、蛋白聚糖、肌動蛋白、肌球蛋白、FN，從而促進許多腫瘤細胞的侵襲和轉移。組織蛋白酶β基因表達與腫瘤惡性程度平行。③流式細胞術天門冬氨酸蛋白酶58四、關于腫瘤轉移的理論四、59（一）解剖學的觀點以器官的血流、淋巴的引流方向解釋轉移

乳腺癌腋窩淋巴結胃腸道惡性腫瘤肝臟陰莖癌腹股溝淋巴結卵巢癌髂區(qū)淋巴結（一）解剖學的觀點60（二）“種子-土壤”學說腫瘤轉移是特殊的癌細胞（種子）在適宜的環(huán)境（土壤）生長發(fā)展的結果

心肌、主動脈、甲狀腺和脾雖血供豐富，但很少有轉移瘤。膀胱癌轉移至腦、前列腺癌轉移至骨組織、眼脈絡膜黑色素瘤轉移至肝、甲狀腺癌轉移至骨、LLC（慢性淋巴細胞性白血?。┳园l(fā)性肺轉移

（二）“種子-土壤”學說61（三）轉移前微環(huán)境（pre-metastaticniche）“癌細胞轉移前的早期步驟很復雜”“腫瘤向新的部位派去特使，為癌細胞轉移做準備”

KaplanRN,LydenD.VEGFR1-positivehaematopoieticbonemarrowprogenitorsinitiatethepre-metastaticniche.Nature.2005Dec8;438(7069):820.（三）轉移前微環(huán)境（pre-metastaticniche62四、腫瘤轉移的器官選擇性

四、63

（一）腫瘤轉移器官選擇性規(guī)律

腫瘤細胞的血行轉移和淋巴道轉移并不總是循著血流或淋巴液流動方向到達相應的臟器，即使通過滲透進入體腔的腫瘤細胞也不遵循自由沉淀規(guī)律繼發(fā)生長從粘附分子的角度看，腫瘤轉移的親器官性是通過器官內皮細胞表達特異性粘附分子，而腫瘤細胞則產(chǎn)生這些粘附分子的特異性配體得以實現(xiàn)的

（一）腫瘤轉移器官選擇性規(guī)律

64原發(fā)腫瘤常見繼發(fā)轉移器官肺小細胞癌骨、腦、肝結腸、胃癌肝肝癌肺、骨乳腺癌骨、腦、腎上腺甲狀腺癌骨前列腺癌骨腎癌骨、肝、甲狀腺睪丸癌肝膀胱癌腦皮膚黑色素瘤肺、腦眼脈絡膜黑色素瘤肝神經(jīng)母細胞瘤肝、腎上腺原發(fā)腫瘤常65（一）腫瘤轉移器官選擇性影響因素

①不同腫瘤轉移潛能不同，通常分化差、惡性程度高、生長快、病程晚的腫瘤易發(fā)生轉移②各種腫瘤以及各種腫瘤亞系所具有的不同轉移潛能可能由不同遺傳編碼、細胞表面結構、抗原特性、代謝特性、受體種類和分布、侵襲力與血管內皮細胞的粘附力、產(chǎn)生局部血凝因子或腫瘤血管生成因子的能力以及對免疫反應的應答力等因素所決定③基因表達及各種調控信號分子的表達和傳遞在不同腫瘤和不同細胞亞系都有所不同，從而決定了其轉移傾向（一）腫瘤轉移器官選擇性影響因素

①不同腫瘤轉移潛能不同，通66④組織器官的微環(huán)境差異也對腫瘤的器官選擇傾向有著重要的影響，繼發(fā)臟器的微環(huán)境對轉移腫瘤細胞具有特殊親和力是腫瘤轉移的重要基礎，⑤其他A、影響腫瘤細胞與繼發(fā)臟器脈管內皮細胞的細胞外基質粘附的因素B、化學趨化因子C、臟器相關免疫狀態(tài)④組織器官的微環(huán)境差異也對腫瘤的器官選擇傾向有著重要的影響，67五、阻止腫瘤轉移的策略和手段五、68（三）腫瘤細胞脫落并進入基質NCAM（神經(jīng)細胞粘附分子）：它的功能為信息傳導和調控細胞生長，其缺失可能導致細胞生長失控和高度轉移傾向。是跨膜糖蛋白家族，主要介導同源細胞間的連接。P型：腫瘤細胞與血小板的粘附結合N型:分布于神經(jīng)組織和肌肉組織。腫瘤血管形成這一過程既受機體神經(jīng)內分泌因素影響，又受腫瘤細胞和腫瘤基質細胞表達的生長因子調控。PEDF、γ干擾素等主要功能是參與不同細胞間的粘附、介導細胞與ECM的結合等轉移的休眠（黑色素瘤、乳腺癌切除后多年后的復發(fā)）而每種ECM成分的降解都需要特定的水解酶鈣粘蛋白參與建立和維持細胞間連接，可能是最1、Caspase-2，-8，-9，是細胞凋亡的起始Caspase，VCAM-1（血管細胞粘附分子-1）：參與協(xié)助腫瘤逸出循環(huán)系統(tǒng)，進入繼發(fā)臟器。非病毒法基因槍、磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、顯微核素骨掃描反之就成為腫瘤侵襲和轉移等病理過程發(fā)生的原因。轉移能力高的細胞在循環(huán)中相互聚集形成小的癌栓才能抵抗易損因素。血管生成抑制劑抑制腫瘤新生血管形成的機制：影像學手段普通X線攝片CT、MR